转化生长因子-β1以浓度依赖的方式重组人成熟树突状细胞的细胞骨架丝状肌动蛋白

目的：探索转化生长因子β1（tansforming growth factor-β1,TGF-β1）对人成熟树突状细胞（mature dendritic cells,mDCs）骨架丝状肌动蛋白（filament actin,F-actin）及其部分骨架结合蛋白表达的影响,为深入理解树突状细胞（dendritic cells,DCs）的生物学行为和提高基于DCs的抗肿瘤免疫治疗的临床效率提供线索。方法：不同浓度的TGF-β1处理mDCs后,用激光共聚焦显微镜和免疫印迹实验分别研究细胞骨架F-actin的结构和部分细胞骨架结合蛋白表达水平的变化。结果：（1）与对照组相比,TGF-β1处理后的mDCs的F-actin出现了明显重排,F-actin的表达量在3 ng/ml组下调（P=0.000）,在5 ng/ml组上调（P=0.000）。（2）mDCs表面丝状突起长度和数量的变化,长度在3 ng/ml和5 ng/ml组较对照组细、短（P=0.001,0.000）;数量在1、3 ng/ml和5 ng/ml组较对照组少而稀疏（P=0.000）;在7 ng/ml组mDCs表面丝状突起长度和数量的变化均无统计学意义（P=0.114）;通过回归分析细胞丝状突起长度和数量与F-actin表达量之间存在非线性相关性（R2分别为0.828和0.746,P=0.000）。（3）细胞骨架蛋白结合蛋白的表达,fascin1在所有实验组中均出现了下调（P=0.001、0.000）;p-cofilin1与总cofilin1的表达水平比在1 ng/ml和3 ng/ml组均下调（P=0.000）;profilin的表达在1、3 ng/ml和5 ng/ml组均上调（P=0.001、0.001、0.013）。结论：TGF-β1以浓度依赖的方式影响mDCs的细胞骨架F-actin结构及其部分结合蛋白的表达,提示在临床上施行基于DCs的抗肿瘤免疫治疗时,需以适当的方式阻断TGF-β1的信号转导通路,这对进一步深入理解DCs的生物学行为和肿瘤的免疫逃逸机制具有重要意义。     

Smad3小干扰RNA在转化生长因子β1作用下对树突状细胞成熟及功能的影响

目的 研究通过RNA干扰技术阻断外周单核细胞来源的树突细胞(DC)内的Smad3,并在转化生长因子β1(TGF-β1)作用下对DC的成熟和免疫抑制作用的影响.方法 设计针对Smad3特异性小干扰RNA(siRNA),利用RNAiMAX转入DC,并用RT-PCR检测转染效果.实验分Control-DC组、TGF-β1-Control-DC组、TGF-β1-Negative siRNA-Smad3 DC组和TGF-β1-siRNA-Smad3 DC组.流式检测各组DC成熟表型的变化,ELISA检测各组DC上清白细胞介素12(IL-12)的水平,CCK-8法检测DC刺激同种异体T细胞增殖的能力.结果 TGF-β1-siRNA-Smad3 DC组表面成熟标志CD80、CD83、CD86、HLA-DR及IL-12分泌水平明显高于TGF-β1-Control-DC组和TGF-β1-Negative siRNA-Smad3 DC组(P＜0.05),且TGF-βNegative siRNA-Smad3 DC组刺激同种异体T细胞增殖的能力显著增强.结论 通过阻断DC的Smad3表达,可以逆转TGF-β1对DC成熟和免疫功能的抑制.     

