套式PCR检测供血者血清人巨细胞病毒DNA的评价

输血是传播人巨细胞病毒（ｈｕｍａｎｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ,ＨＣＭＶ）的重要途径。为预防输血传播ＨＣＭＶ,有人主张对供血者检测ＨＣＭＶＩｇＭ抗体［１］或ＨＣＭＶＩｇＧ抗体［２］。Ｔｏｋｉｍａｔｓｕ发现血清ＨＣＭＶＤＮＡ含量与ＨＣＭＶ感染的活动性相关［３］。为探讨供血者体检的有效筛选试验,应用套式聚合酶链反应（套式ＰＣＲ）检测了１２８例供血者的血清ＨＣＭＶＤＮＡ、ＨＣＭＶＩｇＭ抗体、ＨＣＭＶＩｇＧ抗体及２１例白细胞ＨＣＭＶＤＮＡ。１　材料与方法１９９７年５月我院输血科供血者１２…     

乙型肝炎血清学指标阳性母亲母乳HBV—DNA检测

随机取５０例乙肝血清学指标阳性母亲产后２－３ｄ人的初乳，采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测初乳中ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果：抗原阳性组乙肝病毒（ＨＢＶ－ＤＮＡ）的检出率为５０％，抗体阳性组ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率为７．７％。抗原阳性组中，ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ及抗－ＨＢｃ３项阳性乾和ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ２基阳性者乳汁中ＨＢＶ－－ＤＮＡ检出率为１００％，说明该类乳汁具有极强传染性，抗体阳性组中单纯抗－ＨＢｓ     

慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA含量与e抗原关系

分别用定量聚合酶链反应（ＰＣＲ）法和酶标法（ＥＬＩＳＡ）检测６４例慢性乙型肝炎患血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量与乙肝病毒血清标记物（ＨＢＶ－Ｍ）。结果显示，ｅ抗原阳性组与ｅ抗原阴性血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量分别为１０＾７．９１±４．１６ｃｏｐｙ／ｍｌ和１０＾５．８２±３．２８ｃｏｐｙ／ｍｌ，二组相比具有显性差异（Ｐ〈０．０５），此结果进一步证实，ｅ抗原阳性是乙肝病毒体内复制的指标，但同时也有３２．９％（２     

乙型肝炎病毒前S_1抗原及抗体的检测及临床意义

用合成乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｓ１肽及其免疫抗体制备的试剂，检测１９例急性、１０３例慢性乙型肝炎患者血清中的前Ｓ１抗原和抗体。结果：前Ｓ１抗原及抗体的阳性率在急性乙型肝炎患者分别为８４．２％和８９．５％，在慢性乙型肝炎患者分别为２５．０％和８４．２％。前Ｓ１抗原在血清学表达上与ＨＢＶ ＤＮＡ、ＨＢｅＡｇ的阳性符合率分别高达８９．３％和８７．５％。前Ｓ１抗体与抗 ＨＢｓ在体内有明显相伴随关系。提示：前Ｓ１蛋白是ＨＢＶ在体内复制的可靠标志，而前Ｓ１抗体反映疾病的恢复和病毒的清除。     

定量PCR检测慢性HBV感染者血清HBV-DNA含量

目的 了解不同慢性乙型肝炎病毒感染者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量并探讨其临床意义 。方法 应用荧光能量转移定量聚合酶链反应检测２４５例不同临床类型慢性ＨＢＶ感染者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ含量。结果 ＨＢｅＡｇ阳性患者ＨＢＶ－ＤＮＡ含量显著高于ＨＢｅＡｇ阴性／抗－ＨＢｅ阳性患者的含量;     

慢性乙型肝炎病人外周血单个核细胞HBV DNA的PCR检测

①目的 探讨慢性乙型肝炎病人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ和血清ＨＢＶＤＮＡ的感染情况及其临床意义。②方法 采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对１２８例慢性乙型肝炎病人和２０例健康人进行了ＰＢＭＣ及血清中ＨＢＶＤＮＡ检测。③结果 慢性乙型肝炎病人ＰＢＭＣ中ＨＢＶ ＤＮＡ的感染率为６４．２％,和血清ＨＢＶＤＮＡ的感染率具有一致性倾向（Ｘ＾２－０．６３,Ｐ〉０．０５）,慢性肝病病     

血清,白细胞HBV—DNA的PCR检测结果与HBV血清复制标志的关系

３０例慢性乙型肝炎患者中，有５３．３％的病人用ＰＣＲ可从血清和白细胞中检测出ＨＢＶ－ＤＮＡ；ＨＢｅＡｇ阳性和抗－ＨＢｃ－ＩｇＭ阳性的患者１００％可以检出ＨＢＶ－ＤＮＡ，而仅抗－ＨＢｃＩｇＭ阳性的患者ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出率为６６．７％。１３例乙肝血清学复制标志阴性的病人中有５例（３８．５％）也可检测出ＨＢＶ－ＤＮＡ。在ＨＢｓＡｇ转阴的３例病人中有１例可从白细胞中检测出ＨＢＶ－ＤＮＡ。     

