Dahl高血压大鼠肾小管细胞凋亡的研究

目的：通过对Dahl高血压大鼠肾脏皮质肾小管细胞凋亡及增殖的检测，探讨细胞凋亡在盐敏感性高血压大鼠肾损伤中的作用。方法：日本引进Dahl高血压大鼠（实验组为盐敏感型大鼠，对照组为盐抵抗型大鼠），5周龄时喂8%食盐饲料，尾套法每周测一次收缩期血压，取10周、11周、12周龄大鼠肾脏，多聚甲醛固定，常规石蜡包埋，TUNEL法检测凋亡细胞和SP免疫组织化学法检测增殖细胞核抗原（PCNA）阳性细胞，计算阳性细胞率，进行方差分析。结果：Dahl盐敏感型高血压大鼠肾脏皮质肾小管上皮细胞凋亡阳性细胞和PCNA阳性细胞显著增多，具有表现为10、11周龄凋亡和PCAN阳性细胞都增加，在第12周龄PCNA阳性细胞继续增加而凋亡细胞数量有所减少。结论：细胞凋亡在肾脏损伤的早期发挥作用，与细胞变性同时存在，可能是对损伤的一种保护性应激反应。     

Survivin在非小细胞肺癌组织中的表达与细胞凋亡和增殖的关系

目的　探讨Survivin在非小细胞肺癌 (NSCLC)组织中的表达与细胞凋亡和增殖的关系。方法　免疫组织化学S -P法检测 10例正常肺组织和 5 7例NSCLC组织中Survivin及增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达 ;原位末端标记法 (TUNEL)标记凋亡细胞。结果　Survivin蛋白在正常肺组织中不表达。 5 7例NSCLC组织中Survivin蛋白阳性表达率为 5 9.6 % (34/ 5 7) ;Survivin阳性组平均凋亡指数 (apoptosisindex ,AI)显著低于阴性组 (P <0 .0 5 ) ,Survivin表达与AI呈负相关 (r=- 0 .4 2 0 ,P <0 .0 1) ;Survivin阳性组平均增殖指数 (proliferativeindex ,PI)显著高于阴性组(P <0 .0 5 ) ,Survivin表达与PI呈正相关 (r=0 .4 5 9,P <0 .0 1)。结论　Survivin在NSCLC组织中表达上调 ,可抑制肿瘤细胞凋亡、促进细胞增殖 ,在肿瘤的发生、发展中起到重要作用。     

急性白血病细胞生存素、bcl—2和P-糖蛋白表达及临床意义

目的 :探讨生存素、P-糖蛋白及 bcl-2在急性白血病细胞中的表达及其与耐药的关系。方法 :应用间接免疫荧光染色检测急性白血病 43例 P-糖蛋白、bcl-2蛋白的表达 ,逆转录 -聚合酶链反应检测生存素的表达。结果 :急性白血病患者细胞中 P-糖蛋白、bcl-2及生存素的阳性率均高于正常对照组 (P<0 .0 5 ) ;3者的表达在急性髓细胞性白血病与急性淋巴细胞性白血病中无明显差异 (P>0 .0 5 ) ;P-糖蛋白、bcl-2、生存素阳性的患者耐药率均明显高于阴性者 (P<0 .0 5 ) ;3因素中生存素与 bcl-2的表达呈轻度正相关 ;生存素和 P-糖蛋白及生存素和 bcl-2双阳性患者的耐药性明显高于双阴性的患者 ;生存素、P-糖蛋白和 bcl-2 3者都阳性患者的耐药性明显高于双阳性、单阳性或 3阴性的患者 (P<0 .0 5 )。结论 :急性白血病中存在着生存素、bcl-2和 P-糖蛋白的高表达 ,其中生存素与 bcl-2的表达有相关性 ,3指标中 2项或 2项以上阳性的患者耐药性明显增高。     

