广东省中山地区临床初检RhD阴性人群中D变异体分布及特征分析

目的　研究分析中山地区初检 RhD阴性人群中 D变异体血清学和基因分型特征。方法　研究共收集 2017年 12月～ 2019年 2月中山市人民医院门诊及住院病人的血液样本 24 286例,采用微柱凝胶卡法对其中 RhD阴性样本进行初筛;再经间接抗人球蛋白试验（ indirect antiglobulin test, IAT）确认弱 D或部分 D变异型;然后用吸收放散试验对剩余样本进行 Del表型筛选。同时,通过聚合酶链反应 -序列特异性引物（ polymerase chain reaction-sequence speci.c primmer, PCR-SSP）技术对初筛 RhD阴性的样本进行 RHD等位基因分型以及血清学方法对初筛阴性样本进行 C, c, E和 e抗原表型的检测。结果　在 24 286例血液样本中初筛共检出 102例阴性样本,中山地区初检阴性比例约为 0.42%。经 IAT确认试验共鉴定出 7例弱 D或部分 D血液样本（ 6.86%）,且基因型表现多样,但未见亚洲地区常见的弱 D15和弱 D12表型。接下来的放散试验检测出 25例 Del型,通过 PCR-SSP基因分型技术又检出 3例漏检的 Del型,Del型在初检阴性样本中占比 27.45%,PCR-SSP结果显示该研究中所有 Del型血液样本等位基因均为 RHD1227A。该研究纳入的 102例初检阴性血液样本的 RhCcEe表型分布符合 Hardy-Weinberg遗传平衡 (χ2=2.625,P>0.05),表示相应等位基因所占比例在遗传中保持不变。在 Del型变异体中,除 Ccee和 CCee表型外,未见其他表型。结论　中山地区人群 RhD变异体有丰富的类型和不同分子机制,其中 Del型占比较高,血清学与基因分型结合可提高 D变异体的鉴定能力,防止漏检情况的发生。     

无锡地区献血者D变异体的检定结果

目的准确地检定D变异体,并探讨其在安全输血中的意义。方法通过AS-PCR方法测定RHD1227A等位基因,检定Del血型;通过血清学方法检出D弱反应性标本,然后通过PCR方法鉴定部分D和弱D。结果 351份盐水抗-D阴性标本,检出Del32例,部分D 3例,弱D 4例。结论准确检定D变异体对制定安全有效的临床输血策略具有重要意义。     

石家庄地区初筛Rh（D）阴性献血者D变异体表型分析

目的研究石家庄地区初筛为Rh（D）阴性献血者中D变异体表型的分布。方法263份初筛为Rh（D）阴性的血样用间接抗球蛋白试验筛选并确认弱D/部分D表型,然后用吸收放散试验从间接抗球蛋白试验阴性的血样中筛选并确认Del表型,Rh因子用常规血清学试验检测。结果间接抗球蛋白试验共筛出弱D/部分D表型16份,其中RhCcee3份（18.75%）、RhCcEe1份（6.25%）和RhccEe12份（75.00%）;吸收放散试验共筛出Del表型59份,其中RhCCee5份（8.47%）、RhCcee51份（86.44%）和RhCcEe3份（5.08%）。结论石家庄地区初筛为Rh（D）阴性献血者中,6.08%为弱D/部分D表型,22.43%为Del表型,且与RhCE表型有关。     

