香烟烟雾暴露对支气管哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子及转录因子GATA-3表达的影响

目的 通过观察香烟烟雾暴露后支气管哮喘(简称哮喘)大鼠Th1/Th2细胞因子及转录因子GATA-3表达的变化.探讨吸烟加重哮喘的免疫学机制.方法 48只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、烟雾暴露组、哮喘组、哮喘+烟雾暴露组;建立慢性哮喘大鼠模型和哮喘大鼠香烟烟雾暴露模型,普通病理观察气道壁厚度的变化,酶联免疫吸附试验检测外周血和肺组织γ干扰素(INF-γ)和白介素4(IL-4)含量;免疫印迹检测肺组织GATA-3蛋白表达水平.结果 ①哮喘+烟雾暴露组气道壁厚度[(18.34±0.87)μm 2/μm]较哮喘组[(15.72±0.82)μm 2/μm]和对照组[(8.52±0.58)μm 2/μm]均明显增加,差异有统计学意义(P值均<0.01);②哮喘+烟雾暴露组血浆和肺组织IL-4含量[(34.07±6.11)ng/L]、[(1.41±0.31)ng/L]较哮喘组[(22.57±4.32)ng/L]、[(0.80±0.14)ng/L]和对照组[(11.38±2.90)ng/L]、[(0.27±0.08)ng/L]均增高,差异有统计学意义(P值均<0.05);哮喘+烟雾暴露组血浆INF-γ含量[(9.53±3.28)ng/L]较哮喘组[(58.83±19.57)ng/L]和对照组[(150.87±55.54)ng/L]均降低,差异有统计学意义(P值均<0.05),肺组织INF-γ含量[(0.48±0.10)ng/L]较哮喘组[(0.58±0.23)ng/L]差异无统计学意义;③哮喘+烟雾暴露组GATA-3蛋白表达(1.29±0.08)较哮喘组(0.87±0.04)和对照组(0.45±0.06)均增加,差异有统计学意义(P值均<0.01).结论 香烟烟雾暴露可以通过上调转录因子GATA-3蛋白表达,进而调控Th1/Th2偏移,在哮喘气道炎症及气道重塑的形成中扮演重要角色,为吸烟加重哮喘的免疫学机制之一.     

川芎嗪对支气管哮喘大鼠肺组织转录因子GATA-3表达的影响

支气管哮喘（简称哮喘）是因免疫异常导致的变态反应性疾病，表现为Th2细胞优势应答。转录因子GATA-3是T淋巴细胞发育中关键的调节因子，可特异性诱导Th2细胞分化。我们通过哮喘大鼠模型了解川芎嗪（珠海丽珠集团利民制药厂）对GATA-3表达的影响，探讨其治疗哮喘的机制。     

川芎嗪对哮喘大鼠转录因子GATA-3表达的影响

目的 观察川芎嗪对哮喘大鼠转录因子GATA-3表达的影响。方法 72只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组（A组）、哮喘模型组（B组）、川芎嗪小剂量组（C组,20mg／kg）、川芎嗪中剂量组（D组,40mg／kg）、川芎嗪大剂量组（E组,80mg／kg）和地塞米松组（F组）,每组12只。以卵蛋白腹腔注射并雾化吸入制备大鼠哮喘模型,用动物呼吸机测定气道反应性评价造模效果。采用免疫组化半定量法测定肺组织GATA-3含量。结果 给予乙酰胆碱（Ach）激发后,比较各组大鼠呼气相气道阻力（Re）,显示造模成功;B、C、D、E和F组的GATA-3表达量显著高于A组,其差异均有统计学意义（P〈0．01）;C、D、E和F组的GATA-3表达量和B组比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）;川芎嗪剂量的增加与GATA-3的表达呈负相关趋势;两两比较E组和F组差异无统计学意义。结论哮喘大鼠存在GATA-3高表达;川芎嗪减低气道高反应性,抑制GATA-3的表达,纠正Th1／Th2失衡,从而治疗哮喘。     

GATA-3与支气管哮喘

GATA 3是能与〔T/A(GATA)A/G〕序列结合的锌指结构家族的转录因子之一。目前研究认为它是T细胞发育中关键的调节因子 ,能诱导TH2 型细胞分化 ,调控TH1/TH2 平衡 ,在支气管哮喘的发病中起重要作用 ,使用GATA 3反义寡核苷酸阻断GATA 3的表达可以抑制各种TH2 型前炎性细胞因子的产生 ,从而减轻肺部过敏性炎症。     

