两种高苯丙氨酸血症检验方法的比较研究

目的对比串联质谱(tandem mass spectrometry,TMS)技术与茚三酮化学荧光法在新生儿高苯丙氨酸血症(hyperhenylalaninemia,HPA)筛查中的应用研究。方法分别采用串联质谱技术和茚三酮化学荧光法对不同浓度苯丙氨酸干血斑质控品及57405例新生儿干血斑样本进行检测,分析对比两种方法的精确性、准确性以及对新生儿高苯丙氨酸血症的筛查和诊断。结果 (1)精确度检测:茚三酮化学荧光法在低、高浓度水平检测苯丙氨酸的批内CV值分别为11.97%、9.29%,批间CV值分别为16.85%、11.50%;串联质谱法在低、高浓度水平检测苯丙氨酸的批内CV值分别为4.80%、4.06%,批间CV值分别为9.95%、9.37%。(2)准确度检测:两种实验方法检测结果均100%通过卫生部临检中心室间质评,与临检中心提供的靶值比较,化学荧光法呈正偏倚,串联质谱法呈负偏倚。(3)同时对57405例新生儿干血斑样本进行检测,茚三酮化学荧光法和串联质谱法检测初筛阳性率分别1.75%(1004例)、0.19%(110例);两种方法均确诊高苯丙氨酸血症24例,阳性预测值分别为2.39%、21.82%。结论串联质谱法检测苯丙氨酸较茚三酮化学荧光法具有更好的精确性,在新生儿HPA筛查中具有良好的阳性预测值,更适用于HPA的筛查。     

应用串联质谱技术进行新生儿高苯丙氨酸血症79205例筛查结果分析

目的探讨串联质谱技术在怀化市新生儿高苯丙氨酸血症(HPA)筛查中的应用价值,了解怀化市新生儿高苯丙氨酸血症的检出率。方法选择出生72h后经充分哺乳的新生儿,采集足跟血,制成干血滤纸片,应用串联质谱技术(MS/MS)测定血苯丙氨酸(Phe)、酪氨酸(Tyr)浓度及其比值(Phe/Tyr)进行HPA筛查,筛查原标本血Phe浓度120μmo L/L,或同时伴有Phe/Tyr2.0为阳性,初筛阳性者立即召回复查,复查阳性者应用气相色谱-质谱进行尿有机酸分析及下一代测序技术(NGS)检测阳性患儿的突变基因。结果怀化市2015年3月-2017年12月共筛查新生儿79 205例,其中男性42 592例,女性36 613例,确诊HPA患儿6例,HPA检出率为1/13 201。结论应用串联质谱技术进行新生儿HPA筛查的检出率为1/13 201,明显高于之前报道的应用茚三酮荧光法进行新生儿HPA筛查的检出率1/40 758。应用串联质谱技术进行新生儿HPA筛查是一种准确、可靠的方法。     

比较四种检测方法在高苯丙氨酸血症诊断中的应用

目的探讨化学荧光法、尿蝶呤谱分析、红细胞二氢喋呤还原酶活性(DHPR)分析、串联质谱法在高苯丙氨酸血症诊断中的应用。方法运用茚三酮荧光法检测142516例新生儿phe血值,初筛可疑阳性者行茚三酮荧光法、串联质谱法检测,通过卡方检验统计比较茚三酮荧光法、串联质谱法的复筛可疑阳性率;同时对复筛可疑阳性的患儿行尿蝶呤谱分析、红细胞二氢喋呤还原酶活性(DHPR)分析并对HPA确诊情况及发病率进行统计。结果 1.通过分析2010年-2016年新生儿疾病筛查量动态数列表,发展速度和增长速度都呈现逐年上升的趋势;2.2010-2016年我院筛查中心管辖区域活产218843例,HPA筛查率、不合格血片补采率、HPA可疑阳性召回率上升幅度分别为62.88%、52.75%、40.43%,不合格血片率基本持平;3.142516例标本初筛可疑阳性224例,初筛可疑阳性率1.57‰;4.通过配对卡方检验χ2=48,P0.005,茚三酮荧光法和串联质谱法复筛情况差异具有统计学意义;5.对复筛可疑阳性29例患儿行红细胞二氢蝶啶还原酶活性(DHPR)分析检测、尿蝶呤谱分析检测鉴别确诊经典型苯丙酮尿症(PKU)24例,轻度高苯丙氨酸血症(HPA)3例,四氢生物蝶呤缺乏症(BH4)2例;6.高苯丙氨酸血症检出率:1:4914。结论 1.新生儿疾病筛查量的发展速度和增长速度在2010-2016年筛查量都是呈现上升趋势;2.HPA筛查的血片量、不合格血片召回、HPA可疑阳性召回都有大幅度的提升;3.串联质谱法的复筛阳性率远低于茚三酮荧光法;4.串联质谱法中用phe/Tyr可明显降低假阳性率。5.HPA检出率远高于全国平均水平;6.结合红细胞二氢喋呤还原酶活性(DHPR)分析、尿蝶呤谱分析可以有效的鉴别诊断HPA并加以分型。     

