四妙勇安汤当药苷、马钱苷提取率的拆方分析

目的:研究四妙勇安汤不同配伍组合对当药苷、马钱苷提取率的影响。方法:将四妙勇安汤拆方后,采用HPLC法,SunFireTMC18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相0.1%磷酸水-乙腈梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长250 nm,柱温35℃,分析当药苷、马钱苷含量并计算其提取率。结果:测定了原方及拆方后共8组样品中当药苷、马钱苷的含量并计算相应提取率,当药苷、马钱苷的回归方程分别为Y=1 179 101.85X-28 583.08(r=0.999 2)和Y=1 353 095.24X-4 113.75(r=0.999 1);线性范围分别为0.191 2~1.338 4,0.026 4~0.184 8μg;平均加样回收率分别为101.19%(RSD 2.83%),102.59%(RSD 2.30%)。结论:与单味金银花相比,其他拆方组当药苷和马钱苷提取率均有不同程度的提高,全方合煎后2种成分的提取率最高,进而佐证了配伍的优越性和科学性。     

四妙勇安汤中哈巴苷提取率的拆方分析

目的:考察四妙勇安汤不同拆方中哈巴苷的提取率变化,探讨其配伍规律.方法:将四妙勇安汤拆方分为8组,采用HPLC测定哈巴苷含量,色谱条件为SunFireTMC18色谱柱(4.6 mm× 150 mm,5 μm),流动相0.1％磷酸水-乙腈梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长250 nm,柱温35℃,分析哈巴苷的提取率变化.结果:哈巴苷回归方程Y=1.22 ×106X+3 218.75(r =0.999 8),线性范围0.065 3 ～0.457μg,平均回收率96.81％ (RSD 1.83％);哈巴苷提取率顺序为全方＞玄参＞拆方.结论:四妙勇安汤不同拆方均使哈巴苷的提取率降低,显示出全方合煎的优势,哈巴苷可能是四妙勇安汤发挥药效的有效组分之一.     

四妙勇安汤活性部位配伍方薄层色谱鉴别及绿原酸和哈巴俄苷的含量测定

目的:构建四妙勇安汤活性部位配伍方薄层色谱鉴别方法和HPLC测定绿原酸和哈巴俄苷的含量测定方法。方法:采用薄层色谱法对配伍方中玄参、甘草进行鉴别,采用HPLC对配伍方中绿原酸和哈巴俄苷含量进行检测。结果:薄层色谱鉴别中配伍方中在与对照品哈巴俄苷、甘草酸铵相应位置上均显相同颜色的荧光斑点,斑点清晰,阴性对照无干扰。绿原酸和哈巴俄苷分别在0.195～1.56 0(r=0.999 9)、0.019 2～0.384 0μg·μL~(-1)(r=1.000 0)线性关系良好,平均加样回收率分别为96.5%、97.8%,RSD分别为0.9%、1.1%(n=9)。结论:薄层鉴别及绿原酸和哈巴俄苷的含量测定方法专属性强,准确稳定、重复性好,能够有效控制该配伍方的质量。     

建立并利用一测多评法优化玄参饮片润透工艺的研究

目的：建立以一测多评法测定玄参中哈巴苷、肉桂酸、哈巴俄苷含量的方法,利用并验证一测多评法优化玄参饮片润透炮制最佳工艺的可行性和技术适应性。方法：采用一测多评法,以肉桂酸为内标物质,用外标法测定其含量,在一定线性范围内,建立肉桂酸与哈巴苷、哈巴俄苷的相对校正因子,并用该校正因子进行哈巴苷、哈巴俄苷的含量计算,实现一测多评。以加水量、浸润时间、干燥温度为考察因素,采用一测多评法结合外标法测定哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸含量,比较两种方法测定的结果,并以哈巴苷、哈巴俄苷炮制前后变化率为指标,优化玄参饮片润透工艺。结果：建立的相对校正因子分别为f_{肉桂酸/哈巴苷}=0.060 7（RSD=0.097%）、f_{肉桂酸/哈巴苷}=0.304（RSD=0.682%）,且差异性较小;玄参最佳润透工艺为加水量为药材0.6倍,浸润时间20h,干燥温度50℃。结论：建立的一测多评法方法可行,结果可靠;优化了玄参最佳润透工艺,为玄参的润透工艺研究提供了实验依据。     

