不同基因型矮牵牛高频再生体系建立的研究

为建立不同矮牵牛品种的高频再生体系,以10个矮牵牛品种为材料,研究了不同基因型、不同生长调节剂配比、不同接种方式、叶片不同部位和不同外植体对不定芽再生的影响。研究结果表明:基因型是影响不定芽再生的重要因素之一,从10个品种中筛选获得了5个品种的高频再生体系;6-BA和NAA及其配比极显著影响矮牵牛不定芽再生率和平均不定芽再生数量,其中0.2 mg.L-1NAA极显著的促进了矮牵牛不定芽再生,其次是0.1 mg.L-1NAA,而高浓度NAA抑制不定芽再生;不同品种适宜的分化培养基不同,筛选获得了不同品种适宜的分化培养基;不同接种方式对不同品种不定芽再生影响不同,其中不同接种方式对黄金紫罗兰的不定芽再生有极显著影响,对黄金肉红、珊瑚红则没有影响;叶片不同部位极显著影响黄金紫罗兰星条不定芽的再生,对其它品种没有影响;叶片外植体是矮牵牛不定芽再生的最佳外植体。     

结球甘蓝离体下胚轴不定芽再生研究

以结球甘蓝强力50（QL50）和甘19 CMS下胚轴为外植体,研究不同激素配比、苗龄和AgNO3浓度等对其不定芽再生的影响。结果表明,在不含任何激素以及单独附加不同浓度的6 BA和NAA的MS培养基上,均不能诱导外植体不定芽的分化;QL50下胚轴在MS+6 BA 2 mg·L-1+NAA 0.02 mg·L-1+AgNO3 6 mg·L-1分化培养基上再生频率最高,为93.0%,最适宜的苗龄为9 d,再生系数为9.17;甘19 CMS在MS+6BA2 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1+AgNO3 6 mg·L-1分化培养基上再生频率最高,为73.8%,最适宜的苗龄为6 d,平均再生系数为4.27。外植体在1/2 MS生根培养基中添加0.5 mg·L-1 NAA时,不定芽的生根效果较好,生根率达1000%,且根系生长健壮。     

结球白菜高效离体子叶不定芽再生的研究

以 2个日本优质结球白菜爱知结球白菜 (C1 ) 和新理想白菜 (C2 ) 的子叶为外植体, 研究了不同激素配比、AgNO3浓度和苗龄对不定芽再生的影响。结果表明, 与 6 BA相比, TDZ对子叶不定芽再生的效果更好。在MS 0 5mg·L-1 NAA 1mg·L-1 TDZ培养基中, 2个品种的子叶不定芽再生率分别达到 75 0%和 55 0%。在此基础上, 添加 5mg·L-1 AgNO3 时, C1 和C2 子叶不定芽再生率分别达到 96 7%和 80 0%, 并以 5~8d为子叶不定芽再生的最佳苗龄。     

正交设计在根茎秋海棠‘Helen Lewis’组织培养中的应用

用正交试验设计法研究了6-BA,NAA和2,4-D 3种植物生长调节剂对根茎秋海棠 ‘Helen Lewis’叶片诱导不定芽的影响,建立了根茎秋海棠叶片再生体系。结果表明,诱导根茎秋海棠不定芽发生的最佳配方为：MS+2 mg·L-1 6\|BA+0.5 mg·L-1 NAA+0.5 mg·L-1 2,4-D,36 d时诱导率为86.7%,并有淡绿色愈伤组织形成。附加0.5 mg·L-1 6\|BA+0.2 mg·L-1 NAA的MS培养基有利于不定芽的分化和增殖。在1/2 MS+0.5 mg·L-1 IBA的培养基中生根效果最好,高于4 cm的再生植株移栽成活率达90%以上。     

"黑比诺"葡萄不定芽离体再生的研究

研究多种因素对欧亚种酿酒葡萄品种"黑比诺"叶片、叶柄和茎段不定芽再生的影响.不同生长调节物质及浓度对其再生影响显著,其中以茎段在MS+BA 5.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1培养基上再生效果最好,再生率为62.5%;叶柄在MS+BA 5.0 mg·L-1+IBA 0.1 mg·L-1培养基上再生率达到20%,而叶片始终未能诱导出芽.另外,暗培养时间及不同节位对茎段不定芽再生有明显影响.     

