原发性与复发性成胶质细胞瘤中DNA错配修复蛋白、p53蛋白表达和DNA倍性的差异

目的探讨原发与复发性成胶质细胞瘤的临床病理特点和分子遗传学差异。方法应用免疫组化和流式细胞学方法对32例广东籍成胶质细胞瘤hMSH2，hMLH1和p53蛋白表达及DNA倍性进行检测，结合临床病理学资料，分析它们之间的相关性。结果32例成胶质细胞瘤患者的DNA倍性与p53的表达存在显著的相关性(P<0.05)，23例非整倍体DNA含量的肿瘤中，有20例(87.0％)出现p53蛋白的过度表达。在原发与复发性成胶质细胞瘤中，肿瘤的DNA含量和p53蛋白表达有显著的差异性(P<0.05)，复发性成胶质细胞瘤中，有87.5％(14/16)出现了p53蛋白的过度表达，93.8％(15/16)为非整倍体的DNA含量；而原发性成胶质细胞瘤，则有56.3％(9/16)呈p53表达正常表达，50.0％(8/16)是二倍体或近二倍体DNA含量。另外，丢失了hMSH2蛋白的2例成胶质细胞瘤，全部是复发性的肿瘤，均呈p53蛋白的过度表达和非整倍体的DNA含量。结论广东籍成胶质细胞瘤患者的发病年龄明显低于欧美人。绝大多数的复发性成胶质细胞瘤是沿染色体不稳定性(Chromosomal     

少突胶质细胞瘤临床病理特征及与GFAP、VIM、p53、Ki-67表达的相关性

目的:探讨少突胶质细胞瘤的临床病理分级及与GFAP、VIM、p53、Ki-67表达的相关性。方法:对170例术后病理诊断为少突胶质细胞瘤患者的肿瘤免疫组织化学病理进行回顾性分析,研究少突胶质细胞瘤GFAP、VIM、p53、Ki-67与临床病理特征之间的关系及它们之间的相关性。所有数据采用Excel软件录入,SPSS 17.0统计软件进行数据处理,卡方检验,P＜0.05认为差异具有统计学意义。结果:根据2007年WHO中枢神经系统分类标准:少突型53例,间变少突型43例,星形-少突型55例,间变星形-少突型19例。不同病理分级少突胶质细胞瘤GFAP（P=0.035）、p53（P=0.004）、Ki-67（P=0.000）的表达不同,可能与病理分级相关。VIM（P=0.967）与不同病理分级无关。结论:少突胶质细胞瘤的不同病理分型与p53、GFAP、Ki-67的阳性表达有关,GFAP阳性表达随着肿瘤级别的增加而减少;相反地,p53、Ki-67的阳性表达随着肿瘤级别的增加而增加。     

星形胶质细胞瘤的流式细胞和AgNORs计数分析

 本文应用流式细胞计和胶银染色法分析星形胶质细胞瘤50例的瘤细胞DNA含量、S期百分率和核仁组成区相关嗜银蛋白（AgNORs）。我们将肿瘤分为两类，即高分化性（相当于Ⅰ、Ⅱ级，HDG）24例；低分化性（相当于Ⅰ、Ⅳ级，PDG）26例。结果HDG的DNA含量、非整倍体率、S期百分率和AgNORs计数均低于PDG。经统计学处理两者有显著差异。患者术后放疗的总5年存活率为31.3%。本文提示星形胶质细胞瘤瘤细胞的DNA含量和AgNORs计数分析可作为传统病理诊断的辅助指标。     

MDM2、P53蛋白在星形细胞瘤中的表达

目的　探讨 MDM2、p5 3蛋白在星形细胞瘤发病中的作用及其与肿瘤病理分级、预后的关系。方法　对确诊并有随访的 36例星形细胞瘤标本用免疫组化技术 SABC法进行 MDM2、p5 3蛋白定位观察。结果　发现 MDM2及 p5 3蛋白表达阳性率分别为 44 .4% (16 / 36例 )和 38.9% (14/ 36例 ) ,其阳性率与年龄、性别无关 ,但与肿瘤病理分级呈显著正相关 (分别为 P<0 .0 5 ,P<0 .0 1)。在 36例星形细胞瘤中MDM2和 p5 3共同阳性表达 9例 (2 5 % ) ,这 9例与单独MDM2蛋白或 p5 3蛋白阳性表达病例及 MDM2和 p5 3蛋白表达均阴性病例的一年和三年存活率有显著差别 (分别为P<0 .0 5 ,P<0 .0 1)。结论　 MDM2、p5 3蛋白阳性检出率有助于判断星形细胞瘤的恶性程度及预测肿瘤的预后     

