高效液相-柱后衍生化法测定青蒿琥酯含量

目的建立测定青蒿琥酯的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱-柱后衍生化法,流动相为乙腈-醋酸盐缓冲液(pH4.0)(60∶40),流速0.8ml/min;衍生试剂为1mol/L氢氧化钾的90%乙醇溶液,流速0.5ml/min;反应温度70℃,柱温30℃,检测波长289nm。结果青蒿琥酯在2～100μg/ml范围内线性关系良好,以峰面积对青蒿琥酯浓度进行线性回归,方程为A=1746.8+8525.4C,r=0.99999;日内、日间精密度RSD均<2%;平均回收率均在98.0%～102.0%。结论该法准确、简便、重现性好,可用于青蒿琥酯的质量控制。     

HPLC法测定土鳖虫中黄曲霉素的含量

目的:建立测定土鳖虫中黄曲霉素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Phenomenex C18,流动相为甲醇-乙腈-水(28∶17∶55,V/V/V),流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,荧光检测器激发波长λex为365 nm,发射波长λem为450 nm,衍生溶液为0.05%碘溶液,衍生化泵流速为0.3 ml/min,衍生化温度为70℃,进样量为20μl。结果:黄曲霉素G2、黄曲霉素B2的进样量在1.2~12 pg,黄曲霉素G1、黄曲霉素B1进样量在4~40 pg范围内与各自峰面积呈良好线性关系(r均≥0.999 3);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤2.3%;加样回收率为77.4%~94.8%,RSD为3.1%~4.3%(n=6)。结论:本方法简便、准确、重复性好,可用于测定土鳖虫中黄曲霉素的含量。     

高效液相色谱法同时测定复方对乙酰氨基酚片中3组分的含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定复方对乙酰氨基酚片中对乙酰氨基酚、咖啡因、阿司匹林含量的方法。方法:色谱柱为ODS,流动相为甲醇-4.2%的冰醋酸溶液(3∶7),流速为1.0ml/min,检测波长为275nm,进样量为20μl,柱温为25℃。结果:对乙酰氨基酚、咖啡因、阿司匹林的线性范围分别为16.08～428.80μg/ml(r=0.9981)、3.42～91.20μg/ml(r=0.9988)、23.87～769.92μg/ml(r=0.9999),平均回收率分别为99.2%(RSD=0.23%)、100.4%(RSD=0.63%)、99.3%(RSD=0.11%)。结论:本方法简便、快速、准确,可用于复方对乙酰氨基酚片的含量测定。     

高效液相色谱法测定肾康口服液中盐酸小檗碱的含量

目的 :建立以高效液相色谱法测定肾康口服液中盐酸小檗碱含量的方法。方法 :色谱柱为NovapakC18,流动相为甲醇 -乙腈 -0 05mol/L磷酸二氢钠 (20∶35∶45) ,柱温为24℃ ,检测波长为346nm ,流速为1 0ml/min。结果 :盐酸小檗碱检测浓度在4.00～20.00μg/ml范围内线性关系良好 (r=0.9992) ,平均回收率为99.25 % (RSD=1 03 % ,n=6)。结论 :本方法简便、准确、重现性好 ,可用于该制剂的质量控制。     

柱前衍生化法测定血浆中醋酸精氨酸的浓度

目的:建立柱前衍生化高效液相色谱法测定血浆样品中醋酸精氨酸浓度的方法。方法:衍生剂为2,4—二硝基氟苯,色谱柱为氨基酸分析专用ODS色谱柱,流动相为50%乙腈-0.1mol/L醋酸钠溶液(29∶71),流速为1.2ml/min,检测波长为360nm,柱温为30℃。结果:醋酸精氨酸检测浓度线性范围为10~160μg/ml(r=0.9 998),高、中、低3种浓度血浆样品的回收率分别为(96.64±9.69)%、(90.94±4.70)%、(92.72±4.48)%,精密度<3.91%。含药血浆在冰冻条件(—24℃)下至少可以稳定15d。结论:本法简便可行,适用于醋酸精氨酸的血药浓度监测及其药动学研究。     