HPLC同时测定栀子药材中两类活性成分

目的：本文建立了同时测定栀子药材中有机酸类（新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸等）、环烯醚萜苷类（京尼平苷酸、去乙酰车叶草酸甲酯、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷等）2类有效成分的高效液相色谱含量测定方法,用于栀子药材的质量控制。方法：采用Kromasil C₁₈（250 × 4.6 mm,5 μm）;流动相：乙腈（A）-0.1%磷酸溶液（B）,梯度洗脱,0-10 min,5% → 10%（A）;10-20 min,10% → 18%（A）;20-30 min,18% →20%（A）;流速1 mL·min^-1,进样量10 μL,柱温35℃,检测波长为324 nm 和238 nm。结果：20 min 内绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、京尼平苷酸、去乙酰车叶草酸甲酯、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷等被测组分均出峰且均达到基线分离;在一定浓度范围内具有良好的线性关系,新绿原酸：Y=24.62X-0.462（r=0.999 9）;绿原酸：Y=27.76X-3.045（r=0.999 9）;隐绿原酸：Y=24.07X-0.569（r=0.999 8）;京尼平苷酸：Y=12.95X-1.088（r=1.000 0）;去乙酰车叶草酸甲酯：Y=14.57X-0.693（r=0.999 8）;京尼平龙胆双糖苷：Y=7.261X-0.117（r=0.999 9）;栀子苷：Y=13.60X-13.59（r=0.999 9）,平均回收率均在95%-105%。结论：该检测方法快速、准确、灵敏,可为栀子药材多成分质量控制提供了一定的参考。     

RP-HPLC同时测定天麻头风灵胶囊中蒙花苷、哈巴俄苷和肉桂酸的含量

 目的建立RP-HPLC同时测定天麻头风灵胶囊中蒙花苷、哈巴俄苷和肉桂酸的含量。方法采用Diamonsil C₁₈(4.6mm×200mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(25∶75);流速1.0mL·min^-1;柱温35℃;检测波长278nm。结果蒙花苷、哈巴俄苷和肉桂酸的质量浓度分别在11.0～110,4.60～46.0和4.20～42.0mg·L^-1内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.9992,0.9996和0.9996;平均回收率分别为101.1%(RSD=1.9%,n=9),100.3%(RSD=1.6%,n=9)和101.8%(RSD=1.7%,n=9)。结论本方法简便、准确、重复性好,可用于天麻头风灵胶囊的质量控制。     

HPLC同时测定复方金银花颗粒中绿原酸、连翘苷、黄芩苷、汉黄芩素、芹菜素的含量

目的:建立同时测定复方金银花颗粒中5种化学成分(绿原酸、连翘苷、黄芩苷、汉黄芩素、芹菜素)的高效液相色谱法。方法:采用Agilent-Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)。以甲醇(A)-0.2%磷酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱(0~10 min,25%~53%A;10~16 min,53%~78%A),检测波长278 nm,流速1 mL·min-1,进样量为20μL,柱温25℃。结果:绿原酸、连翘苷、黄芩苷、汉黄芩素、芹菜素5种成分在25 min内基本分离。峰面积(Y)对进样量(X)的标准曲线分别为绿原酸Y=2 350.4X-137.27,r=0.999 6;连翘苷Y=1 161.7X+18.474,r=0.999 6;黄芩苷Y=3 204.2X-423.45,r=0.998 8;汉黄芩苷Y=4 792.7X-93.15,r=0.998 5;芹菜素Y=1 434.1X-8.4132,r=0.999 3;加样回收率分别为:绿原酸99.47%(RSD 0.8%);连翘苷98.26%(RSD 0.9%);黄芩苷100.4%(RSD 1.9%);汉黄芩素99.29%(RSD 1.1%);芹菜素98.79%(RSD 1.1%)。结论:该方法操作简便,重复性好,分离效果好,可以作为复方金银花颗粒的质量控制。     

一测多评法在玄参药材质量控制中的应用

目的建立玄参药材中哈巴苷、类叶升麻苷、安格洛苷C、哈巴俄苷、肉桂酸5种成分的一测多评法,验证该法在玄参质量评价中的准确性和可行性。方法以哈巴苷为内参物,分别建立肉桂酸、类叶升麻苷、安格洛苷C、哈巴俄苷的相对校正因子(f),并计算其含量,实现一测多评。与外标法所得结果进行比较,对一测多评价法的可行性进行验证。结果建立的相对校正因子分别为f_(哈巴苷/肉桂酸)=0.060(RSD=0.81%)、f_(哈巴苷/类叶升麻苷)=0.068(RSD=0.53%)、f_(哈巴苷/安格洛苷C)=0.197(RSD=1.82%)、f_(哈巴苷/哈巴俄苷)=0.142(RSD=1.17%),差异性较小;25批玄参中肉桂酸、类叶升麻苷、安格洛苷C、哈巴俄苷含量的实测值与计算值无显著差异。结论一测多评法控制玄参药材的质量是准确、可行的。     