香烟烟雾暴露对支气管哮喘大鼠OX-62、白介素12表达的影响

目的研究香烟烟雾暴露对支气管哮喘(简称哮喘)大鼠肺组织树突状细胞(dendritic cell,DC)的特异性标记蛋白OX-62、血浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)白介素12(IL-12)表达的影响,探讨吸烟加重哮喘的免疫学机制。方法 30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组、暴露组;建立哮喘大鼠模型和哮喘大鼠香烟烟雾暴露模型,收集BALF进行白细胞计数及分类,用免疫组织化学半定量法测定肺部OX-62染色阳性细胞的数量及分布,用免疫印迹法(Western blot)测定肺组织OX-62蛋白的含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血浆和BALF中IL-12的含量。结果①与对照组相比,哮喘组大鼠BALF中白细胞、淋巴细胞、嗜酸粒细胞、中性粒细胞数量明显增加,差异均有统计学意义(P值均<0.01);与哮喘组相比,暴露组大鼠BALF中白细胞、中性粒细胞数量明显增加,差异有统计学意义(P值均<0.01)。②OX-62蛋白染色阳性细胞即为DC,与对照组相比,哮喘组和暴露组大鼠肺部DC数量明显增加,差异均有统计学意义(P值均<0.01);与哮喘组相比,暴露组大鼠肺部DC数量明显增加,差异有统计学意义(P<0.01...     

香烟烟雾暴露对支气管哮喘大鼠OX-62、白介素12表达的影响

目的 研究香烟烟雾暴露对支气管哮喘(简称哮喘)大鼠肺组织树突状细胞(dendritic cell,DC)的特异性标记蛋白OX-62、血浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)白介素12(IL-12)表达的影响,探讨吸烟加重哮喘的免疫学机制.方法 30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组、暴露组;建立哮喘大鼠模型和哮喘大...     

Th1/Th2漂移与支气管哮喘的免疫治疗

Th1/Th2细胞在不同的细胞因子、抗原等因素的影响下，可发生Th1/Th2的转换，研究表明在支气管哮喘（哮喘）的发生机制中，Th2细胞分化明显增多，而Th1细胞数目减少。因此，促进Th1反应，抑制Th2反应的免疫治疗是治疗哮喘的重要部分。目前许多调节Th1/Th2失衡的免疫治疗方法已取得一些进展。     

香烟烟雾暴露对支气管哮喘大鼠CD4+ CD25+调节性T细胞及转录因子Foxp3表达的影响

目的 探讨香烟烟雾暴露对支气管哮喘(简称哮喘)大鼠CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)数量及转录因子Foxp3表达的影响.方法 将40只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为生理盐水组、烟雾暴露组、哮喘组和哮喘+烟雾暴露组,每组10只;哮喘组采用卵清白蛋白(OVA)致敏并吸入激发制备哮喘模型,生理盐水组雾化生理盐水,烟雾暴露组采用吸入香烟烟雾,哮喘+烟雾暴露组于每日雾化激发OVA前给予香烟烟雾吸入.流式细胞仪检测外周血CD4+ CD25+Treg细胞占CD4+T细胞的比例,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血和肺组织γ干扰素(INF-γ)以及白细胞介素4(IL-4)含量;Western blot检测肺组织Foxp3蛋白表达水平.结果 (1)哮喘组大鼠CD4+CD25+Treg为(6.4±1.0)%,低于生理盐水组的(9.9±1.0)%,差异有统计学意义(F=92.59,P＜0.01);哮喘+烟雾暴露组为(3.3±0.8)%,低于生理盐水组和哮喘组,差异有统计学意义(F=92.59,P＜0.01).(2)哮喘组大鼠血浆和肺组织中IL-4含量[(22.6±4.3)ng/L、(0.8±0.1)ng/L]高于生理盐水组[(11.4±2.9)ng/L、(0.3±0.1)ng/L],差异有统计学意义(F值分别31.69和49.29,P＜0.01);哮喘+烟雾暴露组血浆和肺组织中IL-4含量[(34.1±6.1)ng/L、(1.4±0.3)ng/L]高于生理盐水组和哮喘组,差异有统计学意义(F值分别为31.69和49.29,P＜0.05);哮喘组血浆中INF-γ含量[(59±20)ng/L]低于生理盐水组[(151±56)ng/L],差异有统计学意义(F=21.83,P＜0.05),哮喘+烟雾暴露组INF-γ含量[(10±3)ng/L]低于生理盐水组和哮喘组,差异有统计学意义(F=21.83,P＜0.05).(3)哮喘组Foxp3蛋白表达为8.18±0.26,低于生理盐水组的10.27±0.33(F=43.33,P＜0.01);哮喘+烟雾暴露组为6.36±0.38,低于生理盐水组和哮喘组(F=43.33,P＜0.05).结论 香烟烟雾暴露可能通过下调CD4+CD25+Treg数量并抑制Foxp3蛋白表达,进一步加重哮喘的Th1/Th2失衡.     