Rh（D）变异体的研究进展

Rh（D）变异体的检测在临床Rh血型检测中越来越受到重视,本文将总结分析D变异体的研究进展及国内研究现状,为基因技术检测Rh（D）变异体提供理论依据。     

华北地区汉族人群Rh（D）抗原弱表现型个体的分子遗传机制研究

目的探讨汉族人群非血缘关系Rh（D）抗原弱阳性个体的血清学表型及分子遗传机制。方法采用常规血清学技术从非血缘关系随机献血者中筛检Rh（D）抗原弱阳性个体（包括弱D型、部分D型）,对其进行Rh D、C、c、E、e抗原表型的检测;采用序列特异性引物-聚合酶链反应（PCR-SSP）方法同时检测其RHD基因和RHCE基因;测序分析RHD基因全长编码区序列;同时通过特异性PCR技术测定其RHD合子型。结果血清学试验证实为D抗原弱阳性表型的有32例个体,占无关供者人群比率为0.015%,其中18例个体为弱D15型（845G>A）,1例为弱D12型（830G>A）,1例为携带DEL等位基因（1227G>A）的弱D型,8例为部分D表型中的DⅥⅢ型（RHD-CE（3-6）-D）,1例为部分D表型中的DⅤa（Hus）（RHD-CE（5）-D）,3例标本10个外显子检测均未见异常。Rh小因子检测有3种表型CcEe（4例）、Ccee（10例）、ccEe（18例）,其血清学与分子生物学检测一致。RHD杂合性试验鉴定显示仅4例标本为纯合型RHD+/RHD+,其余为杂合型RHD+/RHD-。结论汉族人群D抗原弱阳性比率明显少于高加索人,汉族人群D弱表现型中,弱D15型频率最高;部分D的弱表现型中,DⅥⅢ型占主要比例。     

贵阳市无偿献血人群RhD变异体的基因型分析

目的研究分析RhD抗原变异体的血清学表型和基因型。方法收集贵阳市159名无偿献血者RhD盐水法初筛阴性的标本,采用间接抗球蛋白试验（IAT）筛出部分D型和弱D型抗原,用乙醚吸收放散试验检出Del型抗原,并对Rh表型（C、c、E、e抗原）进行血清学检测。同时运用序列特异性引物-聚合酶链反应（PCR-SSP）对RhD变异型D抗原外显子进行扩增和选择性测序以判定其确切型别。结果 159例RhD初筛阴性标本中检出RhD变异型53例（33.3%）,包括Del1227G>A、3G>A 46例（28.9%）、部分D DVI typeШRHD-CE（3-6）-D 3例、弱D15 845 G>A 3例、弱D24 1013T>C 1例。Rh表型结果显示,ccee 65例、Ccee 79例、CCee 11例、ccEe和CcEe各2例。结论贵阳市无偿献血人群中RhD变异体的基因型呈现多态性,其中主要为Del型。     

RHD* 1227A等位基因在辽宁汉族Rh阴性人群和随机人群中的频率分析

目的 研究调查辽宁地区汉族RHD*1227A等位基因在Rh阴性人群和随机人群中的频率.方法 采用吸收放散实验筛查Del表型,RHD基因特异聚合酶链反应-序列特异性(PCR-SSP)筛查RHD* 1227A等位基因,RHD全编码区的核苷酸序列分析方法确认RHD* 1227A等位基因,杂交合子技术检测RHD基因的杂合性.结...     

血清学检测柳州地区RhD初筛阴性献血者D变异体结果分析

目的研究柳州地区RhD初筛阴性献血者D变异体分布。方法 425例经盐水法初筛为RhD阴性献血者标本采用IAT试验确认弱D,对IAT阴性的血样进一步采用吸收放散试验检测Del型和真实D阴性。采用单克隆Ig M抗-C,c,E和e血清以盐水法检测Rh表型。参照文献方法计算RhD阴性献血者Rh基因频率、单体型频率和Rh表型期望值,并进行Hardy-Weinberg吻合度检验。结果 425例RhD初筛阴性献血者中共检出D变异体99例（23.29%）,其中弱D18例（4.24%）,Del型81例（19.05%）;确认真实D阴性326例（76.71%）。18例弱D表型分布:Ccee 9例（50.00%）>CCee 4例（22.22%）>cc Ee 3例（16.67%）>CCEe 1例（5.56%）=ccee 1例（5.56%）。81例Del型表型分布:Ccee 47例（58.03%）>CCee 17例（20.99%）>ccee 11例（13.58%）>cc Ee 5例（6.17%）>cc EE 1例（1.23%）。326例真实D阴性表型分布:ccee 199例（61.04%）>Ccee 83例（25.46%）>CCee 22例（6.75%）>cc Ee 16例（4.91%）>cc EE 3例（0.92%）>Cc Ee 2例（0.61%）>CCEe 1例（0.31%）。本文Rh表型的观察值与期望值差异无统计学意义（P>0.05）,Hardy-Weinberg吻合度检验良好。单体型频率特点:cde（0.696 7）>Cde（0.261 6）>cd E（0.0417）>Cd E（0.000 0）。基因频率特点:c（0.739 5）>C（0.260 5）,e（0.960 7）>E（0.039 3）。结论柳州地区RhD初筛阴性献血者D变异体检出率较高,将弱D和Del型献血者认定为RhD阳性,可提高临床输血安全性。     

