NLRP3炎症小体在糖尿病创面愈合中的作用及中医药干预的研究进展

糖尿病创面久不愈合已成为严重的医学问题,可导致感染、截肢,甚至危及生命,同时造成了巨大社会经济负担。炎症状态的慢性化是糖尿病创面愈合过程延长的重要原因。NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体是一种细胞内蛋白复合物,包括NLRP3、凋亡相关颗粒样蛋白（ASC）、胱天蛋白酶-1前体（pro-Caspase-1）,激活后可释放促炎因子白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)参与炎症反应。NLRP3炎症小体的激活与多种炎症性疾病的进展相关,研究发现糖尿病创面微循环障碍、晚期糖基化终产物累积、氧化应激损伤、巨噬细胞长期浸润等多种因素均能对NLRP3炎症小体产生影响,从而导致创面持续的炎症状态。因此,靶向NLRP3炎症小体,减少其过度激活,抑制其过度表达,成为治疗糖尿病创面的新策略。文章从糖尿病创面病理改变与NLRP3炎症小体相关联的角度,总结了调控糖尿病创面氧化应激、中性粒细胞外诱捕网（NETs）/NLRP3炎症小体轴、诱导巨噬细胞向M2型极化、减少晚期糖基化终产物的过量产生及促进自噬等方面,降低NLRP3炎症小体过度表达以促进创面修复的相关研究,并分析了目前中药有效成分...     

基于NLRP3焦亡通路的中药干预溃疡性结肠炎的研究进展

溃疡性结肠炎（UC）主要发生于结直肠,该病病理机制复杂,与肠道的不可控性炎症反应密切相关。当前,西医主要使用糖皮质激素、免疫抑制剂等减轻肠道炎症,虽然可以在一定程度上阻遏UC的进展,但不良反应较大。越来越多研究证实,中医药防治UC具有明显的优势,可显著降低该病复发率。细胞焦亡是一种新型细胞死亡方式,可破坏细胞结构,释放胞内促炎物质,介导UC肠道免疫反应。研究人员认为中医药对细胞焦亡的干预主要表现为促进细胞焦亡（损其有余）和抑制细胞焦亡（补其不足）,这与调节阴阳相一致。其中,中药主要通过抑制细胞焦亡（补其不足）,减轻肠道免疫反应,起到治疗UC的作用。近年来,业界开展了大量研究探索中药通过调控NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)焦亡通路治疗UC的作用机制,结果表明NLRP3焦亡通路是中药治疗UC的关键靶通路。但目前尚缺乏关于中药抑制NLRP3焦亡通路进而治疗UC的全面系统的总结。该文以“细胞焦亡”“NLRP3”“溃疡性结肠炎”及“中药”等为关键词,检索和分析近年来该领域中英文文献,发现调控NLRP3焦亡通路的中药主要包括清热燥湿类、调和气血类、行气通腑类和健脾祛湿类,这可为科研...     

NLRP3炎症小体与抑郁症的关系及中医药的干预作用

抑郁症是全球高发性精神疾病,严重威胁人们健康,带来严重的社会经济负担。近年来,随着研究的逐步深入,有关抑郁症的发病机制研究已经不再局限于神经递质、下丘脑-垂体-肾上腺轴、氧化应激等方面,神经炎症在抑郁症发病机制中的重要作用日益受到重视。研究发现,NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)炎症小体作为连接心理应激和抑郁症的桥梁,可以启动炎症级联反应,介导抑郁症的产生。该文通过探讨NLRP3炎症小体与抑郁症的关系,挖掘其在抑郁症中可能存在的调控机制及作用靶点,总结中医药通过调控NLRP3炎症小体,减少炎症细胞因子释放,发挥抗抑郁的作用机制,以期为抑郁症的防治提供新的思路。     

