酶法水解大豆分离蛋白的研究

研究了大豆分离蛋白水解的最佳预处理条件.研究了不同微生物蛋白酶对大豆分离蛋白的水解效果,并筛选出效果最好的Alcalase蛋白酶进行正交试验.结果表明最佳工艺条件是:温度60℃,pH=8,w(S)=9%,w(E)/w(S)=4%,时间120min,水解度为0.2796.     

大米蛋白水解条件的响应面法优化

运用响应面法优化大米蛋白酶法水解条件,提高大米蛋白水解度和提取率。本研究首先应用单因素实验法分析酶添加量、温度、pH值以及酶解时间对大米蛋白水解的影响;然后在单因素实验基础上,进一步采用Box-Behnken法进行实验设计,考察上述4个因素对大米蛋白水解度和蛋白质提取率的影响。研究结果表明最佳酶解条件为温度62℃,酶添加量2.5%,pH值8.2,酶解时间10.5h,此时大米蛋白的水解度可达到41.5%,蛋白质提取率可达93.1%。研究成果可为酶解制备可溶性大米蛋白肽的工业化应用提供参考。     

酶水解麦糟蛋白制备可溶性肽工艺研究

对碱性蛋白酶水解麦糟蛋白制备多肽的工艺条件进行了研究。通过单因素实验和正交实验,确定了较佳工艺条件：酶解pH10,加酶量3500u/g,酶解温度50℃,酶解时间20min。在此条件下,麦糟蛋白的水解度（DH）达22.18%,氮溶指数（NSI）达23.68%。     

酶法水解蚕蛹蛋白制备多肽的工艺研究

研究了几种蛋白酶对桑蛋蛹蛋白偻的水解情况,采用均匀设计法对桑蚕蛹蛋白粉的限制水解条件进行了选择,得到胰酶水解桑蚕蛹蛋白粉的优化条件为：酶用量占底物的质量分数为４．５０％,底物含量的质量体积分数为１．５％,反应温度为４０℃,水解时间为６．０ｈ,水解Ｐ来８．０,在此条件下水解,酸溶性肽得率可达９２．３７％。     

酶法水解鸡肝的工艺研究

采用5种蛋白酶分别对鸡肝进行水解,以水解度为指标,通过单因素试验,对原料预处理方法、酶解温度、pH、酶用量(E/S)、底物浓度及酶解时间等酶解条件进行优化,确定了Alcalase、Neutrase、Protamex、Fla-vourzyme以及木瓜蛋白酶水解鸡肝的工艺条件.综合比较酶解产物的水解度、氮回收率、感官质量和胆固醇含量发现,Alcalase水解能力最强,且产物苦味较弱;而Flavourzyme所得水解产物感官质量最好,无苦味,且具有较好的鲜味;酶解产物中均不含胆固醇.优选Alcalase用于单酶水解鸡肝,通过正交实验优化确定其最佳水解条件为:温度60℃,pH值8.0,加酶量1.25%,水解时间2.5h,底物浓度7.5%.在此条件下所得酶解液水解度为52.62%,氮回收率为85.32%.     

酶法水解棉籽蛋白的制备与应用

以脱酚后的棉籽粉为原料 ,研究了酶解法制备可溶性棉籽水解蛋白的生产工艺。对其影响因素和产品的实际应用作了探讨。结果表明 ,利用中性蛋白酶AS1.398水解棉籽粉 ,产品得率可达 28.8%,蛋白质量分数为63.28%。棉籽水解蛋白可作为菌体发酵氮源。     

乳清蛋白肽的酶法制备、分离纯化及活性评价

以抗氧化活性及蛋白质回收率为筛选指标对乳清蛋白肽酶解工艺进行优化,用层析柱对酶解液进行逐级分离纯化,并对其分子质量进行检测.研究结果表明:利用胰酶、复合风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶酶解制备乳清蛋白肽,最佳用酶为碱性蛋白酶、最适底物含量为4.0%、最适加酶量为8000U/g、最佳酶解时间为4h;酶解液经DEAE-52纤维素层析后得到的A组分抗氧化活性最好,其还原力为0.320 0±0.004 1,DPPH自由基清除率为6.58%±0.36%;A组分再经Sephadex G-15葡聚糖凝胶层析柱分离纯化后得到组分G,其DPPH自由基清除率为6.73%±0.083%;组分G的主要成分为分子质量378 u的肽段,其一级氨基酸组成为赖氨酸(Lys)、亮氨酸(Leu)及丝氨酸(Ser).     

