刺五加黑木耳酸性多糖化学组成及免疫活性研究

利用离子交换色谱与凝胶色谱纯化获得刺五加黑木耳酸性多糖（EAP）,使用高效液相色谱（HPLC）、傅里叶红外光谱（FT-IR）等方法分析其组成结构;通过噻唑蓝（MTT）实验、Griess法及酶联免疫吸附法测定一氧化氮（NO）释放量和IL-6、IL-10、TNF-α等细胞因子含量,评价EAP对小鼠巨噬细胞RAW264.7的免疫调节作用。结果表明:EAP是一种分子量为925.9 k Da的β型酸性杂多糖,主要由甘露糖、葡萄糖醛酸、木糖、葡萄糖及半乳糖以摩尔比例64.8∶14.7∶14.2∶3.2∶2.0组成。EAP在50²50μg/m L浓度下对小鼠巨噬细胞RAW264.7未产生明显毒性,且可极显著提高巨噬细胞的活性（p<0.01）;在EAP处理浓度为50μg/m L时,巨噬细胞的NO释放量和细胞因子IL-10分泌量极显著提高（p<0.01）,分别为17.2μmol/L和171.5 pg/m L;当浓度200μg/m L时,EAP可极显著提高TNF-α和IL-6的分泌量（p<0.01）。结论:刺五加黑木耳酸性多糖具有增强免疫活性的潜力。      

滁菊多糖结构特性及其免疫活性研究

目的 分离纯化滁菊多糖(Chuzhou chrysanthemum polysaccharides, CCPS),对其进行结构解析,并研究其免疫活性。方法 以滁菊为原料,热水浸提,乙醇沉淀得到CCPS;通过快流速二乙氨基乙基-琼脂糖凝胶(diethylaminoethyl-sepharose fast flow, DEAE-FF)和葡聚糖凝胶G-100 (Sephadex G-100)层析柱分离纯化CCPS,得到中性多糖CCPS-1-1。用高效液相色谱法、紫外和红外光谱法、刚果红实验等进行CCPS-1-1结构解析,建立小鼠单核巨噬细胞(mousemononuclearmacrophagescells,RAW264.7)的免疫模型探究其免疫刺激活性。结果 CCPS-1-1主要由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、半乳糖醛酸组成,具有三股螺旋结构。体外免疫活性实验表明,CCPS-1-1可以促进RAW264.7细胞的增殖和吞噬作用,显著诱导RAW264.7细胞中一氧化氮(nitricoxide,NO)的分泌及细胞因子包括肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)、白细胞...     

龙胆多糖的结构表征及其体外免疫活性

对龙胆多糖的结构和生物活性进行研究,采用甲基化分析多糖的链接方式。结果表明,龙胆多糖中存在(→1)末端和(1→5)-链接的呋喃阿拉伯糖基、(1→4)-链接的吡喃半乳糖基,同时也存在其他含量比较少的糖基和分支。龙胆多糖中糖醛酸是以(1→4)-链接的半乳糖醛酸方式存在,对龙胆多糖的生物活性起着重要的作用。龙胆多糖可以促进RAW264.7细胞增殖并产生NO,而且NO的产生是通过一氧化氮合成酶mRNA上调实现的,同时龙胆多糖可以上调细胞因子COX-2和TNF-α的mRNA表达水平。     