FCM对脑星形细胞瘤DNA含量和p53蛋白表达的测定及其相关性研究

应用流式细胞技术对３３例脑星形细胞瘤的ＤＮＡ含量和ｐ５３蛋白进行了检测，并对二者的关系及对预后的影响进行了探讨。结果显示：１）总的ＤＮＡ异倍体出现率为４２．４％（１４／３３），绝大多数为Ⅲ～Ⅳ级星形细胞瘤。２）Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ～Ⅳ级星形细胞瘤ｐ５３蛋白阳性表达率为２０％（２／１０）、６６．７％（６／９）、１００％（１４／１４）。结果表明：脑星形细胞瘤ＤＮＡ异倍体出现率、ｐ５３蛋白阳性表达与病理分级、肿瘤恶性程度呈正相关，ｐ５３蛋白阳性表达的异倍体肿瘤患者生存率最低，预后较差     

成胶质细胞瘤CAR-T免疫治疗的研究进展

[摘 要] 成胶质细胞瘤是发病率高、侵袭性强、预后差的中枢神经系恶性肿瘤。自2005年FDA批准的替莫唑胺后,再无明显改 善疗效的新策略。随着多形性成胶质细胞瘤（glioblastoma multiforme,GBM）分子生物学、肿瘤免疫学与免疫治疗技术的发展,以 及分子靶点的发现、中枢免疫“豁免”理论的突破和基因转导与细胞技术的进步,GBM治疗迎来了免疫治疗的新跨越。以嵌合抗 原受体修饰T细胞（chimeric antigen receptor-modified T cell, CAR-T）为代表的细胞免疫治疗,在靶向EGFRvⅢ、IL-13Rα2、HER2、 促红细胞生成素产生肝细胞受体A2 （erythropoietin-producing hepatocellular carcinoma A2,EphA2）的GBM体外实验、动物模型及 临床试验中都展示了良好的应用前景。然而,GBM的分子异质性、免疫抑制微环境、血脑屏障等为CAR-T进入一线治疗提出了 挑战。研究者们正在探索肿瘤恶性表型所必需的新靶点、防止免疫逃逸的最优靶抗原组合,致力于提高CAR-T血脑屏障穿越和 肿瘤组织侵润的能力,寻找最佳注射途径和治疗方案,同时逐步完善中枢神经肿瘤免疫治疗评估体系。相信CAR-T免疫治疗的 突破终将为GBM患者向往美好生活圆梦。     

散发性结直肠癌、腺瘤组织中hMLH1和突变型p53表达

[目的]探讨hMLH1和p53基因在散发性结直肠癌发生机制中所起的作用。[方法]采用PV-6000二步法免疫组化检测技术对60例散发性结直肠癌，45例大肠腺瘤和26例正常大肠黏膜石蜡切片进行hMLH1和p53表达的检测。[结果]（1）60例散发性结直肠癌hMLH1蛋白阴性表达和p53蛋白阳性表达分别为11例（18．3％）和32例（53.3％），hMLH1蛋白阴性表达和p53蛋白阳性表达与患者年龄、肿瘤部位、组织学类型和分化程度密切相关（P〈0．05或P〈0．01），而与患者性别、肿瘤大体类型、肿块大小、浸润深度、淋巴结及远处转移与否和患者的Duke’s分期均无显著相关性（P〉0．05）。（2）大肠腺瘤患者p53蛋白阳性表达与患者腺瘤部位、组织学类型和不典型增生程度密切相关（P〈0．05），而与患者性别、年龄无显著相关性（P〉0．05）。（3）散发性结直肠癌中hMLH1蛋白阴性表达组p53蛋白阳性表达率（18.2％，2/11）低于阳性表达组（61．2％，30／49）（P〈O．05）。[结论]（1）大部分散发性结直肠癌是沿染色体不稳定途径发生，其中抑癌基因p53的突变起重要作用。同时，一定比例的散发性结直肠癌中存在错配修复基因的缺陷，并具有相对特殊的临床病理特征。（2）大肠腺瘤组织中有一定比例的hMLH1蛋白阴性表达和p53蛋白阳性表达，提示hMLH1和p53基因的突变可能是散发性结直肠癌发生的早期事件之一。     

p53和p21在骨巨细胞瘤中的表达及临床意义

目的：探讨p53和p21在骨巨细胞瘤（GCT）的表达及与GCT病理分级和复发的关系。方法：应用SP免疫组织化学方法检测p53,p21在52例GCT中的表达。结果：52例样本中,P53和P21的是性表达率分别为26．9％（14／52）和13．5％（7／52）,两者与病理分级无关（P值分别为0．6999,0．658）,在复发病例中,P53和P21的阳性率分别为46．2％和20．5％,在无复发病例中两者分别为23．1％和10．3％,两者同时表达阳性的有2例,p53和p21同时过表达与GCT复发有显著相关性（P=0\042),结论：p53和p21在GCT中的表达与病理分级无关,与复发相关。     

