人肝癌耐药细胞系的建立及生物学特性的研究

目的:培养建立耐药肝癌细胞模型QGY7703/DDP,分析人肝癌耐药细胞系生物学特性的改变.方法:应用人肝癌细胞株QGY7703,采用顺铂(DDP)逐步提高加间歇诱导历时6个月在体外建立QGY7703/DDP细胞系模型.观察该细胞的生长规律,利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法分析暴露前后细胞的增殖和药物对细胞毒性的差异.结果:经过将QGY7703持续暴露,细胞对化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)、DDP、阿霉素(ADM)、丝裂霉素(MMC)的敏感性发生了改变.QGY7703/DDP对5-FU的耐药性是亲代细胞的1.533倍,对DDP的耐药性是亲代细胞的2.181倍,对ADM的耐药性是亲代细胞的7.080倍,对MMC的耐药性是亲代细胞的9.461倍.结论:化疗药物能够诱导培养的肿瘤细胞产生耐药性.     

小檗碱对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨小檗碱对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞株增殖和凋亡的作用.方法 应用MTT、流式细胞仪和软琼脂克隆形成试验,研究小檗碱对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞株增殖和凋亡的作用.结果 小檗碱对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞有抑制增殖、促进凋亡和抑制细胞克隆形成能力.结论 小檗碱对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞有抑制增殖和促进凋亡作用.     

原发性肝癌的体外化疗药物敏感性探析

目的探究原发性肝癌对体外化疗药物的敏感性。方法选取我院2005年1月至2010年12月间确诊的原发性肝癌患者50例,选用MTT比色法,分别测定原发性肝癌对7种化疗药物的体外敏感性,包括阿霉素(ADM)、5-氟脲嘧啶(5-Fu)、顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)、长春新碱(VCR)、羟基喜树碱、甲氨蝶呤(MTX)。结果肝癌患者对化疗药物的敏感率由高到低的顺序为羟基喜树碱>5-氟脲嘧啶>丝裂霉素>顺铂>阿霉素>甲氨蝶呤>长春新碱,各组敏感性具有明显的差异(P<0.05)。结论原发性肝癌对化疗药物的敏感性不同,临床治疗应该根据药敏试验的结果进行个体化综合治疗。     

Rb对HepG2肝癌细胞系增殖的影响

目的研究Rb基因及其产物对HepG2肝癌细胞系增殖的影响。方法转染pRb质粒进入HepG2肝癌细胞系,用MTT法检测转染前后细胞增殖的变化,并将转染pRb质粒的HepG2肝癌细胞接种在裸鼠皮下建立肝癌裸鼠种植瘤模型,观察转染pRb质粒前后裸鼠体内种植瘤生长的变化。结果转染pRb质粒的HepG2肝癌细胞与未转染pRb质粒者相比细胞增殖受到抑制。成功建立HepG2肝癌细胞裸鼠体内种植瘤模型,转染pRb质粒的HepG2肝癌细胞的裸鼠体内种植瘤生长受抑制。转染组种植瘤体积第4周(429.7±114.987)mm3,第5周(657.90±187.27)mm3,第6周(892.56±258.73)mm3。结论Rb在体内和体外均能抑制肝癌细胞的增殖。     

原代肝癌细胞培养及体外化疗药物敏感试验

<正>化疗是目前治疗肝癌的主要辅助手段之一,但治疗效果仍无显著提高。本研究通过肝细胞癌原代培养体外化疗药物敏感实验来筛选对肝癌敏感的化疗药物。     

不同株人肝癌细胞对化疗药物杀伤作用的敏感性分析

目的研究化疗药物对不同株人肝癌细胞杀伤作用的敏感性。方法采用MTT比色分析法测定多柔比星(DXRB)或米托蒽醌(DHAQ)对体外培养的4株人肝癌细胞的细胞毒作用。结果DXRB对SMMC-7721细胞的杀伤作用最强,QJY次之,HEPG-2和Alexander不敏感;DHAQ对QJY细胞的杀伤作用最强,Alexander和SMMC-7721次之,同样HEPG-2不敏感。结论不同株人肝癌细胞对同一化疗药物可具有不同的敏感性。     

骨形成蛋白-2对人肝癌细胞系Huh7生长的影响

骨形成蛋白（bone morphogenetic proteins,BMPs）属于肿瘤坏死因子（TGF）-β超家族,1965年首次被发现并因其具有诱导骨形成的能力而得名.BMPs可调节细胞增殖、分化及凋亡,尤其在胚胎机体发育过程中对组织器官形态发生,在成年机体生长过程中对组织器官形态的维持起重要作用.此外,BMPs与疾病发生特别是肿瘤发生有关,在一些非骨源性肿瘤中也发现有BMPs表达,有研究显示BMP-9在人肝癌细胞系HepG2细胞中表达,BMP-9促进HepG2细胞的生长.     

