DNA甲基化与胃癌的关系研究

基因的表观遗传学修饰是一种不依赖DNA序列改变的可逆的基因表达调控过程。主要包括DNA甲基化与去甲基化,这些可逆的表观遗传学修饰可以方便地关闭和开放某些特定基因,有选择性表达基因组的信息,在维持染色体结构的稳定、基因组的完整、组织特异性基因的表达调节、细胞分化和个体成长等过程中发挥着至关重要的作用,而DNA的甲基化与胃癌的关系日益受到重视,为胃癌的诊断和治疗提供了新的途径。这些分子病理基础研究的不断深入使我们更好地理解发病机制,进而能够为临床治疗提供更好的借鉴价值。     

胃癌组织中肿瘤相关基因甲基化及其表达与叶酸和代谢酶MTHFR基因多态性的关系

目的:探讨人胃癌组织中癌基c-myc,抑癌基因p16INK4A,p21WAF1,错配修复基NhMLH1和hM2SH2的甲基化状态及其表达与叶酸、MTHFR基因多态性的关系．方法:胃癌38例手术切除标本的癌区、癌旁和外周正常黏膜组织,运用FOL ACS:180自动化学发光系统测定叶酸含量,PCR-RFLP技术检测MTHFR基因677(C→T)和1298(A→C)两个常见多态,并分别以Real—time RT-PCR和甲基化特异性PCR (MSP)技术检测肿瘤相关基因的表达和甲基化状态．结果:c-myc表达升高,p16INK4A,hMLH1和hMSH2表达降低的胃癌黏膜组织其基因启动子区异常甲基化．p21WAF1,hMSH2表达降低, p16INK4A高甲基化者叶酸水平明显降低,c-myc低甲基化和表达升高者中均存在低叶酸水平．MTHFR 677CC基因型的胃癌黏膜组织p16INK4A甲基化升高且表达降低,而其余肿瘤相关基因的甲基化及其表达与MTHFR两个常见多态均无明显相关性．结论:DNA甲基化在胃癌的发生、发展中具有重要作用,叶酸水平和MTHFR基因多态性通过影响部分肿瘤相关基因的甲基化状态而调控其表达．     

叶酸对胃癌细胞生物学特征以及alkB基因表达的影响

背景:抑癌基因启动子区DNA超甲基化是胃癌发生的重要机制之一。alkB基因可修复甲基化损伤,而叶酸对胃癌的发生起有预防作用;但叶酸的作用是否与alkB基因表达相关尚不清楚。目的:探讨叶酸对胃癌细胞生物学特征以及alkB基因表达的影响。方法:培养人胃癌细胞株SGC7901,分别以0mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L、0.8mg/L、1.0mg/L和2.0mg/L浓度叶酸进行干预。以CCK-8法检测细胞增殖活力,流式细胞术分析细胞周期,实时定量RT-PCR法检测alkB基因mRNA表达。结果:与空白对照组相比,0.2mg/L、0.4mg/L浓度叶酸能明显抑制胃癌细胞增殖活力,G0/G1期细胞百分比显著减少;alkB基因mRNA表达明显上调。结论:叶酸干预可抑制胃癌细胞增殖,同时上调alkB基因表达,推测alkB基因表达改变或许参与叶酸抑制胃癌细胞增殖的作用机制。     

胃癌前病变中DNA甲基化状态与叶酸

DNA甲基化异常是胃癌发生的重要机制之一,为了能尽早发现并纠正DNA甲基化异常,阻止胃癌的发生,胃黏膜癌前病变中DNA甲基化状态的研究日益受到重视．众多研究表明,胃黏膜癌前病变中多种基因中存在甲基化异常,而且基因的甲基化异常程度与年龄、性别有关,还与胃黏膜上皮细胞是否存在活动性炎症、肠化及幽门螺杆菌感染有关．叶酸缺乏可导致DNA甲基化的紊乱和DNA修复机制效率的减弱, 叶酸摄入量不足患胃癌的相对危险度增高;胃黏膜癌前病变患者体内叶酸不足,黏膜细胞总基因组DNA甲基化水平下降;经叶酸治疗后,体内叶酸升高,黏膜细胞总基因组DNA 甲基化水平上升,异型增生、肠上皮化生明显改善．因此,叶酸缺乏与胃黏膜癌前病变的发生、发展有关,及时纠正叶酸不足,可逆转胃黏膜的病理改变,减少胃癌的发生．     