细胞凋亡及增殖细胞核抗原表达与大肠肿瘤生物学行为的关系

目的：探讨大肠肿瘤组织中细胞凋亡及增殖细胞核抗原（PCNA）表达与其生物学行为的关系。方法：应用免疫组化S－P法及凋亡细胞TUNEL检测法检测10例正常大肠黏膜，15例大肠腺和62例大肠癌标本中细胞增殖指数（PI）及凋亡指数（PI），并分析其与临床病理学参数间的关系。结果：在正常大肠黏膜，大肠腺瘤和大肠癌组织中PI，AI存在显差异（P＜0．05），腺瘤和腺癌组织AI和PI显高于正常黏膜组织；在腺瘤中，不典型增生I级与Ⅱ-Ⅲ级两组间AI和PI存在显差异（P＜0．05），且癌组织中PI高于均数，AI低于均数组淋巴结转移率明显高于其他组织（P＜0．01）。结论：细胞增殖与凋亡平衡失调是大肠黏膜上皮细胞恶性转化的重要因素，两联合检测对判断大肠肿瘤生物学行为及预后有重要意义。     

宫颈癌中金属硫蛋白的表达及其与细胞增殖、凋亡的关系

目的 探讨宫颈癌及癌前病变中金属硫蛋白(MT)的表达及其与细胞增殖、凋亡的关系.方法 应用免疫组化SP法检测不同病变宫颈组织中MT和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,应用TUNEL法检测原位细胞凋亡.结果 在正常宫颈、慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样变(CIN)Ⅰ～Ⅱ级、CINⅢ级、宫颈浸润癌中,MT阳性表达率和增殖指数(PI)均依次递增(均P＜0.05);在CINⅠ～Ⅱ级、CINⅢ级、宫颈浸润癌中,凋亡指数(AI)逐渐降低(均P＜0.05),但明显高于正常宫颈和慢性宫颈炎;MT表达阳性组PI较高,AI较低,与MT阴性组比较,差异有显著性意义(均P＜0.05);MT的表达与宫颈癌的病理类型和组织学分级密切相关(均P＜0.05),与临床分期和淋巴结转移无关.结论 MT可能通过促进细胞增殖和抑制细胞凋亡参与了宫颈癌的发生,检测MT的表达对宫颈癌的早期诊断及恶性程度的评价具有重要参考价值.     

Zeylenone对急性淋巴细胞白血病细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨Zeylenone体外抗急性淋巴细胞白血病(Acute Lymphoblastic Leukemia,ALL)效应及作用的可能机制。方法应用MTT法比较Zeylenone对肿瘤细胞、正常细胞增殖的影响;AO/EB染色观察其对ALL细胞(Reh、RS4;11)凋亡形态学的改变;流式细胞仪检测药物对细胞凋亡及细胞周期的影响。结果 Zeylenone对多种细胞呈现增殖抑制作用,且对ALL细胞株呈现更高的敏感性,而对外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)抑制作用较小,抑制Reh、RS4;11细胞增殖呈时间依赖性和剂量依赖性;Zeylenone能够诱导ALL细胞凋亡,阻滞细胞周期于G0/G1期。结论 Zeylenone体外具有抗ALL细胞增殖的作用,其作用与诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期相关。     

核转录因子-κB抑制剂对儿童急性淋巴细胞白血病细胞生长调控和凋亡的影响及意义

目的探讨核转录因子-κB（NF-κB）抑制剂对儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞生长和凋亡的影响及意义。方法分组：对照组、对甲苯磺酰-L-苯丙氨酸甲基甲酮（TPCK）组、地塞米松（Dex）组、TPCK＋Dex组。MTT比色分析法测定细胞生长抑制率,流式细胞术测定细胞凋亡率。结果TPCK和Dex均可引起ALL细胞生长抑制和凋亡,其生长抑制率和凋亡率与对照组比较,差异均有统计学意义（P均〈0.01）。TPCK＋Dex组的生长抑制率和凋亡率显著高于两者单独使用时,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。结论NF-κB可能通过抑制细胞凋亡和促进细胞增殖参与儿童ALL的发病。抑制NF-κB信号传导途径可能在儿童ALL治疗中有重大价值。     

