急性高原低氧对大鼠海马神经细胞形态结构的影响

目的观察急性高原低氧大鼠海马神经细胞的超微结构变化,为探讨高原低氧对大鼠海马神经细胞形态和功能的影响提供形态学依据。方法将平原SD大鼠运至高原(4000m),在第7天取大鼠海马,常规电镜方法染色,观察海马神经细胞形态结构。结果电镜下急性高原组大鼠海马区神经细胞的形态和胞浆内的细胞器与平原组相比存在不同。结论急性高原低氧环境对大鼠海马神经细胞形态结构存在一定影响。     

急性高原低氧大鼠海马BDNF的表达

目的通过对平原组、急性高原组大鼠海马脑源性神经营养因子（BDNF）表达的研究，探讨高原低氧对大鼠脑海马神经细胞的损伤机制。方法应用免疫组织化学方法结合图像分析技术对两组大鼠海马BDNF表达进行定性、定量分析。结果急性高原组大鼠海马CA1、CA3区神经元BDNF阳性表达含量比平原组大鼠分别增高23．5％、24．1％。结论急性高原组大鼠海马CA1、CA3区神经元BDNF阳性表达发生明显变化，其含量升高，提示BDNF在避免急性高原低氧对大鼠海马CA1、CA3区神经元应激损伤中可能起重要作用。     

高原低氧应激诱导大鼠海马神经元凋亡

目的观察高原低氧应激对大鼠海马神经元凋亡的影响。方法将Wistar大鼠随机分为三组：即平原对照组（山东菏泽,海拔50米）,高原实验Ⅰ组（青海玉树结古镇,海拔3700米）,高原实验Ⅱ组（青海玉树治多县,海拔4950 m）。在不同海拔高度生活4天后,取大鼠海马,应用流式细胞仪检测海马神经元凋亡率。结果暴露于高原组的大鼠海马神经元凋亡率明显高于平原对照组,且随海拔的增加而明显升高。结论高原低氧应激诱导海马神经元凋亡。     

模拟高原低氧应激对大鼠海马单胺递质代谢的影响

目的探讨模拟高原低氧应激对大鼠海马细胞外液中单胺递质及其代谢产物的影响。方法雄性SD大鼠分为低氧应激组和正常对照组(每组各8只)。将低氧应激组动物置于模拟海拔6000m低压舱内24h后,采用推挽灌流方法收集海马细胞外液,高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)测定灌流液中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、3-甲氧4羟苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量,并采用放射免疫法测定血浆皮质酮(CORT)水平。结果与正常对照组比较,低压舱内处理后大鼠血浆皮质酮水平[(2.59±0.59)μg/ml]显著高于对照组[(0.84±0.29)μg/ml](P<0.01);海马细胞外液中NE水平[(813.77±196.14)pg/50μl]显著低于对照组[(1209.20±282.01)pg/50μl](P<0.01),5-HT水平[(82.65±26.35)pg/50μl]显著高于对照组[(53.35±27.88)pg/50μl](P<0.05),DOPAC、HVA和5-HIAA水平均显著低于对照组(P<0.05、0.01和0.05)。结论模拟高原低氧应激显著影响大鼠海马单胺递质代谢。     

阿糖胞苷对新生Wistar大鼠海马神经细胞体外培养的影响

目的探讨阿糖胞苷对新生大鼠海马神经细胞培养的影响作用。方法利用高糖DMEM常规培养神经细胞，在不同的培养时间(0d，1d，3d，5d，7d)分别加入一定量(0．8μg/ml)的阿糖胞苷以及在培养一定时间(5d)时加入不同剂量的阿糖胞苷(0μg/ml，0．4μg/ml，0．8μg/ml，1．6μg/ml，3．21μg/ml)。结果一定浓度的阿糖胞苷对神经细胞生长有促进作用，对胶质细胞的生长有抑制作用。结论阿糖胞苷对神经细胞的抑制表现出时间依赖性和剂量依赖性，在诱导剂量下，可诱导神经细胞的分化增殖。     

模拟高原低氧应激对大鼠海马单胺递质代谢的影响

目的探讨模拟高原低氧应激对大鼠海马细胞外液中单胺递质及其代谢产物的影响.方法雄性SD大鼠分为低氧应激组和正常对照组(每组各8只).将低氧应激组动物置于模拟海拔6000m低压舱内24h后,采用推挽灌流方法收集海马细胞外液,高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)测定灌流液中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、3-甲氧4羟苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量,并采用放射免疫法测定血浆皮质酮(CORT)水平.结果与正常对照组比较,低压舱内处理后大鼠血浆皮质酮水平[(2.59±0.59)μg/ml]显著高于对照组[(0.84±0.29)μg/ml](P＜0.01);海马细胞外液中NE水平[(813.77±196.14)pg/50μl]显著低于对照组[(1209.20±282.01)pg/50μl](P＜0.01),5-HT水平[(82.65±26.35)pg/50μl]显著高于对照组[(53.35±27.88)pg/50μl](P＜0.05),DOPAC、HVA和5-HIAA水平均显著低于对照组(P＜0.05、0.01和0.05).结论模拟高原低氧应激显著影响大鼠海马单胺递质代谢.     