四妙勇安汤标准煎液煎煮工艺的建立

目的建立四妙勇安汤标准煎液的煎煮工艺,为相关临床应用及制剂开发提供基础。方法正交试验考察药味浸泡时间、加水量、煎煮时间,单因素试验考察汤剂过滤方式,以哈巴苷、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、阿魏酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、安格洛苷C、哈巴俄苷、肉桂酸、甘草酸含量及出膏率为评价指标,确定煎煮工艺。结果煎煮工艺为准确称取处方各味饮片,混匀,加20倍量去离子水,置于陶瓷锅(加盖)中浸泡60 min,武火加热至沸腾,文火保持微沸煎煮60 min, 2层纱布趁热过滤,60℃减压浓缩,定容至100 mL,各成分含量及出膏率稳定性良好(RSD3.0%)。结论该方法稳定可行,能较好地保留四妙勇安汤有效成分,并保证其质量。     

UPLC-MS/MS法同时测定通塞脉微丸中10种有效成分

目的 建立同时测定通塞脉微丸中10种有效成分（绿原酸、芹糖甘草苷、毛蕊异黄酮苷、木犀草苷、甘草苷、阿魏酸、异甘草苷、哈巴俄苷、甘草素和肉桂酸）的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）分析方法。方法 采用BEHC₁₈（100 mm×2.1 mm,1.7 μm）色谱柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,体积流量为0.3 mL/min,采用电喷雾电离源（ESI）,多反应离子监测（MRM）扫描方式进行检测。结果 10种成分线性关系分别为绿原酸Y＝294.09 X＋17 624;芹糖甘草苷Y＝19.296 X＋748.42;毛蕊异黄酮苷Y＝670.8 X＋11 121;木犀草苷Y＝490.45 X＋2 938.3;甘草苷Y＝33.489 X＋555;阿魏酸Y＝127.76 X＋1 343.5;异甘草苷Y＝57.87 X＋804.81;哈巴俄苷Y＝13.125 X－20.365;甘草素Y＝29.057 X＋367.71;肉桂酸Y＝72.867 X＋1 301.5,且各相关系数（r）均大于0.999 0。精密度、重复性和稳定性良好;加样回收率在96.00%～104.67%,RSD值均小于3%。结论 所建立的方法准确、快捷,重复性好,可用于通塞脉微丸中绿原酸、芹糖甘草苷、毛蕊异黄酮苷、木犀草苷、甘草苷、阿魏酸、异甘草苷、哈巴俄苷、甘草素和肉桂酸10种有效成分的同时测定。     

HPLC波长切换法同时测定复方青果颗粒中金丝桃苷、柚皮苷、哈巴苷、哈巴俄苷的含量

目的:建立HPLC波长切换法同时测定复方青果颗粒中的金丝桃苷、柚皮苷、哈巴苷和哈巴俄苷含量。方法:采用依利特C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.03%磷酸溶液(B)为流动相,进行梯度洗脱,流速0.8 m L·min~(-1),柱温30℃,波长切换法检测(0~21 min,285 nm,金丝桃苷和柚皮苷;21~45 min,210 nm,哈巴苷和哈巴俄苷),进样量为10μL。结果:金丝桃苷、柚皮苷、哈巴苷和哈巴俄苷4个成分的线性范围分别为4.72~94.40 mg·L-1(r=0.9993)、7.18~143.60 mg·L~(-1)(r=0.9998)、5.96~119.20 mg·L-1(r=0.9996)、4.45~89.00 mg·L~(-1)(r=0.9994);平均加样回收率及相应的RSD分别为98.96%(0.97%),99.08%(1.31%),97.77%(1.58%),99.41%(1.09%)。结论:本文建立的HPLC波长切换法同时测定复方青果颗粒中的金丝桃苷、柚皮苷、哈巴苷和哈巴俄苷含量,样品处理方法简便,专属性强,结果准确,可作为复方青果颗粒全面可靠的质量控制方法。     