星形胶质细胞瘤的流式细胞和AgNORs计数分析

本文应用流式细胞计和胶银染色法分析星形胶质细胞瘤50例的瘤细胞DNA含量、S期百分率和核仁组成区相关嗜银蛋白(AgNORs)。我们将肿瘤分为两类,即高分化性(相当于Ⅰ、Ⅱ级,HDG)24例;低分化性(相当于Ⅰ、Ⅳ级,PDG)26例。结果HDG的DNA含量、非整倍体率、S期百分率和AgNORs计数均低于PDG。经统计学处理两者有显著差异。患者术后放疗的总5年存活率为31.3％。本文提示星形胶质细胞瘤瘤细胞的DNA含量和AgNORs计数分析可作为传统病理诊断的辅助指标。     

原发性和继发性胶质母细胞瘤中p53 、p16 和Rb 的表达及意义

 目的 探讨p53、p16和Rb基因在原发性和继发性GBM中的表达差异性及意义。方法 应用RT—PCR和Western-blot检测14例原发性和16例继发性GBM中p53，p16mRNA和蛋白表达，免疫组织化学法检测Rb表达。结果 Rb免疫组织化学染色显示正常脑组织中无表达，14例原发GBM中有3例表达缺失（21．4％），16例继发GBM中有2例表达缺失（11．1％）。RT-PCR和Westernblot对比原发和继发GBM中p53和p16的表达，发现所有继发GBM中p53表达强度较原发GBM明显增加，14例原发GBM中有5例缺失（36．（1％），继发GBM中仅有1例表达缺失（6．25％）。p16表达缺失明显减少。结论 Rb的表达缺失在原发和继发GBM中没有明显的差异。细胞周期调节基因p53在mRNA和蛋白水平表达增加和p16在同样水平表达缺失是原发与继发GBM重要的细胞周期调控基因上的变化，可能是基因治疗GBM的重要靶点之一。     

原发性与继发性胶质母细胞瘤中MGMT与突变型P53蛋白表达的差异及其生物学意义

背景与目的： 探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanina-DNA methyltransferase, MGMT)与突变型P53蛋白在原发性与继发性胶质母细胞瘤(glioblastoma, GBM)中表达的差异性及其生物学意义。 材料与方法： 应用免疫组织化学法检测39例GBM(原发性组13例和继发性组26例)中MGMT与突变型P53蛋白的表达,比较两者在原发性与继发性GBM中的表达差异;分析MGMT与突变型 P53蛋白表达的相关性及其与预后的关系。 结果： 原发性和继发性GBM间突变型 P53蛋白的阳性表达率和表达强度差异均有统计学意义(P均<0.01)。继发性GBM中MGMT的阳性表达强度降低而突变型 P53蛋白的表达强度明显增强(P<0.01),两者表达呈负相关(r=-0.602,P<0.01)。原发性GBM中MGMT的表达与突变型 P53蛋白的表达无关(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示：原发性GBM和MGMT高表达患者的生存时间缩短(Log-rank检验,P<0.05或P<0.01)。Cox多因素相关分析表明GBM的分型和MGMT的阳性表达是影响患者生存期的独立预后因素(分别为P<0.05和P<0.01)。 结论: P53基因突变是继发性GBM的发生过程中的高发事件,突变型P53蛋白的表达强度增强与MGMT表达减弱有关。而原发性GBM中MGMT的表达与突变型 P53蛋白的表达无关。提示原发性和继发性GBM在发生、发展的过程中有着不同的分子遗传学途径。GBM的分型、MGMT的阳性表达是影响GBM患者生存期的独立预后因素。     