高效液相色谱法测定复方地塞米松霜中2组分的含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定复方地塞米松霜中氯霉素、地塞米松含量的方法。方法:色谱柱为EclipseXDBC8,流动相为甲醇-水(75∶25),检测波长为278(氯霉素)、240(地塞米松)nm,流速为0.7ml/min,柱温为35℃。结果:氯霉素、地塞米松检测浓度分别在200～800(r=0.9999)、5～20(r=0.9999)μg/ml范围内与峰面积积分值线性关系良好;平均回收率分别为100.6%(RSD=0.06%)、98.6%(RSD=0.23%)。结论:本方法简便、快速、准确、可靠,可用于本品的质量控制。     

高效液相色谱法同时测定降脂饮中3组分的含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定降脂饮中大黄酸、大黄素及大黄酚含量的方法。方法:色谱柱为VP-ODS,流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液(80∶20),流速为1ml/min,检测波长为225nm,柱温为室温。结果:大黄酸、大黄素、大黄酚检测浓度分别在0.015～0.15μg/ml(r=0.9996)、0.014～0.14μg/ml(r=0.9998)、0.0085～0.085μg/ml(r=0.9993)范围内线性关系良好;平均回收率分别为99.26%(RSD=2.00%)、98.72%(RSD=1.80%)、99.76%(RSD=2.3%)。结论:本方法稳定、准确、可行,可用于降脂饮的质量控制。     

HPLC法测定复方克林霉素乳膏中盐酸克林霉素和甲硝唑的含量

目的建立复方克林霉素乳膏中盐酸克林霉素和甲硝唑的含量测定方法。方法采用HPLC对盐酸克林霉素和甲硝唑的含量进行测定。盐酸克林霉素:色谱柱为ZORBAX SB-C18(4.6×150 mm,5μm),以磷酸二氢钾-乙腈(55∶45)为流动相,检测波长为210 nm,柱温为25℃,流速1.0 ml/min;甲硝唑:色谱柱为ZORBAX SB-C18(4.6×150 mm,5μm),以甲醇-水(20∶80)为流动相,检测波长为320 nm,柱温为30℃,流速1.0 ml/min。结果复方克林霉素乳膏中盐酸克林霉素含量在90.2~901.6μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率102.3%(n=6),精密度RSD=0.53%;甲硝唑含量在12.9~414.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率103.1%(n=6),精密度RSD=0.01%。结论该方法简单,结果准确、重现性好,可作为该制剂的质量控制方法 。     

RP—HPLC法测定O／W型青蒿素脂肪乳剂中青蒿素的含量

目的:建立柱前衍生化 HPLC 法测定 O/W 型青蒿素脂肪乳剂中青蒿素含量的方法。方法:采用青蒿素的柱前碱性衍生反应,Agilent HC—C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇:0.05 moL·L~(-1)醋酸钠-醋酸缓冲液(pH5.8)=66:34;流速:0.5 mL·min~(-1);柱温:25℃;检测波长:259.8 nm。结果:青蒿素的柱前衍生化反应彻底可靠,该方法在检测波长259.8 nm,试样浓度0.3～10μg·mL~(-1)范围内,与检测峰峰面积呈良好的线性关系(r=0.999),平均回收率为96.1%,RSD=1.1%。结论:本方法简便、精密,回收率与精密度高,重现性好,可用于青蒿素脂肪乳剂中青蒿素含量的测定。     

HPLC-柱前衍生化-双波长法同时测定妥布霉素地塞米松滴眼液中2种主成分的含量

目的:建立同时测定妥布霉素地塞米松滴眼液中妥布霉素和地塞米松含量的方法。方法:采用高效液相色谱-柱前衍生化-双波长法。色谱柱为Agilent C18,流动相为0.25%三羟甲基氨基甲烷-乙腈-0.5 mol/L硫酸(40∶59∶1,V/V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为365、220 nm,柱温为30℃,进样量为20μl。结果:妥布霉素、地塞米松检测质量浓度线性范围分别为18.01~180.09、6.02~60.24μg/ml(r=0.999 5、0.999 8);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<1%;加样回收率分别为98.65%~100.01%、98.92%~100.20%,RSD分别为0.47%、0.50%(n=9)。结论:该方法简便省时、专属性强、重复性好、结果准确可靠,可用于妥布霉素地塞米松滴眼液的质量控制。     

