Hedgehog信号通路与胰腺癌

<正>胰腺癌是预后最差的消化道恶性肿瘤,10余年来随分子生物学研究水平的提高及方法学的进步,对胰腺癌发生、发展过程中的机制研究日趋深入,在寻求新的早期诊断标志及丰富治疗途径方面,显现出深远影响。做为人类胚胎发育重要的调控因子——Hedgehog信号通路,在完成胰腺等器官正常     

Hedgehog信号通路与胰腺癌关系的研究进展

Hedgehog(Hh)信号通路主要是由配体蛋白Hh、蛋白受体蛋白Patched(Ptch)、跨膜蛋白Smo、核转录因子Gli蛋白及下游靶基因组成.该通路在胚胎时期的细胞分化、组织发育及器官形成中扮演重要角色,近年来其已被报道在胰腺癌发生和进展中发挥重要的作用,他能够诱导胰腺癌细胞的分化、增殖和侵袭,还与胰腺癌干细胞的特性密切相关,因此阻断胰腺癌细胞中Hh信号传导通路将为胰腺癌的治疗提供一个新的有效手段.在这篇综述中,我们将总结Hh信号通路的组成、传导机制以及他与胰腺癌发生发展的关系.     

Hedgehog信号通路在胰腺癌中的研究进展

Hedgehog（Hh）信号通路在正常人类胚胎发育及胚胎形成后细胞的分化过程中发挥着重要的作用。研究表明，Hh信号通路异常激活与胰腺癌的发生、发展密切相关。深入探讨Hh信号通路转导机制及其与胰腺癌的关系，有望为胰腺癌的早期诊断和分子靶向治疗提供新的思路。     

Hedgehog通路与胰腺癌相关性研究进展

Hedgehog(Hh)信号转导通路在胚胎发育的过程中发挥重要作用,控制着细胞的增殖和分化,随着近年的深入研究,该信号通路的异常激活对人胰腺癌的发生和恶性生物学特性的维持极为重要。此文就Hh通路与胰腺癌的相关性研究作一综述。     

人胰腺癌 Hedgehog 信号通路中膜蛋白受体 PTCH 的纯化

目的 构建人胰腺癌PTCH基因表达载体并诱导融合蛋白表达.方法 从人胰腺癌细胞株SW1990抽提总RNA,经RT-PCR扩增出PTCH基因,经纯化、回收目的 基因PTCH,将其插入表达载体pET22b,转化E. Coli BL21-CodonPlus(TM)-RP,构建重组质粒pET22b/PTCH,IPTG诱导表达融合蛋白,免疫印迹进行鉴定,Ni-螯合亲和层析纯化融合蛋白.结果 从人胰腺癌细胞株SW1990克隆出长为789 bp PTCH目的 片段,成功构建重组质粒pET22b/PTCH,并诱导表达目的 蛋白;经Ni-螯合亲和层析得到纯化的融合蛋白.结论 成功构建了重组质粒pET22b/PTCH,并获得纯化的融合蛋白,为进一步研究Hedgehog信号通路在胰腺癌中的发病机制提供了有效工具.     

人胰腺癌Hedgehog信号通路中膜蛋白受体PTCH的纯化

目的 构建人胰腺癌PTCH基因表达载体并诱导融合蛋白表达。方法 从人胰腺癌细胞株SW1990抽提总RNA，经RT—PCR扩增出PTCH基因，经纯化、回收目的基因PTCH，将其插入表达载体pET22b，转化E．Coli BL21-CodonPlus^（TM）-RP，构建重组质粒pET22b／PTCH，IPTG诱导表达融合蛋白，免疫印迹进行鉴定，Ni-螯合亲和层析纯化融合蛋白。结果 从人胰腺癌细胞株SW1990克隆出长为789bp PTCH目的片段，成功构建重组质粒pET22b／PTCH，并诱导表达目的蛋白；经Ni-螯合亲和层析得到纯化的融合蛋白。结论 成功构建了重组质粒pET22b／PTCH，并获得纯化的融合蛋白，为进一步研究Hedgehog信号通路在胰腺癌中的发病机制提供了有效工具。     

Hedgehog信号通路与胃疾病研究进展

Hedgehog(Hh)信号通路是人类胚胎发育时的重要信号通路,在成熟个体,可能与维持胃部正常功能有关。研究显示Hh信号与H.pylori相关性胃炎、肠化及胃癌等疾病有关。本文就Hh信号通路与胃部疾病的关系的研究进展作一综述。     