子宫颈癌错配修复基因产物与p53表达

[目的]探讨子宫颈癌中错配修复基因表达产物对抑癌基因p53表达的影响.[方法]30例子宫颈炎标本及70例子宫颈鳞癌标本采用免疫组织化学S-P法检测hMLH1、hMSH2与p53的表达.[结果]子宫颈炎与子宫颈鳞癌组织hMLH1阳性表达率分别为60.0%（18/30）与55.7%（39/70）;hMSH2阳性表达率分别为23.3%（7/30）与57.1%（40/70）;p53表达率分别为33.3%（10/30）与61.4%（43/70）.p53表达阳性和阴性组的子宫颈癌hMLH1阳性表达率分别为46.5%（20/43）与40.7%（11/27）,两者无相关性（rs=0.057,P=0.645）;hMSH2阳性表达率分别为41.9%（18/43）与18.5%（5/27）,两者存在显著相关性（rs=0.242,P=0.044）.[结论]子宫颈炎向宫颈癌的发展中碱基错配逐渐增多,hMSH2蛋白的高表达与p53的低表达对宫颈癌的预后具有一定的预测作用.     

非小细胞肺癌患者DNA修复基因XPD多态性与p53基因突变的相关性研究

[目的]研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者DNA修复基因XPD多态性与p53基因突变的相关性。[方法]以PCR-RFLP方法分析60例NSCLC患者外周血XPD基因Lys751Gln多态;运用PCR-SCCP银染结合DNA序列分析法检测癌组织p53基因第5、6、7和8外显子突变情况。[结果]19例患者至少携带1个XPD751Gln等位基因;25例发生p53基因突变,突变率为42%;携带至少1个XPD751Gln等位基因的患者中p53基因突变率为52.6%,XPD751野生基因型中突变率为36.6%(P=0.27)。所有p53基因突变患者DNA序列分析结果显示,颠换27个,转换12个;突变类型分析显示,携带至少1个XPD751Gln等位基因的患者颠换发生明显占优势,颠换∶转换为14∶2,XPD751野生基因型颠换∶转换为13∶10(P=0.08)。[结论]NSCLC患者中DNA修复基因XPD多态性与p53基因突变发生无明显相关性。     

错配修复蛋白表达与胃肠道癌对化疗药物耐药性的关系

目的探讨胃肠道癌组织错配修复蛋白表达与其对化疗药物耐药性产生的关系。方法免疫组织(细胞)化学方法检测5例胃癌、18例大肠癌及相应癌旁组织和胃癌细胞株BGC823及其耐药株BGC823/cDDP错配修复蛋白表达情况;MTT法检测癌组织及上述2种细胞株对顺铂、5-Fu、长春新碱、丝裂霉素的耐受性。结果癌组织hMSH2蛋白阳性表达率(74%)与癌旁组织(59%)无显著差别,且在两组表达有显著相关性;癌组织hMLH1蛋白阳性表达率(57%)显著高于癌旁组织(23%)。对5-Fu高度耐药的癌组织错配修复蛋白表达率显著低于中度耐药和不耐药组;癌组织对其他药物耐受程度与错配修复蛋白表达间未见显著相关关系。耐药株hMSH2蛋白表达强度明显弱于亲本株(BGC823),hMLH1蛋白表达强度在2种细胞株无明显差异。耐药株较亲本株对cDDP、5-Fu和VCR耐药性均有增加,耐药指数分别为3.93、1.87和2.03。结论错配修复系统功能状态可能与个体遗传背景有关;其蛋白表达下调参与胃肠道癌对5-Fu的原发耐药机制和胃肠道癌细胞多药耐药性的产生。     

胃癌及胃粘膜非典型增生组织p21ras表达与DNA倍体关系的探讨

用免疫组化和自动图像分析方法检测２７例胃癌、２２例非典型增生和９例正常胃粘膜组织中ｐ２１ｒａｓ表达及ＤＮＡ倍体分布类型，发现胃粘膜非典型增生组织中ｐ２１ｒａｓ阳性率最高。２７例胃癌组织中，ＤＮＡ倍体分布类型属Ⅰ型、Ⅱ型及Ⅲ型的ｐ２１ｒａｓ阳性率分别为８３．３％、６６．７％及３３．３％。表明胃癌组织ｐ２１ｒａｓ表达水平随ＤＮＡ含量不断增多，随倍体成倍增加而逐渐下降，明显低于非典型增生组织，提示ｐ２１ｒａｓ过度表达主要出现在细胞表型发生明显转化之前。     