泉州地区新生儿苯丙酮尿症筛查分析

目的分析2002年-2006年泉州地区新生儿苯丙酮尿症（PKU）筛查状况。方法新生儿出生后72h足跟采血,滴在特殊的滤纸（美国S＆S903滤纸）片上,用荧光法定量测定苯丙氨酸（Phe）浓度。Phe〉2.0mg/dl召回复查,结果仍超过2.0mg/dl送上海市新华医院确诊。结果五年共筛查新生儿224917例,疑似PKU240例,确诊6例（其中一例四氢生物蝶呤缺乏）。PKU发现率1/37486。结论新生儿疾病筛查是PKU患儿早期诊断的有效方法,是开展PKU早期治疗,防止智力低下残疾儿发生的有效手段。     

重庆市新生儿苯丙酮尿症荧光法筛查结果分析

目的对重庆市新生儿苯丙酮尿症(PKU)荧光法筛查结果进行分析,以期了解重庆市.方法本市出生的新生儿72 145例,取出生48～72h充分哺乳后的足跟血滤纸片标本,以荧光法测定新生儿滤纸干血斑苯丙氨酸(Phe)含量.凡苯丙氨酸≥0.12mmol/L者为实验阳性,则召回婴儿取第2张血纸片标本进行复查.结果 72 145例标本中,初次筛查检出27例阳性结果,其浓度在0.123～1.024 mmol/L之间;24例已复查,3例结果仍为阳性,其余均正常.重庆市苯丙酮尿症发病率为1/18 036.结论重庆市苯丙酮尿症发病率为1/18 036,比全国水平稍低.     

新生儿苯丙酮尿症筛查国产与进口试剂应用性探讨

目的对比新生儿苯丙酮尿症筛查国产与进口试剂的应用性。方法采用国产广州丰华生物工程公司与进口芬兰Labsystems公司的茚三酮荧光法苯丙氨酸检测试剂盒对6011例新生儿标本进行平行检测。通过实验观察试剂盒的方法学特性,并使用串联质谱法对两试验的阳性标本进行确诊实验。结果 (1)经实验方法学鉴定,国产与进口试剂高低浓度批内变异系数分别为3.9%、4.7%及5.4%、6.3%;高低浓度批间变异系数分别为6.9%、5.8%和7.6%、8.3%;平均重现率分别为103.3%、99.8%,两种检测试剂相关性良好r=0.99,测定结果无明显差别P=0.738。(2)国产与进口试剂平行检测6011例新生儿筛查标本初查阳性分别为21、43例,初筛阳性率分别为3.49‰、7.04‰。新生儿苯丙氨酸含量99%分位值分别为1.31mg/dl、1.44mg/dl。结论两种检测试剂盒均能满足对新生儿苯丙酮尿症筛查。国产丰华试剂盒的精密度高、重现性良好、假阳性率低,有效缓解新生儿家庭的精神压力并降低筛查成本,更适合用于PKU筛查。     

西安地区新生儿CH和PKU筛查结果分析

目的通过对我院新生儿进行先天性甲状腺功能低下（cH）和苯丙酮尿症（PKU）的筛查,降低缺陷儿发生。方法检测促甲状腺刺激激素（TSH）筛查CH;检测苯丙氨酸（phe）筛查PKU。结果在2287名新生儿中,发现有2例PKU可疑患儿,经复查确诊其中1例为PKU阳性患儿。发现4例CH可疑患儿,复查确诊为0例。结论新生儿疾病筛是早期发现CH、PKU缺陷患儿,使其得到诊治,避免发生身体和智力不可逆的损害的有效方法。在优生优育领域具有不可估量的经济与社会价值。     