阻断Hedgehog信号通路对人胰腺癌干细胞自我更新的影响

目的 观察Hedgehog信号通路特异阻断剂环巴明对胰腺癌干细胞自我更新的影响.方法 应用0.5、1、2、5、10 μmol/L环巴明处理胰腺癌PANC1干细胞、PANC1贴壁细胞和永生化胰腺导管上皮H6C7细胞24、48、72 h.采用实时RT-PCR法检测细胞Smo及Gli1 mRNA表达;CCK-8法检测细胞增殖抑制;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡.结果 10 μmol/L环巴明处理72 h后,PANC1干细胞、PANC1细胞和H6C7细胞的Smo mRNA表达量分别为1、0.83、2.61;Glil mRNA为57.27、26.35、1;生长抑制率分别为(37.85±13.69)%、(8.53±4.43)%、(43.55±28.98)%.与PANC1细胞比较,PANC1干细胞的Smo、Gli1 mRNA表达显著增加,生长抑制率亦显著增强(P值＜0.05或＜0.01).经10 μmol/L环巴明处理72 h,PANC1干细胞G1期比例从(67.41±6.35)%显著降至(36.53±6.03)%(P＜0.05),细胞凋亡率从(10.95±5.68)%降至(5.73±1.42)%(P＞0.05);PANC1细胞G1期比例从(67.64±6.88)%显著降至(53.13±1.10)%(P＜0.05),细胞凋亡率从(12.08±4.12)%降至(5.66±1.33)%(P＞0.05);而H6C7细胞的G1期比例及凋亡无明显变化.结论 环巴明阻断Hedgehog信号通路可抑制PANC1干细胞增殖,其机制可能与细胞凋亡无关.     

Hedgehog信号通路对胰腺癌细胞上皮间质转化的调控作用

Hedgehog( Hh)信号通路及上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)调控细胞的增殖和分化,在胚胎发育过程中均发挥重要作用.正常成人组织中二者活性均明显下降,其异常活化往往与恶性肿瘤的发生、发展、侵袭及转移密切相关.在胰腺癌细胞中常发现有Hh信号通路的异常活化和EMT现象,本文就Hh信号通路调控胰腺癌细胞EMT的作用及其机制做一综述.     

Hedgehog信号通路相关蛋白在大鼠胰腺癌发生过程中的变化

目的 观察Hedgehog信号通路相关蛋白Ptch、Smo和Gli1在胰腺癌发生过程中的作用。方法 200只SD大鼠分成对照组(20只)、二甲基苯并蒽(DMBA)组(90只)和环巴明治疗组(90只)。通过胰腺被膜下直接置入DMBA方法诱导胰腺癌模型。环巴明组在置人DMBA后每天腹腔注射6.25 ml/kg 体重环巴明溶液。4个月后处死大鼠,观察胰腺组织病理学改变,应用免疫组化SP法检测胰腺癌及正常胰腺组织中Ptch、Smo、Gli1的蛋白表达。结果 DMBA组胰腺癌诱发成功率为57.5％ (46/80),诱发的肿瘤最大径为0.5～＞2.0 cm;环巴明组诱发成功率为17.1％ (14/82),肿瘤最大径为0.5 ～2.0 cm。两组胰腺癌发生率及肿瘤大小的差异具有统计学意义(P值均＜0.05)。DMBA组胰腺癌组织中Ptch、Smo及Gli1阳性表达率分别为82.6％、73.9％和65.2％;环巴明组分别为50.0％、42.9％和28.6％,两组差异具有统计学意义(P值均＜0.05)。3组的正常胰腺组织中均无Ptch、Smo、Gli1阳性表达。结论 较大剂量DMBA置入胰实质内可在短期内获得较高的胰腺癌发生率;胰腺癌组织Hedgehog信号蛋白表达显著增加;环巴明能抑制Hedgehog信号蛋白表达,进而抑制胰腺癌发生和发展。     

Hedgehog和TGF-β/Smads信号通路与胰腺癌发生发展的关系

正Hedgehog(HH)信号和TGF-β信号通路在肿瘤的发生发展中起着重要的作用,近年来不断有研究指出HH信号通路中的主要效应因子Gli2也是TGF-β/Smads信号通路的靶基因。HH信号通路的异常与胰腺癌的发生密切相关,而TGF-β通路中的信号异常也参与胰腺癌肿瘤的生长、侵袭和转移。该文就这2个信号通路及其与胰腺癌的关系的研究进展作一综述。1总论胰腺癌在世界范围内呈增多趋势,已成为癌症     