转化生长因子β1基因修饰的小鼠树突状细胞在移植体内的迁移与生存

目的观察β型转化生长因子（ＴＧＦβ１）基因修饰的Ｂ１０小鼠骨髓树突状细胞（ＤＣ）在Ｃ３Ｈ小鼠体内的迁移和存活,以探讨ＤＣ生物学特性与移植耐受性的关系。方法从Ｂ１０小鼠骨髓分离ＤＣ前体细胞,在粒细胞巨噬细胞集落刺激因子＋β型转化生长因子（ＧＭＣＳＦ＋ＴＧＦβ）条件下培养增殖（ＤＣ１）,并转导ＡｄＬａｃＺ（ＤＣ２）或ＡｄＴＧＦβ１（ＤＣ３）。每组５×１０５个细胞注入Ｃ３Ｈ小鼠后掌皮下,分别于第１、２、７及１４天取淋巴器官,以免疫组织化学方法检测ＩＡｂ阳性细胞的分布及数量。结果各组ＤＣ在Ｃ３Ｈ小鼠体内的迁移及分布均相似,即ＩＡｂ阳性细胞首先出现在窝淋巴结被膜下,继而迁入脾的Ｔ细胞依赖区和边缘区,第７天脾内阳性细胞数达顶峰。与ＤＣ１组相比,ＤＣ２在脾内的阳性细胞数减少,ＤＣ３阳性细胞数在各时间点都为最高。结论ＤＣ经转导ＡｄＬａｃＺ,可增加其免疫活性,使宿主加速排斥反应;而转导ＡｄＴＧＦβ１可使ＴＧＦβＤＣ表达ＴＧＦβ１,维持ＤＣ于功能不成熟状态,从而提高宿主的耐受性。     

转化生长因子-β1对新生大鼠星形胶质细胞结缔组织生长因子表达的影响

目的:研究转化生长因子;GAAB2;β1;(TGF;GAAB2;β1)对新生大鼠大脑皮层星形胶质细胞表达结缔组织生长因子(CTGF) 的影响.方法:体外培养的新生SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞分为对照组:无血清培养基(FSM) 培养; 实验组:分别用含1 μg /L,2 μg /L,4 μg /L TGF-β1的FSM培养,24 h后,分别用RT-PCR和Western Blot检测2组细胞中CTGF mRNA和蛋白的表达.结果:对照组CTGF mRNA和蛋白表达均为阴性;实验组CTGF mRNA和蛋白表达皆呈阳性,且随着TGF-β1质量浓度的增加,2者的表达量有增高的趋势(F=80.889和200.300,P均＜0.01).结论:TGF-β1 能上调星形胶质细胞中CTGF的表达.     

转化生长因子β1基因修饰的小鼠树突状细胞在移植体内的迁移？…

目的 观察β型转化生长因子（ＴＧＦβ１）基因修饰的Ｂ１０小鼠骨髓树突关细胞（ＤＣ）在Ｃ３Ｈ小鼠体内的迁移和存活,以探讨ＤＣ生物学特性与移植耐受性的关系。方法 从Ｂ１０小鼠骨髓分离ＤＣ前体细胞,在粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子＋β型转化生长因子（ＧＭ－ＣＳＦ＋ＴＧＦβ）条件下培养增殖（ＧＣ１）并转导Ａｄ－ＬａｃＺ（Ｄｃ２）或Ａｄ－ＴＧＦβ１（ＤＣ３）,每组５×１０＾５个细胞注入Ｇ３Ｈ小鼠后掌皮下,分别     

转化生长因子β1对鼠造血祖细胞产生树突状细胞的调控作用

目的 研究转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）对造血祖细胞（ＨＰＣ）产生树突状细胞（ＤＣ）的调控作用及其分子机理。方法 分离高纯度小鼠骨髓Ｌｉｎ,Ｃ－ｋｉｔ,ＨＰＣ经粒细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）干细胞因子（ＳＣＦ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）培养,诱导产生ＤＣ。采用流式细胞仪,逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和同种异基因混合淋巴细胞反应（Ａｌｌｏ－ＭＬＲ）分析ＴＧＦ－β１对ＤＣ产生的调节作用及     

