缓释微球乙型肝炎疫苗的初步研究

目的　研制缓释微球乙型肝炎疫苗。方法　用聚－ＤＬ－乳酸－聚乙二醇共聚物（ＰＥＬＡ）为材料,包裹乙 型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）,制成缓释微球疫苗。微球的粒径均小于５ｕｍ,平均粒径为２．１７ｕｍ,抗原包裹量为１．２５％, 包裹率为６０－８０％。用 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测抗原,以微球疫苗免疫 ＢＡＬＢ／ｃ。小鼠。结果 ＨＢｓＡｇ的结构包裹前后是一致 的,小鼠经皮下注射单剂微球疫苗后,在第 １４ｗ,小鼠血清 ＩｇＧ滴度可达到铝佐剂疫苗相当的水平,且维持较高的滴 度。结论采用生物可降解的缓释微球作为乙肝疫苗载体系统具有潜在的优势。     

壳聚糖缓释微球的制备与表征

以壳聚糖(Chitosan)、戊二醛(Glutaraldehyde)、尿素(Urea)为主要原料,采用乳化-化学交联法制备尿素-壳聚糖缓释微球.通过红外光谱测试,分析缓释微球的结构特征;通过扫描电镜测试,观察微球的微观形貌;通过交联度测试确定戊二醛的最佳用量;通过缓释测试,测定壳聚糖微球的缓释效果.结果表明:采用乳化-...     

一种新型兽用破伤风类毒素抗原的免疫原性

应用戊二醛及精氨酸进行毒素分子聚合解毒制备的破伤风类毒素新型抗原，给9群63匹马超免，一次免后抗体增长率达106．1±31．28％，平均抗体单位由免前1540．9±452．85Lf／ml上升至3146．27±929Lf／ml，免疫成功率为100％。     

农药缓释微球的制备及其改性研究进展

介绍了以天然高分子为载体的农药缓释微球的制备方法,包括挤出-外源凝胶法、乳化-凝胶法(乳化-外源凝胶法和乳化-内源凝胶法)、乳化-溶剂挥发法(单乳液法、双乳液法)等,着重分析各种制备方法对微球结构、粒径、包埋率、缓释等性能的影响,并讨论了共混改性和表面涂覆改性载药微球的缓释性能,同时指出了农药缓释微球的发展方向.     

6B型肺炎球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗的制备及其免疫原性

目的 制备6B型肺炎球菌荚膜多糖(6B-PNCPS)-破伤风类毒素蛋白(TT)结合疫苗,并研究其免疫原性。方法6B-PNCPS用溴化氰活化后与己二酰肼形成多糖-酰肼基衍生物,然后在蛋白活化剂碳二亚胺作用下将6B-PNCPS与TT进行共价结合。分别将其结合物及多糖免疫NIH小鼠,用ELISA检测小鼠血清中抗6B-PNCPS抗体。结果6B-PNCPS-TT结合物经凝胶色谱分析显示具有较6B-PNCPS更大的相对分子质量,多糖/蛋白比为1.42-1.66。结合物具有6B-PNCPS的血清学特异性,所诱生的抗6B-PNCPS特异性IgG抗体滴度与6B-PNCPS差异有显著意义。结论 用该法制备6B-PNCPS-TT结合疫苗,具有良好的免疫原性。     

改性纤维素微球的制备及其药物缓释性能研究

将微晶纤维素(MCC)溶于1-烯丙基-3-甲基氯代咪唑(AmimCl)离子液体中,使用4-二甲氨基吡啶(DMAP)作为催化剂,采用开环聚合的方法,成功合成了纤维素接枝L-聚乳酸(Cellulose-g-PLLA),并采用乳化-溶剂挥发法成功制备了纤维素微球。通过核磁共振(HNMR)、透射电子显微镜(TEM)等对聚合物进行表征。对微球的降解性、缓释性及缓释动力学进行了探讨。结果表明,Cellulose-g-PLLA微球具有作为缓释药物载体的能力。     

