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目的研究胆囊结石病与螺杆茵感染的关系。方法对2000～2002年44例胆囊结石病病人和18例正常对照。胆汁和胆囊黏膜标本接种于需氧、厌氧和微需氧培养基培养。利用两对特异性的螺杆茵16S rRNA基因引物对胆石核心、胆汁、胆囊黏膜行NP-PCR扩增，Southern杂交，并对PCR产物克隆测序，将测序结果与基因库中的序列作比较，采用Neighbor-joining法绘制种系发生树。胆囊黏膜行Giemsa染色。结果胆汁和胆囊黏膜标本来发现螺杆茵生长。胆石、胆汁和胆囊黏膜的螺杆菌DNA扩增阳性率分别为4．55％、38．24％和79．55％，对照组胆汁和胆囊黏膜检测为阴性；对2例胆石和2例胆囊黏膜的阳性扩增产物测序分析，分别与F．rappini、H．cinaedi、H．pylori和H．canadensis的16S rRNA基因序列有较高的同源性；螺杆菌DNA扩增阳性的标本Southerm杂交分析也为阳性；胆囊黏膜经Giemsa染色未见到类似螺杆茵茵体。结论本研究显示螺杆茵DNA存在于胆囊结石、胆汁及胆囊黏膜中，胆道系统螺杆茵感染可能和胆囊结石的形成有一定关系。     

胆固醇结石患者胆道系统幽门螺杆菌研究

为探讨胆固醇结石病与幽门螺杆菌的关系。笔者对23例胆囊胆固醇结石患者及7例对照者进行C13呼气试验和血清幽门螺杆菌IgG抗体检测。胆汁和胆囊黏膜标本接种于微需氧和厌氧培养基培养。采用巢式多聚酶链反应(PCR)技术扩增幽门螺杆菌特异的Ure A基因。结果示胆固醇结石组C13呼气试验阳性5例，占21.74%（5/23），对照组1例，占14.29%（1/7），两组间差异无显著性（P>0.05）。胆固醇结石组血清幽门螺杆菌Ig G抗体平均含量(63.49±26.81)U/mL，高于对照组的(43.37 ± 32.99)U/mL，但差异无显著性（P>0.05）。两组幽门螺杆菌培养和PCR检测结果均为阴性。本研究未在胆固醇结石病标本中检测到幽门螺杆菌，两者的关系不能确定。     

幽门螺杆菌与胆囊结石形成关系的研究

目的研究胆囊幽门螺杆菌感染与胆囊结石形成的关系. 方法采用对照研究方法,对35例单纯胆囊结石(实验组)和25例单纯胆囊息肉样病变(对照组)的胃幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)进行检测,用PCR方法检测2组患者的胆汁及结石Hp细胞毒素相关基因抗原(cagA). 结果 2组患者胃Hp感染率分别为51.4% (18/35)、48.0%(12/25),差异无显著性(χ2=0.069,P=0.793).实验组胆汁标本中 cagA7例阳性(20.0%,7/35),结石标本中1例阳性(2.9%,1/35),对照组胆汁标本无一例阳性,2组胆汁cagA检出率差异有显著性(χ2=5.822,P=0.016),胆汁中cagA检出情况与胃幽门螺杆菌感染有关(χ2=3.886,P=0.049). 结论幽门螺杆菌DNA存在于胆囊结石患者的胆汁及结石中,与胃Hp感染有关,胆囊Hp感染与胆囊结石形成有关.     

先天性胆管扩张症胆囊黏膜上皮环氧化酶-2表达研究

目的了解先天性胆管扩张症（CBD）胆囊黏膜上皮环氧化酶-2（COX-2）表达情况。方法40例CBD胆囊组织均来自我科手术标本，10例胆囊癌标本来自我院同期住院手术患者，3例正常胆囊标本来自因肝母细胞瘤要求切除的胆囊组织。所有标本经i0％甲醛固定，石蜡包埋；采用HE染色观察CBD胆囊组织标本黏膜上皮增生情况；SAB法研究所有标本胆囊黏膜上皮COX-2表达情况。结果40例CBD胆囊标本中，有25例存在黏膜上皮过度增生。3例正常胆囊标本COX-2呈阴性表达，40例CBD胆囊标本COX-2都有表达，但有黏膜上皮增生的25例显著表达，10例胆囊癌标本COX-2呈强阳性表达；三者之间COX-2阳性表达强度差异具有统计学意义。结论COX-2可能与CBD胆囊黏膜上皮增生有关，并在其癌变中起一定作用。     

