HPLC测定大鼠海马中谷氨酸、γ-氨基丁酸的含量

目的 建立了邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生高效液相荧光色谱法检测大鼠海马中谷氨酸(GLU)、γ-氨基丁酸(GABA)含量的方法。方法 采用Alltima C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为50 mmol·L^-1乙酸钠(pH 6.8)、甲醇、四氢呋喃梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1。激发波长(λ_Ex)338 nm,发射波长(λ_Em)425 nm。结果 GLU、GABA线性范围分别为1.03~20.6 μg·mL^-1(r=0.999 2)和1.13~22.6 μg·mL^-1(r=0.999 7);当信噪比为3时,GLU和GABA的检出限分别为5.27×10^-4μg·mL^-1和7.35×10^-4 μg·mL^-1;测得精密度RSD分别为3.4%和3.5%;加样回收率分别为90%~96%,85%~91%。结论 本方法简便、准确、灵敏,特异性强,重复性好,适用于海马中GLU和GABA的含量测定。     

HPLC法测定脑复清胶囊中γ-氨基丁酸的含量

目的建立柱前衍生高效液相色谱法测定脑复清胶囊中γ-氨基丁酸(GABA)含量的方法.方法色谱柱为Hypersil ODS C18柱(125mm×4.0mm,5μm),流动相A为20mmo1@L-1乙酸钠+0.02%三乙胺(pH 7.3);流动相B为100 mmol@L-1乙酸钠(pH 7.2)-乙腈-甲醇(100175225)梯度洗脱;检测波长为338nm.结果线性范围0.05～1.03 mg@mL-1,线性方程A=42 3784C+6 919.5,r=0.9994,平均加样回收率101.7%,RSD为1.7%(n=9).结论本法简便、快速、灵敏度高,可用于脑复清胶囊中GABA的质量控制.     

丙泊酚对大鼠海马突触体释放谷氨酸和γ-氨基丁酸的影响

目的观察丙泊酚对大鼠海马突触体谷氨酸和γ氨基丁酸(GABA)Ca2+依赖性释放和非Ca2+依赖性释放的影响。方法制备突触体后用人工脑脊液(aCSF)孵育,分为7组,应用丙泊酚(propofol)的浓度分别为3(Pro3组)、10(Pro10组)、30(Pro30组)、100(Pro100组)和300μmol·L-1(Pro300组),脂肪乳剂对照组加入脂肪乳(Intralipid组),空白对照组(Control组)不加入任何药物。在观察Ca2+依赖性释放时,加入二氢海人藻酸和哌啶酸;在观察非Ca2+依赖性释放的时候,去除aCSF中的Ca2+。在37℃的条件下,应用20μmol·L-1藜芦定或30mmol·L-1KCl诱发递质释放。应用反相高效液相色谱法测定aCSF中谷氨酸和GABA的浓度。结果①Ca2+依赖性递质释放:应用藜芦定时,Pro30、Pro100和Pro300组的谷氨酸和GABA释放量低于Intralipid组(P<0.01或P<0.05);应用KCl时,各组的谷氨酸和GABA释放量无差异(P>0.05)。②非Ca2+依赖性释放:各组应用藜芦定和KCl诱发的谷氨酸和GABA释放量无差异(P>0.05)。结论丙泊酚可以抑制Ca2+依赖性谷氨酸和GABA的释放,而对非Ca2+依赖性谷氨酸和GABA释放无影响。     

HPLC法测定tremor大鼠脑组织中谷氨酸和GABA含量

目的建立测定tremor大鼠(tm)脑内海马组织中GLU及GABA浓度的高效液相色谱(HPLC)方法。方法冰上剥离13wk的tm/Wistar大鼠海马组织,低温匀浆处理,利用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生HPLC法结合荧光检测器测定GLU和GABA的含量。0.1mol·L-1醋酸钾和甲醇进行二元梯度洗脱,峰面积定量。结果GLU的线性方程为Y^=1E+06X(r2=0.9937),线性范围为0.15～5.88mg·L-1,具有良好的线性关系,在0.74、1.47、3.68mg.L-13个浓度下样本回收率分别为97.7%、98.9%、100.5%;样品中GLU日内变异系数为3.8%,隔日测定后,日间变异系数为5.9%;GABA的线性方程为Y^=4E+06X(r2=0.998),线性范围为0.10～2.15mg·L-1,具有良好的线性关系,在0.2、0.5、1.0mg·L-13个浓度下样本回收率分别为98.3%、101.0%、102.7%;样品GABA日内变异系数为2.3%,隔日测定后,日间变异系数为3.9%。结论该方法较简便、快速且干扰相对较小,满足测定要求,可用于氨基酸的含量测定研究。     