扇贝边酶法水解工艺的优化

以扇贝边为原料,首先分析了扇贝边的营养成分,然后分别用中性蛋白酶、动物蛋白水解复合酶对扇贝边进行水解,通过正交实验考查了加酶量、酶解时间、酶解温度及底物浓度对扇贝边水解率的影响。结果表明,新鲜扇贝裙边水分含量为86.06%(g/g),总氮含量为1.14%(g/g),氨基态氮含量为0.21%(g/g),确定了扇贝边的最佳酶法水解工艺条件。为利用扇贝边资源制备水解动物蛋白及海洋生物活性物质探索一种有效途径。     

利用扇贝边制造水解动物蛋白的研究

选用复合蛋白酶酶解扇贝边制备水解液，并优化酶解工艺条件；采用中空纤维超滤膜对水解液进行分离纯化，制造高质量的水解动物蛋白，并测试膜分离试验操作条件对分离效率的影响．研究结果表明，先用枯草杆菌蛋白酶酶解4h，然后用风味蛋白酶继续酶解，可以显著提高酶解液中多肽、短肽及游离氨基酸的含量；超过滤的操作压力、温度、酶解液的pH值及浓缩比等因素都将影响超过滤效率，在操作压力不高于0．10MPa，pH值为7．0～7．5，温度为43℃，每过滤10min后就对超过滤膜进行2min的反冲洗等操作条件下，可以大大提高超过滤的分离效率、减少膜的污染及延长膜的使用寿命；试验结果还表明，超过滤分离后水解液的感官指标明显优于未分离的水解原液。     

酶解大豆粉蛋白条件优化研究

从底物浓度、pH值、酶解温度、加酶量、酶解促进剂和酶解时间等方面研究了碱性蛋白酶Alcalase和木瓜蛋白酶复合对全脂大豆粉酶解的影响,并运用单因素和正交试验设计优化酶解条件.结果表明,底物体积分数4.5%、pH值8.5、温度60℃、复合酶加酶量(碱性蛋白酶Alcalase与木瓜蛋白酶活力之比为2∶1)2 640 U/g,添加5 mmol/L Mn2+酶解180 min效果较好,水解度达到17.8%.     

蛋白质“酶解度”概念的探究

分析了蛋白质水解度参数在监测蛋白质酶解过程中的不足,并根据蛋白质酶解过程特点提出了酶解度的概念与测定方法。将酶解度定义为一个比值,用于描述蛋白质酶解体系中新增肽链数相对于原有肽链数的变化,可以有效反映酶对蛋白质的酶切过程。根据酶解度的定义,只要分别测定出酶解前的体系中肽链数目与酶解后体系中的肽链增量,通过计算两者的比值就可以计算出该条件下的酶解度。体系中的肽链数目可以通过甲醛滴定法测定出体系中的游离氨基数与新增自由氨基数来计算。     

甲醛滴定法测定牛血清白蛋白的酶解度

建立了一种测定蛋白质酶解度的方法,介绍了甲醛滴定法测定酶解度的四个关键环节：酚酞指示剂配制、基准液配制、碱液标定、甲醛滴定与酶解度计算。依据蛋白质酶解度的定义与相关计算公式,利用甲醛滴定法测定并计算出胰蛋白酶对底物BSA在本实验中的特定酶解条件下的酶解度为6.31。     

基于响应面分析法的草鱼蛋白酶解工艺

应用响应面分析法对草鱼蛋白两段酶解的条件分别进行优化,第一段酶解复合使用胰酶／风味蛋白酶（质量比为4：1）,以蛋白质利用率为响应值;第二段酶解用木瓜蛋白酶,以肽得率为响应值．最终确定第一段酶解的最优条件为：酶（E）与底物（S）的质量比为0．3：100,温度为53℃,时间为5．90h;第二段酶解的最优条件为：E与S的质量比为0．12：100,温度为60℃,时间为5．60h．利用凝胶色谱测得最优条件下制备酶解液组分的相对分子质量范围介于714～8790之间,酶解液中肽含量超过50％（质量分数）,与响应面模型所预测的肽得率（52．55％）相吻合．     