胆囊黏膜和胆总管胆汁菌谱差异性与胆源性胰腺炎临床预后的关系

目的探讨胆囊黏膜与胆总管胆汁的菌谱差异性与胆源性胰腺炎l临床预后的关系。方法对48例胆源性胰腺炎患者的胆囊黏膜和胆总管胆汁进行同步细菌培养和药物敏感试验。结果48例患者中胆总管胆汁需氧菌培养阳性31例（64．6％），胆囊黏膜需氧菌培养阳性13例（27．1％），两者均为阳性12例（25．0％）；胆囊黏膜与胆总管胆汁所培养的菌株存在明显差异，某些菌种仅见于胆总管胆汁，而胆囊黏膜主要以L型细菌为主。结论胆源性胰腺炎感染细菌主要以大肠杆菌为主，耐药菌株的出现可能与细菌向胆囊黏膜迁移并发生变异，以L型细菌的形式潜伏于胆囊有关。在使用抗生素的同时应考虑到L型细菌的存在，这对胆源性胰腺炎的预后具有重要意义。     

胆囊结石患者血清、胆汁与胆囊黏膜中纳米细菌的分布研究

目的　探讨纳米细菌在正常人群血清及胆囊结石患者血清、胆汁和胆囊黏膜中的分布情况。　方法　 ( 1)采用ELASA方法测定 338例正常人群和 76例胆囊结石患者血清中纳米细菌的感染情况 ;( 2 )对 5 7例胆囊结石和 18例非胆囊结石患者的胆囊胆汁进行纳米细菌培养 ,并采用免疫组化染色和透射电镜扫描进行鉴定 ;( 3)随机选取其中 40例胆囊结石患者胆囊黏膜进行免疫组化染色 ,观察相应胆汁和胆囊黏膜中纳米细菌分布的差异。　结果　 ( 1)正常人群和胆囊结石患者血清中纳米细菌感染率分别为 8 0 %和 31 6 % ,两者间差异有显著性 ( χ2 =2 9 90 ,P <0 0 5 ) ;( 2 ) 75例胆汁中有46例感染纳米细菌 ,阳性率为 6 1 3 % ,其中胆囊结石患者的胆汁纳米细菌的感染率为 6 1 4 % ,非胆囊结石患者的胆汁纳米细菌的感染率为 6 1 1% ,两者间并无统计学差异 ( χ2 =0 89,P >0 0 5 )。 ( 3) 14例胆囊结石患者胆囊黏膜感染纳米细菌 ,阳性率为 35 0 % ,其主要分布在黏膜或黏膜下层及钙化灶。　结论　正常人群血清中纳米细菌感染率为 8 0 % ,胆囊结石患者血清、胆汁和胆囊黏膜中存在着纳米细菌感染 ;胆囊壁的钙化或纤维化可能与纳米细菌感染有关。     

胆囊结石与胆囊黏膜及胆汁幽门螺杆菌、磷脂酶A2的关系

目的探讨幽门螺杆菌(Hp)感染与胆囊结石形成之间的关系.方法 PCR法和快速尿素酶法分别检测胆囊结石患者胆囊黏膜及胆汁Hp DNA和尿素酶,酸滴定法测定胆囊黏膜和胆汁磷脂酶A2(PLA2)活性,并做黏膜和胆汁普通、厌氧和Hp培养.结果黏膜Hp DNA阳性检出率45.24%,胆汁阳性检出率35.71%,其中胆汁Hp DNA检测结果阳性者,其黏膜检测结果均阳性.黏膜Hp DNA阳性组胆汁中PLA2的活性显著高于阴性组胆汁,分别为(480.92±164.21)U/L,(225.01±79.01)U/L;黏膜之间的PLA2活性差异无统计学意义(P＞0.05).黏膜及胆汁尿素酶检测均为阴性,普通、厌氧和Hp培养阴性.结论胆囊结石患者存在Hp感染因素,并可能通过PLA2促进胆囊结石形成.     