叶酸对胃癌细胞凋亡的影响

目的胃癌的发生与发展中有细胞凋亡的变化,叶酸抗肿瘤的机理涉及到维持ＤＮＡ甲基化水平等,其与凋亡的关系尚未明了。方法以高低两种浓度的叶酸干预培养的人胃癌ＭＫＮ－４５和ＭＫＮ－２８细胞系７２小时后,以原位ＤＮＡ断端切口标记法和ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳检测凋亡形态学改变和ＤＮＡ断裂情况。结果未加干预者两种细胞系的凋亡指数均低于５％,不同分化细胞系间比较差异无显著性;低浓度叶酸可诱导ＭＫＮ－４５细胞凋亡,而高浓度者使ＭＫＮ－２８细胞凋亡率增加。结论胃癌细胞自然凋亡率较低。叶酸干预可影响凋亡的发生。     

叶酸与肝癌发生发展的关系

迄今为止,肝癌仍是我国高发、恶性程度极高的肿瘤,严重影响我国人民的生命和健康。以往研究发现,肝癌的发生与病毒、吸烟、饮酒及非酒精性脂肪性肝病等诸多因素相关。随着不断探索,越来越多的研究指出,营养因素及生活环境与肝癌的发生发展相关。叶酸作为机体细胞生长和繁殖所必需的营养物质,其在人体内的水平高低均对肿瘤细胞的生长产生影响,与肝癌的关系密不可分。本文对近年来叶酸与肝癌之间关系的研究进展予以综述,以期为肝癌的预防和治疗提供新的参考和依据。     

DNA Methylation and Folate Metabolism in Stomach Cancer

Increasing interest in theanalogues or antagonists inapplication of gut peptide the diagnosis and treatmentof colorectal cancer necessitates a better insight and characterization of receptors for gut peptides in the development and metastasis of colorectal cancer. This study visualized and characterized the receptors for vasoactive intestinal peptide, secretin and somatostatin in the development and metastasis of colorectal cancer with storage phosphor autoradiography. Receptors for these three peptides were demonstrated in tumor-free colon and colon tumors. A decrease in affinity of vasoactive intestinal peptide receptors was shown in the sequence from tumor-free colon (Kd=0.93nmol),     

胃癌组织中叶酸水平与代谢酶亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性的关系研究

目的探讨人胃癌组织中叶酸水平与代谢酶亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性的变化及其关系。方法收集38例晚期胃癌患者的癌区、癌旁和外周正常区域组织标本,以自动化学发光系统测定人胃癌组织叶酸含量,PCR-限制性内切酶片段长度多态性技术检测MTHFR基因677(C→T)和1298(A→C)两个常见多态,并以34例慢性浅表性胃炎(CSG)组织作为对照,分析叶酸、MTHFR基因多态性的变化及其关系。结果CSG对照组中叶酸含量[(5.48±2.15)ng/ml]明显高于胃癌组织[癌区(3.65±1.97)ng/ml,癌旁(4.01±2.11)ng/ml,外周正常组织(4.00±2.20)ng/ml],胃癌组织MTHFR基因的两个多态位点中,677CT基因型叶酸含量最高,而1298(A→C)多态则未见明显差异。677TT基因型与CC基因型相比有减少胃癌发生的趋势,但与其生物学行为关系不密切。677TT基因型高叶酸组与CC基因型低叶酸组相比发生胃癌的相对风险度为0.11(95%CI:0.01~1.02)。癌组织标本检测中未发现1298CC基因型。结论组织叶酸含量降低者发生胃癌风险明显增加。MTHFR基因多态性并不是胃癌的一个孤立危险因素,它和组织叶酸含量共同作用于胃癌发生。     