NLRP3炎症小体与糖尿病心肌病的关系及中医药调控研究进展

糖尿病心肌病（DCM）是糖尿病的并发症之一,是指发生在糖尿病中,其发病机制区别于其他心血管疾病如冠心病、心脏瓣膜病、亦或先天性心脏病的一种特发类心肌病,亦是多年以来糖尿病患者的主要致死病因之一。研究表明,DCM的发病机制与胰岛素抵抗、多种炎症反应激活、氧化应激增加、冠状动脉微循环受阻、晚期糖基化终产物（AGEs）积累等过程有密切联系。而在多种炎症反应中,NOD样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体激活可通过炎症的级联反应诱导分泌出大量促炎细胞因子,继而介导细胞焦亡过程,促进心肌损伤。目前基于NLRP3炎症小体在DCM损伤防治重要作用功能,国内外开展了大量中医药实验研究,证明了黄芪多糖、人参皂苷Rb₁等中药提取物或单味中药如云芝、冬虫夏草亦或抵挡汤、加味桃核承气汤等组方制剂及针刺、中医运动疗法等可通过调控NLRP3炎症小体的相关通路从而抑制其组装或激活,降低炎症反应,进而抑制DCM中心肌的重构,改善DCM的心脏功能。该文就NLRP3炎症小体与DCM的关系及中医药在此领域中发挥抗炎效应的研究进展进行综述,旨在为DCM开发治疗手段提供新的思路。     

中医药调控NLRP3炎症小体治疗糖尿病肾病的研究进展

糖尿病肾病（DN）是慢性肾脏病（CKD）主要病因,加重了终末期肾脏病（ESRD）的患病率,严重威胁人类健康。DN病理机制十分复杂,其中炎症反应是糖尿病肾病级联损伤过程中的关键病理环节。因此,针对糖尿病肾病炎症反应的治疗有利于缓解DN的疾病进展。NOD样受体蛋白3(NLRP3)是一种经典的蛋白酶体,其作为先天免疫反应的诱导剂,NLRP3炎症小体被激活后产生和释放炎症介质,触发细胞焦亡和自噬失控,介导促肾纤维化的应激信号,参与DN肾脏的发生与发展。NLRP3炎症小体作为诱导炎症反应的核心位点广泛参与了DN疾病进程,可能是DN疾病进展的新靶点。中药单体及复方在糖尿病肾病的防治中起到越来越重要的作用,最新研究发现中医药有效防治DN与调控NLRP3炎症小体激活关系密切。从NLRP3炎症小体角度探究中医药治疗DN发生发展的作用机制的研究较多,但尚缺乏系统综述。该文通过分析汇总近年来国内外文献,从NLRP3炎症小体组装与激活,在糖尿病肾病的作用机制及中医药通过相关途径调控NLRP3炎症小体防治DN方面进行综述,为中医药对NLRP3炎症小体调控研究提供参考,以期为防治DN提供新靶点和新策略。     

基于NLRP3炎症小体探讨地奥心血康抗动脉粥样硬化作用机制

目的 研究地奥心血康（Di''ao Xinxuekang,DXXK）对小鼠RAW264.7巨噬细胞和动脉粥样硬化（Atherosclerosis, AS）大鼠胸主动脉NOD样受体3（NLRP3）炎症小体的影响,探讨其抗AS的作用机制。方法 氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）刺激RAW264.7细胞建立体外模型,MCC950和DXXK干预,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,白细胞介素-1β（IL-1β）含量,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测NLRP3,衔接蛋白凋亡相关斑点样蛋白（ASC）及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1（Caspase-1） mRNA和蛋白的表达。60只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,阿托伐他汀组（2 mg·kg^-1）,DXXK高、中、低剂量组（100,30,10 mg·kg^-1）,每组10只。采用高脂饲料+维生素D₂建立AS模型,全自动生化分析仪检测血脂水平,计算AS指数（AI）;ELISA检测血清TNF-α,IL-1β含量;Real-time PCR和Western blot检测胸主动脉NLRP3,ASC,Caspase-1 mRNA和蛋白的表达;苏木素-伊红（HE）染色和天狼星红染色观察腹主动脉及主动脉窦病理形态学变化。结果 与正常组比较,模型组RAW264.7细胞TNF-α,IL-1β与NLRP3,ASC,Caspase-1 mRNA和蛋白表达显著升高（P<0.01）;与模型组比较,各药物组上述指标明显降低（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,DXXK组大鼠胆固醇（TC）,甘油三酯（TG）,低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）,AI显著降低,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）明显升高（P<0.05,P<0.01）,血清TNF-α,IL-1β与胸主动脉NLRP3,ASC,Caspase-1 mRNA和蛋白表达明显降低（P<0.05,P<0.01）,腹主动脉病变及主动脉窦纤维增生明显改善。结论 DXXK具有显著的抗AS作用,抑制NLRP3炎症小体可能是其作用机制之一。     

