金黄色葡萄球菌抗生素耐药相关基因检测及蛋白A基因多态性分型研究

目的 检测2011-2012年深圳市南山区某医院及环境样本中金黄色葡萄球菌（staphylococcus aureus,SA）耐药基因,对SA进行蛋白A基因多态性分型（single locus DNA-sequencing of the repeat region of the Staphylococcus protein Agene,Spa）研究.了解SA耐药基因分布情况以及Spa分型特点.方法 采用PCR技术检测SA的12种耐药基因,对SA蛋白A基因进行扩增,PCR产物测序,序列上传数据库进行比对.结果 27株菌分离自院内病人样本,13株检出mecA基因.其中15株菌检出2种以上耐药基因,3株菌未检出任何耐药基因.16株菌分离自环境样本,未检出mecA基因.15株菌检出ant（4＇,4＂）基因,仅1株菌检出Aac（6＇）/aph（2＂）基因,其余耐药基因未检出.43株SA分为15种Spa型,t091型为优势型别,检出率为27.9％（12/43）,此型别在所有类型的样本中均有检出.结论 院内样本中,不同样本分离菌株携带耐药基因存在差异,院内病人样本分离菌株呈多重耐药.Spa分型,利于深圳市SA分子分型数据库的建立,对于疾病溯源有着重要意义.     

金黄色葡萄球菌毒力基因检测及Spa分型研究

目的 研究深圳市南山区2009-2015年医院内患者临床检测标本、医院台面与医护人员双手涂抹样以及食物中毒样本中金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,SA）蛋白A基因多态性分型（single locus DNA-sequencing of the repeat region of the Staphylococcus protein A gene,Spa）的特征及毒力基因分布情况。方法 采用多重PCR方法检测SA的mecA与femA基因,PCR方法检测24个毒力基因以及SA蛋白A基因,PCR产物测序后序列上传数据库进行比对。结果 87株SA共检出48株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant S. aureus,MRSA）,检出率为55.2%。共检出21种毒力基因,检出率60%的毒力基因有LUKDE（65.5%）、SHE（67.8%）、mpHLG 2（85.1%）、HLD（93.1%）和 HLA（100.0%）。94.3%菌株携带5个以上毒力基因。三类样本中有11种毒力基因检出率差异有统计学意义,分别是SEB、mpSEC、mpSEJ、mpSEO、TST、HLB、HLD、mpHLG 1、mpHLG 2,mpETB和PVL。其中mpETB与PVL仅在患者中检出,肠毒素基因在食物中毒株中携带率较高。MRSA与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（methicillin-sensitive S.aureus,MSSA）的3种毒力基因检出率差异有统计学意义,分别是mpETA、PVL及mpHLG 2;MRSA的毒力基因mpETA与PVL检出率明显高于MSSA（P=0.033, P=0.030）,而mpHLG 2检出率明显低于MSSA（P=0.021）。87株SA分为24种Spa型,患者优势型别为t030（30.0%）与t437（36.7%）,医院其他样本优势型别为t091（50.0%）,食物中毒优势型别为t127（36.8%）与t091（21.1%）。结论 三类样本部分毒力基因检出差异有统计学意义。MRSA与MSSA携带毒力基因差异无统计学意义。三类样本中均存在优势的Spa型别。     

MRSA和MSSA氨基糖苷类药物耐药性和耐药基因检测

目的比较耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(M RSA)和甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(M SSA)对氨基糖苷类药物耐药性和耐药基因携带的不同。方法运用K-B法和PCR方法分别对16株M RSA和24株M SSA 4种氨基糖苷药物(丁胺卡那霉素、奈替米星、庆大霉素、妥布霉素)耐药性和氨基糖苷类耐药基因进行检测。结果M RSA与M SSA对氨基糖苷类药物耐药率分别为93.8%,62.5%,100%,100%和0.0%,0.0%,29.2%,33.3%,三种氨基糖苷类药物耐药基因aac(6')/aph(2')、aph(3')III、an t(4',4')携带率分别为68.8%,62.5%,6.3%和29.2%,8.3%,0.0%。结论M RSA较M SSA对氨基糖苷类药物有着更高的耐药性和耐药基因携带率。M RSA较M SSA对氨基糖苷类药物存在着更为复杂的耐药机制。     

