RP-HPLC法测定兔血浆中盐酸川芎嗪和阿魏酸

目的建立RP-HPLC法测定兔血浆中盐酸川芎嗪和阿魏酸的方法。方法采用RP-HPLC法,使用Diamonsil C18柱（250mmx4．6mm,5μm）,流动相为甲醇-0．5％冰乙酸（35：65）,体积流量为1．0mL／min,检测波长280nm,柱温30℃,香豆素作内标,采用甲醇沉淀蛋白法处理血浆样品。结果盐酸川芎嗪线性范围为0．07213．888gg／mL（r=0．9998）,最低检测浓度12ng／mL,日内、日间精密度试验的RSD值均小于2％;阿魏酸线性范围为0．06～15．36gg／mL（F0．9999）,最低检测浓度10ng／mL,日内、日间精密度试验的RSD值均小于3％。结论该分析方法简便、灵敏,可用于同时测定兔血浆中盐酸川芎嗪和阿魏酸。     

HPLC-MS/MS测定血浆中的牡荆素及其大鼠体内药动学研究

目的:建立高效液相色谱-质谱/质谱联用法(HPLC-MS/MS)测定血浆中牡荆素的方法,并用于大鼠药动学研究。方法:采用Capcell Pak C18柱(50 mm×2.0 mm,I.D.,5μm),柱温25℃,流动相为甲醇∶水(95∶5,0.1%甲酸),流速为0.2 mL/min。用负离子电喷雾电离源,多反应方式检测,选择监测的离子反应为m/z 431～311(牡荆素)和m/z 269～225(大黄素,内标)。结果:牡荆素在0.5～2 000 ng/mL线性关系良好,相关系数为0.9960,最低定量限为0.5 ng/mL。加样回收率76.1%～89.0%,日内日间精密度RSD均小于11%。结论:该方法分析速度快、操作简单、灵敏度高,可用于大鼠血浆中牡荆素的浓度测定及药动学研究。     

液液萃取高效液相色谱法测定纳米乳中吴茱萸碱的血浆浓度

目的 建立高效液相色谱测定吴茱萸碱纳米乳中吴茱萸碱血浆浓度的方法.方法 采用液液萃取法处理血浆样品,用LichrospherC18高效液相色谱柱分离,流动相为甲醇-水70∶30(V/V),以和厚朴酚为内标物质用紫外检测器在225nm波长处检测.结果 实验结果显示吴茱萸碱和内标物质的保留时间分别为6.0 min和8.2 min,血浆内源性杂质不存在干扰;吴茱萸碱在0.017 86 ～2.856 8 μg/mL质量浓度范围内与吴茱萸碱和内标物质色谱峰面积比值呈良好的线性关系(r=0.999 3),吴茱萸碱的最低定量限为10 ng/mL;样品日内和日间精密度的RSD均小于7.60％,样品的平均提取回收率为105.13％,平均方法回收率为100.13％.结论 本方法准确、灵敏,可用于生物样品中吴茱萸碱的测定.     

大鼠灌服炙甘草汤后甘草次酸药动学研究

目的建立大鼠ig炙甘草汤后体内甘草次酸的LC-MS/MS测定方法。方法采用醋酸乙酯沉淀蛋白处理血浆样品,选用白藜芦醇为内标,采用LC-MS/MS法测定,色谱条件为ORBAX SB-C18反相色谱柱(Agilent,50 mm×2.1 mm,1.8μm),乙腈-水(80∶20,含0.2%甲酸)为流动相,体积流量0.2 mL/min,柱温30℃。样品经电喷雾离子(ESI)源负离子化后,通过Agilent 6410三重四级杆串联质谱仪,采用多反应监测(MRM)对甘草次酸进行测定,分别选用m/z 469.4→425.4和227.1→143.0作为甘草次酸和内标物白藜芦醇的检测离子对。结果甘草次酸在33.4～8 560.0 ng/mL线性关系良好(R2=0.997 1),日内(n=6)、日间(n=6)精密度、稳定性RSD均小于10%。甘草次酸高、中、低3个质量浓度平均提取回收率分别为75.3%、78.2%、78.5%。在此方法下得到大鼠ig炙甘草汤后血浆中甘草次酸的药动学参数分别为tmax=(8.00±1.13)h,Cmax=(811.02±300.25)ng/mL,AUC0～24=(11 439.21±3 367.36)ng/mL.h。结论该方法灵敏、准确、快速、选择性高,可用于甘草次酸血药浓度监测和药动学研究。     

LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中人参果抗肿瘤活性成分25-OCH3-PPD

目的 建立Beagle犬血浆中25-OCH3-PPD浓度的LC-MS/MS测定方法.方法 血浆样品用乙腈提取,采用选择性反应监测方法测定其血药浓度.检测仪器为Thermo TAQ型液相色谱-质谱联用仪,离子源为APCI源,用于定量分析的离子反应为:m/z 493.4→425.5(25-OCH3-PPD)和m/z 180.2→110.2(非那西丁);色谱柱为:Agilent Ci8柱(4.6× 150 mm,5μm);流动相为:水-甲醇(5:95,V/V).结果 25-OCH3-PPD的线性范围为5～1000 ng/mL,方法的绝对提取回收率为87.7％～98.0％,批内和批间的精密度均小于11.2％,血浆介质对25-OCH3-PPD低、中、高3个浓度水平的测定影响程度均小于15％.结论 该方法经考察符合血浆样品的测定要求,可以应用于临床前Beagle犬血浆中25-OCH3-PPD的测定及其药代/毒代动力学研究.     

人血浆中介芬胺血药浓度ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ测定方法的建立

目的:建立人血浆中介芬胺血药浓度LC-MS/MS测定方法,为藜芦临床应用时血药浓度测定提供可靠检测方法。方法:采用乙酸乙酯提取法处理血浆样品,以非那西汀为内标,流动相为乙腈-10 mmol/L醋酸铵(氨水调pH至8.8),采用电喷雾离子化(ESI)源,正离子模式扫描,多反应监测(MRM)定量,介芬胺定量离子对m/z:426.2→114.1,非那西汀定量离子对m/z:180.2→110.0。结果:介芬胺在2.70~86.7 ng/m L范围内线性良好,连续3批标准曲线相关系数r均不小于0.99(权重1/X~2),定量下限为2.70 ng/m L;日内、日间精密度(RSD%)≤11.65%,准确度介于91.84%~99.26%间;基质效应不影响测定;血浆样品于室温放置6 h、-80℃放置173 d、期间冻融3次均稳定。结论:所建方法专属性强、灵敏度高,可用于藜芦临床血药浓度测定。     

降脂通络软胶囊人血浆药物浓度的测定

目的:建立高效液相色谱-串联质谱法对降脂通络软胶囊人血浆药物浓度进行测定。方法:采用C_(18)色谱柱(3.5μm,50mm×2mm),以乙腈0.1%甲酸进行梯度洗脱,流速:1.0mL·min~(-1)。结果:人血浆内源性杂质对样品测定无干扰,姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素在100～10 000ng·mL~(-1)范围内线性关系良好,最低检测限和最低定量限分别为10ng·mL~(-1)和30ng·mL~(-1),低中高3种浓度的平均回收率均大于80%,日内精密度RSD均小于3%,日间精密度RSD均小于15%。结论:该方法快速、灵敏、准确,可用于降脂通络软胶囊人血浆药物浓度的测定。     

血浆盐酸二甲双胍的检测及药物动力学研究

目的建立高效液相色谱法测定人血浆中盐酸二甲双胍浓度的方法。方法血浆样品用10％高氯酸沉淀血浆蛋白后,以苯乙双胍为内标物,高速离心后取上清液进行分析。色谱柱为lunaC8（4．3mm×280mm,6μm）,柱温为37℃,流动相为乙腈一磷酸盐缓冲液治（含0．1％十二烷基硫酸钠和0．1％三乙胺,pH6．5）-乙腈（62：38）流速为0．9ml／min,检测波长：287nm。结果盐酸二甲双胍的浓度在0．08～6．00mg／L范围内线性关系良好,回归方程为Y=0．7002C＋0．0008（r=O．9698）,日内和日间精密度（RsD）均小于10％;检测限为0．6ng;检出浓度为45ng／ml～1150ng／ml。结论本方法操作简便,适用于盐酸二甲双胍血药浓度的测定及药物动力学研究。     