基于TLR4/NF-κB/NLRP3通路探讨毛果鱼藤提取物抗痛风作用及机制

目的 通过网络药理学分析结合体内、外实验验证,探究毛果鱼藤对痛风的改善作用及机制。方法 利用数据库获取毛果鱼藤的化学成分及其候选靶标,通过蛋白质互作和网络分析,筛选毛果鱼藤治疗痛风的关键网络靶标和潜在活性成分,并进行生物功能富集及通路分析;小鼠腹腔注射次黄嘌呤复制高尿酸血症模型,观察毛果鱼藤醇提取物对高尿酸血症及正常小鼠尿酸水平的影响;大鼠足跖注射微晶型尿酸钠结晶,复制痛风性炎症模型,观察毛果鱼藤醇提物对痛风性炎症的影响;二甲苯诱导急性炎症模型,观察毛果鱼藤醇提物的抗炎作用;热板法、扭体法观察毛果鱼藤的镇痛作用。脂多糖诱导RAW264.7细胞复制体外炎症模型,观察毛果鱼藤醇提物对相关信号通路的影响。结果 通过构建毛果鱼藤-成分-痛风疾病靶点网络及分子对接分析,获得毛果鱼藤治疗痛风的12个关键网络靶标和15个潜在活性成分,发现其可以通过大黄素、白桦脂酸、美迪紫檀素等成分作用于Toll样受体4（TLR4）、NOD样受体蛋白3（NLRP3）、核转录因子-κB（NF-κB）等靶点发挥抗高尿酸血症、抗炎、镇痛等作用。与正常组比较,模型组小鼠血清尿酸水平显著增高（P<0.01）、大鼠肿胀度显著增高（P<0.05,P<0.01）、小鼠耳廓肿胀度降低（P<0.05）、小鼠扭体次数显著减少（P<0.05,P<0.01）、小鼠热板痛阈显著提高（P<0.05）,细胞中TLR4 mRNA水平、TLR4、NF-κB、NLRP3的蛋白表达及细胞上清中TLR-4、NF-κB水平显著升高（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,毛果鱼藤醇提物（20、10、5 g·kg^-1）可以显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平（P<0.01）,抑制大鼠足跖肿胀（P<0.05,P<0.01）,降低细胞中TLR4 mRNA水平,降低细胞中TLR4、NF-κB、NLRP3的蛋白表达及降低细胞上清中TLR4、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、NF-κB、白细胞介素-6（IL-6）的水平（P<0.05,P<0.01）。结论 毛果鱼藤醇提物具有明显的抗痛风作用,作用机制可能与其对TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路的影响有关。     

NLRP3炎症小体在IgA肾病中的作用及中药干预进展

免疫球蛋白（Ig）A肾病是目前公认最常见的原发性肾小球疾病,高达20%～40%的患者在发病后20年内发展为终末期肾病。针对糖基化缺陷的IgA1免疫复合物在系膜区沉积以及随后T淋巴细胞激活引起的炎症被认为是该疾病的主要原因,先天固有免疫也参与了发病。核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3是新发现的一种模式识别受体,在多种肾脏固有细胞如肾小管上皮细胞、系膜细胞和足细胞上均有表达,受外界刺激活化后可与凋亡相关斑点样蛋白（ASC）形成NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症体,进一步活化胱天蛋白酶-1(Caspase-1),引起白细胞介素-18(IL-18)与白细胞介素-1β(IL-1β)的成熟与释放,参与炎症反应。越来越多证据显示,NLRP3炎症小体参与了IgA肾病的发病及进展,与足细胞、系膜细胞、肾小球内皮细胞及肾小管上皮细胞等肾脏内固有细胞的损伤密切相关。中药可通过作用于NLRP3炎症小体及相关分子,调节炎性因子及其信号通路,发挥治疗IgA肾病的作用及干预其进展。该文系统综述了NLRP3炎症小体在IgA肾病中的作用,以及中药干预IgA肾病NLRP3炎症小体的临床与实验研究进展,以期为中药干预NL...     

