香烟烟雾提取物通过活化NF-κB上调小鼠巨噬细胞ICAM-1表达

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)对香烟诱导的小鼠巨噬细胞细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的调控机制,以及地塞米松的抑制作用。方法:分别用香烟烟雾提取物(CSE)、CSE 二硫基氨基甲酸吡咯烷(PDTC)、CSE 地塞米松(DEX)与小鼠巨噬细胞共同孵育1、4和12h,采用免疫细胞化学染色和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测巨噬细胞NF-κB和ICAM-1的表达。结果:(1)CSE组巨噬细胞NF-κB核染色阳性细胞百分比(41.50%±1.30%)明显高于对照组(10.40%±1.57%),P<0.01;CSE PDTC组和CSE DEX组阳性细胞百分比(17.89%±2.62%,12.72%±1.10%)明显低于CSE组,均P<0.01;(2)CSE组巨噬细胞ICAM-1mRNA水平(1.34±0.05)及其蛋白表达阳性细胞百分比(43.02%±2.37%)明显高于对照组(0.49±0.03,10.58%±0.88%),均P<0.01;CSE PDTC组和CSE DEX组巨噬细胞ICAM-1mRNA水平(0.98±0.05,1.07±0.04)及其蛋白表达阳性细胞百分比(18.42%±1.06%,27.76%±2.06%)明显低于CSE组,均P<0.01;(3)巨噬细胞NF-κB核染色阳性细胞百分比与ICAM-1mRNA水平及其蛋白表达阳性细胞百分比均呈显著正相关(分别为r=0.789和r=0.833,均P<0.01)。结论:香烟可通过诱导巨噬细胞NF-κB的活化在转录水平上上调ICAM-1的表达,地塞米松可抑制香烟诱导的NF-κB活化和ICAM-1的表达。     

EGCG对ConA诱导的肝损伤小鼠NF-κB和ICAM-1表达的影响

目的通过观察表没食：于儿茶素没食子酸酯（EGCG）对ConA诱导的急性肝损伤小鼠肝组织中NF-κB及ICAM-1表达的影响,来探讨EGCG对小鼠的肝保护机制。方法C57BL／6小鼠分成4组：对照组、EGCG对照组、ConA模型组．EGCG＋ConA组。EGCG对照组及EGCG＋ConA组小鼠给予EGCGEl服（5mg／kg）10d后,予模型组小鼠静脉注射ConA（15mg／kg）建造肝损伤模型。采血及留取肝组织,HE法检测肝组织病理变化,ELISA法检测NF-KB及ICAM-1的表达。结果ConA模型组小鼠肝损伤明显,NF-κB及ICAM-1的表达明显增多,与对照组比较有显著性差异（P〈0．05）;EGCG治疗组肝损伤减轻且伴NF-KB及ICAM-1的表达下降,与模型组比较差异明显（P〈0．05）。结论EGCG对ConA诱导的免疫性肝损伤小鼠有保护作用．其机制可能与调节NF-κB及ICAM-1的表达有关。     

NF-κB及ICAM-1在脑出血大鼠及过氧化氢损伤大鼠脑微血管内皮细胞中的表达

目的： 探讨脑出血后炎症反应机制及核因子-κB(NF-κB)与细胞间粘附分子-1(ICAM-1)间表达的关系。方法： 建立大鼠脑出血模型及过氧化氢损伤大鼠脑微血管内皮细胞的模型，分别采用免疫组化、原位杂交、免疫细胞化学及Western blotting方法观察NF-κB和ICAM-1的表达。结果： 大鼠脑出血后NF-κB 及ICAM-1表达均增强，ICAM-1的表达高峰（1 d）先于NF-κB（4 d），但在体外实验中，过氧化氢损伤后即刻大鼠脑微血管内皮细胞中NF-κB表达即增加，2 h后ICAM-1表达也上调，NF-κB的抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC)可下调NF-κB及ICAM-1表达。结论: 在活性氧损伤中NF-κB作为ICAM-1的活化因子，可上调ICAM-1表达，但在脑出血这一复杂的病理生理变化中，尚有其它因素参与对NF-κB 及ICAM-1表达的调控。     