胆固醇结石病人与非胆石症人群胆道细菌感染状况及与免疫球蛋白相关性的对照研究

目的 明确细菌在胆固醇结石发病机制中的地位。方法 用半定量PCR结合16SrRNA序列对照法，测定38例胆囊结石病人的胆石、胆汁和胆囊黏膜细菌DNA阳性率和菌落数，并取17例非胆石病人的胆汁和胆囊黏膜作为对照。用散射比浊法测定相应胆汁和黏膜中IgA、IgG、IgM含量。结果 胆石组和非胆石组胆汁细菌DNA阳性率分别为77％和67％，菌落数分别为3．23cfu(对数值)和2．43cfu，胆囊黏膜细菌DNA阳性率分别为64％和69％，菌落数分别为3．28cfu和3．67cfu，两组间均无显著差异。两组间胆汁和黏膜IgA、IgG、IgM含量也无显著差异。菌落数与免疫球蛋白含量无相关性。结石核心和外周的细菌DNA阳性率分别为79％和82％，菌落数分别为3．19cfu和3．26cfu纯胆固醇结石细菌DNA阳性率为100％(3／3)。结石中胆固醇含量与细菌DNA阳性率无关。胆石组细菌DNA阳性者与阴性者的胆囊黏膜IgA、IgG含量均有显著差异。术前1h用抗生素者胆汁菌落数显著减少，但是黏膜菌落数无显著差异。结论 胆固醇结石病人与非胆石症人群胆道细菌感染率相似，不能仅凭结石中存在细菌来肯定细菌对胆固醇结石形成的作用。胆囊黏膜细菌与IgA、IgG含量增高有关，可能间接参与胆固醇结石形成过程。     

幽门螺杆菌感染与抗血小板治疗致上消化道出血关系的研究

目的探讨幽门螺杆菌(H.pylori)感染与肠溶阿司匹林及氯吡格雷引起消化道出血的关系。方法选择2012年1月到2014年1月门诊或住院服用肠溶阿司匹林或氯吡格雷并且进行H.pylori检测的患者1 009例,其中肠溶阿司匹林组478例,氯吡格雷组531例,每组根据H.pylori检测结果再分为H.pylori阴性组和H.pylori阳性组,观察上消化道出血情况。结果肠溶阿司匹林组和氯吡格雷组H.pylori阳性患者上消化道出血比例均明显高于H.pylori阴性组(P0.05)。结论根治幽门螺杆菌有利于降低肠溶阿斯匹林和氯吡格雷引起消化道出血的风险。     

免疫复合物与胆色素结石成因的实验研究

本研究以胆色素结石(PS)动物模型为基础，选用家兔40只，随机分为4组，每组10只。观察了不同组别成石率；PS切片抗IgG抗体荧光染色；胆石、胆汁中Ⅰ标记大肠杆菌记数；胆汁、血清中免疫复合物(IC)：特异性IgC和总补体溶血活性(CH50)以及各组成石率与其胆汁血清中IC，IgG含量的相关性。结果表明，死菌活菌组都有很高的成石率，而^60CO照射组成石率显著降低，PSv计数明显高于胆汁，各组成石率与其胆汁血清中IC、IgG含量呈非常显著正相关。作者认为：PS中有IC成分；IC形成及其抗原抗体亲和力等免疫学机制可能是促进PS形成的重要原因之一。     

单个与多发胆固醇结石患者胆道细菌感染状况及与免疫球蛋白相关性的对照研究

目的 多发胆固醇结石患者胆囊炎症程度较高,可能与结石形成有关.对多发和单个胆固醇结石患者胆道细菌感染状况及与免疫球蛋白含量的相关性进行对照研究.方法 :用半定量PCR法测定分析38例胆囊结石患者胆石、胆汁和粘膜的细菌DNA阳性率和菌落数,并测定相应胆汁和粘膜IgA、IgG、IgM含量.结果 :单个和多发胆石组的胆汁细菌DNA阳性率分别为75.0%和73.7%,胆囊粘膜细菌DNA阳性率分别为66.7%和64.0%,结石核心的细菌DNA阳性率分别为57.1%和85.7%,结石外周细菌阳性率分别为71.4%和85.7%,两组间差异均无显著性.两组间胆汁和粘膜IgA、IgG、IgM含量差异无显著性,菌落数与免疫球蛋白含量不相关.多发胆石组粘膜细菌DNA阳性者的胆囊粘膜IgA、IgG含量高于阴性者(P<0.05).单个和多发胆石组胆汁胆固醇饱和指数(CSI)差异无显著性,各组内胆汁细菌阳性与阴性者的CSI差异也无显著性.结论 :多发和单个胆固醇结石患者胆囊细菌感染率相似,细菌感染不是多发胆固醇结石患者胆囊炎症严重的原因.多发胆固醇结石患者胆囊粘膜细菌与IgA、IgG含量增高有关,可能间接参与胆固醇结石的形成过程.     