文冠果叶片离体再生体系的优化研究

[目的]探明不同处理对文冠果叶片离体再生体的反应。[方法]以成熟文冠果叶片作为外植体,通过诱导和培养的方法,研究不同培养基激素配比对文冠果离体培养的影响。[结果]2,4-D及其与BA组合诱导的愈伤组织不适宜进行间接不定芽诱导;MS培养基中添加2.0mg·L-1 KT和0.2mg·L-1 NAA时,愈伤组织诱导率最高,且在愈伤组织上可分化出不定芽,是叶片通过愈伤组织诱导不定芽再生的一条最佳途径。IBA与NAA、IAA组合中,NAA、IAA浓度为1.0mg·L-1时,为最佳生长素配比;生长素速蘸方法不适宜进行试管苗生根培养。[结论]不同组合和配比生长系,对文冠果再生体有不同效果。     

结球甘蓝离体叶片不定芽的再生研究

以结球甘蓝强力50组培苗叶片为外植体,研究不同激素配比、苗龄对其不定芽再生的影响。结果表明,在不含任何激素以及单独添加不同浓度的6-BA或NAA的MS培养基上,均不能诱导外植体不定芽的分化;结球甘蓝离体叶片不定芽在MS+6-BA 2 mg·L-1+NAA 0.80 mg·L-1分化培养基上再生频率最高,为79.86%,最适宜的苗龄为8 d;外植体在生根培养基1/2 MS+0.30 mg·L-1NAA中,不定芽的生根效果好,生根率达100.0%,且根系生长健壮。     

TDZ与6-BA对魔芋不定芽诱导的效应研究

为了建立魔芋离体培养高效再生体系,研究了TDZ与6-BA对魔芋不定芽分化的效应。结果表明:(1)单独使用TDZ和6-BA或6-BA与TDZ、6-BA与NAA组合均能诱导魔芋愈伤组织分化形成不定芽,且TDZ与NAA组合有利于魔芋不定芽的分化,当培养基中激素配比为TDZ 1.0mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1时,不定芽分化率可高达96.15%;(2)TDZ或TDZ与NAA组合对魔芋不定芽数量的增加非常有效,增殖系数显著高于单独使用6-BA或6-BA与NAA组合,培养基中TDZ为1.0mg·L-1时增殖系数最高,可达15.78。(3)相比于激素6-BA,TDZ更易于导致不定芽的白化现象,最高白化率可达28.37%,而培养基中NAA的适当添加,可在很大程度上降低魔芋不定芽的白化。TDZ 1.0mg·L-1与NAA 0.1mg·L-1配比,不定芽白化率降至7.56%,6-BA 2.0mg·L-1与NAA 0.1mg·L-1配比不定芽白化率为0。(4)TDZ对魔芋不定芽的伸长生长表现出较强的抑制作用,而6-BA对不定芽的伸长生长则表现出较好的促进作用,可见在继代培养中使用6-BA更有利于魔芋不定芽的伸长生长。     

芥蓝高频离体再生体系的建立

以'尖叶芥蓝'、'中花粗心芥蓝'和'迟花芥蓝'3个品种为材料,研究苯基噻二唑脲(TDZ)预处理、不同激素配比、基因型和外植体类型对不定芽再生的影响,建立芥蓝离体高频再生体系.结果表明:3个品种中,'中花粗心芥蓝'再生能力最强;不同外植体类型中再生率由大到小依次为:下胚轴、带柄子叶、子叶块;不定芽再生的最佳激素组合为0.2 mg·L-1NAA+6 mg·L-16-BA;以此激素组合为基础,下胚轴经0.5 mg·L-1TDZ浸泡30 min预处理接种在分化培养基(MS+0.2 mg·L-1NAA+6 mg·L-16-BA+8 g·L-1琼脂+30 g·L-1蔗糖)上不定芽再生率最高,达98.5%.     

白皮松成熟胚不定芽诱导分化技术的优化

以白皮松成熟胚为外植体进行不定芽诱导分化技术的优化,以此建立白皮松的再生体系.探讨了基本培养基、激素配比、糖浓度和不同摆放方式及不定芽继代增殖等问题.结果表明:成熟胚不定芽诱导以MS培养基最好,不定芽的平均增值系数超过4;MS中加入6-BA3～4 mg·L-1+NAA0.1～0.5 mg·L-1时不定芽的诱导率接近60%,平均分化系数可达6.0以上; 35 g·L-1的蔗糖浓度能有效的防止不定芽的玻璃化;垂直摆放有利于不定芽的分化;不定芽继代增值的最佳培养基为:MS+6-BA 0.3 mg·L-1 + NAA 0.05 mg·L-1.     