大鼠血管新生内膜形成过程中NF-κB的活化和ICAM-1及COX-2表达的变化

目的：探讨大鼠血管内膜增生过程中NF-κB活化与内膜炎性增生的相互关系。方法:Western blotting分析血管壁中NF-κB p65、IκBα及其下游炎性基因ICAM-1和COX-2的表达；用免疫沉淀分析检测NF-κB p65的苏氨酸磷酸化。结果:内皮剥脱后，血管总蛋白与核蛋白中p65的含量于术后7 d达峰值；术后21 d下降但仍高于0、1 d组；但胞浆p65含量无明显变化。p65苏氨酸磷酸化水平与NF-κB核转位成负相关关系。IκBα于术后1 d表现出一过性降低，术后14 d开始回升，21 d接近正常组水平；与此相反，ICAM-1和COX-2的表达于内皮剥脱后升高，至14 d时达峰值，21 d时表达量下降但仍高于正常组。结论:血管内皮剥脱诱导的内膜增生过程中伴有持续的NF-κB p65活化和炎性因子的表达。     

脂多糖通过NF-κB途径调节大鼠星形胶质细胞Toll样受体表达

目的 研究脂多糖（LPS）对大鼠星形胶质细胞Toll样受体表达的影响及其机制。方法 在原代培养的第3代星形胶质细胞中加入不同浓度的LPS作用24h,通过免疫荧光、western blot观察星形胶质细胞 Toll样受体的表达和NF-κB p65的表达,同时研究NF-κB通路抑制剂对其的影响。结果 在正常状况下,星形胶质细胞胞浆和胞膜表达大量的TLR3受体,很少的TLR4受体。在LPS的刺激下,星形胶质细胞的TLR3表达保持不变,TLR4受体的表达随予以LPS的量增加而增高。LPS可刺激星形胶质细胞NF-κB的表达升高,抑制NF-κB通路活化抑制TLR4受体的上调。 结论 星形胶质细胞Toll样受体的表达是不同源的,TLR4受体随环境的变化而改变,其分子机制可能与NF-κB信号途径有关。     

脂多糖通过核因子-κB途径影响腹膜间皮细胞生长及TNF的表达

目的研究脂多糖(LPS)是否通过核因子κB,即IκBα、NF-κBp65途径引起腹膜间皮细胞(peritonealmesothelial cells,PMC)凋亡、抑制细胞生长和诱导肿瘤坏死因子(TNF)的表达。方法胰蛋白酶-EDTA消化法用于PMC的原代培养、传代,经鉴定分组①不同浓度LPS组(正常对照组、0.1mg/L、1.0mg/L、10mg/L、50mg/L、100mg/L);②不同时间组LPS作用于PMC0、1、3、6、12、24h。Hoechst33258染色法检测PMC的凋亡;MTT法检测PMC的生长增殖抑制情况;免疫荧光法检测p65的活性;Western blot检测IκBα的表达;用L929细胞株检测TNF的活性;RT-PCR检测TNFα mRNA的表达。结果LPS抑制PMC生长并诱导凋亡、引起IκBα的降解、p65的核移位;LPS诱导PMC表达TNF,1hTNF-α mRNA达最大值、3hTNF-α活性达最大值。结论LPS可抑制PMC的生长及诱导凋亡;LPS诱导PMC表达TNF-α呈浓度依赖性,在LPS作用早期TNF-α明显升高,随后下降。这一过程中IκBα-NF-κBp65信号途径可能发挥了重要作用。     

NF-κB信号转导途径与炎症性疾病

核因子κB广泛存在于胞浆中,通常以p65-p50二聚体的形式存在,与抑制物IκB结合而呈非活性状态。NF-κB信号转导途径能被TNF-α、IL-1、神经生长因子等多种因素激活。激活后NF-κB信号转导途径能够调节包括生长因子、转录因子、细胞素、趋化因子、抗凋亡蛋白等在内的基因转录。NF-κB信号转导途径参与了炎症、细胞凋亡、免疫反应等病理过程。其与炎症性疾病关系密切,深入了解NF-κB信号转导途径,有助于阐明某些炎症性疾病的发病机制以及为某些炎症性疾病提供新的治疗靶点。     

丁酸钠通过NF-κB途径上调NB4细胞共刺激分子表达

目的　观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠上调NB4 细胞共刺激分子表达的作用,并探讨其分子机制。方法　流式细胞术检测NB4 细胞经不同浓度丁酸钠处理不同时间后CD86、CD80分子表达变化,观察NF κB特异性抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(Pyrrolidinedithiocarbamate ,PDTC)对丁酸钠上调CD86表达影响,NF κB试剂盒检测NB4 细胞核内NF κB含量。结果　经丁酸钠处理后,CD86和CD80分子比对照组出现不同程度上调,并具有时间剂量 效应依赖性。PDTC可部分抑制丁酸钠对CD86分子表达的上调作用。丁酸钠处理NB4 细胞后核内NF κB含量增多。结论　丁酸钠通过NF κB途径上调NB4 细胞共刺激分子表达。     