转化生长因子β1对软骨样细胞整合素和吞噬细胞糖蛋白-1表达的影响

目的 :检测软骨样细胞 (HEMCSS)α1β1,α2 β1,α5 β13种整合素 (integrins)和吞噬细胞糖蛋白 - 1(CD4 4 )的表达 ,及转化生长因子 β1(TGF - β1)对它们表达水平的影响。方法 :HEMCSS是永生性软骨肉瘤细胞 ,培养于含10 %胎牛血清 ,不含或含 1,5 ,10ng·ml-1的TGF - β1的培养液 ,培养时间 2 4h。共聚焦显微镜观察α1β1,α2 β1,α5 β1和CD4 4在HEMCSS细胞上的表达和分布 ,流式细胞仪检测α1β1,α2 β1,α5 β1和CD4 4在HEMCSS细胞上表达的水平。结果 :共聚焦显微镜结果显示 ,HEMCSS细胞膜表面均有α1β1,α2 β1,α5 β1及CD4 4表达。流式细胞仪检测表明 ,加入TGF - β1,培养HEMCSS细胞 2 4h后可诱导α1β1,α2 β1,α5 β1的表达增加 ,并呈剂量依赖趋势。而 3种不同浓度的TGF - β1培养 2 4h后均减少了HEMCSS细胞CD4 4表达。结论 :TGF - β1可以调节HEMCSS细胞膜上细胞外基质受体的表达 ,从而调节软骨细胞与细胞外基质成分的结合 ,对调节软骨细胞的功能起着重要的作用。     

转化生长因子-β1和神经生长因子对人牙周膜细胞增殖的生物学作用

目的：研究转化生长因子-β1（TGF-β1）与神经生长因子（NGF）以及两者联用时对人牙周膜细胞（PDLC）增殖的生物学作用,为牙周损伤后修复提供理论依据。方法：采用方差分析的方法对不同浓度的TGF-β1与NGF以及两者联用时的生物学作用进行分析。结果：TGF-β1、NGF单独作用后,PDLC较对照组增殖较。（P〈0．05）,而两者联合作用后的增殖作用较各自单独应用的作用更显著。结论：TGF-β1、NGF两者以最佳效应浓度联合应用具有协同作用。     

转化生长因子-β1和胰岛素样生长因子-1对兔退变髓核细胞生物学活性的影响

目的 观察在体外培养条件下转化生长因子-β1(TGF-β1)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对兔退变髓核细胞生物学活性的影响.方法 建立兔腰椎间盘退变模型及体外培养兔退变髓核细胞,台盼蓝染色法测定活细胞率.将每份髓核细胞样本分为空白组、TGF-β1组和TGF-β1+IGF-1组.TGF-β1和IGF-1干预后第0、2、4、6天,采用RT-PCR和Western blot方法测定细胞内Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达. 结果 体外培养兔退变髓核细胞的活细胞率为88%～95%.干预后第4天和第6天TGF-β1+IGF-1组与TGF-β1组、空白组比较细胞聚集蛋白聚糖及Ⅱ型胶原均显著增加(P<0.05).结论 TGF-β1和IGF-1能够促进兔退变髓核细胞合成Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖,改善其生物学活性.     

血小板衍生生长因子-BB和转化生长因子-β对人牙周膜细胞增殖的影响

目的探讨血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)和转化生长因子-β(TGF-β)对人牙周膜(PDL)细胞增殖的影响。方法体外培养人PDL细胞,与不同浓度的PDGF-BB、TGF-β或PDGF-BB+TGF-β作用,用噻唑盐(MTT)法观察PDL细胞增殖的情况。结果PDGF-BB和TGF-β均明显促进PDL细胞增殖,在1～50ng/ml和5d范围内,呈浓度-时间依赖关系,PDGF-BB最佳效应时间为3d,最佳效应浓度为10ng/ml,其增殖比对照组增加了256.1%(P<0.001),TGF-β最佳效应时间为4d,最佳效应浓度为5ng/ml,比对照组增加了187.7%(P<0.01),在时间上TGF-β的促增殖作用晚于PDGF-BB。PDGF-BB与TGF-β联合应用时,二者有协同作用,可非常显著地促进PDL细胞增殖,其最大效应作用发生在用药后3d,此时与对照组相比增加了326.9%(P<0.001)。结论PDGF-BB、TGF-β可促进人PDL细胞的增殖,二者联合应用有协同效应。     

血管内皮生长因子对成熟树突状细胞蛋白质组的影响

目的:探索血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对成熟树突状细胞(mature dendritic cells,mDCs)蛋白质表达谱的影响,以进一步理解肿瘤的免疫逃逸机制,为改善基于DCs的抗肿瘤免疫的临床治疗效率寻找新的线索.方法:用免疫磁珠从人外周血分离CD14+单核细胞,加入粒-巨噬细胞集落刺激因子(Recombinant human granulocyte-macrophage CSF,rhGM-CSF)、白介素4(Recombinant human interleukins 4,IL-4)将单核细胞诱导分化为未成熟DCs( immature DCs,imDCs),利用肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)将imDCs诱导为成熟DCs( mature DCs,mDCs),VEGF作用于mDCs,用基于质谱的蛋白质组技术研究VEGF对mDCs的蛋白质表达谱的影响.结果:VEGF可上调或下调mDCs的细胞骨架及其相关蛋白、迁移相关蛋白、免疫功能相关蛋白和抗氧化相关蛋白的表达.结论:VEGF可能通过重组mDCs的细胞骨架来损伤其运动能力和免疫学功能,这对进一步理解DCs的生物学功能和肿瘤的免疫逃逸机制具有重要意义.     