象山地区新生儿疾病筛查10年回顾分析

目的回顾分析象山县10年新生儿疾病筛查情况,了解新生儿先天性甲状腺功能低下症（CH）和苯丙酮尿症（PKU）的筛查情况及发病率。方法采用时间分辨荧光免疫分析法（DELFIA）和化学荧光法,对2001年-2010年在全县出生的新生儿进行足跟采血,统一送宁波市新生儿疾病筛查中心进行CH和PKU的筛查。结果 10年来共筛查新生儿49905例,平均筛查率98.43%,确诊CH44例,患病率为1/1134,未检出PKU,所有患儿均得到及时的早期治疗。结论我县CH发病率明显高于全国平均水平;加强管理,努力提高新生儿疾病筛查率,提高可疑阳性病例召回率,提高人口素质,减少出生缺陷。     

2010年～2014年钦州市新生儿疾病筛查状况及结果分析

目的总结和分析2010年1月~2014年12月钦州市新生儿疾病筛查中心筛查的状况,了解本地区先天性甲状腺功能减低症(CH)和苯丙酮尿症(pku)的筛查及发病和治疗情况,探讨钦州市新生儿疾病筛查工作中存在的问题及解决方法。方法采用时间分辨荧光免疫法检测滤纸干血斑中促甲状腺素(TSH)水平,采用荧光法测定滤纸干血斑中苯丙氨酸(Phe)水平。分析PKU及CH筛查情况、发病率及召回治疗随访情况。结果 2010~2014年共分娩活产儿376920名,筛查新生儿316 933例,筛查覆盖率84.08%,筛查率从2010年的54.26%提高到2014年的98.55%,5年间初筛阳性可疑PKU 201例,召回复查165例,经筛查共确诊PKU2例,发病率1∶158 467;初筛阳性可疑CH 1773例;召回复查1423例,确诊CH 146例、高TSH血症82例,发病率1:2171。PKU召回复查率由65%上升至90%;CH由72%上升至82%。结论通过新生儿疾病筛查可以早期发现CH、PKU患儿,加强管理和宣传力度,提高医务人员及广大人民群众对新生儿疾病筛查的认识,能有效提高筛查率和可疑阳性患儿召回率,及时发现和诊治新生儿智力低下,保障儿童正常的体格和智能发育,提高我国的人口综合素质,具有很好的社会效益和经济效益。     

新疆南疆地区146092例新生儿苯丙酮尿症筛查结果分析

目的对新疆南疆地区146092例新生儿进行苯丙酮尿症（phenylketonuria,PKU）筛查,探讨新疆南疆地区近三年新生儿苯丙酮尿症的发病情况。方法采用化学荧光法检测干滤纸血片中苯丙氨酸（phenylalanine,Phe）浓度。结果新疆南疆地区新生儿苯丙酮尿症的发病率平均约为0.431‰,高于全国平均水平。结论了解苯丙酮尿症在新疆南疆地区的发病情况;在新疆南疆地区进行新生儿PKU筛查具有重要意义。     

宝鸡地区2007∽2013年新生儿筛查高苯丙氨酸血症结果分析

目的对宝鸡市2007年∽2013年间的204 868例新生儿筛查苯丙氨酸浓度测定,并对部分阳性患儿血、尿标本进行MS/MS、GS/MS分析,探讨我市PKU发病情况和发病率。方法采用ELISA时间分辨荧光免疫多标记免疫分析法（DELFIA）检测血苯丙氨酸浓度。结果筛查出高苯丙氨酸血症71例,其中经典型PKU17例,轻度PKU22例,轻度HPA30例,BH4缺乏症2例,高HPA检出率为1/2885（71/204868）,高出全国HPA发生率（1/11444）,BH4缺乏症为2.82%。结论开展新生儿筛查是早期发现HPA的有效方法,对HPA患儿应进一步进行鉴别诊断,排除四氢喋呤缺乏症,并进行及时治疗,避免残障儿的发生。     

影响干血片法筛查新生儿四种病因素的初步探究

目的探讨影响干血片法筛查新生儿四种病（甲状腺功能低下症、苯丙酮尿症、肾上腺皮质增生症和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症）结果的因素。方法采用时间分辨荧光免疫分析、流式荧光检测方法,分别检测干血片中促甲状腺素（TSH）、苯丙氨酸（Phe）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD）、17-α羟孕酮（17-OHP）的含量。结果 TSH筛查结果受季节性变化影响比较显著;室温自然晾干的血片储存于4℃冷藏环境中有助于TSH的稳定,30天后测定其TSH含量仍能达到新鲜测定值的93%。采血时间对Phe的测定有显著影响,新生儿出生72h以后采血可明显降低筛查假阳性率比例。另一方面,标本采集后的检测时间是影响G-6-PD测定值的最重要因素。最后,17-α羟孕酮的测定结果与胎儿孕周以及出生后采血时间有着密切关系。结论胎儿孕周、标本采血时间及保存条件等因素均会对干血片法筛查新生儿四种病的筛查结果产生显著影响。新生儿疾病筛查实验条件的优化能够减少筛查中假阳性率的出现,降低召回率,保证筛查质量。     