杭州市富阳区甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌基因分型研究

目的对杭州市富阳区临床分离的甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)进行基因分型并分析其流行现状。方法收集临床送检标本中分离出的金黄色葡萄球菌,采用全自动细菌鉴定/药敏系统进行药敏试验,对所有MRSA菌株进行多位点序列分型(MLST)、葡萄球菌蛋白A基因(spa)分型和葡萄球菌盒式染色体(SCCmec)分型,同时应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行同源性分析。结果分离到金黄色葡萄球菌121株,其中MRSA 22株,占18.2%。药敏试验显示MRSA对β-内酰胺类、红霉素全耐药,对左氧氟沙星、环丙沙星的耐药率85.0%,未发现万古霉素、利奈唑胺耐药株。SCCmec、spa、MLST分型表明以ST5-t311-SCCmecⅡ基因型为主,部分菌株之间同源性程度高。结论杭州市富阳区MRSA的检出率目前还处于相对较低的水平,流行克隆以ST5-t311-SCCmecⅡ型为主。     

医院感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型研究

目的分析医院不同科室来源的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株基因分型同源性,为控制MRSA医院感染流行提供科学依据。方法使用细菌基因组重复序列聚合酶链反应(REP-PCR)以及高级微生物基因分型系统(DiversiLab)细菌同源性分析技术对23株医院感染的MRSA进行基因分型。结果 23株MRSA分为4个基因型,A型、D型主要分布于急诊观察室,B型、C型主要分布于中医外科。结论中医外科存在以B型、C型基因型为流行株的MRSA医院感染爆发;REP-PCR技术和DiversiLab自动化细菌同源性分型技术可成为医院感染病原研究的有效手段。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌spa基因分型

目的 研究浙江省瑞安地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的spa基因分型。 方法 采集2011年3-11月瑞安市人民医院检验科微生物室临床分离的金黄色葡萄球菌菌株,共100株。采用头孢西丁纸片法筛选耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,PCR扩增MRSA spa基因的X区,测序后通过数据库进行分型。 结果 48株确证为MRSA,可分为16个型别,其中t030型15株,t437型12株,t6944型5株,t172型3株,t9538型2株,t5699、t148型、t179型、t1751型、t015型、t5554型、t127型、t159型、t062型、t163型各1株,同时发现1个新型t10149。 结论 瑞安地区MRSA的spa分型以t030和t437为主,t10149为新型菌种。     

金黄色葡萄球菌耐药基因分析及多位点序列分子分型

目的对临床来源金黄色葡萄球菌(金葡菌)进行分子分型及溯源,研究耐药基因与克隆复合体(CC)关系。方法检测94株金葡菌中的耐甲氧西林金葡菌(MRSA)并分型,测定氨基糖苷类耐药基因[aac(6')/aph(2')、aph(3')-Ⅲ、ant(4',4')]、大环内酯类耐药基因(ermA、ermC、msrA)、四环素类耐药基因(tetM、tetk)共8个耐药基因;用多位点序列分子分型(MLST)进行克隆分析。结果 94株菌株中共检出MRSA菌株36株,其中,医源MRSA(HA-MRSA)29株,包括Ⅲ型28株,Ⅰ型1株;社区源MRSA(CA-MRSA)7株,包括V型6株,Ⅳd型1株。94株菌株中,耐药基因aac(6')/aph(2')、aph(3')-Ⅲ、ant(4',4')、ermA、ermC、msrA、tetM、tetk的携带率分别为55.3%、58.5%、26.6%、37.2%、34.0%、19.1%、37.2%、25.5%;共84株菌株耐药基因阳性,共形成35种耐药基因谱;含3种以上耐药基因的菌株占48.9%(46/94)。MLST分型共得到27个ST型,6个同源复合体;有3个重要同源复合体CC239、CC630、CC5及1个重要ST398型。HA-MRSA均属于CC239,而多数CAMRSA属于CC630;HA-MRSA耐药基因携带率与CA-MRSA及所有甲氧西林敏感金葡菌(MSSA)携带率差异有统计学意义(P0.01)。CC239克隆与所有其他克隆菌株耐药基因的携带率差异有统计学意义(P0.01)。结论引起感染的MRSA主要是HA-MRSA-Ⅲ,其次为CA-MRSA-Ⅴ。CC630是国际上新出现的克隆;ST398主要是起源于人而非动物。MRSA主要存在于几类特定克隆中,主要来源于相同克隆的MSSA;金葡菌获得及携带耐药基因主要与CC克隆有关,推测此类复合体中含有相关分子构型,有利于耐药基因如SCCmec插入。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌：耐药特点和快速检测

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）是引进医院和社区获得性感染的主要原菌之一,由于其质性和多重耐药,导致临床检测,治疗的困难,MRSA耐药分子机理,检测方法及防止新的耐药菌出现一直是这一领域研究特点,本文对MRSA耐药特点和快速检测方法的研究进展作一综述。     