温下肠腑方对大鼠大肠癌细胞周期素D1、增殖细胞核抗原表达的影响

目的探讨温下肠腑方对二甲基肼诱导的大鼠大肠癌细胞周期素D1（CyclinD1）、增殖细胞核抗原（PCNA）表达的影响。方法予以大鼠1,2-二甲基肼腹腔注射,建立大鼠大肠癌模型,温下肠腑方灌胃给药干预,在第15、20、23周时间点,分别用免疫荧光组织化学法结合激光共聚焦显微镜扫描和免疫组织化学法观察中药对大鼠肠组织CyclinD1和PCNA表达的影响。结果在第15、20、23周时间点,与对照组比较,模型组大鼠肠组织CyclinD1蛋白和PCNA蛋白表达均显著增高,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;与模型组比较,温下方组Cyclin D1蛋白和PCNA蛋白表达显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论温下肠腑方能够显著降低肠癌动物模型肠组织Cy-clinD1、PCNA表达,提示温下肠腑方可能通过抑制CyclinD1、PCNA的表达而抑制肠癌细胞的增殖。     

皮肤混合瘤中生存素、转化生长因子和增殖细胞核抗原的表达及意义

目的检测生存素（Survivin）、转化生长因子（TGF）-α和增殖细胞核抗原（PCNA）在皮肤混合瘤中的表达,探讨它们在皮肤混合瘤发病中的意义。方法用免疫组织化学技术检测22例皮肤混合瘤的石蜡包埋组织及10例正常皮肤组织中Survivin、TGF-α和PCNA的表达。结果 Survivin在皮肤混合瘤组织中阳性率明显高于正常皮肤对照组,两者差异有统计学意义（P〈0.01）;TGF-α在皮肤混合瘤组织中阳性率明显高于正常皮肤对照组,两者差异有统计学意义（P〈0.01）;PCNA在皮肤混合瘤组织中阳性率明显高于正常皮肤对照组,两者差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 Survivin、TGF-α和PCNA在皮肤混合瘤组织中均呈高表达,其与皮肤混合瘤的发生关系密切。     

鼻NK/T细胞淋巴瘤生存素基因表达与细胞凋亡和增殖的关系

目的 :探讨凋亡抑制基因生存素 (Survivin)在鼻NK/T细胞淋巴瘤中的表达 ,及其与细胞凋亡和增殖的关系。方法 :应用TdT介导的dUTP缺口末端标记 (TUNEL)技术和免疫组织化学链霉素抗生物素 过氧化酶连接法 (SP法 )检测 2 5例鼻NK/T细胞淋巴瘤组织和 10例反应性增生淋巴组织中的细胞凋亡、增殖细胞核抗原 (PCNA)和Sur vivin基因表达水平。结果 :2 5例鼻NK/T细胞淋巴瘤组织中Survivin表达阳性 17例 (6 8.0 0 % ) ,10例反应性增生淋巴组织中Survivin不表达 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。 2 5例鼻NK/T细胞淋巴瘤中平均凋亡指数 (AI)为 1.92 %± 0 .86 % ,平均增殖指数 (PI)为 4 1.4 8%± 5 .10 % ;Survivin表达阳性组AI(1.71%± 0 .6 1% )显著低于阴性组 (2 .2 9%± 0 .72 % ) ,PI(4 3.35 %± 4 .80 % )显著高于阴性组 (37.5 0 %± 2 .90 % ) ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。结果 :鼻NK/T细胞淋巴瘤中Survivin基因表达上调 ,Survivin基因可能通过肿瘤细胞凋亡的抑制和细胞增殖参与NK/T细胞淋巴瘤的发生发展。     

急性白血病抗凋亡基因BCL-2的表达及其意义

目的：探讨ＢＣＬ－２基因转录在急性白血病中的作用。方法：应用逆转录／聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测２０例急性白血病患者细胞中ＢＣＬ－２ｍＲＮＡ的表达。结果：９例完全缓解（ＣＲ）患者中２例（２２．２％）呈ＢＣＬ－ｍＲＮＡ阳性,而１１例不缓解（ＮＲ,包括难治及复发）患者均呈ＢＣＬ－２ｍＲＮＡ阳性（１００％）,两组ＢＣＬ－２ｍＲＮＡ阳性比例的差异非常显著（Ｐ＜０．０１）。结论：急性白血病ＢＣＬ－２的表达升高可直接影响化疗效果,且是判断患者预后的有用指标。     