转化生长因子-β基因多态性和人类衰老

转化生长因子-β是一类多功能细胞因子,在体内分布广泛,在不同器官的细胞中有着不同的生物学效应,其涉及到胚胎发生、器官发育、组织修复以及机体免疫等调节过程,该细胞因子已经成为衰老研究的一个靶点。本文就转化生长因子β基因的生物学特性、生物学功能、基因多态性及其与衰老的联系作一简要的综述。     

Effects of Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells on TGF-β and MCP-1 in Injured Lung of Rats

The primary objective of the present study is to investigate the therapeutic effect of bone marrow-derived mesenchymal stem cells （MSCs） on bleomycin （BLM）-induced lung injury of rats and the effect on transforming growth factor-β （TGF-β） and monocyte chemoattractant protein-1 （MCP-1）. MSCs were isolated from SD rats. The recipients rats were divided randomly into four groups： lung injury group, MSC treatment group, MSC control group and normal control group. Rats of lung injury group and MSC treatment group were perfused with BLM of 5mg/kg （0.2-0.3ml） intratracheally, others were perfused with normal saline. After twelve hours, rats of MSC treatment group and MSC control group were injected MSCs of 0.5×10^6per rat into tail vein. Haematoxylin-eosin staining was used to observe the morphology in lung tissue. ELISA was used to detect the contents of TGF-β and MCP-1 in serum and bronchoalveolar lavage fluid （BALF）. Collagen content of the lung tissue was assessed by hydroxyproline （HYP） concentration. It was found that the thickness of alveolar wall and lung interstitium were significantly reduced in the rats of MSC treatment group compared with the lung injury group. HYP content in lung interstitium, TGF-β and MCP-1 in serum and BALF were increased significantly in rats of lung injury group two weeks after BLM perfusion, but they were reduced significantly in the rats of MSC treatment group compared with the injured rats. These observations provide evidence that MSCs engraftment could alleviate bleomycin-induced lung injury and fibrosis in rats and the therapeutic effects might relate with the decrease of TGF-β and MCP-1.     

大鼠骨髓树突状细胞的诱导与免疫学特性

目的研究大鼠骨髓来源树突状细胞（DC）的培养扩增方法及用肿瘤细胞裂解物致敏的树突状细胞（TAA／DC）的免疫学特性。方法用含重组大鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rrGM—CSF）、重组大鼠白细胞介素-4（rrIL-4）和重组大鼠肿瘤坏死因子-α（rrTNF-α）的培养体系将近交系大鼠骨髓细胞诱导扩增为DC；用大鼠卵巢癌细胞的肿瘤细胞裂解物（TAA）致敏未成熟DC，获得TAA／DC；用流式细胞术分析DC、TAA／DC细胞的免疫表型。结果含rrGM-CSF、rrIL-4和rrTNF-α的培养体系可在体外诱导大鼠骨髓单个核细胞分化为成熟的DC；TAA可促进DC的分化成熟，TAA／DC的细胞免疫表型显著增强。结论大鼠骨髓细胞可在体外诱导为成熟的DC；负载肿瘤全抗原的DC表达与抗原提呈相关的分子增高，提示其抗原提呈能力增强。     

Progress of Targeting Transforming Growth Factor-β1 Small Interfering RNA in Liver Fibrosis