甲型副伤寒多糖-破伤风类毒素结合疫苗的制备及安全性和免疫原性

目的制备甲型副伤寒多糖-破伤风类毒素结合疫苗,并检测其安全性与免疫原性。方法副甲O-SP溶液加入CDAP活化,己二酰肼(ADH)衍化,在碳二亚胺(EDAC)作用下与破伤风类毒素(TT)偶联,反应物经柱层析纯化,制得多糖蛋白结合物,经质量检测后,进行安全性及免疫原性试验。结果所制备的结合物多糖蛋白比稳定在0.6~0.8之间,CL-4B检测Kd≤0.2时的回收率大于75%,高相对分子质量结合物含量不低于90%。免疫双扩散试验显示结合物与副甲家兔超免血清和TT抗血清均产生可见沉淀线。动物安全试验均合格。结合物免疫小鼠后,其血清副甲LPS抗体滴度显著增长,阳转率达到100%。结论用CDAP活化多糖制备的甲型副伤寒-破伤风类毒素结合疫苗质量稳定,安全可靠,且具有良好的免疫原性。     

吸附精制破伤风类毒素几种效力检定方法的比较

本文提供了用三种效力试验方法检定吸附精制破伤风类毒素的结果。WHO推荐的方法准确性高,但耗用动物过多。中国规程法没有要求用标准品作对照,因此对检品检定的结果,易受季节和动物饲养条件的影响。当前较为合理又简便易行的精破类检定方法是将待检品与标准品同时免疫动物,然后测定其血清抗毒素效价,如待检品的滴度等于或高于标准品即可认为合格。     

抗破伤风类毒素单克隆抗体的研究

用精被类（TT）免疫的BALB／c小鼠牌细胞与小鼠骨髓癌SP2／O细胞融合，获得4株能分泌中和破伤风毒素的单克隆抗体细胞株．所分泌的单抗能识别不同的抗原表位。一种单抗在小鼠体内可中和0．1～0．4IU／ml破伤风毒素，2种、3种和4种单抗混和后分别可中和20、350和750IU／ml。     

PLGA缓释微球的制备及其释药降解性能研究

以巴比妥为球心物质,聚乙烯吡咯烷酮（PVP）为分散剂,采用溶剂挥发法制备了聚（乳酸-羟基乙酸）共聚物PLGA载药微球。透射电镜、光学显微镜测试表明微球球型规则,表面平滑,分布均匀,微球粒径在400nm左右,包覆效果良好,微球载药率1．039％,药物包封率42．34％。红外（FT—IR）分析得知,两种物质互相融为一体。以PH=7．4的PBS缓冲溶液为释放介质,用紫外分光光度计（UV）对微球的体外释药过程进行了实验,微球在前10天有明显的突释,此后缓慢释药,45天后药物释药率在80％以上。实验结果表明：PLGA是一种理想的控缓释材料。     

育龄妇女破伤风类毒素免疫后的血清学效果

205名育龄妇女免前血清破伤风抗毒素达到自然保护水平者占37．56％，抗毒素GMT（滴度倒数，下同）为3．88±5．12HAu／ml。经破类一针免疫的163人，达保护水平者占93．25％，GMT为385．06±12．95HAu／ml；经2针免疫的113人，达保护水平者占100％，GMT为1452．6±4．8HAu／ml；经3针免疫的59人，达保护水平者占100％，GMT为2621．06±2．57HAu／ml。随着免疫针次的增加，GMT逐渐升高且上升幅度非常显著。     

育龄妇女破伤风抗毒素水平和破类免疫效果

应用IHA法对1318名15～45岁育龄妇女进行了破伤风抗毒素水平测定，阳性率8.80％，保护率7.97％，GMT0．0026IU／ml。抗体阳性率随年龄增大呈下降趋势；城镇与农村育龄妇女的抗体阳性率和保护率均无明显差异。对其中379名18～35岁育龄妇女进行破类免疫，接种1，2，3针后的抗体阳性率，由免前的7.12％分别上升到88．34％、95．33％和100％，保护率由免前的6.33％分别上升到86．02％、93．93／和100％；GMT由免前的0.002IU／ml分别上升到0.26IU／ml、0．38U／ml和0．68IU／ml。各针次间的抗体阳性率、保护率和GMT均有显著差异。而各年龄组间的血清学效果则无明显差异。     