Rh血型D放散型(D~(el))

<正>Rh血型系统是人类红细胞30个血型系统中最为复杂的1个抗原系统,在临床输血中其重要性仅次于ABO血型。Rh血型系统包括50多个抗原,与临床密切相关的抗原主要     

Rh血型系统弱D及部分D研究进展

Rh血型系统弱D及部分D具有不同的分子遗传机制,形成弱D的氨基酸替换主要位于胞内和跨膜区域,表现为抗原位点数减少,但抗原表位数目基本不变。形成部分D（partial D）的氨基酸变异主要位于胞外区域,表现为缺失一个或多个D抗原表位,这也是部分D易产生抗体的原因所在。本文主要综述了近年来Rh血型系统弱D及部分D相关研究进展。     

D抗原阳性个体及无效等位基因携带者RHD基因数目测定

目的　测定Rh血型D抗原阳性个体的RHD基因数目。方法　采用聚合酶链式反应 限制性片段长度多态性 （PCR RFLP）技术 ,扩增 10名D阳性、5名弱D、2 5名Del表型和 12名携带无效等位基因的Rh阴性个体的RH基因座位下游盒子和融合盒子序列 ,产物经DNA限制性内切酶PstI消化后电泳 ,以 5份经血清学和序列分析基因分型方法确认的D阴性样本作为RHD-/RHD-纯合子对照 ,鉴定RHD+ /RHD+ 或RHD+ /RHD-基因型。结果　 10名D阳性个体均为RHD+ /RHD+ 纯合子、5份弱D样本及 12名携带无效等位基因的Rh阴性个体全部为RHD+ /RHD-杂合型。 2 5名Del表型个体中 9人为RHD+ /RHD+ 纯合型 （36 % ） ,其中 6人Rh表型为DCCee、3人为DCcee ;另 16名Del个体为RHD+ /RHD-杂合型 ,Rh表型均为DCcee。结论　D阳性个体RHD+ /RHD+ 纯合型多见 ,弱D型个体以RHD+ /RHD-杂合型为主 ,在Del表型个体存在高比率的RHD+ /RHD+ 纯合型 ;携带无效等位基因的个体多为RHD+ /RHD-杂合型     

Frequency of RHD variants in serologically weak D Turkish blood donors

BackgroundRhD typing has remained of primary importance, as being the leading cause of hemolytic disease of the newborn. Among Rh system’s 55 blood group antigens, RhD is the most immunogenic. We aimed with this study to determine weak D/partial D variant frequency in blood donors who were admitted to our blood center and have serologically designated blood group weak D.Materials and methodsWe screened blood donors who admitted between 2011 and 2017 to our blood center. Sixty-seven serologically weak D phenotyped donors have participated in the study. These donors' samples were studied further by Polymerase Chain Reaction Sequence- Specific Primers (PCR-SSP) for determining D variants.ResultsWeak D phenotype was detected in 228(0.12 %) out of 177,554 donors. Sixty-seven of them agreed to take part in the study. The frequency of weak D and partial D was 68.7 % (n = 46), and 22.4 % (n = 15), in order. The most encountered weak D and partial D variant was type 15 and DFR type, respectively.ConclusionsThe prevalence of serologically weak D phenotypes varies by race and ethnicity. Turkey is a country covering a mixture of European and Asian DNA with different ethnic groups. Thus, our research as giving the overall distribution of RHD variants from the largest city of Turkey, which may reflect the general ethnic background of the country, would help to the establishment of a databank for blood banking. This paper is the first molecular study on RHD variants in Turkey. New molecular research would be more reliable and precise.     