HPLC同时测定玄参中5种成分的含量

目的:建立同时测定玄参药材中哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷、安格洛苷C含量的高效液相色谱方法.方法:采用Agilent SB-C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5 μm);流动相乙腈-0.03%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速1 mL·min-1;检测波长210,280,330 mm;柱温30℃.结果:哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷、安格洛苷C的线性范围分别为50～400,1～40,1～20,0.5～4.5,1～60 mg·L-1;哈巴苷、哈巴俄苷、肉桂酸、麦角甾苷、安格洛苷C的回收率分别为101%(RSD 0.62%),102%(RSD 0.32%),98.8%(RSD 0.48%),99.9%(RSD 1.4%),99.2%(RSD 1.1%).结论:该方法简便快速,分离效果好,灵敏度高,重现性好,可为全面控制玄参质量提供参考.     

RP-HPLC法测定增液颗粒中哈巴俄苷的含量

目的探索增液颗粒中哈巴俄苷含量的测定指标,以期确立增液颗粒的含量测定项。方法选择高效液相色谱(RP-HPLC)法测定哈巴俄苷含量。色谱柱为Diamonsil ODS-C1(8150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-1%冰醋酸溶液(27∶73),检测波长278nm,流速为1.0ml/min,柱温25℃。结果哈巴俄苷在3.06～30.6μg/ml的范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=3258.35X-3.16(r=0.9999),平均回收率为99.1%,RSD=0.30%(n=6)。结论以RP-HPLC法测定哈巴俄苷含量简便、准确、重现性好,可作为增液颗粒的质量控制标准。     

HPLC法测定出血热预防片中的女贞苷、特女贞苷、哈巴苷和哈巴俄苷

目的建立高效液相色谱法测定出血热预防片中女贞苷、特女贞苷、哈巴苷和哈巴俄苷的定量测定方法。方法采用依利特Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm);体积流量1.0 m L/min;女贞苷和特女贞苷的检测流动相为甲醇-0.1%磷酸(42∶58),检测波长为224 nm;哈巴苷和哈巴俄苷的检测流动相为乙腈-0.03%磷酸溶液,哈巴苷检测波长为210 nm,哈巴俄苷检测波长为280 nm。结果女贞苷和特女贞苷分别在0.012 6~0.252 0μg(r=0.999 2)、0.073 2~1.464 0μg(r=0.999 6)范围内进样量与峰面积的线性关系良好,平均回收率分别为97.1%、98.2%,RSD(n=6)分别为1.0%、1.1%。哈巴苷和哈巴俄苷分别在0.095 2~1.904 0μg(r=0.999 5)、0.013 4~0.268 0μg(r=0.999 1)范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.7%、97.0%,RSD(n=6)分别为0.7%、0.9%。结论本方法简便、快捷,结果准确,重复性好,可应用于出血热预防片的质量控制。     

RP-HPLC梯度洗脱法测定玄麦甘桔胶囊中哈巴俄苷与肉桂酸含量

目的:用反相高效液相色谱梯度洗脱法测定玄麦甘桔胶囊中哈巴俄苷与肉桂酸的含量.方法:Grac-eSmart-RP18柱,乙腈-2%醋酸溶液二元梯度洗脱,0～20 min(28→39∶72→61);流速为1.0 ml·min-1,检测波长278nm,柱温为室温.结果:哈巴俄苷的平均回收率为100.5%,方法精密度RSD为0.11%(n=5);肉桂酸的平均回收率为101.3%,方法精密度RSD为0.21%(n=5).结论:本法可用于玄麦甘桔胶囊中哈巴俄苷与肉桂酸的含量测定.     

RP-HPLC双波长梯度洗脱法同时测定通塞脉微丸中阿魏酸、甘草素、肉桂酸、哈巴俄苷的含量

目的建立以RP-HPLC双波长法同时测定通塞脉微丸中阿魏酸、甘草素、肉桂酸、哈巴俄苷4个有效成分含量的方法。方法采用Packing Material HederaODS-2柱(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,以乙腈-1.0%磷酸水为流动相,梯度洗脱;双波长检测,λ_1=320 nm,λ_2=276 nm;流速为1.0 mL·min~(-1);柱温30℃;结果阿魏酸、甘草素、肉桂酸和哈巴俄苷分别在32.04～160.2、12.2～61.0、12.24～61.2、11.88～59.4μg·mL~(-1)内有良好线性关系,r≥0.9995。4个份均能达到基线分离,各组分的平均回收率在97.30%～100.94%之间。结论本方法简便,准确,重现性好,可作为该制剂质量控制的方法。     