香烟烟雾增加支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞的增殖表达

吸烟是影响支气管哮喘（简称哮喘）发生、发展的重要危险因素，它可以增加哮喘发生频率和症状的严重程度；香烟烟雾（CS）可使多种细胞蛋白激酶C（PKC）活化，但机制尚未明确。我们的实验通过CS及PKC激动剂：12-肉豆蔻酰-13-乙酸佛波酯（PMA）、抑制剂：马来酰亚胺甲磺酸盐（Ro-31-8220）干预哮喘大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs），     

支气管哮喘患者外周血单个核细胞Th2特异性转录因子GATA-3表达及其临床意义

目的探讨支气管哮喘患者Th2特异性转录因子GATA-3的表达及其临床意义。方法采用ELISA法、RT-PCR等，分别检测15例哮喘患者（哮喘组）外周血嗜酸细胞（EOS）计数、血清总IgE，地塞米松干预前后单个核细胞（PBMC）培养上清液IL-4，IL-5水平及GATA-3 mRNA表达量，并与10例健康正常者（对照组）进行比较。结果哮喘组GATA-3 mRNA表达水平、IL-4及IL-5明显高于健康对照组，经地塞米松干预后，上述各指标水平均降低。哮喘组GATA-3表达与IL-4、IL-5，IgE，嗜欺细胞计数星正相关。结论Th2特异性转录因子GATA-3可直接调控IL-4，IL-5表达，并参与哮喘气道炎症的发生。     

川芎嗪对哮喘大鼠转录因子GATA-3表达的影响

目的 观察川芎嗪对哮喘大鼠转录因子GATA-3表达的影响.方法 72只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、川芎嗪小剂量组(C组,20 mg/kg)、川芎嗪中剂量组(D组,40 mg/kg)、川芎嗪大剂量组(E组,80 mg/kg)和地塞米松组(F组),每组12只.以卵蛋白腹腔注射并雾化吸入制备大鼠哮喘模型,用动物呼吸机测定气道反应性评价造模效果.采用免疫组化半定量法测定肺组织GATA-3含量.结果 给予乙酰胆碱(Ach)激发后,比较各组大鼠呼气相气道阻力(Re),显示造模成功;B、C、D、E和F组的GATA-3表达量显著高于A组,其差异均有统计学意义(P<0.01);C、D、E和F组的GATA-3表达量和B组比较,差异均有统计学意义(P<0.01); 川芎嗪剂量的增加与GATA-3的表达呈负相关趋势;两两比较E组和F组差异无统计学意义.结论 哮喘大鼠存在GATA-3高表达;川芎嗪减低气道高反应性,抑制GATA-3的表达,纠正Th1/Th2失衡,从而治疗哮喘.     

腹腔注射川芎嗪对哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子的影响及机制

目的探讨腹腔注射川芎嗪对哮喘大鼠模型Th1／Th2细胞因子表达的影响及其机制。方法40只SD大鼠随机分为正常对照组（Con组），哮喘组（Ast组），哮喘生理盐水对照组（Ast—C组），川芎嗪组（Lig组），地塞米松组（Dex组），每组8只。ELISA检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-4和IFN-γ的浓度并进行嗜酸性粒细胞（EOS）计数，同时用免疫组化法检测肺组织GATA-3和T-bet蛋白的表达。结果①Ast组及Ast—C组大鼠BALF中EOS均高于Con组，而Lig组和Dex组均低于Ast组及Ast—C组（P〈0．05）。②与Con组相比，Ast组及Ast—C组BALF中IL-4和肺组织GATA-3水平均明显升高，IFN-γ和T-bet水平明显减低（P〈0．05）。③与Ast组及Ast-C组相比，Lig组BALF中IL_4和肺组织GATA-3水平均明显降低（P〈0．05），IFN-γ和T—bet水平明显升高（P〈0．05），而Dex组IL-4、IFN-γ、GATA-3和T-bet水平则均降低（P〈0．05），IL-4和GATA-3分别比IFN-γ和T—bet减低更明显。结论川芎嗪可通过使哮喘肺组织GATA-3下调、T—bet上调进而调节Th1／Th2细胞因子比例，从而扭转哮喘时的Th2细胞优势，改善相应炎性症状。     