液相色谱-串联质谱法检测人血浆中阿兹夫定的浓度

目的 建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测人血浆中阿兹夫定(azvudine, AZV)的浓度，并应用于新型冠状病毒感染患者的临床样本测定。方法 血浆经Ostro^TM板除蛋白及磷脂后，以¹⁵N₄-次黄嘌呤为内标，采用LC-MS/MS测定。色谱柱采用HILIC Silica柱，以乙腈(0.1%甲酸)-10 mmol·L^-1甲酸铵(0.1%甲酸及5%乙腈)为流动相进行梯度洗脱，流速0.30 mL·min^-1,柱温40℃,进样量0.50μL。采用电喷雾离子源，以多反应监测模式进行正离子扫描，用于定量分析的离子对为m/z 287.3→112.0(AZV)、m/z 141.0→113.0(内标)。结果 血浆中AZV在0.10～20.00 ng·mL^-1内线性良好，定量下限日内、日间相对标准偏差(RSD)均不大于4.46%,相对误差为12.00%～15.13%;低、中、高质控样本日内、日间RSD均不高于2.88%,相对误差为3.10%～12.11%。平均提...     

HPLC-UV法测定大鼠血中[6]-姜酚的浓度

目的建立测定大鼠血浆中[6]-姜酚浓度的HPLC-UV法,为进一步研究[6]-姜酚的药代动力学提供可靠的方法。方法大鼠血浆样品以液-液萃取法提取后,采用HPLC-UV测定大鼠血浆中[6]-姜酚的浓度。HPLC条件:Hypersil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-水(45:55)为流动相,进样量:20μL,流速:1.0mL/min,紫外检测波长:280nm。结果[6]-姜酚线性范围为0.25～5.0μg/mL,最低检测限为0.1μg/mL,日内精密度RSD5.5%,日间精密度RSD6.8%。结论该测定方法具有灵敏、专一和快速的优点,可用于测定大鼠灌胃给药后[6]-姜酚的血浆浓度。     

LC-MS/MS法测定小鼠血浆nodosin浓度及其药动学研究

目的建立LC-MS/MS法测定nodosin在小鼠体内的血药浓度,研究nodosin在小鼠体内的药物动力学。方法将KM小鼠单次腹腔注射nodosin生理盐水注射液,断头取血,采用液液萃取法处理血浆样品,以齐墩果酸为内标,采用ESI离子源,多重反应监测模式进行负离子检测,检测离子质荷比(m/z)为nodosin 361.0/256.9;齐墩果酸(内标)以m/z 455.2/407.2和m/z 455.2/455.2分别进行定性和定量。使用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇-5 mmol·L-1乙酸铵水溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 m L·min-1;柱温25℃。结果小鼠腹腔注射nodosin后,nodosin血药浓度在3.9~1000 ng·m L-1范围内线性关系良好(r20.99),最低检测限为1.0 ng·m L-1。日内、日间精密度(RSD)均小于9.8%,方法学考察均符合生物样品分析的要求。小鼠血浆中nodosin及内标物均无内源性基质的干扰。结论本研究建立的LC-MS/MS分析方法灵敏可靠,特异性高,适用于nodosin的药动学研究。     

LC/MS/MS法测定人血浆中人参皂甙-Rd浓度

目的:建立液相色谱-质谱(LC/MS/MS)法测定人血浆中人参皂甙-Rd浓度。方法:血浆样品采用固相萃取法处理。用电喷雾离子化和正离子多离子反应监测(MRM)方式检测人参皂甙-Rd(m/z 964.6→767.5;964.6→325.3),内标物:龙胆苦甙(m/z374.1→195.1;357.1→195.1)。结果:人参皂甙-Rd的最低定量限为3.00 ng/m l;线性范围为3.00~5000.00 ng/m l;方法回收率在81.01%~83.39%范围,日内、日间变异系数(RSD)均小于15%。结论:该法准确、灵敏、特异,适用于血浆人参皂甙-Rd浓度的测定。     