DNA甲基化与胃癌的研究进展

DNA甲基化引起的基因表达沉默是导致胃癌发生的重要途径之一。过度甲基化可能是由于DNA甲基转移酶的过表达或是去甲基化活动的减弱所引起的,具体机制并未完全阐明。有研究发现,在胃癌组织中有许多基因启动子区发生了甲基化。此文对于近年来DNA甲基化与胃癌的研究进展作一综述。     

叶酸治疗萎缩性胃炎并干预胃癌生成的分子生物学机制

目的：研究萎缩性胃炎患者血清叶酸水平与胃粘膜病变及某些基因变化的关系。方法：胃镜及胃粘膜活检确诊为中度以上的萎缩性胃炎患者80例，测定其基础状态及服用叶酸1年后的血清叶酸水平、粘膜病理及p53、p16 、Fas和增殖细胞核抗原（PCNA）基因表达水平。结果：①血清叶酸水平与萎缩及异型增生负相关显著（P＝001，P＝0．053）,与Fas表达负相关趋向显著；②随机叶酸水平上升，萎缩肌肠化呈减轻趋势，高水平时达到显著（P＝0．001，P＝0．052），并伴p53表达下调（P＝0．056）；③服用叶酸 大幅度提高其血清水平者，呈现异型增生明显减轻（P＝066），并伴Fas及PCNA基因表达的明显下调（P＝0．007，P＝0．083）。结论：补充叶酸可以影响胃粘膜基因调节，减轻损伤，抑制增殖，使萎缩、肠化及异型增生明显改善，从而阻断胃癌前病变的进展。因此，叶酸可以治疗萎缩性胃炎并干预胃癌的发生。     

罗非昔布和叶酸对甲基硝基亚硝基胍诱发大鼠胃恶性肿瘤的化学预防作用

背景流行病学和实验研究均证实,非甾体抗炎药(NSAIDs)对消化道肿瘤具有化学预防作用,但对胃癌的化学预防作用研究尚少.叶酸缺乏及其所引起的DNA低甲基化与消化道肿瘤的发生有关,补充高剂量叶酸可干预胃癌的发生.目的探讨选择性COX-2抑制剂罗非昔布和叶酸对甲基硝基亚硝基胍(MNNG)诱发的Wistar大鼠胃恶性肿瘤的化学预防作用.方法80只雄性Wistar大鼠随机分为5组(每组16只).对照组予自由饮用纯水,喂饲标准饲料;MNNG致癌剂组予自由饮用MNNG溶液(100mg/L),喂饲标准饲料;低剂量罗非昔布干预组每天灌喂罗非昔布5 mg/kg(溶于蒸馏水中),同时给予MNNG溶液和标准饲料;高剂量罗非昔布干预组每天灌喂罗非昔布15 mg/kg,同时给予MNNG溶液和标准饲料;叶酸干预组每天灌喂叶酸5 mg/kg,同时给予MNNG溶液和标准饲料.实验第50周结束时处死所有大鼠,对照组、MNNG致癌剂组和叶酸干预组取静脉血3 ml,采用化学发光法检测血清叶酸浓度;所有大鼠均取胃组织行组织病理学检查,并以免疫组化法检测胃上皮细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果MNNG致癌剂组45.5%(5/11)的大鼠发生胃恶性肿瘤,其余各组均无胃恶性肿瘤发生(P＜0.05).肿瘤组织中PCNA的阳性率显著高于非肿瘤组织(P＜0.05).MNNG致癌剂组的非肿瘤组织PCNA阳性率显著高于其余各组,低剂量、高剂量罗非昔布干预组与叶酸干预组的PCNA表达率则无显著差异.血清叶酸浓度叶酸组(193.7 ng/ml±60.7 ng/ml)显著高于对照组(84.2 ng/ml±25.3 ng/ml)和MNNG致癌剂组(72.3 ng/ml+16.7 ng/ml)(P＜0.05).结论低剂量、高剂量罗非昔布和叶酸均能干预MNNG诱导的Wistar大鼠胃恶性肿瘤发生,罗非昔布和叶酸可能通过抑制胃黏膜细胞增殖而在胃癌的化学预防方面起至关重要的作用.     