缺血后处理抑制大鼠肠缺血再灌注后肺组织核因子-κB活化及ICAM-1的表达

目的:研究缺血后处理(Ⅰ-postC)对大鼠肠缺血/再灌注(Ⅱ/R)后肺组织核因子-κB(NF-κB)及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,探讨Ⅰ-postC对Ⅱ/R后肺的保护作用及机制。方法:32只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术(sham)组、Ⅱ/R组、肠缺血后处理(Ⅱ-postC)组和肢体缺血后处理(LⅠ-postC)组,以无创动脉夹夹闭肠系膜上动脉45 min,再灌注2 h建立小肠I/R模型,采集动脉血进行血气分析,测定肺系数判定组织水肿情况,光镜下观察肺组织病理学改变,测定肺组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)及髓过氧化物酶(MPO)活性,检测肺组织NF-κB p65和ICAM-1的表达。结果:(1)与Ⅱ/R组比较,Ⅱ-postC组和LⅠ-postC组PaO2升高而PaCO2降低(P0.05),肺系数减小(P0.01)且肺组织病理变化减轻;(2)Ⅱ-postC和LⅠ-postC均显著抑制Ⅱ/R所致的肺组织SOD活性降低和MDA含量升高(P0.05或P0.01),降低肺组织MPO活性(P0.01),并下调肺组织NF-κB p65和ICAM-1的表达(P0.05或P0.01)。结论:缺血后处理可减轻肠I/R大鼠的肺损伤,其机制可能与抑制NF-κB活化,进而减少ICAM-1介导的中性粒细胞浸润有关。     

辛伐他汀对高血压大鼠主动脉NF-κB和MCP-1表达的影响

目的研究他汀类药物对核因子κB(NF -κB)、单核细胞趋化蛋白 -1(MCP -1)在自发性高血压大鼠 (SHR)大血管中表达的影响 ,探讨其预防动脉粥样硬化 (AS)的可能机制。方法20只12周龄雄性SHR随机分为SHR组和辛伐他汀 (simvastatin)组,simvastatin组用simvastatin5mg/kg·d灌胃8周 ,另取10只同龄雄性京都种Wistar大鼠为WKY组 ,免疫组化测各组主动脉NF -κB、MCP-1的表达 ,ELISA测血清MCP-1含量。结果SHR组主动脉组织中NF-κB、MCP-1表达及血清MCP-1含量显著增加 (P<0.01) ,且MCP -1表达与NF -κB活化正相关(r=0.728,P<0.01) ;simvastatin组NF -κB、MCP -1表达和血清MCP -1含量显著降低 (P<0.01)。SHR组及simvastatin组之间血压及血清总胆固醇、总甘油三脂水平无明显差异(P>0.05)。结论他汀类药物可能独立于降脂外部分通过抑制NF-κB的活化来调控MCP-1表达而抗AS。     

NAC壳聚糖膜干预大鼠腹部术后腹膜核转录因子Sp1和NF-κB的表达

目的探讨NAC(N-乙酰半胱氨酸)生物膜对大鼠腹膜损伤粘连修复演变过程中核转录因子Sp1和NF-κB活化的影响。方法建立大鼠腹部回盲部手术动物模型,术中腹膜创面覆盖留置NAC壳聚糖多孔膜,术后腹腔镜连续观测、提取相应腹膜粘连组织,监测腹膜粘连分级变化。大鼠分4组:正常腹膜组,腹膜损伤组(无生物膜覆盖处理),NAC壳聚糖多孔膜组,壳聚糖多孔膜组,每组40只。应用EMSA方法检测Sp1含量,Western blot检测NF-κB,Masson染色法检测Sp1和SP染色法检测NF-κB表达。结果腹膜损伤导致Sp1和NF-κB被激活,壳聚糖多孔膜和NAC壳聚糖多孔膜覆盖损伤的腹膜可以一定程度抑制Sp1和NF-κB的表达。在抑制Sp1和NF-κB表达方面,NAC壳聚糖多孔膜显著优于壳聚糖多孔膜。NAC壳聚糖膜组比壳聚糖膜组更显著减低粘连级别(P<0.05或P<0.01)。结论 NAC壳聚糖生物膜可显著下调核转录因子Sp1和NF-κB表达,并有效减轻腹膜粘连形成。     