GC-MS法研究麻黄汤中麻黄碱、伪麻黄碱的人体内过程

目的建立用于同时测定麻黄碱( ephedrine, E)、伪麻黄碱( pseudoephedrine, PE)血药浓度的气相色谱-质谱法( GC-MS),并探讨二者在人体内的药代动力学.方法用 GC-MS法测定人血药浓度,所得数据用 WinNonlin4.0.1药代动力学程序处理,求出有关参数.结果 E、 PE分别在 5～ 1000 ng/mL, 2.5～ 500 ng/mL的范围内线性关系良好(R2=0.9985,r2=0.9994) ,加样回收率分别为 107.5 %～ 96.2 % , 102.5 %～ 93.9 %.两者日内、日间精密度的RSD < 5 %,血浆样品 60 d内稳定,符合生物样本分析要求.结论该方法稳定、准确,灵敏度高,适于 E、 PE的血药浓度测定.     

HPLC法测定荷瘤小鼠组织中马钱子碱的浓度

目的 建立利用HPLC法测定荷瘤小鼠组织中马钱子碱浓度的方法。方法 以石杉碱甲为内标,采用液-液2次萃取处理小鼠肿瘤、肝、肾、脑、血浆样品。采用Kromasil C18（250 mm×4.6mm,5μm）和汉邦C18预柱（10 mi×4.6 mm,5μm）;流动相：乙腈：0.01 mol·L-1庚烷磺酸钠与0.02 mol/L磷酸二氢钾的等量混合液(用10％磷酸调pH 2.8)(24：76);检测波长：264 nm;流速：1.0 mL/min;柱温：35℃。结果 内源性杂质对样品测定无干扰。马钱子碱在50～2000 ng/mL范围内线性关系良好。组织和血浆中马钱子碱的绝对回收率为70.23 ％～99.18％,方法回收率为92.57～108.86％,日内RSD≤9.31％,日间RSD≤8.58％。样品冻融与复溶后稳定性良好。结论 该法快速、灵敏、准确,可用于评价马钱子碱制剂在荷瘤小鼠体内的靶向性分布结果。     

非索非那定体内探针药物法考察脑心通胶囊对大鼠P-gp活性的影响

[目的]建立检测大鼠血浆中非索非那定的液相质谱联用(LC-MS/MS)方法,考察脑心通胶囊对大鼠P糖蛋白(P-gp)的影响。[方法]采用Waters XBridge~(TM) C_(18)(2.1 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,电喷雾离子源,多反应正离子模式监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 502.3→466.3(非索非那定),m/z 256.1→166.9(内标,苯海拉明)。[结果]非索非那定在1~250 ng/m L范围内线性关系良好,日内、日间精密度(RSD)均小于8.7%,方法回收率均大于83.0%。[结论]该方法灵敏、可靠,可用于快速检测大鼠血浆中的非索非那定。大鼠经连续灌胃给药脑心通胶囊后可对大鼠体内P-gp的活性产生抑制作用。     

甲磺酸多沙唑嗪片人体生物等效性试验研究

目的：建立HPLC—MS／MS法测定人体血浆中甲磺酸多沙唑嗪浓度的方法。方法：以KromasilC_18（4．6mm×250mm,5μm）为色谱柱,流动相为乙腈：20mM乙酸胺（含0．3％甲酸）水溶液（55：45）,流速为0．30mL·min-1,柱温为25℃,进样器温度为4℃,进样量为10μL,内标物为吡格列酮。结果：甲磺酸多沙唑嗪在血浆浓度0．3～100ng／mL范围内线性良好,定量下限为0．3ng／mL,日内RSD≤6．0％,日间RSD≤6．3％,回收率为96．58％～100．16％。结论：该法灵敏,检测结果准确,适用于甲磺酸多沙唑嗪片的人体生物等效性研究。     

