SPF家兔的培育及植入肠道正常菌群后生长性能的观察

目的对普通级实验家兔进行剖腹净化建立SPF家兔种群,提高实验用兔的质量,满足科研、生产及检定工作需要。方法采用剖腹摘取子宫术,在无菌隔离器内以人工哺乳方法将仔兔培育成无菌兔,再将双岐杆菌等肠道正常菌接种到无菌兔体内,使其成为SPF兔;对SPF环境中植入肠道正常菌兔和未植菌兔离乳后生长性能进行观察比较。结果人工培育出的SPF兔,经微生物和寄生虫检测,符合国家SPF兔标准;植入肠道正常菌群兔体重与未植入肠道正常菌兔生长体重相比极显著增加。结论通过剖腹摘取子宫术,人工哺乳仔兔和植入肠道正常菌群的方法建立了SPF实验用兔种群。     

SPF家兔种群的建立

目的对普通级实验家兔进行了剖腹净化,建立我国SPF家兔种子核心群,使普通级兔子升级换代,以满足科研、生产及检定工作不断发展的需要.方法采用剖腹摘取子宫术,在无菌隔离器内以吮吸法人工哺乳仔兔,离乳后将正常菌群植入仔兔体内,并转入SPF屏障设施内饲养、繁殖.结果建立了具有100只种兔的SPF兔子核心群,兔群生长发育正常.经多次微生物检测,符合SPF标准.SPF兔群将作为建立SPF实验用兔生产群的核心种群.     

实验鼠的剖腹产代乳净化

实验动物的生物净化方法主要有药物净化和剖腹产净化两种，一般要得到较高级别的实验动物主要是通过剖腹产净化的方法达到，目前国内多采用手术隔离器进行剖腹产手术，笔者利用北京实验动物研究中心的悉生工程设备，以澳大利亚引进的无菌ＮＩＨ小鼠和ＳＤ大鼠作为代乳鼠，分别对来自美国的清洁级ＮＩＨ小鼠和来自澳大利亚的清洁级ＳＤ大鼠首次进行了在超净工作中做剖腹产手术的尝试。     

小鼠剖腹产净化方法研究

目的:探讨大理学院现用实验小鼠妊娠期、小鼠剖腹产的适宜时间、技术方法和仔鼠的代乳方法,为实现小鼠的净化作技术准备.方法:通过对小鼠饲养繁殖,摸清小鼠的平均妊娠期,确定剖腹产时间,在此基础上采用剖腹产手术对小鼠进行子宫摘除取胎,取出仔鼠进行代乳,观察代乳情况及代乳仔鼠成活率.结果:大理学院现用实验小鼠平均妊娠期为18.5d,在三次小鼠剖腹产实验中,第一次实验仔鼠代乳成活率为0,第二次实验仔鼠代乳成活率达100%,第三次实验仔鼠代乳成活率仍为100%.结论:小鼠剖腹产手术成功率为100%,已摸索出小鼠剖腹产净化方法的配套技术,包括剖腹产手术的适宜时间、技术方法以及代乳母鼠的选择和代乳方法.     

无菌大鼠培育的技术创新及其繁育探讨

对清洁级SD大鼠进行剖腹取胎净化,经人工饲育建立无菌SD大鼠群,以满足科研单位对无菌大鼠的需求。在手术隔离器中剥离子宫,取35只仔鼠传入饲育隔离器,静置2 h后存活20只;用自行研制的灌胃注射器,和市售配方改良奶粉,对剖腹取胎仔鼠进行人工哺乳。每24 h人工哺乳5~6次。哺乳20只,离乳13只。粪便、垫料、棉拭子经无菌检查,均无细菌生长。通过优化人工乳配方,创新无菌鼠培育技术,成功建立无菌大鼠模型,并传代保种,解决了科学研究在国内买不到无菌大鼠的难题。     