基于在体肠灌流模型的四妙勇安汤活性成分拆方配伍研究

采用大鼠在体单向肠灌流模型,以UPLC-MSn测定四妙勇安汤水提物中绿原酸、甘草苷、金丝桃苷、安格洛苷C和异绿原酸C 5种抗炎活性成分在不同拆方配伍组合及不同肠段中的含量,通过计算所得到的肠吸收参数为指标对上述成分在多种配伍组合中的肠吸收情况进行评价。结果显示,四妙勇安汤5种活性成分中,除甘草苷回肠吸收参数在单味甘草中最高,其余4种成分在回肠和十二指肠中的肠吸收参数均配伍组合时高。其中,绿原酸在全方配伍时回肠和十二指肠吸收参数均处于最高水平,异绿原酸C在全方及金银花-玄参-甘草3药配伍组合时吸收参数处于较高水平,而不同配伍组合中的金丝桃苷和安格洛苷C的肠吸收情况在回肠和十二指肠中截然相反。该研究通过考察四妙勇安汤中5种活性成分在不同拆方配伍组合的肠吸收情况,揭示了活性成分的吸收往往会因配伍组合方式及肠段的不同而有所差异。同时也表明了通过复方配伍,可明显促进活性成分的吸收,从生物学角度为四妙勇安汤配伍规律的研究奠定了一定的基础。     

HPLC法测定喉喑清胶囊中哈巴俄苷的含量

目的建立高效液相色谱法测定喉喑清胶囊中哈巴俄苷含量的方法。方法色谱柱为Sinochrom ODS-Bp C18（4.6×250mm,5μm）,流动相以乙腈-1%醋酸溶液二元梯度洗脱;流速：1.0mL？min-1;检测波长为280nm。结果该方法的回归方程为Y=2520.34X-0.16,r=0.9999。哈巴哦苷在0.0264～0.528μg范围内呈良好的线性关系。平均回收率为97.20%,RSD为1.11%,符合分析要求。结论方法成熟,结果准确、重复性好,可用于新药喉喑清胶囊的质量控制。     

HPLC同时检测增液汤中5种成分的含量

目的:建立HPLC法同时测定增液汤中5种成分含量的方法。方法:采用ZORBAX SB C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%乙酸溶液,梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;进样量:20μL,测定7批增液汤中安格洛苷C、哈巴俄苷、肉桂酸、哈巴苷、麦角甾苷5种成分的含量。结果:哈巴苷、麦角甾苷、安格洛苷C、哈巴俄苷、肉桂酸分别在0.036～0.426 mg/mL(r=0.999)、0.003～0.036 mg/mL(r=0.999)、0.012～0.141 mg/mL(r=0.999)、0.012～0.138 mg/mL(r=0.999)和0.003～0.039 mg/mL(r=0.998)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为103.76%、104.17%、97.52%、106.52%和113.68%,RSD分别为3.74%、4.00%、4.92%、5.40%和4.70%。结论:该方法简便、准确且重复性好,可为增液汤的质量控制提供参考。     

HPLC-UV-ELSD同时测定玄参中5种成分的含量

目的:采用HPLC-UV-ELSD同时测定玄参药材中桃叶珊瑚苷、哈帕苷、哈帕俄苷、安哥拉苷C、肉桂酸的含量.方法:应用SHIMADZU C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-0.4%醋酸溶液为流动相,进行二元梯度洗脱;紫外检测波长为280 nm,蒸发光散射检测器漂移管温度105℃.结果:桃叶珊瑚苷、哈巴苷、哈巴俄苷、安哥拉苷C和肉桂酸5种成分能够达到很好的分离.其线性范围分别是0.752 0～13.54 μg,r=0.999 3(n=6):0.828 0～14.90 μg,r=0.999 4(n=6):0.636 0～11.45μg,r=0.999 7(n=6);0.544 0～9.792 μg,r=0.999 7(n=6);0.010 8～0.193 9μg,r=0.999 9(n=6).平均回收率分别为98.12%,RSD 2.3%(n=6);99.14%,RSD 1.5%(n=6):100.2%,RSD 1.9%(n=6):98.17%,RSD 1.7%(n=6);100.4%,RSD 0.50%(n=6).结论:该方法可同时测定玄参药材中上述5种成分的含量.