血清、白细胞HBV－DNA的PCR检测结果与HBV血清复制标志的关系

３０例慢性乙型肝炎患者中，有５３．３％的病人用ＰＣＲ可从清和白细胞中检测出ＨＢＶ－ＤＮＡ；ＨＢｅＡｇ阳性和抗－ＮＢｃ－ＩｇＭ阳性的患者１００％可以检出ＨＢＶ－ＤＮＡ，而仅抗－ＨＢｃ－ＩｇＭ阳性的患者ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出率为６６．７％。１３例乙肝血清学复制标志阴性的病人中有５例（３８．５％）也可检测出ＨＢＶ－ＤＮＡ。在ＨＢｓＡｇ转阴的３例病人中有１例可从白细胞中检测出ＨＢＶ－ＤＮＡ。     

乙型肝炎血清学标志的临床意义及进展

人体感染乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）后，机体可产生３对抗原抗体，其阳性均具有一定的临床意义。由于聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术的应用，使乙型肝炎病毒抗原阴性的血清和其他标本中乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（ＨＢＶ－ＤＮＡ）的检出率大大提高，提高了乙型肝炎病毒感染的诊断率，对乙型肝炎血清学标志物（ＨＢＶＭ）也有了新的认识。     

PCR检测HBV DNA对乙肝疫苗应答反应的研究

儿童全程接种乙肝疫苗后的应答反应率高（为９６％）［１］；而成人接种乙肝疫苗后免疫应答比较低（为６５．１２％）。本文对成人组接种乙肝疫苗无应答反应１５例（３４．８８％），进一步探索了乙肝疫苗接种后不产生抗－ＨＢｓ的原因，采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了１５例正常成人经乙肝疫苗接种后无应答反应者和３例乙型肝炎患者的血清，结果发现１５例不产生抗－ＨＢｓ者，经ＰＣＲ扩增ＨＢＶＤＮＡ均为阴性；仅３例为阳性。本文作者在ＰＣＲ检测指导下，对１５例成人采用乙型肝炎免疫球蛋白（ＨＢＩＧ）和３０微克乙肝疫苗联合应用１０５天后，有１２例产生抗－ＨＢｓ。提示对于接种乙肝疫苗的正常人群，凡经ＰＣＲ扩增ＨＢＶＤＮＡ阴性者，经过重复大剂量注射乙肝疫苗后可使绝大多数得到可靠的保护。     

PCR检测乙肝病人肝组织和血中HBVDNA

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合地高辛素标记的乙肝病毒ＤＮＡ探针（ＨＢＶＤＮＡ－Ｄｉｇ）杂交技术检测了４９份乙型肝炎患者的肝组织标本和４６份血清标本中的ＨＢＶＤＮＡ。结果表明：ＰＣＲ检出乙肝病人肝组织和血清中ＨＢＶＤＮＡ阳性率比斑点杂交高（Ｐ＜０．０５）。在２１例同时检测了肝组织和血清中ＨＢＶＤＮＡ的病人中，肝组织ＨＢＶＤＮＡ阳性率为５７．１％（１２／２１）；血清阳性率为６１．３％（１３／２１）；两者总阳性率为８０．９％（１７／２１），说明用ＰＣＲ同时检测肝组织和血中ＨＢＶＤＮＡ，可明显提高ＨＢＶＤＮＡ的检出率。     

应用PCR,病毒分离及核酸杂交技术诊断疱疹病毒性脑炎的研究

应用聚合酶链反应，核酸分子杂交和病毒分离技术检测了７例临床诊断为病毒性脑炎患者及１０例其他神经疾病对照组患者的脑脊液中单纯疱疹病毒ＤＮＡ。结果ＰＣＲ检出５例脑炎患者ＣＳＦ中ＨＳＶＤＮＡ阳性，其中ＨＳＶ１型２例，ＨＳＶ２型３例，而核酸杂交方法仅检出２例，其中ＨＳＶ－１和ＨＳＶ－２各１例，与病毒分离结果一致。     

套式PCR技术检测肝细胞癌患者血清HBV DNA

应用套式聚合酶链反应（套式ＰＣＲ）技术检测了１６例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者血清中ＨＢＶＤＮＡ，并与ＰＣＲ结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交（ＰＣＲ－ＳＢＨ）的方法作了比较。２种方法灵敏度均可达１０￣（－５）ｐｇ。套式ＰＣＲ无需制备探针，试验周期短，更适于推广。１６例ＨＣＣ患者检出ＨＢＶＤＮＡ９例（５６．２５％）。ＨＢｓＡｇ阳性组９例检出４例，ＨＢｓＡｇ阴性组４例检出２例。３例未测ＨＢＶ血清标记物均检出ＨＢＶＤＮＡ。结果表明ＨＣＣ患者血清中仍有ＨＢＶＤＮＡ低水平复制，仍具传染性。     