嘉善县新生儿遗传代谢病筛查结果分析

目的了解嘉善县新生儿遗传代谢病筛查工作开展现状,探讨进一步提高和改进新生儿遗传代谢病筛查工作方法。方法根据卫生部《新生儿疾病筛查技术规范》要求,各助产单位经过培训的卫生专业人员,对嘉善县2004年-2013年在各助产机构出生的新生儿,在出生满72h并喂足6次奶后,采集足跟内侧或外侧3个血斑。采用时间分辨免疫荧光分析法和荧光分析法,分别检测血斑的促甲状腺素（TSH）水平和苯丙氨酸（PA）浓度,TSH水平的阳性切值〉9.0μU/ml,PA浓度阳性切值〉120μmol/L。召回可疑阳性新生儿,确诊后给予治疗及干预。结果 2004年-2013年嘉善县各助产机构活产数总计44201例,接受先天性甲状腺功能减退症（CH）和苯丙酮尿症（PKU）筛查的新生儿42 714例,平均筛查率96.64%。发现CH可疑阳性110例,召回率94.55%,确诊CH患儿14例,发病率1/3051;发现PKU可疑阳性120例,召回率93.33%,确诊PKU患儿7例,发病率1/6102。另确诊亚临床型CH 2例,四氢生物蝶呤缺乏症（BH4D）1例。治疗随访率100.00%。结论嘉善县新生儿遗传代谢病筛查工作已取得较好成绩,进一步提高需加强宣教,加大随访力度,并争取得到政府更多支持和投入。     

江门地区新生儿先天性甲状腺功能减低症与苯丙酮尿症发病现状分析与研究

目的分析研究江门市2008年1月至2008年12月新生儿苯丙酮尿症（PKU）与甲状腺功能减低症（CH）发病现状及两病发病类型构成比例。方法PKU应用荧光分析法测定血苯丙氨酸（Phe）浓度、CH应用荧光酶免疫分析法测定促甲状腺激素（TSH）,共30125例。结果江门市未发现新生儿PKU发病率,与世界、国内范围内有差异;CH1：1673,与世界、国内范围之间有著差异;CH患儿中以腺体缺失及部分缺如为主,CH总体男女发病率基本一致。结论基本总结分析出江门市新生儿苯丙酮尿症与甲状腺功能减低症两病发病率及两病发病主要类型．为筛查及治疗工作提供可靠科学依据,推动本市新生儿筛查工作开展,提高儿童保健水平。     

北京市西城区2004年-2012年新生儿疾病筛查情况分析

目的分析2004至2012年北京市西城区新生儿疾病筛查情况。方法采用回顾性研究的方法,统计和分析2004至2012年在西城区各助产机构出生的新生儿先天性甲状腺功能低下和苯丙酮尿症筛查数据。结果9年间西城区活产73890人,筛查72637人,随活产数增加筛查人数逐年增多,平均筛查率为98．30％。检出先天性甲状腺功能低下33例,检出率为O．45‰;检出苯丙酮尿症13例,检出率为0．18‰;可疑患者复查率为95．77％;未复查的可疑患者32人,其中流动人口占62．50％。结论新生儿疾病筛查是先天性甲状腺功能低下和苯丙酮尿症三级预防的重要且有效的方法,继续科学规范管理,特别加强流动人口的管理,通过多种途径提高新生儿疾病筛查率和复查率。     

苯丙酮尿症的新生儿筛查和诊断治疗

目的探讨湛江市PKU发病情况,治疗效果,总结经验,以便更好的指导今后筛查工作。方法应用化学荧光法进行血苯丙氨酸检测,确诊患者给予治疗,定期检测血苯丙氨酸水平及体格和智能发育。结果自1997～2009年共筛查511500例新生儿,确诊3例,检出率为1:170500,明显低于全国平均水平。结论新生儿PKU的筛查及早期诊断治疗,是减少出生缺陷,提高人口素质的重要措施之一。     