乙酰化黑木耳多糖的制备及其抗氧化活性研究

本实验采用二次回归正交组合设计法优化了乙酰化黑木耳多糖的制备工艺,并对乙酰化前后黑木耳多糖的抗氧化活性进行了比较研究。实验以甲酰胺为溶剂,乙酸酐为酰化试剂,N-溴代琥珀酰亚胺（NBS）为催化剂,采用二次回归正交组合设计法,以反应时间、反应温度、酰化试剂用量和NBS添加量为实验因素,采用羟胺比色法测定乙酰取代度的大小,以乙酰化取代度大小为实验指标,利用SPSS软件进行数据分析。结果表明,酰化试剂用量和NBS添加量对黑木耳多糖乙酰化有显著影响（p<0.05）,经过方程运算,得到制备乙酰化黑木耳多糖的最优实验条件为,反应时间3.5 h,反应温度80.0℃,乙酰化试剂用量32.5 m L,NBS添加量为1.0%,在此实验条件下,得到的乙酰化取代度平均值为0.55。通过对原多糖和乙酰化多糖的红外光谱检测,显示乙酰化黑木耳多糖制备成功。抗氧化活性研究结果显示,黑木耳多糖乙酰化改性后清除羟自由基和超氧阴离子自由基的能力有所增加;还原能力也要比原料多糖有所提高。      

灵芝子实体多糖的分离纯化、组成及其免疫活性研究

从一种新菌株培育的赤芝子实体中提取分离得到两个分子量均为500万以上的水溶性灵芝多糖组分GLPD1与GLPD2;SEC—LLS分析结果显示两者均为高支化的紧缩结构。PMP柱前衍生化反相色谱分析结果表明GLPD1与GLPD2的单糖组成有显著差异,即GLPD1的单糖组成摩尔百分比为Man∶GlcN∶Rib∶Rham∶GalUA∶GalN∶Glc∶Gal∶Xyl∶Fuc=3.7∶0.8∶0.16∶6.8∶0.7∶0.29∶77∶9.27∶0.16∶1.1;而GLPD2的摩尔比Man∶GlcN∶Rib∶Rham∶GalUA∶GalN∶Glc∶Gal=10.6∶2.0∶0.97∶10.72∶0.65∶0.99∶64.51∶9.52。傅立叶红外光谱分析发现两者异头碳连接方式均为β-构型。体外促进正常小鼠脾淋巴细胞增殖活性试验结果表明,这2个多糖级分均具有一定的免疫活性,且在50,200,500mg/mL 3个浓度下GLPD2的免疫活性均比GLPD1要高,且GLPD2促进正常小鼠脾淋巴细胞增殖活性有量效相关性。     

黑木耳多糖的磷酸化修饰、结构表征及体外降糖活性

利用加压剪切联合萃取技术提取的黑木耳多糖为原料,以三偏磷酸钠为交联剂,不同温度下进行磷酸化修饰,并对其进行结构表征及体外降血糖活性研究。结果表明：磷酸化黑木耳多糖主要由木糖、果糖、甘露糖以及葡萄糖组成的杂多糖,随着温度的升高磷酸化黑木耳多糖相对分子质量明显下降,并出现三股螺旋结构。红外图谱显示在1 205、898 cm－1处出现了P＝O及P—O—C的特征吸收峰。核磁共振光谱分析表明磷酸化修饰主要发生在C6位的羟基上,且在δ 0～1.5范围内出现了磷酸基团中P的信号峰。扫描电镜结果表明修饰后黑木耳多糖表面形貌变化明显,相比修饰前多糖更加细小、破碎。且对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶具有较强的抑制作用,当PAAP-4质量浓度为5.0 mg/mL时,α-葡萄糖苷酶抑制率为56.89%,体外降血糖活性增强。     

茯苓渣多糖组成分析及体外抗癌、免疫活性研究

目的:以茯苓渣为原料,通过热水浸提茯苓多糖,研究其单糖组成及抗癌、抗炎症因子及免疫活性,为开发茯苓多糖相关产品提供了理论依据。方法:利用高效液相色谱和红外光谱对水提茯苓多糖进行单糖组成分析,采用CCK-8法对水提茯苓多糖进行抗肿瘤及免疫活性研究。结果:水提茯苓多糖的多糖含量为76%,具有明显的多糖特征吸收峰,主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、岩藻糖组成,其物质的量之比为1:0.107:0.079:0.018;对胃癌细胞、乳腺癌细胞、肝癌细胞均有抑制作用,对胃癌细胞的增殖抑制效果最优（IC₅₀=1096 μg/mL）,对小鼠脾淋巴细胞具有促进增殖作用。结论:水提茯苓多糖具有良好的体外抗癌及免疫活性。     

