浸润性乳腺癌HDAC1mRNA表达的临床病理意义

目的 探讨浸润性乳腺癌组织中组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)蛋白质水平和分子水平mRNA的表达意义及其与临床病理特征之间存在的相关性.方法 分别应用EnVision两步法免疫组化和RT-PCR方法检测乳腺浸润性导管癌和乳腺良性增生HDAC1蛋白和HDAC1 mRNA的表达,并分析其与临床病理特征的关系,同时与Her-2蛋白表达结果比较分析.结果 (1)乳腺浸润性导管癌中,HDAC1蛋白高表达率为35.83%(43/120),对照组20例乳腺增生病变中HDAC1低表达或不表达,两者之间差异有显著性;(2)HDAC1 mRNA阳性率为63.33%(38/60),高于免疫组化法;(3)乳腺癌中HDAC1表达与Her-2(55.26%)的表达有相关性(P<0.05).结论 (1)HDAC1蛋白在乳腺癌和乳腺良性增生性病变中有差异,HDAC1在浸润性乳腺癌的发生、发展中起重要作用,对判断预后有积极意义;(2)RT-PCR方法检测结果更可靠、更敏感;(3)HDAC1抑制剂有望成为乳腺癌患者治疗的新靶向药物.     

慢病毒介导的SHP-1过表达抑制模型小鼠动脉粥样硬化

目的:研究含SH2结构域的酪氨酸磷酸酶-1(SHP-1)慢病毒载体在动脉粥样硬化模型小鼠中的作用。方法:将45只8周龄雄性Apo E基因敲除小鼠随机分为3组,即对照组、绿色荧光蛋白(GFP)转染组、SHP-1转染组。3组小鼠右侧颈总动脉植入套环并高脂喂养8周,随后分别转染GFP空载体和SHP-1慢病毒(SHP-1-LV)。分别于转染第1、2、6周检测硬化斑块荧光强度、小鼠体重、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平变化,并利用real-time PCR和Western blot检测右侧颈总动脉中SHP-1、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9等的表达,最后制作切片染色观察斑块病理变化。结果:荧光显微镜下观察到慢病毒转染第1、2、6周后斑块有明显荧光,且在第2周时荧光强度最高,SHP-1慢病毒转染对小鼠体重和血清TC、TG水平无显著影响,但可显著上调右侧颈总动脉中SHP-1的mRNA和蛋白的表达,同时抑制IL-6、TNF-α、MMP-2、MMP-9等的表达水平。SHP-1慢病毒转染也降低右侧颈总动脉斑块面积比及脂质含量。结论:过表达SHP-1可能促进小鼠动脉粥样硬化斑块消退,从而为预防和治疗动脉粥样硬化提供靶点。     

FIZZ1在ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块内的表达

目的:探讨FIZZ1在ApoE基因敲除小鼠粥样斑块内的表达。方法:C57BL/6JApoE基因敲除鼠及C57BL/6J野生型小鼠各9只,分别喂食高脂饲料及普通饲料,24周后处死,自主动脉根部至腹主动脉离断整支血管,石蜡包埋后作连续切片,行HE染色及FIZZ1免疫组化,检测血管斑块内FIZZ1表达情况,RT-PCR检测斑块内FIZZ1mRNA表达。结果:ApoE基因敲除鼠高脂饲养24周后,主动脉根部动脉粥样硬化明显,斑块体积较大,免疫组化及其RT-PCR可见FIZZ1及其mRNA在粥样硬化斑块内明显表达,同龄野生型C57BL/6J鼠血管壁内未见FIZZ1及其mRNA表达。结论:FIZZ1能在动脉粥样硬化斑块内表达。     

小檗碱改善动脉粥样硬化小鼠的血管炎性反应和钙化

目的以Apo^-/-E小鼠和HUVECs为对象研究小檗碱对动脉粥样硬化的缓解作用。方法 6~8周龄的雄性Apo^-/-E小鼠随机分为对照组、模型组(给予高脂饲料喂养4周)、小檗碱组[灌胃给予,100 mg/(kg·d)]和阿托伐他汀组[灌胃给予,5 mg/(kg·d)],每组12只。生化分析仪检测血清中TC、TG、LDL-C和HDL-C含量;ELISA检测IL-6、ALP、BMP-2和TNF-α的表达;化学发光法检测钙含量;分离主动脉并进行HE染色,免疫组化检测组织中BMP-2 OPG、OCN、RUNX2表达量;化学发光法检测主动脉组织匀浆中ALP的表达和钙含量。将HUVECs细胞分为对照组、模型组(TNF-α刺激)和小檗碱组(浓度分别为7.5,10,15,20 mg/L)。ELISA检测ICAM、VCAM和MMP-9表达量。结果与对照组相比,模型组动物血清中炎性因子和血脂4项水平明显上升(P<0.05),血管内斑块明显,血管组织中ALP、BMP-2、OPG、OCN和RUNX2表达量升高(P<0.05)。小檗碱治疗后可明显降低血清中LDL-C和TC水平(P<0.05),抑制炎性因子IL-6分泌,降低血清和组织中的ALP、BMP-2、OPG、OCN、RUNX2和钙含量(P<0.05),抑制血管炎性浸润并提高斑块稳定性。与对照组相比,模型组HUVECs细胞ICAM、VCAM和MMP-9表达上调,小檗碱抑制ICAM、VCAM和MMP-9表达。结论小檗碱能够有效调节高脂饮食动物的血清脂质水平,减少炎性介质对血管内皮的损伤并抑制血管钙化,有可能改善动脉粥样硬化发挥心血管保护作用。     