青花菜高频离体再生体系的研究

以青花菜04J-20、04J-19和04J-21带柄子叶为外植体,研究其高频离体再生体系.比较了不同基因型、不同质量浓度植物生长调节剂、不同时期苗龄外植体对不定芽再生频率的影响.结果表明:04J-20 8 d苗龄外植体不定芽的再生频率最高为100%(MS 0.10 mg·L-1 NAA 6.0 mg·L-1 6-BA 8 g·L-1琼脂 30 g·L-1蔗糖),继代培养增殖系数达8～9(MS 0.2 mg·L-1 NAA 2.0 mg·L-1 6-BA 7 g·L-1琼脂 30 g·L-1蔗糖),生根培养诱导生根率为100%(1/2MS 0.1 mg·L-1 NAA 7 g·L-1琼脂 30 g·L-1蔗糖),驯化移栽成活率达95%,获得增殖200倍的田间再生植株.     

德国鸢尾的组织培养试验

取德国鸢尾驯化种的茎尖外植体块,接种于不同激素配比的基本培养基上.结果表明,不定芽诱导最佳培养基为MS BA 0.5mg·L-1 NAA 0.2;不定芽增殖最佳培养基为MS BA 1.0 NAA 0.1;不定根诱导最佳培养基为1/2MS NAA 1.0;试管苗炼苗最佳基质配比为泥炭:珍珠岩=7:3,成活率达85%以上.     

丽格海棠‘宣言’离体再生因素的优化

丽格海棠再生分化受到多种因子的影响,通过对丽格海棠离体再生影响因素的优化试验表明:以叶片为外植体,MS+6-BA2.0mg· L-1+NAA0.2 mg·L-1最利于海棠的不定芽诱导;不定芽增殖分化的培养基为MS+ 1/2MS(Trace element)+6-BA 1.5 mg·L-1+ NAA0.1 mg·L-1+ Sucrose 30 g·L-1;生根壮苗培养基为1/2MS +IAA0.1 mg· L-1.     

火焰南天竹茎段离体培养再生体系的优化

  目的  进行离体培养关键因子优化,以满足火焰南天竹Nandina domestica ‘Firepower’的规模化生产。  方法  以火焰南天竹茎段为外植体,通过对影响不定芽诱导、增殖生长和生根的基本培养基、6-苄基腺嘌呤（6-BA）和萘乙酸（NAA）不同质量浓度配比、白砂糖质量浓度及pH值等关键因子的研究,优化火焰南天竹茎段离体培养再生体系。  结果  WPM+0.50 mg·L-1 6-BA+0.10 mg·L-1 NAA为火焰南天竹不定芽诱导的理想培养基,不定芽诱导率为93.8%,且生长健壮;WPM+0.75 mg·L-1 6-BA+0.10 mg·L-1 NAA为不定芽增殖培养基,增殖倍数3.3,新芽鲜绿色、生长良好;1/2WPM+0.50 mg·L-1 NAA+白砂糖30.0 g·L-1（pH 6.0）为生根培养基,生根率达95.0%。  结论  本研究建立的火焰南天竹的离体培养再生体系可为其大规模生产提供技术支撑。     

矮牵牛细胞的长期离体培养及再生植株的ISSR分析

 【目的】实现矮牵牛细胞的长期离体培养和再生，不但可以获得矮牵牛体细胞突变体，从中选出优良株系，而且可以为研究外源基因在矮牵牛细胞增殖与分化过程中的稳定性提供技术体系。【方法】以重瓣矮牵牛叶片为外植体，使用不同浓度BA与NAA的组合在黑暗条件下诱导愈伤组织。在不同光条件下，将愈伤组织在MS+ BA 2.0 mg•L-1+0.5 mg•L-1 NAA+200 mg•L-1 CH 与 MS+ BA 0.5 mg•L-1+0.5 mg•L-1 NAA+200 mg•L-1 CH两种培养基进行愈伤组织3年多的继代培养，并利用筛选的8个引物对20个再生植株的总DNA进行ISSR分析。【结果】不同的生长素与分裂素配比诱导的愈伤组织状态明显不同，继代后的愈伤组织在低激素培养基上分化出不定芽，再生芽复壮后可得到正常植株。对再生植株的总DNA进行ISSR分析发现，再生植株之间存在很大的遗传变异。【结论】矮牵牛愈伤组织在高BA浓度培养基上可长期继代保存；在低激素培养基上可实现植株再生。长期离体培养矮牵牛是获得其突变体的有效方法。     