大鼠血浆中的银杏内酯B的液相色谱-电喷雾串联质谱法测定

目的 建立快速、灵敏、简单的液相色谱-串联质谱( LC-MS/MS)法测定大鼠血浆中的银杏内酯B.方法 血浆样品经乙酸乙酯液-液萃取后,采用Symmetry C18(3.9 mm×150 mmID,5μm)柱分离,以甲醇-乙酸铵溶液(10 mmol·L-1) (85:15,V/V)为流动相,流速为0.8 ml·min-1.采用电喷雾离子化源(ESI)三重四级杆串联质谱,在负离子多反应监测(MRM)模式下进行检测.结果 血浆中银杏内酯B的线性浓度范围为1.0～200 ng·ml-1,定量下限为1.0ng·m1-1,日内、日间精密度(RSD)均小于4.88％,准确度(RE)在±2.61％范围内.未观察到GB明显的基质效应.结论 该方法操作简便、快速、灵敏度高,分析时间短,适用于银杏内酯B的大鼠药代动力学研究.     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中芫花素的浓度及药物动力学研究

目的 建立LC-MS/MS方法测定芫花素在大鼠体内的血药浓度,并研究其药物动力学。方法 大鼠灌胃芫花提取物,眼眶采血,离心,以蛋白沉淀法处理血浆样品,芒柄花素为内标,电喷雾离子化,多反应检测方式进行负离子检测,检测离子质荷比(m/z)分别为283.2/267.9,267.0/251.9。使用Phenomenex Gemini 110 C18色谱柱(50 mm×2.0 mm,5 μL);以甲醇- 0.1 %甲酸水(85∶15)为流动相,等度洗脱;柱温:40 ℃;流速:0.3 mL·min-1。结果 大鼠灌胃芫花提取物后的药-时曲线符合二房室模型,芫花素血药浓度在5～1000 ng·mL-1范围内线性关系良好(r2=0.998),最低检测限(LOQ)为0.5 ng·mL-1,日内及日间精密度(RSD)为2.42 %～10.71 %,日内及日间准确度为95.67 %～112.15 %,血浆中无内源性基质干扰,稳定性良好。结论 本研究所建立的方法简便、灵敏、重复性好、分析速度快,可用于血浆样品中芫花素的血药浓度测定和大鼠体内药物动力学研究。     

RP-HPLC法同时测定内异消大鼠血浆中各成分

目的 建立RP-HPLC法同时测定内异消大鼠血浆中川芎嗪、阿魏酸和延胡索乙素的方法.方法 采用RP-HPLC法,Agilent SB-C180DS色谱柱(4.6mm× 250mm,5μm),以甲醇-0.3％冰醋酸(42:58)为流动相,体积流量为1.0mL/min,检测波长280nm.结果 川芎嗪、阿魏酸和延胡索乙素分别在0.0351～16.8750μg/mL、0.0322～16.4800μg/mL和0.0161～8.250μg/mL范围内线性关系良好;平均回收率均在80％～120％之间,RSD均小于10％;低质量浓度精密度RSD均小于20％,中、高质量浓度精密度RSD均小于15％.结论 本方法准确可靠,分离度好,适用于同时测定内异消大鼠血浆样品中川芎嗪、阿魏酸和延胡索乙素.     

高效液相色谱法测定家兔血浆中红景天苷浓度及其药代动力学研究

目的：建立测定家兔血浆中红景天苷浓度的HPLC—UV方法,并对其药代动力学进行初步研究。方法：采用乙腈沉淀蛋白法处理血浆样品,色谱柱：Phenomenex C18（250mm×460mm,5μm）,流动相：甲醇：磷酸盐缓冲液（35：65,pH3．5）,检测波长：275nm。结果：家兔血浆中的线性范围为0．8—400μg／mL,日内、日间精密度（RSD）均小于8．4％,准确度（RE）在±13．1％以内。结论：本方法灵敏、简便、选择性强,适用于红景天苷血药浓度测定,及其药代动力学研究。