高效液相-柱后衍生化法同时测定双氢青蒿素和哌喹

目的建立同时测定双氢青蒿素和哌喹的方法。方法采用反相高效液相-柱后衍生化-紫外检测法,流动相为乙腈:甲醇:醋酸钠缓冲液(65:20:15,pH4.0),流速0.8ml/min;衍生化试剂为1mol/LKOH的90%乙醇溶液,流速0.3ml/min;衍生化反应体系包括三通阀和6m长的聚醚醚酮管以及超级恒温水浴,流动相所载药物在柱后与衍生试剂经过三通实现混合后在70℃水浴的聚醚醚酮管中反应1min,然后进入检测器;柱温35℃,检测波长289nm。结果双氢青蒿素在3.0～300μmol/L范围内线性关系良好,以峰面积对双氢青蒿素浓度进行线性回归,方程为A=3544.3C+3846.4,r=0.9999;同时,哌喹在6.8～680μmol/L范围内线性关系良好,以峰面积对哌喹浓度进行线性回归,方程为A=7217.1C+28115,r=0.9996;对两种药物测定的日内、日间精密度相对平均偏差(RSD)均小于2%;平均回收率均在98%～102%之间。结论该方法的灵敏度、精密度、准确性及重现性均符合药典要求,可为各种复方制剂中双氢青蒿素及哌喹的质量控制提供依据。     

蒙古黄芪中黄酮类有效成分指纹图谱研究

目的建立蒙古黄芪中黄酮类有效成分的指纹图谱，为科学评价黄芪的内在质量提供参考。方法应用高效液相色谱-紫外检测法，测定5批蒙古黄芪黄酮类成分提取物的指纹图谱。色谱条件：C18柱[（250×4．6）mm，5μm）]，流动相：A相为乙腈-甲醇（2：8v／v），B相为醋酸盐缓冲液（pH=4．0）梯度洗脱，流速为0．8ml／min，检测波长为254nm，柱温为25℃。结果5批黄芪药材有8个共有峰，其HPLC指纹图谱基本一致，各共有峰保留时间的比值基本一致，共有峰面积之和均大于总峰面积的90％，但其共有峰面积的比值有一定差异。结论该方法重现性好，建立的指纹图谱为黄芪的质量控制及评价提供依据。     

高效液相色谱法测定人血浆中氨甲喋呤血药浓度

目的建立高效液相色谱法测定血浆中氨甲喋呤浓度的方法。方法以乙腈∶0.02mol/L磷酸水溶液（10∶90）为流动相,监测波长为302nm。结果在0～35.2μmol/L范围内呈良好线性关系,r=0.99995。日内及日间测得的RSD分别为0.62%,3.03%,平均回收率为99.6%。血清中最低检测浓度为10ng/ml。结论本法具有快速、准确,操作简便,流动相成本低等优点。     

柱后衍生化高效液相色谱法测定门冬氨酸鸟氨酸颗粒剂的有关物质及含量

目的：建立采用邻苯二甲醛（O-phthaldialdehyde,OPA）作为柱后衍生试剂的HPLC法测定门冬氨酸鸟氨酸颗粒的有关物质与含量。方法：采用色谱柱Synergi Hydro RP,C18。（150mm×3mm,4μm）,流动相A为0．005mol／L辛烷磺酸钠溶液-高氯酸（100：0．16）,流动相B为0．01mol／L辛烷磺酸钠溶液-乙腈-高氯酸（50：50：0．16）,进行梯度洗脱;检测波长为336nm。结果：门冬氨酸和鸟氨酸在37．5-112．5μg／m1范围内,浓度与峰面积呈良好的线性关系（门冬氨酸r=0．9998,鸟氨酸r=0．9999）;门冬氨酸回收率为101．2％,RSI）为0．92％（n=9）,鸟氨酸回收率为101．0％,RSD为0．97％（n=9）;门冬氨酸鸟氨酸主成分峰与3种杂质峰分离度均符合要求,门冬氨酸和鸟氨酸最低检出限均为5ng。结论：该方法方便、快速、灵敏度高、重现性好,适用于测定门冬氨酸鸟氨酸颗粒剂中的有关物质及含量。     