基于NLRP3炎性小体探讨中医药治疗溃疡性结肠炎的研究进展

溃疡性结肠炎（UC）是临床上常见的一种炎症性肠病（IBD）,临床表现为腹痛、腹泻、黏液脓血便,有难治愈、复发率高等特点。UC发病机制与异常免疫反应、肠道组织氧化应激、炎症反应等有关。研究表明,NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）炎性小体的异常激活参与UC的病理进程,激活了肠上皮细胞中氧化、焦亡、炎症等病理机制,因此阻断NLRP3的异常激活有利于缓解UC。目前UC的西医治疗以水杨酸类、糖皮质激素、生物制剂为主,但总体疗效不佳。中医药治疗本病具有疗效显著、复发率低的优势。近年来,运用中医药方法治疗UC的基础研究已取得显著进展,研究发现通过中药干预NLRP3炎性小体可以明显促进肠黏膜愈合,治疗UC,其作用机制涉及到多靶点、多层次、多通路。该文就近年来中医药靶向调控NLRP3炎性小体对UC影响的实验研究进行总结,发现NLRP3与胱天蛋白酶-1（Caspase-1）、核转录因子-κB（NF-κB）等因子相互作用从而促进了肠上皮细胞中促炎因子的释放及细胞焦亡,激活了氧化应激、炎症反应等病理机制,中医药作用于NLRP3炎性小体及其上下游因子阻断UC的病理进程,抑制肠黏膜的病理损伤进而缓解结肠溃疡。以期为UC的防治及进一步的药物开发提供理论依据。     

基于NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路探讨独活醇提物对MSU诱导的痛风性关节炎的治疗作用

目的：通过体内和体外实验探讨独活醇提物(DH50)对尿酸钠(MSU)晶体诱导的痛风性关节炎的治疗作用及作用机制。方法：体内实验：将50只雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、地塞米松组(DXMS,0.07 mg·kg^-1)、DH50低剂量组(DH50-D,9 mg·kg^-1)、高剂量组(DH50-G,18 mg·kg^-1)5组(n=10)。连续灌胃给药7 d,正常组和模型组给予等体积纯水,第5天向大鼠右侧踝关节注射MSU建立痛风性关节炎模型。测量造模后4、8、24、48 h的大鼠足跖容积并对关节炎症评分,苏木素-伊红(HE)染色检测大鼠滑膜组织病理形态的改变,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠滑膜组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的含量变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测滑膜组织中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、IL-1β、环氧化酶-2(COX-2)的蛋白表达情况。...     

当归芍药散通过调控NLRP3/Caspase-1信号通路抑制AD大鼠神经炎症的作用

目的 研究当归芍药散对β淀粉样蛋白_1-42（Aβ_1-42）诱导的阿尔茨海默病（AD）大鼠模型的神经保护作用及对NOD样受体3（NLRP3）/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1（Caspase-1）信号通路的调控作用。方法 大鼠脑内注射Aβ_1-42构建AD动物模型,给予不同浓度的当归芍药散治疗。实验分为假手术组,模型组,当归芍药散高、中、低剂量干预组。Morris水迷宫实验检测动物学习记忆能力;苏木素-伊红（HE）染色和高尔基染色检测神经元形态功能;免疫荧光共定位检测NLRP3炎症小体活化情况;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测炎症因子白细胞介素-1β（IL-1β）和IL-18 mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测NLRP3,Caspase-1,IL-1β蛋白的表达水平。结果 与假手术组比较,模型组大鼠学习记忆能力显著降低（P<0.01）;神经元形态功能受损;炎症因子IL-1β和IL-18 mRNA表达升高,NLRP3炎症小体活化增加,NLRP3,Caspase-1,IL-1β蛋白表达显著升高（P<0.01）;与模型组比较,给予当归芍药散中、高剂量干预后,AD大鼠学习记忆能力明显增加（P<0.05,P<0.01）;神经元形态功能明显恢复;炎症因子IL-1β和IL-18 mRNA表达显著降低,NLRP3炎症小体活化减少,NLRP3,Caspase-1,IL-1β蛋白表达显著降低（P<0.01）。结论 当归芍药散可能通过调控NLRP3/Caspase-1信号通路抑制炎症小体活化,抑制神经炎症反应,从而发挥神经保护作用。     