深圳地区献血者Rh表型和基因型分布调查

目的 探讨Rh阴性个体的分子基础。方法 对1999年6月～2002年5月共83722名首次献血,应用血清学方法检测样本：Rh表型,对部分：Rh阴性、弱D表型的RHD基因编码区全长进行序列分析,并应用限制性片段长度多态性(RFLP)技术或双管PCR法分析RhD基因型。结果 中国人Rh阴性率(IAT检测)为0．3％;弱D表型个体(包括弱D型、部分D型和其他弱D形式)概率约0．1‰;在IAT确认的Rh阴性中,RHD基因检出率为36．0％．D放散型(D^el)占24．3％。D^el个体以RHD1227A等位基因为主,纯合子占33．3％(9／27);表型为CCee的D^el个体占22．2％(6／27),均为纯合子。在真实RhD阴性个体(吸收放散试验排除D^el个体)中,RHD基因检出率为15．5％,以携带RHD—CE(2—9)-D2等位基因为主(占真实RhD阴性个体的11．9％)。另外,在IAT确认的Rh阴性中,如果排除无效基因携带,E抗原的频率仅为0．018％。结论 中国人RhD阴性的分子背景复杂,且与高加索人和非洲黑人存在较大差异,高频率的D^el表型个体和RHD—CE(2—9)-D2等位基因携带是中国人群Rh阴性个体分子背景的特点。     

Rh阴性血型者Del表型和RhD基因的检测

目的 初步探讨中国汉族人群Rh阴性血型者Del表型与RhD基因之间的关系。方法 对67例血清学方法检测为Rh阴性的供血者样本进行吸收放散试验以检测Del型，并扩增RhD基因的外显子3，4，5，7，10，检测RhD基因存在情况。结果 吸收放散试验表明67例样本中Del型22例，占32．8％，非Del型45例，占67．2％。在所有表型为ccee,ccEe的38例RhD(-)个体中，Del试验均为阴性，RhD基因完全缺失；而在表型为Ccee或CcEe的29例RhD(-)个体中，22例Del试验阳性，其中20例携带完整的RhD基因，2例有部分RhD基因；7例Del试验阴性，其中6例携带部分RhD基因，1例D基因完全缺失。结论 中国汉族人群中Rh阴性血型者RhD基因的存在及多态性多由Del引起。     

南充市Rh阴性献血者血清学表型和不规则抗体调查

目的调查南充市Rh阴性无偿献血者的血清学表型和不规则抗体情况。方法应用血型血清学方法对初检Rh阴性的献血者进行Rh阴性确认、血清学表型鉴定及不规则抗体筛选鉴定。结果在433份送检标本中共确认Rh阴性402份(92.8%),检出D变异体23份(5.3%),其余8份(1.9%)为检验科RhD检测错误;共检出不规则抗体12份,在Rh确认阴性献血者中检出7份抗-D(1.7%);Rh阴性献血者的血清学表型分布结果主要以dccee和dCcee为主,其余为dCCee、dccEe和dCcEe。结论通过本次调查,掌握了南充市Rh阴性无偿献血者的血清学表型和不规则抗体的分布情况,保障了临床Rh阴性患者输血安全性、有效性和及时性。     

聚合酶链式反应技术检测Rh血型Del表型

目的　探讨采用DNA技术鉴定Del基因型。方法　根据文献和GenBank报道的中国人Del等位基因序列 ,设计一对特异性引物 ,再引入一对内对照引物 ,建立聚合酶链反应 (PCR)检测Del基因型 ,用此法检测 10名Rh阴性、10名Rh阳性和 2 0名经血清学吸收放散试验鉴定的Del表型个体的样品。结果　 10份Rh阳性和 10份Rh阴性样品PCR检测均为阴性 ,2 0份Del样品则均为阳性 ,显示此法能特异性检测Del等位基因 ,且与吸收放散试验结果一致。结论　与吸收放散试验比较 ,PCR方法简便、快速 ,可用于临床常规实验室鉴定中国人群Del表型个体