胆囊结石患者胆汁需氧菌和厌氧菌脱氧核糖核酸检测及意义

目的:为探索提高胆囊结石患者胆汁细菌检出阳性率,从分子生物学水平研究胆囊结石胆汁细菌脱氧核糖核酸(DNA)。方法:采用聚合酶链式反应(PCR)对胆汁中5种需氧菌和4种厌氧菌DNA进行检测。结果:检测70例其中需氧菌DNA存在56例(80％),厌氧菌DNA存在23例(32.9％)。两类细菌DNA共同存在为20例(28.6％)。从21例胆汁中检测出幽门螺杆菌DNA。结论:胆结石刖汁中存在多种细菌DNA。PCR可提高细菌检出阳性率。     

原发性胆囊癌胆囊黏膜和胆汁中螺杆菌相关基因的检测

目的 探讨人类原发性胆囊癌(primary carcinoma of the gallbladder,PCG)的发生是否与幽门螺杆菌(Helicobacter pylor,Hp)的感染有关,为原发性胆囊癌的治疗提供新的思路.方法 选取18例PCG患者、40例慢性胆囊炎、胆囊结石(chronic cholecystitis or cholelithiasis,CC)患者以及20例排除PCG和CC的患者(对照组)手术后的胆囊黏膜、胆汁,采用巢式PCR方法扩增螺杆菌特异的16S rRNA基因.阳性者检测Hp特异26 KDa蛋白1基因和4个相关功能基因(cagA、vacA、rps4、ureA),并进行测序分析,确定检出的细菌是否为Hp.结果 PCG组胆囊黏膜和胆汁标本有29份检出螺杆菌属16S rRNA基因,阳性率为81%,显著高于CC组(50%)和对照组(20%).PCG 组螺杆菌属16S rRNA基因阳性29份标本中,15份cagA基因阳性,阳性率为52%;25份26 KDa基因阳性,阳性率为86%;14份ureA基因阳性,阳性率为48%;未扩增出vacA和rps4基因;cagA、26 KDa、vacA、ureA和rps4基因至少一项阳性的样本数为27份,阳性率为93%.经测序鉴定,检测出的螺杆菌与Hp有99%以上的同源性.结论 PCG患者胆囊黏膜和胆汁中存在Hp感染,且感染率高.初步提示胆道系统Hp感染与PCG有关.

Abstract：

Objective To investigate the relationship between helicobacter pylor (Hp) and primary carcinoma of the gallbladder (PCG), providing a theoretical basis for the treatment of PCG.Methods Mucosa and bile of gallbladder samples were collected from 18 patients with PCG (PCG group), 40 patients with chronic cholecystitis or cholelithiasis (CC group), and 20 patients with no PCG and CC (control group). 16S rDNA-based polymerase chain reaction (PCR) followed by DNA sequence analysis of the obtained PCR fragments was performed. A developed search for Hp was also carried out by PCR. Five genes specific for Hp were amplified. Results In the PCG group, 81% samples of mucosa and bile were positive for Helicobacter-specific 16S rRNA gene. The positive rate in PCG group was significantly higher than those of the CC group (50%) and the control group (20%).Of the 16S rDNA sequence of Helicobacter pylori positive samples of mucosa and bile, 52% of samples were positive in cagA, 86% were positive in 26 KDa, 48% were positive in ureA separately. The vacA and rps4 genes were never detected in any of the samples of mucosa and bile. At least one gene was positive in 93% of samples of musca and bile. The sequencing showed more than 99% homology of Helicobacter 16S rRNA in PCG and Hp groups. Conclusion A higher infection rate is present in bile and gallbladder mucosa from patients with PCG. Hp in the biliary system may be one of the risk factors for occurrence of PCG.     

Helicobacter pylori is not associated with the manifestations of gastroesophageal reflux disease.