基于TLR4信号通路的中药抗肝脏疾病作用研究进展

肝脏疾病是发生在肝脏的所有疾病的总称。近年来中药在治疗肝脏疾病中有一定优势,其实验研究作用显著或临床应用疗效较好,不良反应较少,呈现了广阔的前景。Toll样受体4(TLR4)信号通路与肝脏疾病息息相关,其抑制机制是通过TLR4介导的信号通路活化核转录因子-κB(NF-κB),抑制白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎症因子的分泌,抑制肝细胞的炎症损伤,进一步抑制了IL-1β,IL-6,TNF-α等对肝星状细胞(HSC)等细胞的激活,其阻断TRL4通路的方式为①抑制TLR4的表达;②抑制TLR4二聚体化;③阻断胞内信号转导,通过作用于衔接蛋白,作用于激酶IL-1受体相关激酶(IRAKs),作用于去泛素化酶锌指蛋白A20(TLRAFst)。通过这几个方面阻断TRL4通路,抑制炎症反应发生,达到抗肝脏疾病的作用。因此,抑制或增强TLR4信号通路或针对TLR4信号通路中某些环节进行干预成为肝病治疗的新策略。目前TLR4信号通路成为中药抗肝脏疾病的靶点之一。本文对近年中药抗TLR4信号通路活化,通过中药单体及有效部位、中药提取物、中药复方等发挥抗肝脏疾病作用的文献进行整理,为下一步中西医治疗肝脏疾病提供重要的指导意义和方向。     

中药单体调控PI3K/Akt信号通路干预卵巢癌的研究进展

卵巢癌是一种发病率较高的女性生殖系统恶性肿瘤,早期病情隐匿,症状不典型,多数患者确诊时已达晚期,严重威胁着女性的生命健康.众多信号通路参与卵巢癌的形成、发展过程,其中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路是关键的调控通路之一.近年来,中医药抗肿瘤以其安全性高、不良反应少等优势受到广泛的重视,其中对...     

中医药通过mTOR途径调节细胞凋亡与自噬的研究进展

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是一种进化保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,其生物学功能主要是参与细胞的增殖、生长及分化,从而调节机体的代谢过程。诸多国内外研究表明,mTOR是细胞凋亡及自噬信号转导通路的交汇点,营养、药物及氧化应激等多种刺激均可通过mTOR介导的信号通路对细胞的凋亡和自噬起到关键性的调控作用。目前,诸多研究已经证明,mTOR信号通路的改变与多种人类疾病的发病机制密切相关,如癌症、代谢紊乱(肥胖和2型糖尿病)、心血管和神经退行性疾病、与年龄有关的疾病和卵泡发育障碍等。近年来,越来越多的医家以该通路为切入点,以细胞凋亡和自噬为研究载体,研究了中医药对细胞凋亡和自噬的调节。其中包括中药单体、中成药、中药复方以及针灸等药物及物理疗法调控凋亡及自噬的实验研究。本文从mTOR信号通路入手,探讨了mTOR与细胞凋亡及自噬的关系,综述了中医药经mTOR途径调节细胞凋亡与自噬的最新进展,为中医药在该领域的深入研究提供了思路与参考。今后,中医药领域仍可以mTOR信号通路为依托,在中医基础理论的指导下对细胞凋亡和自噬的时效关系进行探索,为中医药在机体的作用机制提供新的现代医学的理论支持和作用靶点。     