聚合酶链反应在乙型肝炎病毒感染诊断中的意义

用ＰＣＲ法检测１６６例乙型肝炎病毒感染者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果显示：ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性，ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性和ＨＥｂＡｇ阳性组，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为９６．２％、２８．６％、９３．５％、ＨＢｓＡｇ单项阳性者中，检出ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性７８例（孕妇占１９．２％），阳性率８１．３％。另外，在２０例血清标志物全部阴性对照组中发现ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１例，阳性率５．     

PCR检测抗—HBe阳性慢性乙型肝炎病人血清的HBV DNA

ＰＣＲ检测抗－ＨＢｅ阳性慢性乙型肝炎病人血清的ＨＢＶＤＮＡ潘修成吴文漪（附属医院传染科）关键词聚合酶链反应慢性乙型肝炎乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸中图法分类号Ｒ５１２．６２作者采用ＰＣＲ技术检测抗－ＨＢｅ阳性各型ＨＢＶ感染者血请的ＨＢＶＤＮＡ，并探讨其临...     

胃癌组织中的HBV-DNA检测

探讨乙型肝炎病毒感染在胃癌中的意义。方法：采用基因扩增检测６０例胃癌中的ＨＢＶ－ＤＮＡ存在的情况。结果：６０例胃癌中２例可见ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性,阳性率３．３％。结论ＨＢＶ感染可能在某些胃癌中起一定作用。     

防止角膜移植传播乙型肝炎病毒的研究

为了检测角膜有无ＨＢＶ－ＤＮＡ，防止角膜移植传播乙型肝炎病毒（ＨＢＶ），应用ＰＣＲ技术对２９例乙型肝炎、乙型肝炎病毒感染患者和１０例健康人角膜的ＨＢＶ－ＤＮＡ进行了检测。同时对１１例乙型肝炎病毒感染患者的结膜和２６例乙型肝炎患者的泪液也进行了检测。结果ＨＢｓＡｇ阳性的１６例角膜有１１例（６８．７％）检测到ＨＢＶ－ＤＮＡ，１３例ＨＢｓＡｇ阴性的角膜有４只（３６．６％）ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性，１０例健康人角膜无１例ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性。１１例乙型肝炎病毒感染患者的结膜中，有７例（６３．６％）ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性，２６例乙型肝炎患者的泪液中，有１４例（５３．８％）检测到ＨＢＶ－ＤＮＡ。说明角膜也是ＨＢＶ的贮存场地，临床不能应用乙型肝炎病毒感染者的角膜作供体行角膜移植术     

乙型肝炎病毒基因多重PCR的临床观测

为探讨多重多聚酶链反应（ＰＣＲ）在慢性乙型肝炎检测中的应用价值，选用ＨＢＶＤＮＡ的Ｓ区、Ｃ区及Ｘ区的３对引物Ｓ１／Ｓ２，Ｃ１／Ｃ２和Ｘ１／Ｘ２，同时扩增ＤＮＡ。结果发现，３个基因区的表达情况不同。７７例慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌患者ＨＢＶＤＮＡ的检出率分别是Ｓ区６１０％，Ｃ区４５５％，Ｘ区３９０％；且三区联合检出率为７５３％，与单独Ｃ区检出有明显差异（Ｐ＜００５）。提示多重ＰＣＲ能对ＨＢＶＤＮＡ同一模板的各基因区同时扩增，从而可以得到Ｃ区以外的其它保守基因区特异性的扩增片段，提高了对乙型肝炎病毒患者ＨＢＶＤＮＡ的检出率。     

用聚合酶链反应检测乙肝患者血清中的HBV—DNA

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了１１４例传梁科门诊病人血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，并与ＨＢＶ有关的血清学标志（ＨＢＶＭ）进行了比较。结果证明ＰＣＲ法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ较用ＥＬＩＳＡ法检测抗原－抗体更加灵敏、可靠。     

荧光定量聚合酶链反应测定乙型肝炎患者血清HBV—DNA及其意义

目的探讨荧光定量聚合酶链反应（简称 ＦＱ－ＰＣＲ）检测 ＨＢＶ－ＤＮＡ的临床意义。方法对 １１５例乙型肝炎患者的血清同时进行乙肝两对半、ＡＬＴ、ＡＳＴ及ＨＢＶ－ＤＮＡ测定。结果大三阳患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率为 １００％,平均含量为 １０７．２３±１．６４拷贝／ｍｌ;小三阳患者血清 ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率为 ５９．６％,平均含量为 １０６．２１±１．５１拷贝／ｍｌ;两组之间的 ＨＢＶ－ ＤＮＡ含量差异有显著性。乙肝两对半全阴性 ２２例,有 ６例 ＨＢＶ－ ＤＮＡ阳性,其平均浓度为１０４．１２±１．３８拷贝／ｍｌ与大、小三阳患者的浓度差异有非常显著性。结论ＦＱ－ＰＣＲ法检测乙肝患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ具有快速、特异、灵敏等优点,它对乙型肝炎的诊断、治疗、预防具有重要的临床意义。