天花粉中瓜氨酸与γ-氨基丁酸的含量测定

目的 建立测定天花粉中瓜氨酸与γ-氨基丁酸含量的方法.方法 采用柱前衍生反相高效液相色谱法.在碱性条件下,氨基酸与异硫氰酸苯酯反应,生成异硫氰酸苯-氨基酸的衍生物,采用Venusil-AA氨基酸分析柱(250mm×4.6mm,5μm),用二元梯度洗脱方式,流动相A为0.05 mol/L醋酸钠溶液(pH=6.5),流动相B为乙腈-水(80:20),检测波长为248 nm.结果 瓜氨酸与γ-氨基丁酸的进样量分别在9.30~372.00 ng(r=0.999 7)与25.76~1 030.40 ng(r=0.999 6)范围内与各自峰面积呈良好的线性关系,样品平均加样回收率分别为98.45%(RSD=0.73%)与98.15%(RSD=0.64%).结论该方法测定天花粉中瓜氨酸与γ-氨基丁酸,结果准确、重现性好.     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定天花粉中γ-氨基丁酸含量

目的测定天花粉中γ-氨基丁酸的含量。方法在碱性条件下，将氨基酸与异硫氰酸苯酯反应生成异硫氰酸苯一氨基酸的衍生物，采用Venusil-AA氨基酸分析柱（250mm×4．6mm，5μm），二元梯度洗脱，流动相A为0．05mol／L醋酸钠溶液（pH=6．5），流动相B为乙腈-水（80：20），检测波长为248am。结果γ-氨基丁酸质量浓度在8．224～41．120μg／mL范围内与峰面积线性关系良好，平均加样回收率为99．1％（n=5）。结论该方法结果准确，重现性好。     

固定化谷氨酸脱羧酶转化γ-氨基丁酸的研究

目的用固定化谷氨酸脱羧酶转化制备γ-氨基丁酸(GABA)。方法以海藻酸钠与明胶为协同作用载体包埋固定化酶,考察影响固定化酶活性的因素,获得固定化酶的优化条件,并将酶应用于制备GABA。结果海藻酸钠、明胶、氯化钙和戊二醛浓度分别为2.5%,1.0%,3.0%和0.3%,硬化时间4 h,固定化酶的相对活性最高,酶活回收率达到65.3%。以谷氨酸为底物,固定化谷氨酸脱羧酶为催化剂,采用填充床反应器连续制备GABA,连续反应60 h,酶相对活性仍保持在初始值的76.9%,谷氨酸转化率为98.7%。结论该固定化谷氨酸脱羧酶可应用于生物转化法连续制备GABA。     

反相高效液相色谱法测定香砂养胃丸中γ-氨基丁酸含量

目的建立测定香砂养胃丸中γ-氨基丁酸含量的反相高效液相色谱法。方法在碱性条件下,氨基酸与异硫氰酸苯酯反应生成异硫氰酸苯-氨基酸的衍生物,采用Venusil-AA氨基酸分析柱（250mm×4.6mm,5μm）,二元梯度洗脱方式,流动相A为0.05mol/L醋酸钠溶液（pH=6.5）-乙腈（95：5）,流动相B为乙腈-水（80：20）,检测波长248nm。结果γ-氨基丁酸质量浓度在2.252～13.512μg/mL范围内与峰面积有较好的线性关系,平均加样回收率为98.04%,RSD=0.97%（n=6）。结论所用方法结果准确,被测溶液稳定性良好,可用于香砂养胃丸中γ-氨基丁酸的含量测定。     