人脑胶质瘤p53基因突变及MDM2、p16、p53蛋白表达与临床病理特征相关性研究

目的:探讨p53突变在人脑胶质瘤发生发展中的作用及p53蛋白蓄积与突变的符合程度,并研究MDM2、p16、p53蛋白表达与胶质瘤临床病理特征的关系以及三者的相关性。方法:利用聚合酶链反应-单链构象多态性分析法(PCR-SSCP)及LSAB免疫组化法对已明确诊断的48例人脑胶质瘤进行p53基因突变以及MDM2、p16、p53蛋白表达的检测。结果:48例胶质瘤中20例p53蛋白呈阳性表达(41.7%)。PCR-SSCP检测发现17例(35.4%)呈现p53基因的单链构象多态性改变,均位于5～8外显子,突变例数依次为7(41.2%)、1(5.9%)、4(23.5%)、5(29.4%)。两种方法检测的符合率为89.6%(43/48)。MDM2、p53蛋白阳性率分别为22.9%、41.7%,p16表达缺失率为60.4%。在高级别(Ⅲ、Ⅳ级)的肿瘤中p53表达率及p16表达缺失率分别为63.2%、84.2%,均明显高于低级别(Ⅱ级)的肿瘤(分别为27.6%、44.8%)(P<0.05)。在不同分级的胶质瘤中,MDM2表达率及阳性程度没有显著差异。在p53阳性表达的病例中常伴有p16的表达缺失(57.6%),而且大多出现在Ⅲ、Ⅳ级肿瘤中(9/12)。p53突变、三种分子的表达均与患者的年龄、性别、肿瘤的大小及发病部位无相关性。结论:胶质瘤中p53基因的突变与胶质瘤的发生及恶性进展相关,p53蛋白蓄积与突变率较一致。MDM2基因异常参与胶质瘤的发生,是其形成的早期事件;p16、p53在胶质瘤中的异常表达与肿瘤的分化程度相关。     

DNA Mismatch Repair and Lynch Syndrome

Purpose of Review

This review will discuss the genetic basis and epidemiology of Lynch syndrome, review Lynch Syndrome colorectal cancer screening guidelines, and summarize the screening guidelines pertaining to other cancers that are associated with Lynch syndrome.

Recent Findings

All colorectal tumors should be universally tested for microsatellite instability (MSI) changes regardless of the age of the patient. Genetic testing of family members of patients with Lynch syndrome has significant cost effectiveness implications. Polyethylene glycol bowel preparation and chromocolonoscopy improve screening exams. Aspirin use is associated with decreased colorectal cancer risk. Phosphodiesterase-1 (PD-1) inhibitor immunotherapy is effective treatment in mismatch repair (MMR) deficiency tumors.

Summary

Lynch syndrome should be suspected if patients with malignancies exhibit diagnostic criteria and these tumors should be tested for MMR deficiencies. Colonoscopy is used for surveillance of colorectal cancers in Lynch syndrome, and bowel preparation quality and colonoscopy techniques are important factors contributing to efficacy. Clinicians should be aware of screening modalities for extracolonic cancers including upper endoscopy, regular transvaginal ultrasound with endometrial sampling, and urinalysis.

     

乳腺癌组织中PCNA、bcl-2与p53基因蛋白表达

[目的]探讨乳腺癌、癌旁和正常乳腺组织中PCNA、bcl-2与p53基因蛋白表达的差异及其在乳腺癌变中的意义。[方法]用免疫组化法检测46例乳腺癌、癌旁组织和33例正常乳腺组织中PCNA、bcl-2与p53基因蛋白表达。[结果]①PCNA指数:乳腺癌与癌旁组织差异无显著性;乳腺癌和正常乳腺组织(46.03±8.76与32.13±6.78),乳腺癌旁和正常乳腺组织(42.90±7.92与32.13±6.78)差异均有显著性(P<0.01)。②bcl-2基因蛋白表达分值:乳腺癌、癌旁和正常乳腺组织分别为:0.62±0.47,0.91±0.58,1.56±0.84;分值大小顺序呈表达上升趋势。③p53基因蛋白表达分值:乳腺癌、癌旁组织和正常乳腺组织分别为:2.21±0.96,1.86±0.87,0.87±0.57;分值大小顺序表达呈下降趋势。④在乳腺癌组织PCNA指数与bcl-2呈中度负相关(rs=-0.537),与p53呈中度正相关(rs=0.628),bcl-2与p53呈中度负相关(rs=-0.476)。[结论]乳腺癌的发生、发展过程中PCNA和p53分值增大,bcl-2分值变小,预示组织恶性程度可能增加,对判定乳腺组织的良、恶性及预后具有重要临床价值。