血浆同型半胱氨酸和血清叶酸水平与胃黏膜异型增生的关系

背景近年来,同型半胱氨酸与细胞癌变的关系已引起广泛重视。叶酸及其辅酶对活细胞的生长发育等功能具有重要影响,叶酸缺乏与多种肿瘤的发生有关。目的了解胃黏膜异型增生患者的血浆同型半胱氨酸和血清叶酸水平,并探讨其间的关系。方法选取29例胃黏膜异型增生患者和25名健康对照者,采用高效液相色谱法测定血浆同型半胱氨酸水平,微生物学法测定血清叶酸水平。结果胃黏膜异型增生患者的血浆同型半胱氨酸水平显著高于健康对照者(14.74μmol/L±5.40μmol/L对8.16μmol/L±3.50μmol/L,P<0.001),血清叶酸水平显著低于健康对照者(4.29ng/ml±3.13ng/ml对11.24ng/ml±4.26ng/ml,P<0.001)。结论胃黏膜异型增生与血浆同型半胱氨酸水平升高和血清叶酸水平降低之间存在一定联系。血浆同型半胱氨酸水平升高和血清叶酸水平降低可能是胃黏膜异型增生的危险因素,有必要对此作进一步的探讨。     

“疗胃煎剂”胃粘膜保护作用的实验研究

目的研究“疗胃煎剂”对胃粘膜慢性损伤的防护作用。方法应用2级Wistar大鼠灌胃接种SSlHp菌株,灌胃3％水杨酸钠溶液,交替自由饮用5％乙醇与5mmol/L去氧胆酸钠溶液及饥饱失常的综合方法制备Hp相关CAG动物模型。模型制备成功后均先行根除Hp,进行“疗胃煎剂”治疗,并以三九胃泰作对照,12周疗程结束后,进行Hp感染,组织病理学检查及血清EGF及粘膜氨基己糖含量检测。结果“疗胃煎剂”中、高剂量组大鼠胃粘膜固有层、粘膜表面上皮层、PAS(＋)层厚度较模型自然恢复组明显增加(P＜0.01),其中粘膜固有层与表面上皮层厚度增加明显优于三九胃泰(分别(P＜0.05),已接近正常组水平(P＞0.05)。“疗胃煎剂”与三九胃泰组均有增加PAS(＋)层厚度的作用(P＜0.05)。“疗胃煎剂”中剂量组粘膜氨基己糖含量较模型自然恢复组明显增加(P＜0.05)。各治疗组血清EGF浓度均较模型自然恢复组明显下降。结论“疗胃煎剂可以增加氨基己糖含量及粘膜表面上皮层厚度,具有增强粘膜屏障功能的作用。     

胆汁反流性胃炎的胃运动功能研究

目的:探讨胃排空改变以及胃窦平滑肌电节律紊乱在胆汁反流性胃炎发病中的可能机制。方法:对59例有慢性上消化道症状的慢性胃炎病人,根据胃镜下可见显著胆汁反流,胃液呈深黄色或深绿色,胃液pH≥3.0,甘胆酸浓度>58μg/ml,胃粘膜病理积分>9,判断为病理性胆汁反流(部分病人经:显象进一步证实)。胃镜下未见胆汁反流,胃液清亮,其余指标均未达上述标准者判断为非胆汁反流性。选出18例胆汁反流性胃炎病人(BRG组)和17例非胆汁反流性胃炎病人(NRG组),上述检查正常的10名健康志愿者(HC组)作为对照受检者进食一份双核素标记的标准餐,用照相机以1帧/2分钟连续动态照相120分钟,部分受试者又在空腹时检测胃窦肌电。结果:BRG组有明显的固、液体双相排空延迟,以固相延滞期(SLP)延长较为突出,而固体半排空时间(HSET)延长在很大程度上受到SLP延长的影响:NRG组仅有HSET显著延长。进一步胃电检测结果表明,各组间平均慢渡频率(MSWF)无显著性差异,出现胃电节律失常(DRM)在各组的分布为HC组1/7、NRG组3/10和BRG组7/13,严重程度BRG>NRG>HC。结论:胆汁反流性胃炎者有较严重的胃窦功能不良,且胃肌电可予进一步证实,胃底和十二指肠动力异常也可能与胆汁反流性胃炎的发病有关。     