电镜测定神经细胞钙离子分布

1　材料和方法1 .1　材料　选用健康成年 SD雌性大鼠 75只 ,随机分为正常组、对照组、实验组 .实验组动物放入次声压力仓内 ,采用次声测量系统施以 1 6 Hz,90 d B,1 30 d B的次声作用 1 ,7,1 4 ,2 1次 ,共 8组 ,次声作用均为每次 2 h,1次· d-1 .对照组动物放入次声压力仓内不施加次声作用 ,放置时间及次数和观察时间点同实验组 .1 .2　方法　各组分别于次声作用后 0 .5,1 2 h后以 2 0 g·L-1戊巴比妥钠 ip麻醉后 ,迅速取出下丘脑组织 ,切成 1 m3小块 ,置入 30 ml· L-1戊二醛 - 90 mml· L-1草酸钾溶液中固定 2 h.经 75g· L-1蔗糖 90 …     

NCAM在不同海拔大鼠脑海马区的表达

目的观察不同海拔下大鼠海马区NCAM的表达变化,探讨NCAM在机体对低氧应激反应中的作用,以及在低氧条件下NCAM对大鼠海马神经细胞形态和功能的影响。方法将平原SD大鼠运至海拔(4100米)地区,在第7天取大鼠海马,用常规电镜方法进行染色,观察高原环境下NCAM的表达变化。结果NCAM在不同海拔大鼠海马CA2区和CA3区神经细胞的胞膜上的量随海拔的升高而降低。结论高原低氧环境对大鼠海马区NCAM的表达有一定影响,揭示NCAM是参与高原低氧应激反应的重要生理和病理体液因子,提出在高原环境下NCAM对神经系统细胞的发育以及功能的维持有重要作用。     

低氧预适应血管内皮细胞增加神经细胞低氧耐受

目的:研究经低氧预适应处理的血管内皮细胞分泌的物质对神经细胞低氧耐受的影响.方法:分别将人微血管内皮细胞(HMEC-1)经过低氧预适应(HPC)处理及正常培养,分离其培养基并通过滤膜过滤.人神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y)细胞分为低氧预适应组(HPC组)、培养基对照组(Medium-C组)和空白对照组(SY5Y-C组),三组细胞分别加入经HPC的HMEC-1细胞的培养基、正常培养HMEC-1细胞的培养基和正常培养SH-SY5Y细胞的培养基.随后三个组细胞均给予低氧处理.使用MTS法检测神经细胞活力,Western Blot检测caspase-3蛋白表达水平.结果:SY5Y-C组、Medium-C组和HPC组的细胞活力分别是(0.9967±0.0033)、(1.0751±0.0447)和(1.4737±0.0325),HPC组细胞活力显著增加(P<0.05);三个组caspase-3蛋白表达的相对丰度分别是(0.9950±0.0050)、(0.9893±0.0787)、(0.8180±0.0361),HPC组细胞的caspase-3蛋白表达显著受到抑制(P<0.05).结论:内皮细胞在经过低氧预适应处理后分泌的物质可以增加神经细胞的低氧耐受.     

西红花苷对高海拔低氧条件下大鼠脑海马IGF-1表达的影响

目的研究西红花苷提前用药对高海拔低氧条件下大鼠海马胰岛素样生长因子1(IGF-1)表达的影响。方法 224只SD大鼠,随机分为对照组和用药组。用药组每天肌肉注射西红花苷1次(50mg/Kg),对照组每天肌肉注射相同剂量的0.9%Nacl,连续给药3天后运至高海拔低氧环境,在第1、3、5、7天观察取材。通过Morris水迷宫观察大鼠学习记忆行为,通过免疫组织化学方法检测IGF-1的蛋白水平,通过RT-PCR方法检测IGF-1的mRNA水平。结果与对照组相比,用药组大鼠在Morris水迷宫实验中的寻台潜伏期在第1、3、5天明显缩短(P<0.05)。免疫组织化学法结果显示,用药组各组大鼠海马的IGF-1蛋白表达水平均高于对照组,其中以第1、3天最为明显(P<0.01)。RT-PCR法检测显示用药组各组大鼠海马的IGF-1 mRNA水平均高于对照组,其中以第1、3天最为明显(P<0.05)。结论西红花苷提前干预给药,可以提高高海拔低氧条件下大鼠海马IGF-1的表达量,同时能够改善高海拔低氧条件下大鼠学习记忆能力,其机制可能是通过调节IGF-1表达水平实现。     