川芎嗪对支气管哮喘患者T-bet、GATA-3及气道炎症的影响

目的 观察川芎嗪对支气管哮喘患者气道炎症的作用以及对转录因子T-bet和GATA-3表达的影响.方法 60例哮喘患者随机分成常规治疗组(A组)和川芎嗪联合治疗组(B组),每组30例.另外选取健康人30例做为正常对照组(C组).观察治疗前后的临床疗效,采用ELISA法检测干扰素γ(IFN-γ)和白介素4(IL-4)水平,采用RT-PCR法测定T-bet和GATA-3的表达.结果 治疗前A、B组的T-bet、IFN-γ水平明显低于C组,GATA-3、IL-4水平明显高于C组(P＜0.05),A、B组间没有显著差异;与治疗前比较,治疗后A、B组的T-bet、IFN-γ以及GATA-3、IL-4水平均有显著性差异(P＜0.05);治疗后B组的T-bet和IFN-γ水平均高于A组,GATA-3和IL-4水平均低于A组(P＜0.05).结论 在常规哮喘治疗的基础上,加用川芎嗪可以取得更好的疗效.川芎嗪通过纠正哮喘患者的免疫失衡来治疗哮喘,为川芎嗪对哮喘的治疗进一步提供了理论依据.     

转录因子GATA-2基因在ANLL、CML和MDS中的表达

目的 :了解 GATA- 2基因在急性非淋巴细胞白血病 (ANL L )、慢性粒细胞白血病 (CML )和骨髓增生异常综合征 (MDS)中的表达情况。方法 :利用 RT- PCR扩增 ANL L、CML和 MDS等 2 46例患者外周血单个核细胞中 GATA- 2基因。结果 :GATA- 2基因在 ANL L、CML 和 MDS中的表达率分别为 88.4%、81.6 %和 97% ,差异与正常人有高度显著性 (P <0 .0 1)。结论 :绝大多数髓系白血病和 MDS标本表达 GATA- 2基因 ,GATA- 2可能是白血病细胞的增殖过程中所需要的转录因子之一。     

SB203580对烟雾暴露的哮喘大鼠的影响

目的 建立烟雾暴露的支气管哮喘(简称哮喘)大鼠模型,观察p38有丝分裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)抑制剂SB203580对其的治疗作用.方法 将Wistar大鼠随机分为4组,即正常对照组、哮喘组、烟雾暴露的哮喘组及SB203580干预组.动物肺功能仪测定大鼠呼气阻力、吸气阻力及肺顺应性,观察肺组织病理学改变,通过ELISA检测大鼠肺组织中IL-4、IL-5和IL-8的表达.结果 与烟雾暴露的哮喘组相比,SB203580干预组大鼠的气道阻力显著下降,肺顺应性显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05);气道炎症明显减轻;肺组织中IL-4、IL-5和IL-8的含量显著下降,差异有统计学意义(P ＜0.05).结论 p38 MAPK抑制剂SB203580可以改善烟雾暴露的哮喘大鼠的气道炎症,减轻其支气管收缩反应.     

SB203580对烟雾暴露的哮喘大鼠的影响

目的建立烟雾暴露的支气管哮喘(简称哮喘)大鼠模型,观察p38有丝分裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)抑制剂SB203580对其的治疗作用。方法将Wistar大鼠随机分为4组,即正常对照组、哮喘组、烟雾暴露的哮喘组及SB203580干预组。动物肺功能仪测定大鼠呼气阻力、吸气阻力及肺顺应性,观察肺组织病理学改变,通过ELISA检测大鼠肺组织中IL-4、IL-5和IL-8的表达。结果与烟雾暴露的哮喘组相比,SB203580干预组大鼠的气道阻力显著下降,肺顺应性显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);气道炎症明显减轻;肺组织中IL-4、IL-5和IL-8的含量显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 p38 MAPK抑制剂SB203580可以改善烟雾暴露的哮喘大鼠的气道炎症,减轻其支气管收缩反应。