Hartley 豚鼠生物净化群体建立及微卫星遗传质量分析

摘要:目的 对现有 Hartley 豚鼠种群进行剖腹产净化,通过遗传检测,确认净化后的种群符合封闭群遗传特征。方法 生产群中不同繁殖单元广泛选择雌、雄个体,按 1 ∶ 1 比例合笼交配,于合笼后 70 d 实施剖腹产手术,仔鼠人工乳饲喂。 用循环交配法繁殖一代,从 F1 代中选取 30 个个体采集耳部组织样本,提取 DNA,应用 18 个豚鼠基因组微卫星位点进行 遗 传 检 测。 结 果 剖 腹 产 共 获 得 85 只 仔 鼠,成 活 56 只,离 乳 47 只 ( 23 雄、24 雌) ,成 活 率65. 9% ,离乳率 83. 9 % ;18 个豚鼠微卫星位点共检测到 81 个等位基因,平均杂合度 0. 5747,平均多态信息含量( PIC)0. 5216。 Hardy-Weinberg 遗传平衡检测,14 个位点符合 H-W 遗传平衡,3 个位点显著偏离 H-W 遗传平衡,1个位点呈现纯合状态。 结论 通过剖腹产对豚鼠种群进行了净化,净化后的群体具备较理想杂合度,属高度多态性群体,符合封闭群实验动物遗传特征。     

SD大鼠的剖腹净化

1994年从日本引进的SD大鼠种群 ,本身携带有金黄色葡萄球菌 ,不符合我国SPF动物的等级要求 ,为使之符合我国三级动物的要求 ,通过剖腹产手术进行净化 ,并用SPFWistar大鼠为保姆代乳。成功剖腹孕鼠 35只 ,选取活仔 115只 (每只母鼠选仔 4— 6只 ) ,经过扩大繁殖 ,目前已为 180只生产母鼠 ,4 0只生产雄鼠的生产群。经过 4年共18次的微生物检测 ,不但去除了金黄色葡萄球菌 ,而且 ,各项微生物检测指标均符合我国SPF大鼠的等级标准。表明剖腹净化是成功的     

屏障系统大耳白、新西兰兔血液学指标测定分析

目的了解在屏障环境繁育的不同品系实验兔的生理指标特性。方法采用SPF级大耳白和新西兰兔各10只,通过心脏采血获得检测样本。用血细胞分析仪、血液生化仪及凝血仪检测其生理指标。结果大耳白实验兔部分指标有差异(P<0.05),而新西兰实验兔部分指标也存在差异(P<0.05)。结论不同品系的SPF兔生理指标有着明显的差异,这对选择生理指标稳定的实验动物、保证动物实验顺利进行有着非常重要的意义。     

铬对SPF级新西兰兔繁殖性能的影响

目的研究铬离子对SPF级新西兰兔繁殖性能的影响。方法 SPF级新西兰兔50只,10雄40雌,随机分为阴性对照组、实验Ⅰ组、实验Ⅱ组、实验Ⅲ组、实验Ⅳ。对照组给予阴性饲料,实验Ⅰ～Ⅳ分别给予含铬为0.1 mg/kg,0.2 mg/kg,0.4 mg/kg,0.8 mg/kg,连续观察4胎内产活仔数、初生窝重、断奶仔数、断奶窝重、断奶成活率、断奶均重和成活率。结果添加铬可以提高新西兰兔的繁殖能力,提高仔兔的成活率。当铬的添加量从0.1 mg/kg、0.2 mg/kg增至0.4 mg/kg时,初生窝重、断奶仔数、断奶窝重和断奶成活率均随着铬的添加量呈线性增高趋势,各项指标有显著性差异（P≤0.05）,从0.4 mg/kg提高到0.8 mg/kg,各项数据均无显著提高。     

硫喷妥钠,氯胺酮麻醉行家兔四肢骨折实验观察

硫喷妥钠、氯胺酮麻醉行家兔四肢骨折实验观察朱森树宋淑君解放军第２５１医院动物中心（张家口０７５０００）第２５１医院外二科,采用兔脐血注射、对家兔进行骨折愈合影响实验研究。选用新西兰兔进行实验,根据动物实验的特点和要求,我们采用了硫喷妥钠加氯胺酮联合麻...     