Hedgehog信号通路与胰腺癌吉西他滨固有耐药的相关性研究

背景:吉西他滨是胰腺癌的一线化疗药物,但化疗耐药问题普遍存在并成为胰腺癌化疗失败的主要原因。Hedgehog(Hh)信号通路是胰腺癌发生、发展的核心信号通路之一,其异常活化与多药耐药相关蛋白表达、肿瘤干细胞的维持和自我更新等明确相关。目的:探讨Hh信号通路相关因子表达与胰腺癌吉西他滨固有耐药的相关性。方法:培养人胰腺癌细胞株CFPAC-1和PANC-1,予吉西他滨、Hh信号通路抑制剂GANT61或激动剂purmorphamine处理,或吉西他滨分别与GANT61或purmorphamine联合处理,以real-time PCR和蛋白质印迹法检测Hh信号通路相关因子Shh、Ptch、Smo、Gli1表达,CCK-8实验检测不同处理对细胞增殖活性的影响。结果:与CFPAC-1细胞相比,PANC-1细胞中的Hh信号通路相关因子表达显著增高(P0.05),对吉西他滨的敏感性相对较低。GANT61可下调PANC-1细胞中的Gli1表达,并增强细胞对吉西他滨的敏感性,而purmorphamine则可上调CFPAC-1细胞中的Gli1表达,并降低细胞对吉西他滨的敏感性,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:Hh信号通路相关因子表达与胰腺癌吉西他滨固有耐药相关,抑制Hh信号通路异常活化可增加胰腺癌细胞对吉西他滨的敏感性。     

三羟异黄酮抑制胰腺癌细胞Notch-1和Hedgehog信号通路活性

目的 探讨三羟异黄酮对胰腺癌BxPC3细胞Notch-1和Hedgehog信号通路分子SHH和HHIP表达以及对细胞周期和增殖的影响.方法 体外培养胰腺癌BxPC3细胞,三羟异黄酮作用BxPC3细胞后,提取总RNA和蛋白质.RT-PCR方法检测Notch-1 mNRA、SHH mRNA和HHIP mRNA表达,Western blotting方法检测Notch-1和SHH蛋白的表达.MTT方法检测BxPC3细胞的增值,流式细胞术和PI单染法分析细胞的周期.结果 20μg/ml的三羟异黄酮处理BxPC3 48 h后,细胞增殖抑制率为(67.17±2.32)%.Notch-1 mRNA表达从2.454±0.068下调到1.304±0.169;SHH mRNA表达从0.959±0.023下调到0.472±0.077;而HHIP mRNA表达从0.625±0.158增加到1.761±0.121.Notch-1蛋白表达从1.361±0.109下调到0.760±0.114;SHH蛋白表达从0.265±0.018下调到0.129±O.013.(52.77±9.47)%的细胞被阻滞在G2/M期.结论 三羟异黄酮能同时抑制Notch-1的表达和阻断Hedgehog信号通路,并抑制胰腺癌细胞的增殖.     

恶性肿瘤中Hedgehog信号通路与其他经典信号通路交互作用的研究现状

<正>恶性肿瘤是危害人类健康最主要疾病之一,据统计,2012年全球范围内约1 410万例新发病例和820万例死亡病例~([1])。随着对肿瘤基础和临床研究的深入,各种肿瘤的手术方式及原则不断更新,以及抗癌药物和综合治疗方法的广泛应用,许多恶性肿瘤的治疗效果明显,但5年生存率及预后仍不佳。Hedgehog(Hh)信号通路作为发育过程中重要的调节因子,在肿     

Hedeghog信号通路与胰腺癌治疗研究进展

胰腺导管腺癌（简称胰腺癌）是消化系统常见的恶性肿瘤,占胰腺恶性肿瘤的90％以上,近年来发病率呈逐年上升趋势,居欧美国家癌症致死病因的第4位。近年来研究发现,Hedgehog信号通路（HH信号通路）在胰腺癌中有不同程度的异常活化,可能是胰腺癌的核心致病机制之一。     

Notch信号通路与胰腺癌相关性研究进展

胰腺癌(pancreatic cancer,PC)是一种恶性程度极高的消化道肿瘤.在美国,2010年新诊断胰腺癌患者43 140例,死亡36 800例[1].胰腺癌明确诊断时多属晚期,手术切除率低,并且对化疗药物不敏感,5年总生存率＜5％,40年来总生存率无明显变化[2].一项对24例胰腺导管腺癌(PDAC)组织的全基因组分析结果显示,12条细胞信号通路与胰腺癌的发生密切相关,包括Wnt/Notch、Hedgehog、TGF-β及K-ras等信号通路[3].本文就Notch信号通路与胰腺癌的相关性研究做一综述.     