MCP-1的表达与动脉粥样硬化

单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ－１）能趋化单核细胞在内皮下间隙聚集，这是动脉粥样硬化最早期的病变之一，近年研究表明，内皮细胞、平滑肌细胞、单核细胞和巨噬细胞均能表达ＭＣＰ－１。并认为动脉粥样硬化病变早期的内皮细胞和内皮下巨噬细胞是ＭＣＰ－１的主要来源。     

HDAC1和HDAC6蛋白过表达在卵巢浆液性癌中的临床病理学意义

目的探讨组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)1和6蛋白表达检测在卵巢浆液性癌中的临床病理学意义。方法选取147例卵巢病变的存档蜡块标本,其中包括39例卵巢浆液性囊腺瘤26例卵巢浆液性交界性囊腺瘤和82例卵巢浆液性囊腺癌。应用免疫组化EnVision法检测HDAC1和HDAC6基因蛋白在上述卵巢病变组织中的表达水平,并分析其蛋白检测的临床病理学意义。结果 HDAC1和HDAC6蛋白分别为胞核和胞质染色,HDAC1蛋白强阳性表达率在卵巢浆液性囊腺瘤、交界性浆液性肿瘤和浆液性囊腺癌中分别为7.7%(3/39)、65.4%(17/26)和80.5%(66/82);HDAC6蛋白的强阳性表达在39例卵巢浆液性囊腺瘤中完全阴性,而在交界性浆液性肿瘤中为34.6%(9/26)、在浆液性囊腺癌中则高达86.6%(71/86),差异均具有统计学意义。结论 HDAC1和HDAC6蛋白在卵巢癌发生发展过程中起重要作用,对于卵巢浆液性癌的诊断具有重要的辅助意义,有望成为卵巢癌治疗的新靶点。     

ADAM17在动脉粥样硬化发病机制中作用的研究进展

动脉粥样硬化是一种慢性炎性反应疾病,涉及脂质代谢失衡和免疫反应失调.去整合素-金属蛋白酶17(ADAM17)是经典的膜蛋白脱落酶,通过参与炎性反应、病理性血管生成及斑块不稳定过程,促进动脉粥样硬化的发生发展.在少数情况下,ADAM17也表现出抗动脉粥样硬化作用.因此,关注ADAM17在动脉粥样硬化中的作用机制,有利于对...     

白藜芦醇对溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜氧化应激水平及SIRT3表达的影响

目的研究白藜芦醇对溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠黏膜氧化应激水平以及乙酰化酶3(SIRT3)表达的影响。方法采用葡聚糖硫酸钠(DSS)制作UC型(MD)组、低剂量治疗组(RLD)、高剂量治疗组(RHD)。造模7 d后同时停止使用造模药物,随后RLD组及RHD组给予白藜芦醇治疗7 d,NC组及MD组给予生理盐水7 d。14 d后处死小鼠,取结肠组织行HE染色,并检测结肠黏膜中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)、活性氧(ROS)活性及丙二醛(MDA)含量;采用PCR及Western blot检测SIRT3的mRNA及蛋白的表达量。结果 MD组氧化应激水平升高,SIRT3表达降低;白藜芦醇治疗后,氧化应激水平减低,SIRT3表达升高,且RHD组效果优于RLD组。结论白藜芦醇可通过上调结肠黏膜SIRT3、GSH、SOD以及下调MDA、ROS从而降低黏膜氧化应激水平,进而对UC发挥一定的治疗作用,且其效果呈剂量依赖性。     

SIRT在肠屏障中作用的研究进展

沉默信息调节子(SIRT)是一组保守的NAD+依赖的蛋白去乙酰化酶,参与调控细胞的基因稳定、代谢、衰老和凋亡等过程。研究表明,SIRT对肠屏障具有保护作用,其通过参与调节炎性因子的释放、肠上皮细胞间紧密连接蛋白的表达、改变肠道潘氏细胞和杯状细胞的数量等影响肠屏障的结构与功能。     