富硒黑木耳多糖的理化性质及抗氧化活性研究

采用超声辅助法对富硒黑木耳多糖和普通黑木耳多糖进行提取和分离纯化,得到富硒黑木耳多糖(Se-AAP-2)和普通黑木耳多糖(AAP-2),比较分析Se-AAP-2和AAP-2的分子量、单糖组成、纯度、糖醛酸含量、体外及体内抗氧化活性.结果表明,Se-AAP-2和AAP-2均由甘露糖和葡萄糖组成,分子摩尔比分别为1:1.3...     

黄秋葵籽多糖的组成结构及抗氧化活性研究

目的 分析黄秋葵籽多糖的组成结构并对其抗氧化活性进行评价。方法 样品经DEAE-52阴离子交换柱和Sephacryl S-400凝胶色谱柱进行分离纯化得到黄秋葵籽多糖组分(OSPs), 采用尺寸排阻色谱柱分析其分子量, 并对其化学成分、单糖组成、糖苷键链接方式、红外光谱(FTIR)结构信息及抗氧化活性进行研究。结果 分离纯化的OSPs重均分子量为7.09×105 Da, 数均分子量为7.01×105 Da, Mw/Mn为1.01, 表明OSPs有较高的纯度, 得率为0.45%。酸降解和糖醇衍生化后经气相色谱测得OSPs由甘露糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和鼠李糖组成, 摩尔百分比为38:32.84:17.14:9.13:2.88。FTIR结果表明OSPs含有甘露糖残基。高碘酸氧化、Smith降解实验结果表明OSPs主要含有1→、1→6、1→2、1→2,6糖苷键。此外, OSPs具有良好的抗氧化能力,特别是对O2-自由基的清除。结论 通过对OSPs组成结构及抗氧化活性研究, 有利于对黄秋葵籽资源的高值化利用。     

绣球菌子实体单组分多糖结构表征及其免疫活性

分离纯化绣球菌子实体多糖得到单一组分,研究其结构和免疫活性,探究绣球菌单组分多糖结构与免疫活性之间的关系。以绣球菌子实体粗多糖为原料,经HZ-830大孔树脂、DEAE-52和Sephadex-G 100分离纯化后得到单组分多糖,命名为SlP,采用高效凝胶渗透色谱、红外光谱、离子色谱、核磁共振、原子力显微镜、扫描电镜、刚果红染色等对SlP结构进行鉴定。用MTT法检测SlP对巨噬细胞RAW 264.7增殖的影响,中性红染色测定SlP对巨噬细胞的吞噬能力。取细胞上清液,检测上清液中巨噬细胞NO的生成量。收集细胞,提取总RNA,采用荧光定量RT-PCR测定巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-3、IL-10、IFN-βmRNA的表达量。结果表明SlP是一种由葡萄糖构成的β-葡聚糖,分子质量集中在1.04×104u,具有三螺旋结构,表观呈现大小、形状不一、无规则的碎片状,分子间呈现无规则的线团和岛屿状,链间缠绕并具有分支状结构。SlP在质量浓度1.95～31.25μg/mL范围能促进RAW264.7巨噬细胞增殖;在质量浓度为7.81μg/mL时,促细胞增殖能力最强;在质量浓度1.95～7.81μg/mL范围时,能显著提高巨噬细胞的吞噬能力、NO分泌量,增加细胞内TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-3、IL-10、IFN-β免疫因子mRNA的表达量,且呈剂量效应关系。SlP可作为一种良好的功能食品原料应用于食品工业上。     