四氢生物喋呤负荷试验在高苯丙氨酸血症鉴别诊断中的临床应用

目的探讨四氢生物喋呤（BH4）负荷试验在高苯丙氨酸血症（HPA）鉴别诊断中的应用价值。方法自2005年5月到2007年4月，51例HPA患儿采用口服BH4（20mg／kg）负荷试验。对其中血苯丙氨酸（Phe）浓度小于600μmol／L患儿采用口服Phe—BH4联合负荷试验，结合尿喋呤分析、血红细胞二氢喋呤还原酶（DHPR）活性测定。结果（1）在BH4负荷试验中，不同类型HPA患儿的血Phe浓度表现出各不相同的改变。51例HPA患儿中，共鉴别出5例BH4缺乏症，10例BH4反应性苯丙氨酸羟化酶（PAH）缺乏症，36例BH4无反应性苯丙氨酸羟化酶（PAH）缺乏症。（2）在17例中度苯丙酮尿症（PKU）患儿中，9例（52．9％）为BH4反应性PAH缺乏症。结论BH4负荷试验在HPA早期鉴别诊断中十分重要，部分中度PKU对BH4有反应，可使用BH4替代治疗。     

天津地区已婚群体苯丙酮尿症杂合子筛查

目的　寻找一种筛查苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)杂合子的可靠易行方法。方法　用反相高效液相色谱快速检测血浆苯丙氨酸和酪氨酸实验方法,对101余例已知PKU杂合子和2023名已婚群体分别进行检测和统计分析。结果　已知PKU杂合子的Phe浓度、Phe/Tyr和Phe     

2008年～2012年茂名地区新生儿遗传代谢病筛查结果分析

目的总结分析茂名市地区2008～2012年问新生儿先天性甲状腺功能减低症（CH）、苯丙酮尿症（PKU）和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6PD）缺乏症3种新生儿先天性疾病和遗传病的筛查结果,总结新生儿遗传代谢病筛查的工作进展以及发病情况。方法采用干滤纸片法对全血中的促甲状腺素、苯丙氨酸和G6PD活性进行测定。结果5年以来共筛查344763份新生儿血样本,检出CH、PKU和G-6PD缺乏症患儿各202例、2例和25558例,发病率分别为1／1706、1／172381和7．41％,CH的发病率明显高于全国1／3009的发病率,G6PD缺乏症的发生率也明显高于全国0．69％的发生率．PKU的发病率则明显低于全国1／11144的发病率。结论育的损害。加强新生儿遗传代谢病筛查工作是控制出生缺陷、通过新生儿遗传代谢病筛查可避免其对新生儿智能和体格发提高出生人口素质的重要措施。     

1066例高苯丙氨酸血症患者诊断及治疗随访

目的1066例高苯丙氨酸血症（HPA）患者治疗随访。方法自1984年10月到2009年12月,我院共诊治HPA患者1066例。采用高效液相色谱法进行尿喋呤分析,血红细胞二氢喋啶还原酶（DHPR）活性测定及四氢生物喋呤（BH4）负荷试验,进行四氢生物喋呤缺乏症（BH。D）的鉴别;对部分患者进行MRI、1HMRS检查;对不同类型的HPA进行治疗。结果（1）1066例中1016例为苯丙氨酸羟化酶缺乏症（PAHD）,其中51例为BH4反应性PAHD;50例为BH4Dc（2）28例筛查早治的BH4D患儿智商为（96±15）分,晚治疗的11例患儿治疗前为（46±15）分,治疗后为（69±11）分,前后有显著意义（P〈0．05）。DQ／IQ水平与治疗开始时间呈明显的负相关（r=-0．714,P〈0．01）。（3）33例BH4反应性PAHD患儿的智商为（92±18）分。（4）PAHD患者治疗中筛查组智商与非筛查组智商比较,筛查治疗理想组智商与筛查治疗不理想组智商比较,非筛查治疗理想组智商与非筛查治疗不理想组智商比较均有意义（P〈0．001）,47例非新筛并控制理想血Phe浓度PKU患儿智商从治疗前的（60．66±7．78）分,提高到治疗后的（76．62±7．55）分（P〈0．001）。（5）合并癫痫的患儿脑电图的异常率为94．3％,将血苯丙氨酸浓度控制在理想范围,可使脑电图异常有改善。（6）22例大于4个月的患儿血、脑Phe浓度与智商均呈负相关关系r血=-0．5045,r脑=-0．6471（P〈0．01）。结论对所有HPA患者都必须进行BH4D的鉴别诊断,尽早确诊和治疗效果越好。严格控制血苯丙氨酸浓度是减少智能落后的最好措施。