重组可溶性TRAIL联合化疗药诱导急性白血病细胞凋亡

目的肿瘤坏死相关凋亡诱导配体(TNT-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)作为肿瘤细胞诱导凋亡剂,可单独或与化疗药联合作用诱导多种肿瘤细胞株凋亡。本实验观察重组人可溶性TRAIL是否可有效诱导临床白血病患者的白血病细胞凋亡,并检验化疗药Ara-C联合TRAIL对白血病细胞的杀伤作用。方法将13例原始细胞比例均>60%急性白血病患者的骨髓标本的每份分4组:对照组、TRAIL组、Ara-C组、TRAIL+Ara-C组,进行细胞培养24h后,用AnnexinⅤ及碘化丙啶染色后流式细胞仪观察细胞凋亡率。结果对照组细胞凋亡率为(10.22±7.48)%,TRAIL组为(14.61±11.95)%,Ara-C组为(15.95±11.12)%,TRAIL+Ara-C组为(22.11±15.97)%。将4组标本进行组间方差检验,对照组与TRAIL+Ara-C组比较差异有统计学意义(P=0.015<0.05)。在TRAIL组中,13例中有3例(23%)显示对TRAIL诱导的凋亡敏感(若TRAIL组细胞凋亡率高于对照组10%以上,即认为对TRAIL敏感);在TRAIL+Ara-C组中,2例原对TRAIL不敏感的标本及1例对TRAIL敏感标本在TRAIL+Ara-C联合作用下,细胞凋亡率均高于对照组20%以上。结论1)TRAIL在体外可诱导急性白血病患者的白血病细胞凋亡;2)化疗药Ara-C与TRAIL联合应用可增加白血病细胞的凋亡率,包括先前对TRAIL不敏感的白血病细胞。     

羽扇豆醇对白血病细胞株增殖和凋亡作用的影响

目的研究羽扇豆醇对人髓系K562、NB4、SHI-01及淋系Jurkat白血病细胞的增殖和凋亡作用。方法以不加药物处理为对照组,设置5个羽扇豆醇浓度梯度分别处理人髓系、淋系白血病细胞,采用MTT法检测细胞活力及增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果随着羽扇豆醇浓度的升高,细胞增殖明显受到抑制。当浓度达到150μmol/L时,4种细胞都呈现出明显的增殖抑制作用（均P〈0.05）;与对照组相比,羽扇豆醇组细胞凋亡率明显增加（P〈0.05）。结论羽扇豆醇可显著抑制人髓系K562、NB4、SHI-01及淋系Jurkat白血病细胞增殖并诱导其凋亡。     

凋亡抑制蛋白Survivin在儿童急性白血病中的表达及临床意义

目的探讨凋亡抑制蛋白Survivin在儿童急性白血病(AL)中的表达及其临床意义。方法49例AL患儿,其中初诊未治26例,治疗后完全缓解23例;对照组为10例非恶性血液病患儿。应用免疫组织化学方法检测骨髓细胞Survivin蛋白的表达。结果AL初诊未治患儿Survivin蛋白表达阳性率(65.38%)显著高于治疗后完全缓解患儿(17.39%)和对照组(10.00%,P<0.017);初诊未治患儿Survivin蛋白表达阳性率在急性淋巴细胞白血病(63.16%)和急性髓细胞白血病(71.43%)比较无显著性差异(P>0.05)。结论Survivin可能通过抑制肿瘤细胞的凋亡参与了儿童AL的发生发展,为儿童AL的治疗提供了新的思路。     