高原低氧环境下大鼠肾脏血红素氧合酶-1的表达及意义

目的研究高原低氧环境下大鼠肾脏血红素氧合酶-1（HO-1）mRNA及蛋白的表达、分布及活性变化情况。方法将60只雄性Wistar大鼠随机分为高原组（50只,海拔4600m）和对照组（10只,海拔1500m）,高原组又分为1、3、7、14、21d组（每组均为10只大鼠）。用Westernblot法、RT-PCR及免疫组化染色标记法检测HO-1基因及蛋白的表达及分布情况。结果与对照组比较,高原组HO-1mRNA在第一天就呈现表达上升（0.75±0.10,P〈0.05）,在第三天时达峰值（0.94±0.07,P〈0.05）,差异有统计学意义,以后逐渐下降,直至接近于对照组。HO-1蛋白在大鼠到达高原时即呈现表达升高（0.35±0.03）,7d时达高峰（0.68±0.03,P〈0.05）,差异有统计学意义,以后逐渐下降,直至接近对照组。结论在高原低氧环境下,大鼠肾脏HO-1mRNA及蛋白的表达会随时间发生改变,在缺氧早期呈上升趋势,后逐渐下降到正常水平,其改变可能与机体对缺氧的耐受性及对高原低氧产生习服有关。     

针刺预处理促进急性低氧大鼠海马腺苷A1受体表达及神经元的保护作用

目的通过针刺预处理来保护急性低氧对大鼠海马神经元的损伤作用及腺苷A1受体的表达。方法将45只SD大鼠随机分成常氧对照组、低氧组、针刺组。低氧组、针刺组（放入低氧舱之前先针刺30min）动物置于低氧舱,吸入15％的O2,30min后处死;对照组动物于常氧下处死。三组均测定海马腺苷A1受体表达水平,并对不同组大鼠海马神经细胞进行形态学观察。结果低氧组海马组织形态学显示神经元有明显的胞浆空染、核固缩现象,针刺组与正常对照组神经元无明显的胞浆空染现象;腺苷A1受体表达水平在低氧组明显降低,在针刺组显著增多,与低氧组相比有显著性差异（P〈0．01）。结论针刺具有保护急性低氧对大鼠海马神经细胞损伤的作用,而这种保护作用与脑组织中腺苷A1受体表达上调有关。     

复方丹参滴丸对大鼠高原低氧组织病理损害的干预作用

目的探讨复方丹参滴丸(DSP)对高原低氧多器官组织病理改变的影响。方法将平原大鼠运入高原(海拔5000m),随机分为DSP干预组(7只)和对照组(7只),实验20天后全部处死,取出心、肝、脾、肺、肾、脑组织用光电镜观察。结果与对照组比较,DSP干预组大鼠的组织病理改变明显轻微。结论DSP能预防、改善细胞的低氧性水肿、变性、坏死等损伤,是高原自然环境条件下比较特异的低氧性器官组织损伤的保护剂。     

大鼠心肌急性高原性损伤特征的形态学观察

本实验将大鼠由近海平面区在10天内携往高原,通过对其心脏标本的光,电镜观察,提出以(1)右心室为主的全心性损伤(2)心肌细胞混浊肿胀,空泡变性,溶解坏死,间质水肿及(3)心肌细胞膜系统改变,收缩成份破坏,细胞内外水肿和糖元颗粒减少等分别为急性高原性大鼠心肌损伤的组织学及超微结构特征。     

急性高原低氧对小鼠学习记忆及海马CA1区PKA、CREB表达的影响

目的 初步探讨急性高原低氧对小鼠学习记忆能力以及海马CA1区PKA、CREB表达的影响.方法 将小鼠随机分为两组：高海拔对照组（青海省西宁地区,海拔2361米）、急性高原组（青海省果洛州花石峡地区,海拔4300米）.两组小鼠在不同海拔均喂养5天后,应用跳台实验观察小鼠训练时的潜伏期及错误次数,评估急性高原低氧对小鼠学习记忆能力的影响;两组小鼠在不同海拔均喂养8天后断头取脑,通过免疫组织化学法半定量观察海马区环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（cAMP response element—binding protein,CREB）、蛋白激酶A（PKA）的表达.结果 急性高原组跳台实验潜伏期显著短于高海拔对照组（P＜0.05）,且错误次数显著增多（P＜0.05）;CREB及PKA主要在海马CA1区表达,且急性高原组表达量明显低于高海拔对照组（P＜0.05）.结论 急性高原低氧可能使小鼠学习记忆能力下降,其作用机制可能与CREB、PKA表达降低导致cAMP-PKA-CREB通路障碍有关.