3 种木耳多糖的抗氧化活性与抑菌能力比较分析

目的：研究玉木耳、黑木耳与毛木耳3 种木耳多糖的抗氧化活性与抑菌能力。方法：利用水提醇沉法获得了3 种木耳的多糖,并测定了其多糖含量;采用分光光度法分别测定了3 种木耳多糖的总抗氧化能力,羟自由基、超氧阴离子自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基和亚硝酸根离子清除能力;同时进行了大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌实验。结果：相同提取条件下,玉木耳、黑木耳与毛木耳的粗多糖提取率分别为13.87%、11.26%、7.91%,其中3 种木耳多糖质量分数分别为49.22%、41.50%和37.97%;总抗氧化活性检测结果显示毛木耳多糖的总抗氧化能力最高,黑木耳多糖与玉木耳多糖抗氧化能力相当;其中玉木耳多糖对羟自由基清除能力略强于黑木耳多糖,且二者的超氧阴离子自由基清除能力相当,均强于毛木耳多糖;3 种木耳多糖对DPPH自由基的清除作用较明显,其中玉木耳多糖相对较优,可达80%;此外,黑木耳多糖对亚硝酸根离子的清除能力最好,略优于其他两种木耳多糖。对常见细菌的抑制作用而言,3 种木耳多糖均对大肠杆菌有一定的抑制作用,但黑木耳多糖和毛木耳多糖对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌抑制作用较弱;仅玉木耳多糖对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌有较好的抑制作用。结论：3 种木耳多糖具备各自不同的抗氧化活性与抑菌能力,且差异较为明显。     

总状蕨藻Caulerpa racemosa多糖抗肿瘤和免疫增强活性

以荷S180实体瘤的昆明小鼠为模型,研究了总状蕨藻粗多糖(CRP)的抗瘤作用及其对免疫器官等的影响,采用细胞培养法研究了CRP及其两个主要级分(CRPF1和CRPF2)对正常小鼠免疫细胞功能的影响。实验结果显示:总状蕨藻粗多糖对S180实体瘤具有显著的抑制作用,其抑瘤率和免疫活性与给药方式、剂量等因素有关,在注射和灌胃给药条件下,当CRP剂量分别为25mg/(kg.d)和100mg/(kg.d)时,其抑瘤率达到最大值,分别为46.2%和58.2%,且在注射给药时能显著地增加小鼠的脾脏指数。在50~200mg/(kg.d)范围内,灌胃给药时能升高小鼠碳廓清指数;细胞培养结果显示:CRP能提高正常小鼠的免疫功能,不过,其对静止淋巴细胞增殖的促进作用和对小鼠腹腔巨噬细胞MФ分泌NO的促进作用均小于CRPF1和CRPF2。以上事实表明,总状蕨藻多糖具有较强的抗肿瘤和增强小鼠免疫力的作用。     

微波辅助提取黑木耳多糖的研究

研究利用微波辅助萃取技术提取黑木耳子实体中的黑木耳多糖的方法。以无菌过滤水为溶剂,以微波辐射处理为辅助条件,提取黑木耳子实体中的多糖,并与常规水提法(WE)、超临界萃取法(SFE)和超声波萃取法(USE)作了对比实验;考察了微波辐射功率,微波辐射时间,固液比,浸提时间和浸提级数这些因子对多糖得率的影响。确定的提取工艺条件为:微波功率为800W,微波辐射时间为40min,固液比(g:mL)为1∶32,水浴浸提时间为3h,提取级数为二级。     

酸碱性和分子量对木耳多糖抗氧化活性及相关性的影响

为研究提取溶剂酸碱性和分子量对黑木耳多糖抗氧化活性的影响及其抗氧化相关性,本试验以野生黑木耳为原料制备黑木耳多糖,采用Labscale TFF System超滤系统对黑木耳多糖进行分子量分级,分别测定黑木耳多糖的得率、纯度和抗氧化活性,并使用SPSS软件分析黑木耳多糖分子量与抗氧化活性之间的相关性。结果表明,酸性未脱色黑木耳多糖的得率最高(12.48%),碱性脱色黑木耳多糖的纯度最高(68.78%),中性未脱色黑木耳多糖体外抗氧化活性最好。不同分子量中性未脱色黑木耳多糖抗氧化试验表明,分子量小于30 ku的黑木耳多糖(Sp3)抗氧化活性最好,抗氧化活性与Vc相近。其次是分子量为30 ku~100 ku的黑木耳多糖(Sp2),最差的是分子量大于100 ku的黑木耳多糖(Sp1),Sp3与抗氧化活性之间存在极显著相关(p0.01),本试验结果为深入开发黑木耳多糖抗氧化产品提供理论依据。     