半枝莲提取物对人大肠癌细胞系凋亡的影响

目的 探讨半枝莲提取物(SBE)诱导人大肠癌细胞系(SW480、LoVo、HT-29)的凋亡作用及其可能机制.方法 体外培养SW480、LoVo、HT-29细胞,以药物康复新、露蜂房作对照,应用MTT法和流式细胞术检测不同浓度SBE处理三种细胞48 h后的抑制率、细胞凋亡率及周期变化;RT-PCR检测SBE处理后凋亡相关基因Bcl-2和Caspase-3 mRNA表达.结果 与康复新、露蜂房比较,SBE对三种细胞的抑制率和细胞凋亡率均呈剂量依赖性显著升高(P＜0.01);S期细胞含量增多,出现S期阻滞;Caspase-3 mRNA表达亦显著上升,Bcl-2表达明显下降(P＜0.01).结论 SBE具有诱导大肠癌细胞系凋亡和抑制增殖作用,作用强于康复新和露蜂房提取物.其机制可能与Caspase-3基因表达的上调及Bcl-2基因表达下降有关.     

人胃低分化腺癌细胞系的建立及其单克隆抗体的研制

本文报道自胃癌患者转移的淋巴结获得了体外培养细胞系为人胃低分化腺癌细胞,已传110代,冻存的细胞易复苏,异种移植成功率高,细胞恶性程度高。该细胞免疫的BALB/C小鼠的B淋巴细胞与BALB/C小鼠骨髓瘤细胞(SP_2/O)进行融合,共获得2株能分泌抗人胃癌单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为GC—3A5和GC—1A5,融合率为70.83％,阳性率为2.35％,经免疫荧光及双P免疫酶标组化法试验对胃癌细胞均为阳性,腹水效价1:400,GC—3A5McAb为IgM抗体,GC—1A5为IgG_1抗体。     

医院常见病原菌对多种抗菌药物的敏感性

目的：对我院1999年全年临床分离病原菌排在前10位的菌类所做过药敏实验的多种抗菌药物敏感率进行分析,为临床经验用药提供更合理的选用抗菌药物的依据。方法：肉汤稀释法测MIC,通过Sceptor数码分析系统完成鉴定和药敏实验。结果：（1）临床分离菌株中的前10位革兰氏阴性杆菌占7个,革兰氏阳性球菌占3个;（2）7种革兰氏阴性杆菌对氨苄西林已基本耐药,敏感率均＜10％,加酶抑制剂的复方制剂也未能更好的拓宽抗菌谱;（3）革兰氏阴性杆菌对第二代头孢菌素敏感率并不优于第一代头孢菌素;（4）铜绿假单胞菌对头孢他啶、头孢哌酮的敏感率分别为80％和76％,大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌对第三代头孢菌素的敏感率均在60％－93％之间,其他革兰氏阴性杆菌对第三代头孢菌素的敏感率约在50％以下,基本表现耐药;（5）亚胺培南／西司他丁尚保持较强的抗菌活性;（6）多数革兰氏阴性杆菌对阿米卡星尚敏感;（7）3种革兰氏阳性球菌对β－内酰胺类抗生素、喹诺酮类、红霉素等敏感率均＜50％;（8）出现了对万古霉素耐药的可疑的金葡球菌、表葡球菌菌珠;（9）金葡球菌、表葡球菌、表葡球菌群对利福平的敏感率在60％－75％;（10）嗜麦芽黄单胞菌、鲍氏不动杆菌耐药情况严重。结论：抗生素敏感率下降,耐药现象非常严重,应该引起医药学界高度重视。     

沉默Livin基因表达对人肝癌HepG2细胞生物学特性的影响

<正>肝细胞癌是世界范围内年发病率位居第五的恶性肿瘤,在恶性肿瘤导致的病死率中位居第3[1]。传统的治疗手段如手术切除和化疗,其治疗效果差,并且几乎不能达到完全缓解或是治愈。目前,越来越多的研究表明,应用RNA干扰(RNAi)技术,可以减少癌基因的表达,同时可以改变肿瘤细胞的一些生物学活性,因此,RNAi可能是肿瘤治疗的重要方     

肝癌治疗药物的研究新进展

目的介绍肝癌治疗药物的最新研究进展。方法通过查阅近年来国内外关于肝癌治疗药物的相关文献并进行综述。结果与结论肝癌的治疗药物近年来有了很大进展,包括诺拉曲塞,PI-88,T-67,索拉非尼,利卡汀,prolarix等,其中以索拉非尼为代表的酪氨酸激酶抑制剂可能成为肝癌的标准治疗药物。     

七种人癌细胞系对冬凌草甲素的敏感性比较

采用体外集落培养技术测定剂量-存活率曲线,比较了七种常见肿瘤的人癌细胞系对冬凌草甲素的敏感性。除在肺鳞瘟LTEP-78仅测及肩段外,其他细胞的存活率曲线均为阈值指数型。对曲线参数的分析表明,食管唐CaES-17和胃腺癌MGc 80-3对冬凌草甲素最敏感。     