Hedgehog信号通路在肝脏疾病中的研究进展

Hedgehog信号通路是高度保守的信号通路,在胚胎发育和生长调控方面发挥着诸如细胞增殖、细胞黏附、细胞迁移、细胞分化和胚胎形成的作用。Hedgehog信号通路还参与多个成熟器官组织的伤口愈合,尤其在肝脏损伤修复方面发挥重要作用,但其过度活化可导致肝脏纤维化及肝癌的发生。本文将对各种慢性肝脏疾病中Hedgehog信号通路的作用机制进行总结归纳,为肝脏肿瘤靶向治疗及抗肝纤维化寻找新靶点提供理论依据。     

维生素D3通过Hedgehog信号通路对胰腺癌PANC1细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨维生素D3抗胰腺癌的作用机制.方法 应用不同浓度的维生素D3（25、50、75、100 μmol/L）干预胰腺癌PANC1细胞,以未干预细胞作为阴性对照组.MTT比色法检测细胞的生长抑制率;流式细胞仪检测细胞的早期凋亡率;RT-PCR法检测细胞PTCH、Gli-1 mRNA的表达.结果 维生素D3呈浓度依赖性抑制PANC1细胞的增殖,以48 h点的抑制作用最强,阴性对照组及25、50、75、100 μmol/L维生素D3组的生长抑制率分别为0、16.1％、18.8％、31.8％、39.4％,组间差异有统计学意义（P值均＜0.05）.阴性对照组及25、50、75、100 μmol/L维生素D3干预24 h时PANC1细胞的早期凋亡率分别为（5.89±0.57）％、（6.06±0.44）％、（16.21± 1.62）％、（16.94±0.91）％、（20.96±0.98）％,早期凋亡率随浓度的增加而增加,差异有统计学意义（P＜0.05）.维生素D3干预PANC1细胞24 h后,阴性对照组及25、50、75、100 μmol/L组细胞的PTCH mRNA表达量分别为0.117±0.009、0.104 ±0.011、0.069±0.011、0.052±0.009、0.056±0.007;Gli-1 mRNA表达量分别为0.323±0.007、0.312±0.015、0.299±0.015、0.233 ±0.007、0.175 ±0.014,均随浓度的增加而下调,差异有统计学意义（P值均＜0.05）.75 μmol/L维生素D3干预0、12、24、36、48 h后,PTCH mRNA表达量分别为0.142±0.008、0.127 ±0.009、0.111±0.010、0.115 ±0.003、0.102±0.007;Gli-1 mRNA分别为0.341±0.011、0.317 ±0.017、0.320±0.018、0.226 ±0.011、0.191±0.010,均随时间的延长而下调,差异有统计学意义（P值均＜0.05）.结论 维生素D3可以有效抑制胰腺癌PANC1细胞的增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与阻滞Hedgehog信号通路有关.     

苦参碱对胰腺癌CFPAC-1细胞增殖、凋亡及Hedgehog信号通路的影响

目的:探讨苦参碱对人胰腺癌CFPAC-1细胞增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制.方法:应用MTT法检测苦参碱对人胰腺癌CFPAC-1细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪分析细胞的凋亡率,Western blot法检测苦参碱对Hedgehog(Hh)通路中Ptch、Smo、Gli-l、Bcl-2蛋白表达的影响.结果:MTT实验显示:经浓度为0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mg/mL的苦参碱作用6、12、24、48 h后,苦参碱对CFPAC-1细胞的生长抑制作用呈明显的浓度依赖性和时间依赖性(P0.05),其中24 h的IC50为1.266 mg/mL.FCM分析显示与对照组(8.2367%±1.685%)比较,不同浓度苦参碱作用24 h后CFPAC-1细胞的凋亡率分别11.3867%±0.4652%、13.6167%±0.5785%、17.0433%±0.72501%、23.8700%±3.31107%、46.1333%±1.61398%,均高于对照组(P0.05).其中除药物浓度为0.25 mg/mL与0.50 mg/mL浓度组比较时,无统计学意义(P0.05),余浓度组两两对比均有统计学意义(P0.05).Western blot结果显示:1.00 mg/mL苦参碱作用24 h后,CFPAC-1细胞的Bcl-2、Gli-l、Ptch、Smo蛋白表达均显著低于阴性对照组(F值分别为:15.557,8.745,24.386,12.768,P0.05).结论:苦参碱能够有效地抑制胰腺癌细胞的增殖并促进其凋亡,其机制可能与Hh通路及其下游的Bcl-2有关.     

Hedgehog信号通路与肝纤维化发病相关机制研究新进展

Hedgehog信号通路在肝纤维化的发生、发展中具有极其重要作用,现已证实Hedgehog通路涉及肝纤维化过程中如肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)增殖与凋亡、上皮间质/间质上皮转换及与其他通路的交互作用等方面,本文就Hedgehog通路与肝纤维化研究进展作一概述,以期为肝纤维化防治提供新思路。