脂多糖诱导大鼠心肌细胞NF-κB、IκB-α的表达及意义

目的研究脂多糖(LPS)诱导大鼠心肌细胞NF-κB,IκB-α的表达及意义。方法100ng/mlLPS刺激心肌细胞0、0.5、1、2、4、6、8h和0、10、50、100ng/mlLPS刺激1h,免疫细胞化学检测NF-κBp65的表达,Westernblot检测IκB-α表达。结果LPS的刺激迅速激活心肌细胞NF-κBp65的表达,于1h时达高峰;IκB-α的表达先降低,后升高。结论LPS可诱导大鼠心肌细胞NF-κB的激活,并通过激活心肌细胞核因子-κB途径从而促进细胞损伤。     

阿魏酸钠对TNF-α致内皮细胞NF-κB和ICAM-1表达的影响

目的 :探讨阿魏酸钠对TNF α致内皮细胞NF κB和ICAM 1表达的影响及可能机制。方法 :通过免疫组化技术观察阿魏酸钠对TNF α对培养内皮细胞 (ECV30 4)的NF κB和ICAM 1表达的影响。结果 :TNF α能使细胞核内NF κB及细胞表面ICAM 1表达明显增高 ,阿魏酸钠和TNF α共同作用后 ,可使内皮细胞核内NF κB及细胞表面ICAM 1表达显著降低。结论 :阿魏酸钠可显著减轻TNF α所致内皮细胞的损害 ,其机理可能与抑制内皮细胞NF κB活化 ,减少ICAM 1表达有关。     

抗炎药物对溃疡性结肠炎患者肠黏膜组织NF-κB的活化和细胞黏附分子表达的影响

探讨抗炎药物柳氮磺胺吡啶 (SASP)和糖皮质激素对溃疡性结肠炎 (Ulcerative colitis,UC)患者肠黏膜活检组织细胞间黏附分子 (Intercellular adhesion molecule- 1,ICAM- 1)与血管细胞黏附分子 (Vascular cell adhes-ion molecule- 1,VCAM- 1) m RNA和蛋白表达的影响 ,以及黏附分子 m RNA的表达与 NF- κB活化的关系。2 7例来自四川大学华西医院的 U C患者 (符合 1993年太原会议溃疡性结肠炎诊断标准 )被纳入本研究。其中 15例使用过药物 (SASP或 SASP 糖皮质激素 )治疗 ,12例未用过任何与 U C治疗相关的药物 ,9例同期结肠癌患者 (取其癌旁正常组织 )被作为对照。采用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)检测 ICAM- 1与 VCAM- 1m RNA的表达 ;酶联免疫吸附试验 (EL ISA)测定 ICAM- 1与 VCAM- 1蛋白水平。凝胶电泳迁移率改变分析 (EMSA)检测 NF-κB DNA结合活性。结果显示 :与对照组相比 ,UC患者肠黏膜活检组织 ICAM- 1与 VCAM- 1m RNA和蛋白表达以及 NF-κBDNA结合活性明显升高 (P<0 .0 5 ) ;糖皮质激素和 SASP明显抑制 U C患者 NF-κB DNA结合活性 ,降低 ICAM- 1与 VCAM- 1m RNA和蛋白的表达 (P<0 .0 5 ) ;ICAM- 1和 VCAM- 1基因激活与 NF-κB DNA结合活性呈显著正相关 (ICAM- 1:r=0 .86 5 2 ,P<0 .0 5 ;VCAM-     

B细胞非霍奇金淋巴瘤中CD40和NF-κB表达及意义

目的 探讨B细胞非霍奇金淋巴瘤(non-hodgkinlymphoma,NHL)中CD40、NF-κB的表达及意义.方法 采用免疫组化SP法检测69例B细胞NHL及22例淋巴结反应性增生组织中CD40、NF-κB的表达.B细胞NHL患者应用CHOP(环磷酰胺、阿霉素、长春新碱、地塞米松)方案治疗6～8个周期.结果 CD40和NF-κB在B细胞NHL组织中阳性率分别为72.46%(50/69)(P<0.05)和59.42%(41/69)(P<0.001).CD40在Ⅰ+Ⅱ和Ⅲ+Ⅳ期B细胞NHL中的阳性率分别为87.88%(30/33)和58.33%(20/36)(P<0.05);NF-κB在Ⅰ+Ⅱ和Ⅲ+Ⅳ期B细胞NHL中的阳性率分别为36.36%(12/33)和80.56%(29/36)(P<0.05).B细胞NHL组织中CD40与NF-κB的表达呈负相关(r=-0.443,P<0.01).结论 CD40阳性提示B细胞NHL侵袭性低,NF-κB阳性则提示B细胞NHL侵袭性高;CD40是一种提示预后良好的因子,而CD40-NF-κB信号途径对B细胞NHL预后提示的作用尚需进一步研究.     