Hsulf-1在肝癌细胞系中的作用及STAT3信号通路研究

目的基于肝癌细胞中人硫酸酯酶-1(human sulfatase-1,Hsulf-1)基因对STAT3信号通路的影响,探讨Hsulf-1基因在肝癌发生发展中的作用。方法应用RT-PCR方法测定Hsulf-1在肝癌细胞中的表达;通过Western blot方法测定Huslf-1在HGF加入前后对STAT3磷酸化(p-STAT3)水平及下游蛋白的影响。结果 5-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-d C和曲古抑菌素Actrichostain A,TSA)处理Hep G2细胞中Hsulf-1表达增加,且2者具有协同作用;与正常细胞相比,Hsulf-1在肝癌细胞系中(Hep G2,Hep3B,Huh-7,SMMC-7221)表达水平下降,在转染pc DNA3.1(+)/Hsulf-1以及pc DNA3.1(+)/STAT3siRNA-Hsulf-1中的Hep G2细胞,Hsulf-1的蛋白表达量增加,p-STAT3和c-met的表达水平下降,在未转染组以及转染阴性siRNA的Hep G2细胞中,结论则相反。结论 Hsulf-1在肝癌细胞中表达下降;Hsulf-1在肝癌细胞中可抑制由HGF刺激的p-STAT3及下游蛋白的表达水平。     

七种人癌细胞系对冬凌草甲素的敏感性比较

采用体外集落培养技术测定剂量-存活率曲线,比较了七种常见肿瘤的人癌细胞系对冬凌草甲素的敏感性。除在肺鳞瘟LTEP-78仅测及肩段外,其他细胞的存活率曲线均为阈值指数型。对曲线参数的分析表明,食管唐CaES-17和胃腺癌MGc 80-3对冬凌草甲素最敏感。     

药物处置的体外模型--Caco2细胞系

口服药物的生物利用度被认为仅与胃肠道吸收和肝脏的首过代谢有关。然而随着对小肠生理功能认识的深化,已经了解小肠在药代动力学过程中不仅专司吸收,还在药物的代谢、转运和消除中发挥着重要作用。     

肝癌的导向药物治疗

肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一 ,肝癌与其他多数癌症相比 ,有几个“最”。一、最难发现 ,一旦扪到或感到不适 ,肿瘤往往已达８～９ｃｍ大小 ,达中、晚期 ;二、最难诊断 ,肝癌通常没有特异症状 ,直到７０年代 ,由于甲胎蛋白用于普查 ,通过大量手术验证 ,这才进入到“亚临床诊断”的早期诊断阶段 ;三、最难治疗 ,能够获得切除的病人不到５ %～１０ % ,且手术风险极大 ,６０年代 ,约２０ %的病人手术后１个月内死亡 ,切除后生存５年以上者不到１５ % ;四、发展最快 ,１９７３年有学者统计全国３２５４例肝癌病人 ,平均生存期仅５ ７个月 ;…     

Caco-2细胞系及其在药物吸收、代谢中的应用

由于小肠的生理结构适用于药物吸收 ,所以口服给药是最广泛、最方便的给药途径之一 ,因此研究药物在肠道的吸收与代谢就显得十分必要。目前用于药物吸收的实验方法主要有 :在体肠回流法 ,肠襻法 ,分离肠粘膜法、外翻囊法等 [1 ]。由于这些方法存在采用动脉组织及其它一些局限性 ,近年来人们尝试使用人肠细胞培养系统来研究药物在肠道的吸收和代谢 ,以快速筛选口服药物。Caco-2细胞模型被认为是目前最好的体外吸收模型 ,可用于快速评估新药的细胞渗透性、阐明药物转运的途径、评价提高膜通透性的方法、确定被动扩散的药物最合适的理化性质和…     

我院抗感染药物应用情况及病原菌药物敏感性分析

目的了解临床抗感染药物的使用及病原菌对抗感染药物的敏感性情况。方法收集2006年使用的抗感染药物的种类及数量、使用量占前10位的品种、革兰阳性菌（G^＋菌）和革兰阴性菌（G^-菌）的药物敏感试验数据。结果头孢菌素类、青霉素类、喹诺酮类为临床用量最大的抗感染药物，分别占27.66％，22．60％，15．38％；G^＋菌对青霉素G、哌拉西林的耐药率分别为83.33％和48．72％，对阿米卡星的耐药率最低，为40．54％；G^-菌对头孢哌酮、头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶、阿米卡星、左氧氟沙星的耐药率分别是22、51％，30．57％，30．94％，16．85％，9，40％，26．12％。结论临床应根据病原菌分布和药物敏感试验统计数据合理选用抗感染药物。