Gastric acid secretion: Changes during a century

The advances in knowledge of gastric physiology within the past century have been the most exciting and important in this area of interest for many decades.The aim of this presentation consists of a comprehensive review of the extensive recent literature on this topic in order to highlight milestones in the field of gastric physiology, in particular in gastric acid secretion, gastric pathophysiology, acid-related diseases and use of acid regulatory drugs. Moreover, in the 21st century there have been many epidemiologic changes as well as a decrease of Helicobacter pylori infection and gastric cancer together with an increase of gastroesophageal reflux disease and the related increase of pomp proton inhibitor wide use.     

慢性多灶萎缩性胃炎患者胃酸分泌与幽门螺杆菌感染及血清胃泌素的关系

目的 研究慢性多灶萎缩性胃炎(BAG)胃酸分泌与幽门螺杆菌(Hp)感染及血清胃泌素的关系.方法 将200例确诊的慢性胃炎患者根据病理结果分为轻度、中度、重度BAG组及对照组(非萎缩性胃炎组),监测各组患者24小时胃内pH值的变化情况,并检测其幽门螺杆菌及血清胃泌素的含量,各组间进行比较.结果 (1)150例BAG患者中,Hp感染阳性率70%,随着胃粘膜萎缩程度的加重,Hp感染阳性率逐渐上升;(2)各组间血清胃泌素值比较:轻度萎缩组与非萎缩性胃炎组比较差异无显著性(P＞0.05),其余各组问比较差异有显著性(P＜0.05;(3)各组pH值分析结果:BAC胃黏膜轻度萎缩时,pH≤2时间百分比较非萎缩性胃炎组升高,pH＞4时间百分比及pH平均值、pH中位值均较非萎缩性胃炎组降低,中度及重度萎缩时pH≤2时间百分比逐渐降低,pH＞4时间百分比及pH平均值、pH中位值逐渐升高.结论 BAG的发生与Hp感染有关,胃粘膜萎缩程度与Hp感染的严重程度有关;BAG胃黏膜轻度萎缩时,血清胃泌素含量无明显变化;中、重度萎缩时,血清胃泌素含量降低;BAc胃黏膜轻度萎缩时,胃酸分泌增多;随着胃黏膜萎缩程度的加重,胃酸分泌逐渐减少.     

Effect of Nicotinic Acid on Gastric Secretion of Acid in Human Subjects and in Dogs

The effect of nicotinic acid on gastric secretion was studied in 19 fasting patients who had coronary heart disease and hyperlipoproteinemia. Among 10 patients with basal secretion of acid, 9 had increased acid output following oral administration of 0.5 g of nicotinic acid — the increase ranged from 13 to 232 per cent. Also in Pavlov pouch dogs, i.v. infusion of nicotinic acid gave rise to a significant increase in gastric acid output. The mechanism behind gastric stimulatory action of nicotinic acid is unknown.     

表没食子儿茶素没食子酸酯联合叶酸杀伤胃癌细胞的实验研究

背景：表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）具有抗肿瘤作用，对不同胃肠道肿瘤细胞系具有不同程度的、呈剂量依赖的杀伤作用。叶酸是一种水溶性维生素，叶酸缺乏可增加肿瘤的发生率，影响肿瘤细胞凋亡。目的：研究EGCG联合叶酸对胃癌细胞杀伤作用的影响。方法：以甲基噻唑基四唑（MTT）比色法检测EGCG联合叶酸对胃癌细胞系MKN45、SGC7901、MKN28的杀伤作用。流式细胞仪测定两者对MKN45细胞周期的影响。结果：EGCG联合叶酸较EGCG单独作用对MKN45、SGC7901、MKN28细胞的杀伤作用增强，EGCG半数抑制浓度（IC50）分别降低28．4％、51．9％和40．0％。3种浓度的EGCG联合叶酸作用48h后，MKN45细胞的细胞周期分布与对照组和EGCG组相比无明显变化（P〉0．05）。结论：EGCG联合叶酸较EGCG单独作用对胃癌细胞的杀伤作用增强，但对MKN45的细胞周期分布无明显影响。