抑制CDK9的表达减轻高脂饮食介导的炎症反应和动脉粥样硬化程度

目的 探究细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK9）在高脂饮食介导的炎症反应及动脉粥样硬化中的作用。方法 收集健康体检者及动脉粥样硬化患者血清标本各20例,ELISA方法检测患者血清CDK9和炎症因子白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,分析CDK9表达量与炎症因子的相关性。24只雄性C57/B6小鼠随机分为对照组、模型组和CDK9抑制剂组,每组8只。HE染色与油红O染色方法观察动脉粥样斑块的形态学变化;免疫组织化学方法检测各组小鼠主动脉组织中IL-6、TNF-α、CD68、PCNA和Ki67;Western blot方法检测各组小鼠主动脉组织中α-SMA和PCNA的表达。结果 动脉粥样硬化患者的血液CDK9和炎症因子水平显著高于健康体检者,且两者呈正相关。模型组小鼠动脉粥样硬化斑块沉积面积明显增加;IL-6、TNF-α水平和CD68阳性细胞数显著升高;α-SMA和PCNA的蛋白表达显著升高（P<0.05）。CDK9抑制剂处理明显减少模型小鼠主动脉动脉粥样斑块沉积的面积、降低IL-6、TNF-α水平和CD68阳性细胞数、降低α-SMA和PCNA的蛋白表达（P<...     

ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化斑块中NHE1与Netrin-1表达上调

目的探讨ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化斑块组织及小鼠巨噬细胞系(RAW 264.7)是否同时表达钠氢交换体1(NHE1)及神经轴突导向因子-1(netrin-1),以及两者之间共定位、相互影响情况。方法制作小鼠动脉粥样硬化斑块模型,HE染色检测主动脉粥样斑块形成;免疫荧光及显微共聚焦检测动脉粥样斑块中NHE1、netrin-1表达及共定位;用氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)干预RAW264.7细胞,Western blot检测不同浓度及时间干预下, NHE1和netrin-1蛋白表达;设计NHE1基因小干扰RNA(siRNA),通过脂质体转染导入RAW264.7细胞,RT-qPCR及Western blot分别检测靶向作用于NHE1基因的小干扰RNA(siRNA)的抑制效率。结果小鼠动脉硬化斑块中NHE1表达上调(P<0.05),且NHE1与netrin-1存在部分共定位情况;Ox-LDL可上调RAW264.7细胞NHE1及netrin-1蛋白表达,且呈一定时间-浓度依赖性(P<0.05);构建的NHE1 siRNA能有效抑制RAW264.7细胞NHE1表达(P<0.05);有效敲降RAW264.7细胞NHE1表达能使Ox-LDL干预下升高的NHE1、netrin-1蛋白表达下调(P<0.05)。结论小鼠动脉粥样硬化斑块及Ox-LDL干预的小鼠巨噬细胞系(RAW264.7)中NHE1、netrin-1表达上调且存在共定位规律,netrin-1表达受NHE1表达的影响。     

内质网应激中IRE1级联反应对动脉粥样硬化的作用

正1概述内质网(endoplasmic reticulum,ER)蛋白质折叠在生理上是至关重要的,它的破坏导致内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)触发动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)发生发展。未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)是目前研究最为透彻的ERS信号通路,一定程度的UPR有利于维持     

曲古抑菌素A通过抑制脊髓背角内的炎症反应减轻大鼠神经病理性痛

目的:观察曲古抑菌素A (TSA)对脊神经结扎(SNL)大鼠镇痛效果及分子机制。方法:40只健康雄性Sprague Dawley(SD)大鼠随机分为假手术组(sham)、曲古抑菌素A处理组(TSA)、脊神经结扎组(SNL)和SNL+TSA组(SNL+TSA)。采用L5脊神经结扎(SNL)的方法建立神经病理性痛模型,鞘内注射TSA进行干预,通过von Frey丝和热板实验检测大鼠的痛敏,应用免疫荧光染色方法观察大鼠脊髓背角内HDAC1的表达情况;应用Western Blot方法观察大鼠脊髓背角内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙接头蛋白分子1(Iba-1)的表达水平;应用real time RT-PCR方法检测大鼠脊髓背角内TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达水平。结果:SNL模型大鼠术后机械性痛阈值和热痛阈值均显著降低(P <0.05),鞘内给予TSA能够明显缓解大鼠患侧后足机械性痛敏和热痛敏; SNL模型大鼠脊髓背角内HDAC1的表达较对照组明显增加,而鞘内注射TSA可显著抑制其表达; SNL术后脊髓背角内GFAP和Iba-1的表达显著升高(P <0.05),...     