随机多态性DNA基因分型方法在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌医院感染研究中的进展

近年来,分子生物学的理论和技术在实验诊断中的渗透和广泛应用,使得细菌鉴定、耐药基因的检测、分子流行病学的调查变得更加准确、简捷和快速。各种细菌基因分型技术逐渐成为临床上监测和鉴定细菌的主要手段,在判定医院感染的暴发、确定感染的病原菌、寻找感染源以及识别一些特殊的致病菌等方面有着重要的作用。目前采用的分型方法很多,     

随机多态性DNA基因分型方法在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌医院感染研究中的进展

近年来,分子生物学的理论和技术在实验诊断中的 渗透和广泛应用,使得细菌鉴定、耐药基因的检测、分子 流行病学的调查变得更加准确、简捷和快速。各种细菌 基因分型技术逐渐成为临床上监测和鉴定细菌的主要手 段[1,2],在判定医院感染的暴发、确定感染的病原菌、寻找 感染源以及识别一些特殊的致病菌等方面有着重要的作 用[3]。目前采用的分型方法很多,其中随机引物DNA多 态性分析在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)医院感 染研究中较为广泛。我们就此方面研究进展进行综述。 一、常规药敏方法对MRSA的筛选测定 MRSA对苯唑西林…     

医护人员携带MRSA及其耐药基因的研究

目的研究医院医护人员携带耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及其抗药基因携带情况,为抗菌药物合理使用提供参考。方法采用细菌分离鉴定方法和基因扩增技术,对医院医护人员鼻前庭和手上采集的标本进行了细菌分离鉴定和抗药基因检测。结果上海市医院4种岗位医护人员鼻前庭MRSA平均携带率为1.81%,手上MRSA平均携带率为0.83%,以医生和工勤人员携带率较高。鼻前庭分离的MRSA菌株qacA基因阳性率为33.33%,手分离到的MRSA菌株qacA基因的阳性率为54.55%。结论上海市医院医护人员鼻前庭和手上MRSA携带率不高,但此类菌株抗消毒剂基因阳性率较高,提示应加强适时监控。     

呼伦贝尔地区MRSA耐药谱及分子流行病学特征分析

目的 了解内蒙古呼伦贝尔地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)主要流行株,并探讨不同基因型与耐药谱的关系,明确MRSA的起源、传播和流行特征,寻找有效控制MRSA感染的途径,延缓万古霉素不敏感菌株的出现.方法 收集2012年1月—2017年6月内蒙古呼伦贝尔地区5家医院非重复MRSA临床分离株55株.采用Vitek ...     

社区和医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因及耐消毒剂基因的检测

摘要 目的 〖JP3〗了解伤口分泌物分离的社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)与医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)的耐药特点,探讨其耐药基因及耐消毒剂基因的携带情况。方法 收集某院2016年1月-2017年12月伤口分泌物分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)76株,采用聚合酶链反应(PCR)方法检测其耐药基因和耐消毒剂基因。结果 共分离到MRSA 76株,其中CA-MRSA 52株,HA-MRSA 24株。52株CA-MRSA对四环素、庆大霉素、红霉素的耐药率分别为36.54%、1.92%、86.54%,24株HA-MRSA对四环素、庆大霉素、红霉素的耐药率分别为50.00%、12.50%、75.00%,HA-MRSA和CA-MRSA中，耐药基因tetM、ermA及耐消毒剂基因(qacA/B)的携带率均较高。结论 伤口分泌物分离的CA-MRSA与HA-MRSA菌株耐药严重,均可携带多个耐药基因和耐消毒剂基因,应引起重视。     

多重PCR检测MRSA的SCCmec基因分型

目的了解我院MRSA的流行状况。方法收集2005年1—6月65株社区感染MRSA及60株医院感染MRSA，应用多重PCR对MRSA染色体Dlec基因盒（staphylococcal cassette chromosomeSCCmec）分型及杀白细胞毒素（PVI。）基因检测，应用K—B纸片法进行药敏分析。结果125株MRSA的mecA基因阳性，其中SCCmecII型1株，SCCmecⅢ型120株，SCCmecⅣ型3株，未分型1株；未发现携带PVL基因的MRSA。携带SCCmecII型、SCCmecⅢ型的菌株均为多重耐药株，而携带SCCmecⅣ型的菌株除对8内酰胺类药物耐药外，对其他类别的抗菌药敏感。结论本院分离的MRSA以SCCmecⅢ型为主，发现SCCmecIV型CA-MRSA，但不携带PVL基因；携带SCCmecⅡ、SCCmecⅢ的临床分离株耐药严重。     