中医药调控PI3K/Akt 信号通路治疗类风湿关节炎的研究进展

类风湿关节炎是一种以滑膜炎症为基本病理表现的自身免疫性疾病,临床常以对称性多关节疼痛、肿胀 为主要症状,甚者还会引发肺间质纤维化和冠状动脉疾病等关节外表现和合并症,严重影响患者的生活质量。 中医药治疗类风湿关节炎具有多通路、多靶点、多成分及毒副反应少的特点,在类风湿关节炎治疗中发挥着重 要的作用。近年,许多研究已经证实中药单体及中药复方可以通过调控磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）信号通路控制炎症,减少血管新生,诱导滑膜成纤维细胞 凋亡,抑制其增殖、侵袭、迁移,发挥治疗类风湿关节炎的作用。基于此,该文概述了PI3K/Akt 信号通路及 其对类风湿关节炎的作用,总结中医药通过调控PI3K/Akt 信号通路治疗类风湿关节炎的研究进展,以期为类 风湿关节炎的治疗及新药开发提供理论依据。     

中医药调控瞬时受体电位香草酸受体1治疗肠易激综合征

肠易激综合征是临床常见病多发病,其机制尚未明了。瞬时受体电位香草酸受体1(TRPV1)在肠易激综合征内脏高敏感性发生中起到重要的作用。肠易激综合征中结肠组织等处的TRPV1呈高表达,中医药可以降低TRPV1表达从而达到治疗肠易激综合征的目的。本文以中医药调控TRPV1治疗肠易激综合征为契机来探讨中医药治疗肠易激综合征的优势。     

调控滋养血管新生稳定动脉粥样硬化斑块的中西医治疗进展

动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）病变的主要临床危险在于斑块的不稳定性、易损性。斑块内新生滋养血管（Vasa Vasorum,VV）具有结构缺陷,其脆性大、渗漏性高,容易破裂出血,促进炎症反应,也为血细胞及血液可溶性成分进入斑块提供通道,促进AS斑块的形成,并且与斑块内出血、斑块破裂及临床心脑血管事件的发生密切相关。深入研究VV的功能及关键信号途径在AS中的作用,有望从根本上阻止稳定斑块发展为易损斑块,或者阻止不稳定斑块破裂及其并发症的发生。本文将新生VV在AS形成中的作用与机制以及相关治疗作一综述,以期为稳定AS易损斑块提供理论依据。     

小檗碱靶向Wnt5a/NPC1信号通路调节脂自噬抑制动脉粥样硬化形成

目的 探讨小檗碱（BBR）在防治小鼠动脉粥样硬化（AS）病变中对脂自噬的调节作用及分子机制。方法 采用载脂蛋白E基因敲除（ApoE^-/-）小鼠50只随机分为AS模型组、阿托伐他汀组（5 mg·kg^-1）、BBR低、中、高剂量组（2.5、5、10 mg·kg^-1）;另设10只C57BL/6J小鼠为空白组。12周后苏木素-伊红（HE）及油红O染色检测主动脉AS斑块病理学改变;生化检测血清脂质水平;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清炎症因子白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平、氧化应激标记物活性氧（ROS）含量及血清脂自噬标记物Beclin1、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）水平;黄嘌呤氧化酶法检测血清超氧化物歧化酶（SOD）活力;免疫组化（IHC）检测主动脉无翅型MMTV整合位点家族成员5a（Wnt5a）、C1型尼曼-匹克蛋白（NPC1）分布;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测主动脉Wnt5a、NPC1蛋白表达。结果 与空白组比较,AS模型组小鼠可见显著的AS斑块形成,血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、IL-6、TNF-α、ROS、主动脉Wnt5a分布及蛋白表达均显著升高（P<0.01）,血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、SOD、Beclin1、LC3Ⅱ、主动脉NPC1分布及蛋白表达均显著降低（P<0.01）;与AS模型组比较,阿托伐他汀组、BBR中剂量组及BBR高剂量小鼠AS斑块面积明显减少（P<0.05,P<0.01）,血清TC、TG、LDL-C、IL-6、TNF-α、ROS、主动脉Wnt5a分布及蛋白表达均明显降低（P<0.05,P<0.01）,血清HDL-C、SOD、Beclin1、LC3Ⅱ、主动脉NPC1分布及蛋白表达均明显升高（P<0.05,P<0.01）;与阿托伐他汀组比较,BBR中剂量组小鼠以上检测指标差异无统计学意义。结论 BBR可通过竞争性结合Wnt5a激活NPC1表达,上调脂自噬水平降低血脂,抑制炎症介质的释放及氧化应激损伤从而发挥防治AS功效。     