柱后衍生化-HPLC法检测硫酸新霉素的有关物质

目的 建立硫酸新霉素有关物质检查的柱后衍生化-HPLC-荧光检测法，并与新建的HPLC-电化学检测法进行比较。方法 色谱柱为COSMOSIL 5C18-PAQ(4.6mm×250mm, 3.5μm)；以pH3.4缓冲液[取庚烷磺酸钠一水合物4.35g和无水硫酸钠16g，加水溶解并稀释至1000mL，用冰醋酸调节pH值至(3.4±0.1)]-乙腈(95:5)为流动相A，pH3.4缓冲液-乙腈(60:40)为流动相B；梯度洗脱；柱温为30℃；流速为1.0mL/min。柱后衍生化试液为邻苯二甲醛溶液[pH值为(10.4±0.1)]；流速为0.3mL/min。电化学检测法采用脉冲安培检测器，金电极为工作电极，四电位波形工作模式。结果 柱后衍生化法与电化学检测法均检出24个杂质。柱后衍生化法的检测限和定量限分别为1.1和3.5ng。结论 柱后衍生化-HPLC法操作简便，灵敏度高，重复性好，可作为硫酸新霉素有关物质检查的常规方法。     

青蒿素在不同溶剂中平衡溶解度和表观油水分配系数的测定

目的测定青蒿素在不同pH缓冲液和7种非极性溶剂中的平衡溶解度以及在正辛醇-水中的表观油水分配系数,为青蒿素新剂型的研究与开发提供实验基础。方法采用高效液相-柱后衍生化-紫外检测法测定青蒿素在不同pH缓冲溶液及7种非极性溶剂中的平衡溶解度;采用摇瓶法测定青蒿素的表观油水分配系数。结果 37℃时青蒿素在纯水中的平衡溶解度为82.4μg/mL,随着pH的增大平衡溶解度呈先增大（pH5.0～6.8）后减小（pH6.8～8.0）的趋势;37℃时青蒿素在肉豆蔻酸异丙酯（IPM）、油酸乙酯（EO）和中链甘油酸三酯（MCT）中平衡溶解度较大,分别为10.34、9.28、8.46mg/mL,青蒿素的正辛醇-水表观油水分配系数P为12.2（lgP=1.09）。结论青蒿素水溶性差,在非极性溶剂IPM、EO、MCT中平衡溶解度较大。     

反相离子对色谱法测定环磷腺苷有关物质

目的建立反相离子对色谱法检测环磷腺苷的有关物质。方法用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 ;以 0 .0 5mol/L磷酸二氢钾溶液 (含 0 .0 1mol/L四丁基溴化铵 ,pH 4 .3) 乙腈 (85∶15 )为流动相 ;检测波长为 2 5 9nm ;流速为 1.0ml/min。结果腺苷、5′ 腺苷酸、环磷腺苷和降解产物之间的分离度分别为 9.2、11.5、14 .3,腺苷与 5′ 腺苷酸的检测限均为 0 .1ng、定量限均为 0 .3ng。结论此法分离度好、灵敏度高 ,操作简便 ,可有效分离、检测起始原料带入的杂质和降解产物 ,用于环磷腺苷中的有关物质控制 ,优于纸色谱法。     

高效液相色谱法测定人血浆中阿糖胞苷的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血浆中阿糖胞苷浓度的方法。方法:色谱柱为Zorbax C18,检测波长为280nm,流动相为0·01mol/L磷酸盐(pH=7·0)-乙腈(95∶5),流速为1·0ml/min。结果:阿糖胞苷血药浓度在0·05~20μg/ml(r=0·9999)范围内线性关系良好,最低检测浓度为2ng/ml,方法回收率为98·3%~103·2%,日内、日间相对标准差分别为2·8%、3·6%。结论:本方法简单、快速、准确,适用于阿糖胞苷临床血药浓度监测和药动学研究。     

高效液相色谱法测定指甲真菌病患者指甲中特比萘芬含量的方法研究

目的：建立测定指甲真菌病患者指甲中特比萘芬含量的高效液相色谱法。方法：将患者指甲标本20 mg加2mol/L氢氧化钠溶液0.5 ml,置60℃水浴2 h碱水解,调节pH值至9.0后,于37℃下水浴至指甲标本完全溶解。用2 ml正己烷及100μl甲醇提取,取有机层,加入0.5 mol/L硫酸-异丙醇（85∶15）混合物0.2 ml进行酸化,取水相20μl进样测定。色谱柱为Kromasil C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.01 mol/L磷酸盐缓冲液-水-三乙胺（66∶10∶24∶0.1）,流速为1.0 ml/min,紫外检测波长224 nm。结果：指甲中内源性物质对样品测定无干扰。本方法在0.003 7~0.89 mg/L浓度范围内线性关系良好（r=0.998 9）,方法回收率为94.15%~100.85%（RSD〈10%）,日内RSD〈2%。结论：本法简便、灵敏,准确,适用于特比萘芬药动学的研究。