金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因qacA的流行病学研究

目的 了解重庆医科大学附一院近年临床分离的金葡菌中,耐消毒剂基因qacA的流行情况,从而指导临床抗菌药物、消毒剂的合理使用.方法 选取有代表性的1价和2价化合物,检测126株金葡菌的MIC,阳性株用PCR法检测qacA基因型,采用CLSI推荐的30 μg头孢西丁纸片法进行MRSA鉴定.结果 临床分离的126株金葡菌中,12株qacA基因型呈阳性(阳性率为9.5%),52株为MRSA(其中qacA基因阳性率为17.3%).结论 临床分离的金葡菌中,qacA基因携带率较高.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药机制与分子分型研究进展

正自1961年Jevons首次分离出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)以来,MRSA在世界各地的感染率和分离率不断增加,目前已成为医院、社区感染的主要病原菌之一。由于MRSA对所有β-内酰胺类抗菌药物(青霉素类、头孢菌素类和碳青霉烯类)均耐药,因此,MRSA也被称为“超级细菌”。由于抗菌药物的不合理使用,导致MRSA耐药谱越来越广,尤其是多重耐药,给临床治疗带来了极大的困难。近年来,随着MRSA     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌多重耐药基因检测

目的 了解金黄色葡萄球菌（金葡菌）β内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类抗生素耐药基因的分布特点，评估耐药性基因型与表型测定法的相关性。方法 聚合酶链反应（PCR）测定本地分离100株金葡菌的β内酰胺类耐药基因mecA、氨基糖苷修饰酶基因aae（6′）／aph（2″）、aph（3′）-Ⅲ、ant（4′，4″）、大环内酯类23s rRNA甲基化酶基因erm、四环素类核糖体保护蛋白基因tetM的发生率，纸片扩散法测定苯唑西林、庆大霉素、红霉素、四环素的耐药性。结果 100株受试菌中mecA阳性66株（MRSA），最常见的耐药基因是erm＋tetM，存在于89．4％的MRSA中，最少见的是ant（4′，4″），存在于4．5％的MRSA中，MRSA的aae（6′）／aph（2″）、aph（3′）-Ⅲ、erm、tetM检出率分别为97．.％、72．7％、100％、89．4％，明显高于MSSA的11．8％、2．9％、44．1％、8．8％；66株MRSA中，43株（65．2％）同时检出aae（6′）／aph（2″）、aph（3′）-Ⅲ、erm、tetM4种基因，58株（87．9％）同时检出aae（6′）／aph（2″）、erm、tetM3种基因，34株MSSA中，仅2株（5．9％）同时检出aae（6′）／aph（2″）、erm、tetM3种基因；苯唑西林、庆大霉素、红霉素、四环素与其相应的耐药基因mecA、age（6′）／aph（2″）、erm、tetM的符合率分别为96％、99％、96％、84％，81株红霉素表型耐药菌中79株（97．5％）为大环内酯．林可霉素．链霉菌素B（MLS8）结构型耐药。结论耐药基因在金葡菌中均可检出，金葡菌对氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类抗生素耐药与苯唑西林耐药紧密相关，大环内酯类主要是结构型耐药，基因型与表型测定有较高的符合率。     

147株金黄色葡萄球菌耐药现状分析

目的 研究金黄色葡萄球菌(SAU)临床分离株的耐药性,为合理使用抗菌药物提供依据.方法 采用VITEK 2 Compact型全自动微生物分析系统进行菌株鉴定和药敏试验,统计分析147株SAU的标本分布及耐药率.结果 分泌物标本SAU检出率最高;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离率达40.1%(59/147).SAU对多种抗菌药物具有不同程度的耐药性,对呋喃妥因、利奈唑胺、奎努普汀/达福普汀、替加环素、万古霉素敏感率为100.0%.结论 SAU临床分离株耐药现状严重,MRSA的耐药情况更为严重,临床微生物实验室应加强MRSA监测工作.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型的研究进展

金黄色葡萄球菌是临床上常见的毒性较强的致病菌,自20世纪40年代青霉素问世后,金黄色葡萄球菌引起的感染性疾病受到较大的控制。但随着人们对青霉素的广泛使用,有些金黄色葡萄球菌产生青霉素酶,能水解β-内酰胺环,表现为对青霉素的耐药。人们又研究出一种新的能耐青霉素酶的半合成青霉素,即甲氧西林。1959年甲氧西林应用于临床后,     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因的研究进展

金葡菌是临床最常见的病原菌之一,在临床分离菌中分离率位居前列,其中以MRSA临床意义尤为重要。由于其多重耐药性和易造成医院感染的暴发流行,已成为临床抗感染治疗的一大难题。金葡菌可引起一系列的化脓性感染、食物中毒及中毒性休克综合征等,其化脓性感染从小的皮肤感染病变如疖、痈到严重的感染如组织坏死、坏死性肺炎、骨髓炎和心内膜炎等。