A群奈瑟脑膜炎球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合物的制备及其工艺稳定性

目的按初步确定的工艺,制备A群奈瑟脑膜炎球菌荚膜多糖(Group A Neisseria meningococcus capsular polysac charide,GAMP)与破伤风类毒素(Tetanus toxoid,TT)的结合物,通过监测关键工艺参数,分析该工艺的稳定性。方法制备8批GAMP-TT结合物,经Sepharose4FF柱层析纯化后,进行各项生化鉴定,采用双向免疫扩散试验检测其抗原性,以结合物皮下免疫小鼠,ELISA检测小鼠血清中抗GAMP及抗TT IgG抗体水平。结果制备的8批结合物工艺关键参数较稳定,均保持GAMP抗原特异性;免疫小鼠后,均可诱生较高水平的血清抗GAMP IgG抗体,并可诱生免疫加强应答。结论该制备工艺稳定,为GAMP-TT结合疫苗的研制提供了参考。     

吸附精制白喉—破伤风二联类毒素成人接种后的血清学效果

本文报告用两种配方的吸附精制白喉—破伤风二联类毒素(DT),在浙江省黄岩县中学生和青工中进行免疫效果观察。免疫后1个月、 1年和3年白喉抗体保护水平分别达95％、88％和80％以上。免疫后1个月和1年破伤风抗体保护水平分别达85％和81％以上。白喉和破伤风免疫后抗体滴度的几何平均值(GMT)分别比免疫前增加4～28倍和7～11倍。表明该制剂接种1次即可获得较为满意的血清学效果,可供青少年和成人作加强免疫或应急接种用。     

多价肺炎链球菌荚膜多糖结合物对小鼠免疫应答的影响

目的探讨多价肺炎链球菌荚膜多糖结合物对小鼠免疫应答的影响。方法分别用单一载体(破伤风类毒素)和混合载体(破伤风类毒素和白喉类毒素)作为多糖结合物的载体蛋白,制备5～9价肺炎链球菌荚膜多糖结合物,免疫NIH小鼠,采用间接ELISA法测定免疫小鼠血清中抗荚膜多糖特异性IgG抗体水平。结果多价肺炎链球菌荚膜多糖结合物的免疫效果优于相应的单价结合物;随着结合物配制价数的增高,小鼠的免疫应答能力趋于下降;多价结合物中使用两种载体能缓解此现象,但载体含量过高时,依然会抑制免疫应答。结论多价肺炎链球菌荚膜多糖结合物免疫小鼠后,随着载体剂量的增高,会出现载体诱导的表位抑制现象,使小鼠的免疫应答反应减弱。两种载体蛋白同时使用能缓解此现象。     

大肠杆菌表达的破伤风毒素C片段的免疫原性分析

目的　分析大肠杆菌表达的破伤风毒素C片段 (简称TTC)的免疫原性。方法　利用分子生物学技术在大肠杆菌中表达破伤风毒素C片段 ,用阴离子交换层析和金属离子螯合亲和层析方法进行蛋白纯化。参照2 0 0 0年版《中国生物制品规程》的方法检测表达产物的效价。用间接血凝实验检测免疫动物血清中的破伤风抗体单位。结果　重组蛋白的表达量占菌体总蛋白的 15 %。纯化后蛋白纯度达到 96 5 %。免疫效价为 18 70 6IU mg ,ED50 为 2 0 μg。 1μgTTC经 4次免疫能诱导机体产生足够的抗体 ,保护动物免受破伤风毒素的攻击。 结论　重组蛋白具有良好的免疫原性 ,为开发基因工程疫苗奠定了基础