黑木耳多糖及其生物活性

黑木耳是一种常见的大型药食两用真菌，其主要功能性成分为多糖，具有降血脂、抗凝血、抗肿瘤等多种生理活性。现对深层发酵黑木耳多糖、多糖分子结构以及主要生物活性的研究进展作一综述。     

超声波协同半仿生法提取黑木耳多糖工艺优化

对超声波协同半仿生法提取黑木耳多糖的工艺进行优化,以黑木耳多糖提取率为指标,采用单因素试验和正交试验,确定最佳提取工艺参数.结果表明,超声波协同半仿生法提取最佳工艺参数为:料液比1∶30(g/mL),超声温度60℃,超声功率500 W,超声时间60min,在此条件下,黑木耳多糖提取率为22.52％.     

黑木耳多糖及其生物活性

黑木耳是一种常见的大型药食两用真菌,其主要功能性成分为多糖,具有降血脂、抗凝血、抗肿瘤等多种生理活性。现对深层发酵黑木耳多糖、多糖分子结构以及主要生物活性的研究进展作一综述。     

黑木耳粗多糖(CAAP)的分离提取工艺及其理化性能研究

以黑木耳(Auricularia auricula)的子实体粉粒为原料,研究了其中黑木耳粗多糖(CAAP)的分离提取方法及其产品的溶解性能等特性。以蒸馏水为提取剂,当分离提取的工艺条件为:20～40目的子实体粉粒的料水比为1:15,乙醇与浓缩后物料的体积比为4:1,提取液的水温控制为75℃,每次浸提时间2h,提取次数为5次时,产品的得率较高;采用冷冻干燥工艺制得的CAAP产品的性能优于真空干燥的产品;胰蛋白酶法与Sevage法结合使用脱除蛋白质时,CAAP的纯化效果优于单独使用Sevage法。     

黑木耳酸性多糖对高血脂症小鼠的降血脂作用

目的：初步探究黑木耳酸性多糖对高血脂症小鼠的降血脂作用。方法：采用不同剂量的黑木耳酸性多糖对高脂模型小鼠进行灌胃,研究黑木耳酸性多糖对高脂模型小鼠血脂四项及相关酶类的影响。结果：与高脂模型组相比,黑木耳酸性多糖组小鼠体质量明显降低,肝脏指数和动脉粥样硬化指数（atherosclerosis index,AI）也明显降低;小鼠血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）水平均明显降低,HDL-C水平则显著或极显著升高（P＜0.05或P＜0.01）;黑木耳酸性多糖中、高剂量组小鼠的总超氧化物歧化酶（total superoxidedismutase,T-SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力均极显著高于高脂模型组（P＜0.01）。结论：黑木耳酸性多糖可以明显降低高血脂症小鼠血脂水平,改善其因摄入过多脂质而导致肝脏脂肪堆积及动脉粥样硬化程度,并对高血脂症引起的脂质过氧化损伤具有防护作用。     

深层发酵黑木耳产孢外多糖的初步研究

从黄天菊花、白背毛、苏黑、银白、正白、紫毛木耳7个黑木耳菌种中筛选产孢外多糖较多且生长较快的菌株紫毛木耳,并以紫毛木耳为菌种，研究了不同碳源、氮源、起始pH值和温度对其产孢外多糖的影响。结果表明，超始pH为6．0、温度25℃、酶母膏0．3％、葡萄糖2％，为产多糖较合适条件，每100ml培养液中多糖的量达74．5mg。