γ-聚谷氨酸-柠檬酸-顺铂复合物中顺铂含量测定方法的建立

目的建立γ-聚谷氨酸-柠檬酸-顺铂复合物中顺铂含量测定的方法。方法采用高效液相色谱法测定γ-聚谷氨酸-柠檬酸-顺铂复合物中顺铂含量,色谱柱为C18柱(4.6 mm×300 mm,5μm),流动相为含150mmol·L-1氯化钠的磷酸盐缓冲溶液(pH 7.4),流速为0.65 mL·min-1,检测波长为210 nm。结果顺铂质量浓度在4²00μg·mL-1范围内,其色谱峰面积与质量浓度的线性关系良好(r=0.999 7)。顺铂含量测定的加样回收率平均值为99.78%,RSD小于2%。测得γ-聚谷氨酸-柠檬酸-顺铂复合物中顺铂含量约为26%200μg·mL-1范围内,其色谱峰面积与质量浓度的线性关系良好(r=0.999 7)。顺铂含量测定的加样回收率平均值为99.78%,RSD小于2%。测得γ-聚谷氨酸-柠檬酸-顺铂复合物中顺铂含量约为26%²8%。结论该法灵敏度高、专属性强、可用于γ-聚谷氨酸-柠檬酸-顺铂复合物中顺铂的含量测定。     

柱前衍生RP-HPLC法测定法半夏中γ-氨基丁酸的含量

目的:建立以反相高效液相色谱法测定法半夏中γ-氨基丁酸含量的方法。方法:在碱性条件下,氨基酸与异硫氰酸苯酯反应,生成异硫氰酸苯-氨基酸的衍生物;采用Venusil-AA氨基酸分析柱(250mm×4.6mm,5μm)、二元梯度洗脱方式测定样品含量,流动相A为0.05mol.L-1醋酸钠溶液(pH6.5),流动相B为乙腈-水(80∶20),检测波长为248nm。结果:γ-氨基丁酸检测浓度在2.056～12.336μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈较好的线性关系;加样回收率为99.0%,RSD=0.92(n=6)。结论:本方法简便、准确、重现性好,可用于法半夏的质量控制。     

青藤碱凝胶剂透皮吸收的研究

目的研究青藤碱凝胶的制备方法及其皮肤通过量。方法用卡巴姆934作为凝胶基质制备青藤碱凝胶,并采用HPLC测定药物的含量,采用TK-12A型透皮扩散池测定并比较其吸收量。结果与羟丙基甲基纤维素凝胶相比,以卡巴姆934作为凝胶基质的青藤碱其经皮渗透效果较好。加入10%丙二醇对药物的经皮渗透影响不大。结论青藤碱在以卡巴姆为基质的凝胶剂中具有较好的经皮渗透效果。     

青藤碱微乳与凝胶的皮肤渗透性比较

目的比较青藤碱微乳和凝胶对离体大鼠皮肤的透皮能力。方法以油酸-聚山梨酯-80-无水乙醇-水作为微乳的组成,采用改进的Franz扩散池研究青藤碱微乳和凝胶的透皮行为,用高效液相色谱法测定青藤碱浓度。结果青藤碱微乳的透皮速率大于青藤碱凝胶(P<0.01),青藤碱微乳平均透皮速率为116.44μg.cm-2.h-1,青藤碱凝胶为89.93μg.cm-2.h-1。结论青藤碱微乳有很强的透皮能力,有望成为青藤碱的新型透皮给药制剂。     

布洛芬凝胶剂的制备及透皮吸收的研究

报道了布洛芬凝胶剂的制备及含量测定的方法,并采用双室渗透扩散装置进行了小鼠离体皮肤体外渗透试验,观察了几种不同的渗透促进剂对布洛芬透皮吸收的影响。     

不同基质及促渗剂对氢溴酸高乌甲素凝胶经皮渗透的影响

［摘要］目的 研究不同凝胶基质及促渗剂对氢溴酸高乌甲素经皮吸收的影响. 方法 分别用羟丙基甲基纤维素和卡波姆934作为凝胶基质制备氢溴酸高乌甲素凝胶,并加入月桂氮卓酮或油酸作为经皮吸收促进剂,采用TK－12A型透皮扩散池测定并比较其吸收速率. 结果 与羟丙基甲基纤维素凝胶比较,以卡波姆934作为凝胶基质的氢溴酸高乌甲素其经皮渗透效果较好. 加入3%月桂氮卓酮+乙醇作为复合促渗剂能显著促进氢溴酸高乌甲素卡波姆凝胶中药物的吸收,3%油酸对药物的经皮渗透影响不大. 结论 氢溴酸高乌甲素在以3%月桂氮卓酮和乙醇为复合促渗剂,卡波姆为基质的凝胶剂中具有较好的经皮渗透效果.     