废弃纤维材料的酶水解

采用纤柔酶(Cellusoft L)和苏宏抛光酶(Suhong Cellish L)进行废弃纤维素水解，从酶水解的机理出发，考虑酶水解的主要影响因素为温度、pH值、微量元素及底物浓度，并以酶解效率为主要指标设计了四因素三水平的正交实验。此外还研究了时间对酶解的影响，以及不同原材料的酶解情况。     

响应面法酶解剩余活性污泥中微生物蛋白质研究

从剩余活性污泥中提取及分解蛋白质是有效减少污泥二次污染的重要途径．以剩余活性污泥为原料,采用酶解法分解蛋白质,分析了体系ｐＨ值、酶解时间、酶解温度、酶用量、液固比对蛋白质分解率的影响,并应用响应面分析法优化蛋白质分解条件．结果表明:以蛋白质分解率为响应值,经实验后最终确定最优条件为:pH为7.0,液固比4.0:1.0,酶解时间为4.0h,酶解温度为58.0℃,酶用量（E:S）为3.0%,分解率达53.29%,接近响应面模型所预测的分解率．     

酶解处理对扁桃仁蛋白质起泡特性影响及其应用研究

扁桃仁营养丰富,是一种优质的坚果蛋白资源。为拓宽扁桃仁的应用领域,以扁桃仁分离蛋白质为研究对象,以其起泡能力和泡沫稳定性为观测指标,探讨生物酶解处理对其起泡特性的影响。结果表明:扁桃仁分离蛋白质经胃蛋白酶酶解处理后,其酶解产物的粒径减少,表面疏水性增加,分子质量(10~25kDa)与电位值(-20.06)均减小,即胃蛋白酶酶解处理显著改善了扁桃仁分离蛋白质的起泡性和泡沫稳定性。在此基础上,将酶解180min的扁桃仁分离蛋白质水解物(almond protein isolate hydrolysates,APIH180)作为发泡剂应用到蛋糕中,结果发现,当APIH180添加量为20%时,蛋糕的外观、口感与全蛋蛋糕相比,均有所提升;APIH180添加量超过40%的蛋糕品质明显下降,即APIH180添加量为20%~40%时可以起到良好的发泡效果,且改善了蛋糕的品质。本研究旨在拓展扁桃仁蛋白质的开发利用思路,进而丰富植物基蛋白质资源应用的理论与技术。     

蛋白质酶促水解反应机理与动力学模型

研究蛋白质酶促水解制备生物活性多肽的反应机理与动力学行为，并建模表征不同反应机制的酶解曲线。基于对不同实验条件下反应时程特性的分析，以经典的米氏方程为理论基础，提出了同时考虑蛋白质单底物水解、蛋白酶失活以及底物或产物抑制因素的机理模型，并构建了指数形式动力学方程dh／dt=aexp（-bh），其中参数（a和b对于不同反应机理具有不同的表达形式和确定的数值结果，对于牛血清白蛋白（BSA）-胰蛋白酶（trypsin）模型体系，经实验拟合平均相对误差为4．73％，并求得该体系相应热力学和动力学常数：Km=0．0748g/L，Ks=7．961g/L，Kd=9．358min^-1，K2=38．439min^-1，Ea=64．826kJ／mol，Ed=80．031kJ／mol。所建整套模型可用于蛋白质酶解反应过程的模拟、热动力学常数的计算和生物反应器的优化设计。     

鲢鱼下脚料营养组成及酶解条件的研究

以鲢鱼下脚料为原料,分析其营养组成成分,并采用木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶按1:1:1的比例(活力比)对其进行酶解实验,通过单因素试验、正交试验对其酶解工艺条件进行优化研究。结果表明:最佳混合酶水解鲢鱼下脚料的工艺条件为酶用量0.20%,温度45℃,pH6,时间3 h。通过方差分析表明,其中酶的用量对水解度影响差异显著(P<0.05)。     

酶解技术及其应用

简单介绍了酶解技术的基本原理以及酶解技术在中药有效成分提取与分离纯化、食品饮料、酿造、饲料、纺织等领域的应用。