HYPOTHESIS: Helicobacter pylori is not associated with gastroesophageal reflux disease and its complications, including adenocarcinoma of the esophagus and the gastroesophageal junction (GEJ). DESIGN: Retrospective analysis. SETTING: University tertiary referral center. PATIENTS: Two hundred twenty-nine patients with symptoms suggestive of foregut disease underwent esophageal manometry, 24-hour pH monitoring, and upper gastrointestinal tract endoscopy, with biopsy specimens obtained from the gastric antrum, the GEJ, and the distal esophagus. In these and in an additional 114 patients with adenocarcinoma of the esophagus and the GEJ, the presence of H. pylori was determined by Giemsa stain. The presence of gastroesophageal reflux disease, defined by abnormal esophageal acid exposure, and its manifestations (carditis, erosive esophagitis, intestinal metaplasia limited to the GEJ, Barrett esophagus, and adenocarcinoma of the esophagus and GEJ) were correlated with the presence of H. pylori. RESULTS: Helicobacter pylori was found on the biopsy specimens of the gastric antrum in 14.0% (32/229) of the patients with benign disease. It was not related to the features of gastroesophageal reflux disease, including abnormal esophageal acid exposure, erosive esophagitis, or Barrett esophagus. The presence of inflamed cardiac mucosa at the GEJ or carditis was inversely related to H. pylori infection and strongly associated with increased esophageal acid exposure. There was no association between the presence of intestinal metaplasia and H. pylori infection. Helicobacter pylori was found in 22 (19.3%) of the 114 patients with esophageal adenocarcinoma, which was not different from the prevalence of H. pylori in patients with benign disease. CONCLUSION: Helicobacter pylori plays no role in the pathogenesis of gastroesophageal reflux disease or its complications.     

胆固醇结石患者胆囊细菌感染的研究

目的 比较胆固醇类结石患者和非胆石症患者胆道细菌感染情况.方法 用不依赖细菌培养的半定量PCR和16SrRNA序列对照法,检测76例胆固醇类结石患者胆囊黏膜、胆汁和胆石中细菌DNA,与34例非胆石患者对照.结果 胆石组和非胆石组胆汁细菌DNA阳性率分别为77%和67%,胆囊黏膜细菌DNA阳性率分别为64%和69%,两组间差异均无统计学意义(P＞0.05).胆石组细菌种类主要为大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、不动杆菌、链球菌、鞘氨醇单胞菌、脆弱类杆菌和痤疮丙酸杆菌,胆石组菌种比非胆石组丰富,非胆石组菌种基本上均能在胆石组中找到.结论 胆固醇结石与非胆石症患者胆道细菌感染率相似,胆固醇结石中存在细菌不足以证明细菌参与胆固醇结石的形成.     

原发性胆管色素结石形成原因的阶段性研究总结

目的从多角度研究及探讨胆管色素结石的成因。方法1997—2006年10年间围绕原发胆管结石成因的研究包括对胆管结石及胆汁进行细菌培养及电镜观察:对胆管结石术后病人,放射性核素检测肠胆反流;同样利用该同位素,检测胆系病人肠道通透性;使用金黄地鼠制造胆囊色素结石模型,观察内毒素含量及二胺氧化酶变化,评价肠道黏膜通透性与胆结石的关系;调查胆管结石与胆囊切除术间的关联;观察门奇静脉断流术前后Oddi括约肌运动功能的变化;研究肠胆反流及胆汁排出速度的变化对胆管结石形成影响;钡餐造影研究十二指肠降段憩室与胆管色素结石形成间的关联;观察药物对Oddi括约肌收缩及胆道压力的影响。结果对原发性胆管结石病人结石及胆汁细菌培养表明,胆石中需氧菌阳性率29/30(96.7%);胆汁中需氧菌阳性率33/35(94.2%)。经扫描及透射电镜亦观察到结石内有细菌存在。放射性核素检查发现胆道残石病人中44/123(35.8%)存在明显的肠液反流。胆管色素结石病人肠壁通透性明显升高。胆囊色素结石模型提示金黄地鼠血清中内毒素含量显著高于造模前水平,二胺氧化酶测试亦表明肠黏膜通透性显著升高。调查发现618例胆管结石病人中既往因胆囊结石行胆囊切除者约占12%。切断迷走神经可使消化间期Oddi括约肌张力减低,餐后Oddi括约肌舒张延迟。核素显像对EST前后胆汁排出情况的研究发现,Oddi括约肌切开后胆汁排出明显加快。钡餐造影显示十二指肠降段憩室在胆管色素结石病人中的发生率较高。多种药物可影响Oddi括约肌的运动功能。结论Oddi括约肌受神经体液因素影响,其结构、功能异常是诱发肠胆反流、胆道感染乃至胆管色素结石形成的重要原因。肠道黏膜通透性增高、细菌易位亦与胆管色素结石的形成存在一定关系。