吗啡人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

利用化学法合成吗啡人工抗原,将此抗原免疫新西兰大白兔制备抗吗啡多克隆抗体.利用混合酸酐法将吗啡人工抗原分别与蛋白质载体BSA及OVA偶联,经蛋白质电泳以及紫外扫描检测,证明吗啡人工抗原合成成功.用间酶联免疫检测法检测,证明制备得到了高效价的吗啡多克隆抗体血清,且与吗啡人工抗原具有高特异性反应,可用于吗啡免疫学检测方法的研究.     

日本大耳白兔、新西兰白兔的遗传分化研究

应用平均基因杂合度，平均基因纯合度，等位基因有效数，基因均质度，Lewontin的Shannon信息测度，对日本大耳白兔，新西兰兔两个群体存在的血液蛋白位点的基因频率进行遗传分析，研究表明：日本大耳白兔的基因杂合度，等位基因有效指标和Shannon信息测度值高于新西兰白兔，新西兰兔的均质度高于日本大耳白兔。     

兔内膝体神经元声反应的观察

实验在10只三碘季胺酚麻痹的新西兰兔上进行.采用记录单个神经元放电的方法,观察了短纯音引起的内膝体(MGB)神经元的声反应.实验结果表明:兔MGB神经元的声反应类型与猫、鼠等类似;并且声反应型式随纯音刺激频率、强度、时程的变化而变化.     

新西兰雄兔部分血液生化指标正常值测定

检测了 6 0只新西兰雄兔的 2 0项血液生化指标的正常值 ,其中包括兔血浆和红细胞中脂肪酸、载脂蛋白A和B、肝功、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、前列腺环素、红细胞膜流动性等较新的指标 ,为以兔做为实验动物的研究提供了相关参考依据。     

人血管能抑素免疫兔抗血清制备及其特性测定

纯化的人血管能抑素包涵体进行SDS-PAGE分离，切胶回收目的蛋白，与弗氏不完全佐剂充分乳化后，进行多点皮下注射免疫新西兰白兔，制备兔抗人血管能抑素抗血清，抗血清去除交叉反应抗体后，进行Western Blotting分析抗血清与人血管能抑素及其N端和C端片段的抗原抗体反应特性。结果表明，经过4次加强免疫后，获得了高效价的兔抗人血管能抑素抗血清。抗血清去除交叉反应抗体后，Western Blotting分析表明，它能与人血管能抑素发生特异的抗原抗体反应，同时还能与人血管能抑素的N端片段和C端片段发生特异性较弱的抗原抗体反应。证明制备的兔抗人血管能抑素抗血清能应用于人血管能抑素及其N端和C端片段免疫学研究中。     

强力霉素一侧关节腔注射对兔制动骨性关节炎模型对侧膝关节退变的影响

为研究一侧关节腔内注射强力霉素对制动兔骨关节炎模型对侧膝关节早期退变的影响及作用机制。用36只新西兰大白兔随机分为空白对照组;模型对照4、8、12周组;给药8、12周组。模型组与给药组均给予石膏固定左下肢。石膏固定4周后,给药组每日给予1.33%的强力霉素0.3mL左膝关节腔内注射。分别在8周、12周处死动物,观察右膝指标包括:软骨大体形态、软骨mankin评分、软骨细胞MMP-3表达及滑膜细胞IL-1β表达。血液检测MMP-3及IL-1β含量。结果显示:与模型对照组比较,给药组软骨面光滑,mankin评分较低,IL-1β、MMP-3活性较低(P0.05)。与模型对照组比较,给药组血液中IL-1、MMP-3含量较低(P0.05)。由此可知,强力霉素一侧关节腔注射对制动兔骨关节炎模型对侧膝关节软骨早期退变有缓解作用,作用机制与抑制IL-1β、MMP-3的表达有关。     

家兔模拟直肠癌手术损伤盆腔植物性神经后的性机能观察

为了验证损伤盆腔植物性神经后会导致术后性机能障碍，以及进一步了解神经的走行和解剖关系，对雄性家兔进行了模拟直肠癌根治性手术的实验：即损伤其低前神经盆内脏神经及盆丛后再与雌性家兔配对，继续喂养６个月，看有无生育能力，以观察性机能。观察结果：生育者只占１０％，而对照组全部有生育，这与临床上直肠癌振治性手术后所发生的排尿、性机能障碍基本一致。这项研究为实施保存植物性神经的直肠癌手术提供了可靠依据；对维持直肠癌术后的排尿和性机能，提高生存质量有重要意义。     