线粒体SIRT3在器官纤维化中作用的研究进展

器官纤维化是造成脏器功能障碍的主要原因,且目前尚缺乏有效应用于临床治疗的抗纤维化疗法。而SIRT3作为一种重要的线粒体去乙酰化酶,可通过调节线粒体蛋白乙酰化水平保护线粒体免受各种损伤,从而在器官纤维化中发挥作用。SIRT3能通过调节线粒体代谢、氧化应激、线粒体动力学等方面减缓或抑制器官纤维化的进程。     

SIRT1影响间充质干细胞骨修复的研究进展

激活沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)可延长细胞寿命,延缓衰老的发生.SIRT1在调节炎性反应过程中也发挥着重要作用.基于在间充质干细胞的组织修复过程中,细胞衰老及炎性反应严重影响其修复能力.因此,有望通过调节SIRT1活性改变间充质干细胞组织修复能力.     

去纤酶对防止家兔实验性动脉粥样硬化斑块形成的作用

目的 研究去纤酶是否具有防止家兔实验性动脉粥样硬化斑块形成的作用。方法 对给药组及对照组模型动物血清总胆固醇含量,主动脉病变面积有胆固醇含量,心壁冠状动脉分支狭窄程度进行定性或定量分析。结果 去纤酶能降低血清及动脉壁的胆固醇含量（Ｐ〈０．０１）,斑块面积明显小于模型对照组（Ｐ〈０．０１）,在胸腹主动脉区各动脉分支开口愉形成计数中,给药组明显少于对照组,心脏上１／３处横切片显示心壁内冠状动脉大,中分     

SAHA对糖尿病大鼠肾组织Twist和HDAC1表达的影响

目的:通过观察辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)对糖尿病(DM)大鼠肾组织Twist、组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)及相关上皮-间充质转化和纤维化指标表达的影响,初步探讨SAHA对糖尿病肾病Twist表达变化的可能干预机制。方法:以链脲佐菌素复制DM大鼠模型,实验分为正常对照(NC)组、DM组和SAHA组,每组12只。造模成功8周后,SAHA组用SAHA(25 mg·kg~(-1)·d~(-1))进行灌胃。治疗8周后处死大鼠,HE和Masson染色观察肾组织形态变化;免疫组织化学染色观察肾组织中Twist的表达变化;Western blot法检测肾组织中Twist、HDAC1、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和IV型胶原(Col-Ⅳ)蛋白的表达;real-time PCR检测肾组织中Twist的mRNA表达。结果:DM组的血糖、24 h尿蛋白量和肾脏指数均显著高于NC组;而SAHA组肾脏指数与DM组相比有明显降低(P0.05),24 h尿蛋白量虽有降低,但差异无统计学显著性,而血糖无明显改变。与NC组对比,DM组大鼠肾组织中HDAC1、α-SMA和Col-Ⅳ蛋白表达上调,E-cadherin蛋白表达下调,Twist的mRNA和蛋白表达上调(P0.05);SAHA组大鼠肾组织中的Twist、HDAC1、α-SMA和Col-Ⅳ蛋白表达量明显低于DM组(P0.05),且Twist的mRNA的表达比DM组低,E-cadherin蛋白表达较DM组有所上升(P0.05)。相关性结果显示,在糖尿病大鼠肾组织中,Twist与HDAC1蛋白表达呈正相关(P0.05)。结论:SAHA可下调DM大鼠肾组织中Twist的表达,减轻糖尿病肾病大鼠肾纤维化病变,其机制可能与抑制HDAC1和Twist形成进而促进Ecadherin转录有关。     

抑肽酶抑制体外循环中炎症反应的应用研究

目的:总结抑肽酶抑制体外循环心脏直视手术中炎性反应的研究和临床应用.方法:自2001年1月至11月,因心脏瓣膜病变而施行心脏瓣膜置换手术的患者随机分为研究组和对照组,术中应用抑肽酶的患者作为研究组.两组患者的体外循环、麻醉方法、预充液配制及手术方式间无差异.分别在体外循环前、中、后监测IL-6、IL-8和TNF-α变化.结果:两组患者CPB开始前的各炎性因子浓度间无显著性差异(P＞0.05),而体外循环开始至结束后对照组患者的各炎性因子浓度均比研究组患者显著增加(P＜0.05).结论:抑肽酶能有效的抑制体外循环术中IL-6、IL-8和TNF-α的释放,减轻体外循环术后炎性反应的程度,这对促进患者术后恢复、减少术后并发症具有重要的意义.     

组蛋白去乙酰化酶2在烟雾致COPD大鼠肺组织中表达下降

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pneumonia disease,COPD)是一种有多种炎性因子、炎性介子参与的气道慢性炎性反应疾病,其炎性反应过程复杂使病情反复迁延[1]。组蛋白乙酰化酶(histone acetylase,HAT)和组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)在各种炎性反应基因的表达中起重要作用。因此,COPD气道炎性反应可能与之变化所致的炎性反应基因表达增加有关。本实验使用烟熏制备