雷帕霉素对HL-60细胞增殖和凋亡的影响

目的研究雷帕霉素作用于HL-60细胞后，对细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡率的影响。方法通过细胞生长曲线、MTT检测细胞增殖情况；免疫荧光染色、流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率。结果雷帕霉素组与空白对照组细胞生长抑制率比较，差异有显著性（P〈0．05）；细胞培养72h后，雷帕霉素组与空白对照组细胞凋亡率比较，差异有显著性（P〈0．05）。结论雷帕霉素能抑制HL-60细胞增殖及促进其凋亡。     

Antitumor Effect of Interferon-α on U937 Human Acute Leukemia Cells in vitro and Its Molecular Mechanism

In order to investigate the antitumor effect and molecular mechanism of interferon-α(IFN-α) on human acute myeloid leukemia cell line U937 cells in vitro, the proliferation of U937 cells was determined by MTT assay, the apoptosis rate was analyzed by flow cytometry (FCM), and the mRNA expression of cell cycle regulatory protein cyclin E was detected by RT-PCR. The results showed that IFN-α could inhibit the proliferation of U937 cells significantly in a dose- and time-dependent way (P<0.01), and induce the apoptosis of U937 cells also in a dose- and time-dependent manner at the concentration of 1000-4000 U/L (P<0.01). The apoptosis rate of U937 cells was even over 50% when cultured with IFN-α for 36-48 h at the concentration of 2000-4000 U/L. Moreover, the expression of cyclin E mRNA was markedly inhibited by the addition of IFN-α, and the inhibition was time-dependent (P<0.01). It was concluded that the anti-leukemia mechanism of IFN-α might be correlated with its antiproliferative and apoptotic inducing effects, and the down-regnlation of the cyclin E expression might be one of its molecular mechanisms.     

Survivin在侵袭性垂体腺瘤中的表达及其与bcl-2、bax表达的关系

目的探讨凋亡抑制基因survivin在侵袭性垂体腺瘤中的表达，及其与bcl-2、bax蛋白表达的相关性。方法应用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶连接法（SP法），检测39例侵袭性垂体腺瘤瘤组织中survivin、bcl-2、bax蛋白的表达，与非侵袭性垂体腺瘤32例进行对照。结果侵袭性垂体腺瘤中survivin蛋白阳性表达率为61．5％，明显高于非侵袭性垂体腺瘤的阳性表达率21．9％（P〈0．01）；在侵袭性垂体腺瘤中survivin蛋白表达与bcl-2蛋白表达呈正相关（P〈0．01），而与bax蛋白表达呈负相关（P〈0．01）。结论survivin可通过抑制肿瘤细胞凋亡，对侵袭性垂体腺瘤的发生、发展起重要作用，并与凋亡相关基因bcl-2、bax在侵袭性垂体腺瘤的发展中分别起协同和拮抗作用。     

姜黄素对原代急性髓性白血病细胞凋亡及调控蛋白Mcl-1、Bax、Bak表达的影响

为探讨姜黄素诱导急性髓系白血病(AML)原代细胞凋亡的作用及其机制,采用流式细胞术作细胞周期分析并检测Sub-G1峰值;SABC法检测Bcl-2家族Mcl-1、Bax和Bak蛋白表达.结果显示姜黄素不影响初治AML原代细胞细胞周期进展,但使Sub-G1峰值升高(P＜0.05).在初治AML原代细胞,同样处理可下调Mcl-1表达、上调Bax和Bak表达,且结果有显著性差异.提示姜黄素可诱导初治AML患者原代细胞凋亡,＆1-2基因家族成员参与姜黄素诱导白血病细胞凋亡.     

凋亡抑制因子Survivin在急性白血病和骨髓增生异常综合征患者中的表达

目的研究凋亡抑制因子survivin在急性白血病（AL）和骨髓增生异常综合征（MDS）患者中的表达及其临床意义.方法以23例初发的AL患者和27例初发的MDS患者为研究对象,10名健康成年人为对照.应用RT-PCR的方法检测survivin mRNA 的表达.结果 AL患者survivin mRNA的表达阳性率为78.26%,在MDS患者中的表达率为74%,均明显高于对照组.结论 survivin广泛表达于AL患者和MDS患者,提示其过度表达与AL及MDS有关.