Liver fibrosis is a common pathological consequence of a variety of chronic stimuli, including viral, autoimmune, drug-induced, cholestatic and metabolic diseases. Fibrosis is driven by a dynamic process involving increased synthesis of matrix components and a failure of physiological mechanisms of matrix turnover. Activation of hepatic stellate cells （HSCs） remains a central event in fibrosis. HSCs are the main source of extracellular matrix （ECM）. Transforming growth factor-beta （TGF-β）, which is the fibrogenic master cytokine, can induce the activation of HSCs to produce a large amount of ECM, and is capable of inducing apoptosis of liver cells. RNA interference （RNAi） is a novel gene disruption technology. Studies have shown that small interfering RNA （siRNA） targeting TGF-β1 may inhibit the activation and proliferation of HSCs, suppress ECM synthesis and block liver fibrosis. TGF-β1 siRNA-mediated gene silencing therapy provides a new avenue for liver fibrosis. This review summarizes recent progresses in research on HSCs, TGF-β1 and TGF-β1 siRNA in liver fibrosis.     

血小板反应蛋白-1在肿瘤血管生成中的作用

血小板反应蛋白-1在肿瘤的发生发展中具有抑制肿瘤的作用,主要通过抑制内皮细胞的迁移、促进凋亡、激活转化生长因子-β、抑制新生肿瘤血管的生成,进而抑制肿瘤的生长.阐述血小板反应蛋白-1在恶性肿瘤发生发展、肿瘤血管生成和激活转化生长因子-β的作用及其机制.     

Effect of Colquhoumia Root on the Expression of Transforming Growth a Root on the Expression of Transforming Growth Factor-β in Mesangial Proliferation Glomerulonephritis Model

To study the efficacy and the mechanism of Colquhoumia root (Tripterygium hypoglaucum (Le,vL)Hutch) in the treatment of mesangial proliferation glomerulonephritis (MsPGN), SD rats were injected with anti-thymocyte serum (ATS) to make MsPGN model (anti-Thy1 model). The rats were then divided into 3 groups: normal control group, anti-Thy1 model group and treatment group. Histopathological (HE, PAS), immunohistochemical, RT-PCR technique and computer imaging analysis system were used to evaluate mesangial matrix production, the expression of TGF-β1 protein and mRNA in the tissues of kidney.Our result showed that proteinuria and the ratio of extracellular matrix/glomerular capillaries area (ECM/CA) were increased significantly in model group. The expression of both TGF-β1 protein and mRNA in glomeruli was much higher in model group than in control group (P<0.01). After the treatment with Colquhoumia root, proteinuria, ECM/CA and the expression of both TGF-β1 protein and mRNA in glomeruli were significantly decreased in treatment group as compared with those in model group. It is concluded that Colquhoumia root is effective in reducing proteinuria and mesangial matrix proliferation in MsPGN and it may achieve these effects by inhibiting the expressions of TGF-β1 protein and mRNA of mesangial cells.     

转化生长因子β1与哮喘的相关性及川芎嗪治疗哮喘的研究进展

目的了解转化生长因子-β1(TGF-β1)与哮喘的相关性及川芎嗪治疗哮喘的研究现状。方法应用现代信息技术,通过互联网等,查阅近年来国内外相关资料并进行分析、整理、总结,对TGF-β的生物学特征、TGF-β1与哮喘发病机制的相关性、川芎嗪对哮喘的治疗及其与TGF-β1的关系进行综述。结果TGF-β1在哮喘发病中起到复杂的生物调节作用,动物实验显示,川芎嗪治疗哮喘有效,而且部分是通过抑制TGF-β1的表达起作用。结论深入研究TGF-β1、哮喘及川芎嗪之间的相关性,会为哮喘的临床分级和治疗提供新的思路。     

转化生长因子β1在胃溃疡愈合过程中的表达及意义

目的探讨转化生长因子β1在人胃溃疡愈合过程中的表达及意义。方法实验分4组，正常胃黏膜组，胃溃疡活动期组，胃溃疡愈合期组和胃溃疡瘢痕期组，各20例。采用免疫组织化学方法检测TGF-β1的表达，原位杂交技术检测TGF-β1 mRNA的表达。结果TGF-β1蛋白和TGF-β1 mRNA表达趋势一致，在正常胃黏膜组、胃溃疡活动期组、愈合期组和瘢痕期组中的表达逐渐升高（P〈0．05）。结论在人胃溃疡愈合过程中，存在着内源性TGF-β1表达由弱到强的演变过程，TGF-β1可能参与了胃溃疡的愈合过程。