不同激素配比对重瓣矮牵牛组织培养的影响

[目的]研究不同激素配比对重瓣矮牵牛组织培养的影响。[方法]以重瓣矮牵牛叶片为外植体,研究不同激素配比对其愈伤组织、不定芽诱导和不定芽生根的影响。[结果]愈伤组织及不定芽的诱导以MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L最佳,不定芽生根以1/2 MS＋NAA 0.1 mg/L或1/2MS＋IBA 0.1 mg/L最佳,产生的根较粗,数量较多。[结论]该研究结果为重瓣矮牵牛的快速繁殖、种质资源的保存和遗传转化建立了基础。     

翠菊品种库蕾娜叶片和叶柄及茎段的再生研究

为加速翠菊新品种的培育和扩繁,研究利用种子消毒接种获得的无菌苗作为外植体,以MS、1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA依次进行愈伤组织诱导、愈伤组织分化、不定芽生根。结果表明:茎段为再生体系的最佳外植体,愈伤诱导培养基为MS+2.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+1.0mg·L-1 6-BA+0.1mg·L-1 NAA,不定芽最佳生根培养基为1/2MS。叶片、叶柄最佳愈伤诱导培养基MS+4.0mg·L-1 6-BA+0.2mg·L-1 NAA,愈伤分化培养基只分化不定根。     

结球甘蓝外源基因转化再生时的激素条件研究

结球甘蓝(Brassicaoleracevar.capitataL.)转化时,子叶柄、下胚轴受农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)侵染后,芽再生的激素配比研究表明,中甘8号在激素配比为BA4.0mg·L-1+IAA(1.0～2.0)mg·L-1时,子叶柄和下胚轴芽的诱导率为100%;在BA1.0mg·L-1+ZT1.0mg·L-1+NAA(0.10～0.15)mg·L-1时,子叶柄芽的诱导率为60%左右;在BA1.0mg·L-1+ZT1.0mg·L-1+NAA(0.15～0.20)mg·L-1时,下胚轴芽的诱导率为100%。激素配比与品种间互作效应小,以因素主效应为主。与未侵染外植体芽诱导比较,认为结球甘蓝受农杆菌侵染后,离体芽诱导需要较高的生长素质量浓度。     

五种菊花近缘植物组织培养研究

以紫花野菊变种、纪伊潮菊、龙脑菊、那贺川野菊和矶菊5个菊花近缘种属植物无菌苗为试材,进行了茎段离体快繁体系和离体叶片不定芽再生体系研究.结果表明:最佳茎段增殖培养基分别为:紫花野菊变种,MS+1.0 mg·L-1 6-BA+(0.05～0.10)mg·L-1 IBA;纪伊潮菊,MS+2.0 mg·L-1 KT+0.1 mg·L-1 NAA;龙脑菊,MS+0.5 mg·L-1 KT+0.1 mg·L-1 NAA;那贺川野菊,MS+1.0 mg·L-1 KT+0.1 mg·L-1 NAA;矶菊,MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA.紫花野菊变种、纪伊潮菊、龙脑菊、那贺川野菊试管苗适宜生根培养基是1/2MS;矶菊试管苗适宜生根培养基为1/2MS+0.2 mg·L-1 NAA.5个材料试管苗离体叶片愈伤组织诱导率均较高,但不定芽的诱导率则因基因型而异,仅那贺川野菊和矶菊能诱导出不定芽.那贺川野菊在MS+0.5 mg·L-1 KT+0.1 mg·L-1 NAA培养基上不定芽的再生率和增殖系数均最高,分别为75.0%和3.4;而矶菊在MS+1.0 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 NAA培养基上的不定芽再生率和增殖系数最高,分别达80.0%和5.8.     

亚洲百合Strawberry and Cream花器官组培快繁技术研究

为完善百合种球繁殖技术体系,对亚洲百合Strawberry and Cream花器官进行组织培养及快速繁殖技术研究。结果表明:不同外植体分化能力不同,由强到弱依次为花瓣,花丝和花柱;花瓣诱导不定芽的最佳培养基为MS+1.00mg·L-1TDZ+0.1mg·L-1NAA,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2.0mg·L-12.4-D+0.5mg·L-1KT;花丝诱导不定芽的最佳培养基为MS+1.0mg·L-1TDZ+0.5mg·L-1NAA,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2.0mol·L-12.4-D+1.5mg·L-1KT;不定芽扩繁的最佳培养基为MS+1.0mg·L-1BA+0.1mg·L-1NAA。