盐酸格拉司琼巴布剂的制备及大鼠透皮释药性能研究

以水溶性高分子材料制备盐酸格拉司琼巴布剂,采用HPLC法测定药物含量、制品的体外释放度及其在离体大鼠皮肤中的透皮行为。结果表明,制品体外释药特性符合Higuchi方程,释放速率为0．4mg．cm~(-2)．h~(1/2)。离体透皮行为符合零级动力学过程,渗透速率为13．9μg·cm~(-2)．h~(-1)。     

吲哚美辛微乳的制备及经皮吸收研究

以油酸、Cremorphor RH60、Labrasol和水组成微乳系统,通过伪三元相图确定o/w微乳区并筛选出最佳微乳处方.考察5种吸收促进剂对吲哚美辛原药及微乳的促渗作用.结果表明,微乳中Cremorphor RH60与Labrasol的比例为1:2时,o/w微乳区最大.月桂氮(艹卓)酮是吲哚美辛微乳的最佳透皮促进剂,用量为5%时渗透速率为(73.52±2.30)μg·cm-2·h-1,24h累积渗透量可达1700μg/cm2.     

青藤碱凝胶的制备及质量控制

目的 :探讨青藤碱凝胶的制备及质量控制标准。方法 :以卡波姆为辅料制备青藤碱凝胶剂 ,采用薄层色谱法及紫外分光光度法鉴别青藤碱 ;用反相高效液相色谱法测定凝胶中青藤碱的含量。结果 :处方设计合理 ,制备方法简便 ,方法平均回收率为(99 6±1 3) %。结论 :本方法操作简便、快速 ,检测结果准确 ,可作为青藤碱凝胶的制备和质量控制方法。     

咪康唑莫米松皮肤成膜凝胶的体外透皮研究

目的：观察咪康唑莫米松皮肤成膜凝胶的体外透皮性能。方法：采用HPLC-DAD法测定咪康唑莫米松的含量,用Franz扩散池以离体鼠皮为透皮屏障进行体外透皮扩散试验,并计算咪康唑莫米松药物累积透皮量Q（Q 咪和Q 莫）和透皮速率常数J（J 咪和J 莫）。结果：咪康唑与莫米松的色谱峰能有效分离,进样量分别在1.0～400.0μg·ml-1和0.1～40.0μg·ml-1范围与各自峰面积呈良好线性关系,r值分别为0.9988和0.9982（n=6）,咪康唑与莫米松的J值分别为（17.810±0.558）μg·cm-2和（1.821±0.941）μg·cm-2·h-1,r值分别为0.9913和0.9908,无显著差异（P≥0.05）,咪康唑莫米松的透皮吸收行为均符合零级动力学方程。结论：咪康唑莫米松皮肤成膜凝胶,可开发为经皮给药制剂。     

Matrix-Type Transdermal Patches of Verapamil Hydrochloride: In Vitro Permeation Studies Through Excised Rat Skin and Pharmacodynamic Evaluation in Rats

The objectives of this study were to develop matrix-type transdermal patches of verapamil hydrochloride (VRP) with pectin as a matrix polymer to investigate the influence of several terpenes on in vitro permeation of VRP through rat skin and to evaluate pharmacodynamic activity of transdermal formulations in rats. Matrix-type transdermal patches containing VRP were prepared using pectin as a matrix agent and propylene glycol as a plasticizer agent. Terpenes such as nerolidol, d-limonene, eucalpytol, menthone, and menthol were also used as a chemical enhancer to improve the skin penetration of VRP. The permeation studies were perfomed using Franz-type diffusion cells and full-thickness excised abdominal rat skin. Effects of terpenes on the permeation parameters of VRP were evaluated. In vitro skin permeation studies showed that nerolidol was the most promising enhancer among the enhancers examined in the present study, followed by d-limonene. Pharmacodynamic activity of the transdermal patches containing nerolidol or d-limonene was evaluated in rats by the measurement of systolic blood pressure for 360 min with the use of the tail cuff method. VRP transdermal patches significantly decreased the systolic blood pressure after 30 min and transdermal patches containing nerolidol and d-limonene maintained the decrease in blood pressure during the observation of 360 min.     

布洛芬传递体的制备及体外透皮研究

采用正交设计优化布洛芬传递体处方,并以水-甲醇(20:80,用0.1%三氟乙酸调至pH 2.0)为流动相,HPLC法测定布洛芬含量.比较了几种促渗剂(3%月桂氮革酮、吐温-20、尿素、1,2-丙二醇)对布洛芬传递体体外透大鼠皮肤的影响.结果表明,3%月桂氮革酮的促渗效果最好,稳态渗透速率为(85.98±6.54)μg·cm~(-2)·h~(-1).