NF-κB的生物学功能

NF κB因其广泛参与机体的免疫及其它应激反应而受到人们的关注 ,其常见的形式是由p5 0和p6 5组成的异源二聚体。细胞受到外部因素刺激后 ,NF κB由细胞质转移到细胞核中 ,并发生磷酸化和乙酰化 ,启动相关基因的表达。目前研究表明受NF κB调节的基因有 2 0 0多种 ,其激活因子不少于 15 0种 ,所以对NF κB在各种条件下的激活过程及信号传导网络的研究具有重要的意义。本文综合了当前关于NF κB研究的最新进展 ,着重阐述了由TNF α、IL 1及LPS刺激而引起NF κB激活的信号传导通路 ,并进一步阐述了其在人类某些疾病当中的生物学功能     

CD40在人腹膜间皮细胞的表达

目的:对人腹膜间皮细胞CD40的表达及其调节因素进行初步探讨。方法:从CAPD患者的透出液中分离、培养腹膜间皮细胞,用IFN-γ、TNF-α、IL-1、LPS刺激24h,通过流式细胞仪(FACS)检测分析腹膜间皮细胞CD40、CD40L及ICAM-1的表达。结果:腹膜间皮细胞结构性表达少量的CD40;IFN-γ可显著增加腹膜间皮细胞表面CD40蛋白的表达,而TNF-α、IL-1、LPS对腹膜间皮细胞表面CD40蛋白的表达无显著影响。未见间皮细胞表达CD40L。IFN-γ、TNF-α、IL-1、LPS对间皮细胞ICAM-1表达均有显著增强作用。IFN-γ增强ICAM-1表达作用显著高于TNF-α、IL-1、LPS,间皮细胞CD40表达强度与ICAM-1呈显著正相关。结论:人腹膜间皮细胞可功能性表达CD40。     

NF-κB在不同时期糖尿病大鼠肝中的表达

目的研究NF-κB在糖尿病大鼠肝中的表达。方法取不同时期糖尿病大鼠的肝组织,石蜡切片,免疫组化染色,光镜观察。结果NF-κB在糖尿病肝脏组织中表达增高,且随着病程的延长而增加。结论NF-κB在糖尿病的发生发展及其并发症中起了一定作用。     

LPS诱导肺微血管内皮细胞ICAM-1的表达及NF-κB作用的实验研究

目的研究LPS诱导的肺微血管内皮细胞 (PWVEC)ICAM -1的表达及调控机制。方法100ng/mlLPS刺激PMVEC0h、2h、4h、6h、8h或10ng/ml、50ng/ml、100ng/mlLPS刺激6h ,免疫细胞化学检测PMVECICAM -1的表达。凝胶电泳迁移率变化分析检测NF -κB的活化。并通过加入活化阻断剂PDTC观察对PMVECICAM -1表达的影响。结果PMVECICAM -1的表达与LPS的刺激呈时相 -剂量依赖方式。LPS的刺激迅速活化NF -κB ,60min达到高峰 ,后逐渐下降。PDTC能显著降低ICAM -1的表达 (P<0 .01)。结论LPS刺激诱导NF-κB的活化 ,启动ICAM -1的合成表达。     

USP22通过上调NF-κB促进磷诱导的人主动脉平滑肌细胞钙化

目的 探究USP22在血管钙化过程中的作用及其机制。方法 使用人主动脉平滑肌细胞（HASMCs）构建高磷诱导血管钙化模型,通过免疫荧光实验观察USP22在钙化HASMCs中的表达;通过茜素红染色观察USP22对HASMCs钙化影响,Western blot方法检测USP22对成骨分化标志物及NF-κB信号通路的影响。结果 USP22在钙化的HASMCs中高表达且定位于细胞核,促进HASMCs的成骨分化及高磷诱导的HASMCs的钙化,促进NF-κB激活,NF-κB抑制剂PDTC逆转了USP22对HASMCs的促钙化作用。结论 USP22通过NF-κB信号通路促进高磷诱导的血管钙化。