基于PLA2-TRPV1/TRPA1通路探讨苓桂术甘汤对慢性支气管炎的抗炎化痰作用

目的 研究苓桂术甘汤对香烟烟雾暴露联合脂多糖（LPS）气道滴注诱导的慢性支气管炎（CB）大鼠的疗效作用机制。方法 将60只SPF级SD大鼠按体质量分层法随机分为正常组、模型组、地塞米松组（1 mg·kg^-1）、苓桂术甘汤高、中、低剂量组（30.06、15.03、7.515 g·kg^-1）6组,每组10只。各组造模第1天、第14天分别予LPS（1 g·L^-1） 200 μL气道滴注,正常组予等体积的生理盐水。除正常组外,其余各组第2~13天、15~30天予香烟烟雾暴露（10支/次/30 min,2次/d）构建大鼠CB模型。给药组分别在造模第2天连续灌胃30 d,观测大鼠精神行为状态与体质量。造模后30 d取大鼠肺组织,测定左肺湿/干质量比（W/D）;苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织及支气管病理形态学变化;阿利新蓝-过碘酸雪夫（AB-PAS）染色观察支气管黏液分泌情况与杯状细胞增生程度;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中黏糖蛋白5AC（MUC5AC）、白细胞介素-13（IL-13）、白细胞介素-6（IL-6）与肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量;免疫组化与全自动蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肺组织中磷脂酶A2（PLA2）、热敏通道瞬时感受器电位香草素受体1（TRPV1）与瞬时感受器电位锚蛋白1（TRPA1）的表达变化。结果 与正常组比较,模型组大鼠精神憔悴,弓背蜷腹,口鼻有血性分泌物,死亡率为40%,体质量增长趋势显著下降,肺支气管结构损害严重,管壁大量炎性介质与炎症细胞浸润,充血水肿与纤维增生,杯状细胞大量增生,黏液过量分泌堆积,管腔明显狭窄变形,且肺水肿显著加重（P<0.01）;血清MUC5AC、IL-13、IL-6、TNF-α及肺PLA2的组织表达与蛋白表达水平显著上调（P<0.01）;与模型组比较,苓桂术甘汤高、中、低3组反应灵敏,无异常行为与分泌物,死亡率低,体质量持续增长稳定,肺支气管损伤减轻,杯状细胞增生与黏液分泌减少,肺水肿显著减轻（P<0.01）;血清MUC5AC、IL-13、IL-6、TNF-α及肺PLA2、TRPA1、TRPV1的组织表达与蛋白表达水平显著下调（P<0.01）。结论 苓桂术甘汤可以有效减轻慢性支气管炎大鼠的肺部炎症与气道黏液高分泌状态,具有一定的抗炎化痰功效,其机制可能与PLA2-TRPV1/TRPA1通路有关。     

中医药干预TGF-β1/Smads信号通路对组织器官细胞纤维化调控作用的研究进展

转化生长因子-β1(TGF-β1)是一种重要的调节细胞外基质(ECM)积聚的细胞因子,也是目前治疗组织器官细胞纤维化的新靶点。近年来中医药在防治心、肝、肺、肾等组织器官细胞纤维化相关疾病方面取得了较好的临床疗效,随着Smads蛋白家族的研究深入,对各组织器官细胞纤维化发生机制的探讨已进入细胞内信号转导、细胞因子水平,了解转录和转录后水平的细胞内信号通路之间的交叉对话,将使我们能够开发出特异性和有效的治疗方法。因此,探讨中医药对TGF-β1/Smads信号通路的调控作用,将为中医药预防及治疗各组织器官细胞纤维化相关的疾病提供有力依据。就中医药干预TGF-β1/Smads信号通路对心肌纤维化、肝纤维化、肺纤维化、肾脏纤维化及前列腺纤维化的调控作用研究进展进行综述。