组织工程人角膜内皮在维持新西兰兔角膜透明中的效果研究

为了评价组织工程人角膜内皮(TE-HCE)维持动物角膜透明的效果,利用来自非转染人角膜内皮(HCE)细胞系的核型正常单克隆细胞株为种子细胞、以去上皮层修饰羊膜为载体支架体外重建的TE-HCE,对新西兰兔进行了穿透性角膜内皮移植试验,利用肉眼观察了移植兔眼的水肿和免疫排斥情况,利用裂隙灯显微镜检测了移植兔角膜的透明情况,并利用荧光显微镜检测了移植兔角膜内皮细胞的CM-DiI标记。对撕除后板层新西兰兔眼进行TE-HCE穿透性角膜内皮移植实验的观察和检测结果显示,移植后的兔眼角膜没有出现明显的水肿和排斥等不良反应,使移植兔角膜维持透明的时间长达100d,且角膜内皮移植区的细胞均为带有CM-DiI标记、来自TE-HCE的种子细胞。由此可见,体外重建TE-HCE移植后能使新西兰兔角膜长期保持透明,有望作为HCE的替代物用于角膜内皮失代偿和角膜内皮盲的临床移植和治疗。     

兔抗人多发性骨髓瘤细胞多克隆抗体的制备与鉴定

制备人多发性骨髓瘤全细胞兔多克隆抗体。用人多发性骨髓瘤细胞系ARH-77全细胞和福氏完全佐剂通过背部皮内多点注射首次免疫新西兰大白兔,第14 d用ARH-77全细胞和福氏不完全佐剂同样剂量加强免疫,第28 d和38 d时再次免疫。第45 d颈动脉采血80 mL,4℃静置过夜,收集血清。然后采用亲和层析系统纯化血清中的多克隆抗体。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测纯化多克隆抗体的效价;免疫印迹法和荧光免疫细胞化学检测纯化多克隆抗体的特异性。结果:ELISA检测多克隆抗体滴度为1∶20 000,免疫印迹检测结果显示该抗体具有较高特异性,荧光免疫细胞化学检测多克隆抗体能够有效的结合细胞表面抗原。实验获得了高效价的特异性的兔抗人骨髓瘤细胞多克隆抗体,为进一步研究多发性骨髓瘤诊断和治疗奠定了基础。     

离乳1周SPF级与普通级新西兰兔血液学参数比较

目的测定离乳1周龄SPF级和普通级新西兰兔的血液生理生化参数,并进行比对研究。方法选取离乳1周龄健康的SPF级和普通级新西兰兔各20只,均雌雄各半;全部动物耳缘静脉取血,运用血液分析仪、全自动生化分析仪,对所采血液进行生理生化指标测定;将测定数据输入计算机,用SPSS软件统计分析,计算均数和标准差(x珋±s),并做t检验。结果离乳1周龄SPF级雌性与雄性兔相比较,白细胞数、总蛋白指标差异极显著(P<0.01),红细胞、葡萄糖等6项指标差异显著(P<0.05)。普通级雌兔和雄兔在平均血红蛋白浓度、淋巴细胞比率、总胆红素等3项指标差异显著(P<0.05)。SPF级雄兔和普通级雄兔比较,白细胞、中性粒细胞、碱性磷酸酶等20项指标差异极显著(P<0.01),红细胞、嗜碱性粒细胞等5项指标差异显著(P<0.05)。SPF级雌兔和普通级雌兔相比较、在白细胞数、中性粒细胞、碱性磷酸酶等9项指标差异极显著(P<0.01),在平均血红蛋白浓度、嗜酸性粒细胞等4项指标差异显著(P<0.05),其余差异不显著(P>0.05)。结论同等级新西兰兔血液生理生化参数差异较小,不同微生物控制等级对新西兰兔血液生理生化参数有显著影响。