长链非编码RNA PRNCR1对胃癌细胞增殖、侵袭及转移的研究

探索胃癌MGC-803细胞和人正常胃黏膜上皮GES-1细胞中,长链非编码RNA PRNCR1的表达,以及沉默PRNCR1 对胃癌MGC-803细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法利用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测细胞中PRNCR1 表达水平;设计并合成PRNCR1-siRNA及对照序列（PRNCR1-NC）转染胃癌细胞,通过qRT-PCR 检测细胞中PRNCR1 的沉默效果;利用四甲基偶氮唑盐比色法检测胃癌细胞 的增殖;Transwell实验检测胃癌细胞迁移和侵袭能力的变化。结果PRNCR1 在胃癌MGC-803 细胞中的表达高于人正常胃黏膜上皮GES-1 细胞,PRNCR1-siRNA 可以下调胃癌MGC-803 细胞中PRNCR1 的表达,并可以抑制MGC-803 细胞的增殖和侵袭转移能力。结论PRNCR1-siRNA 能够下调PRNCR1 的表达,并有效抑制胃癌细胞的增殖和侵袭迁移力,为以PRNCR1 为靶点的胃癌基因治疗奠定理论基础。     

长链非编码RNA MCF2L-AS1促进胃癌的增殖、侵袭和迁移

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)MCF2L-AS1在胃癌中的表达情况以及MCF2L-AS1对胃癌增殖侵袭迁移的影响.方法 生物信息学分析MCF2L-AS1在胃癌组织中的表达情况;实时PCR检测MCF2L-AS1在胃癌细胞中的表达情况.siRNA转染敲低胃癌细胞中的MCF2L-AS1,实时PCR检测敲低的结果....     

长链非编码 RNA BANCR在胃癌中表达及其对胃癌细胞迁移、侵袭的影响

目的：检测长链非编码RNA BANCR在胃癌组织中的表达,并探讨其对胃癌细胞迁移、侵袭生物学行为的调控作用与相关机制。方法：采用荧光定量PCR（QPCR）和TCGA?STDA数据库分析胃癌组织和癌旁组织中BANCR的表达水平,采用小干扰RNA（siRNA）技术敲低胃癌细胞MKN28 BANCR的表达,采用Transwell、QPCR检测MKN28细胞的迁移、侵袭情况以及肿瘤细胞转移相关标志物的表达水平变化。结果：胃癌组织中BANCR的表达水平呈明显上调。敲低BANCR表达后,MKN28细胞的迁移、侵袭能力被抑制,转移相关分子CDH1的表达量显著增加,而Vimentin的表达量显著降低。此外,敲低BANCR下调ZEB1表达,同时干扰miR?203能部分恢复ZEB1的表达水平。结论：BANCR在胃癌组织中呈高表达,其可能通过调节miR?203?ZEB1?CDH1轴促进胃癌细胞迁移和侵袭。     

长链非编码RNA BC015134调控胃癌细胞侵袭与迁移的研究

目的 探讨长链非编码RNA BC015134促进胃癌细胞侵袭迁移的作用及机制。方法 通过对GEO数据库中10对胃癌和癌旁组织RNA芯片结果进行分析以及湖州市中心医院2015年1月至2020年12月胃癌根治术患者的临床样本80例验证,筛选胃癌转移相关长链非编码RNA。通过shRNA介导的RNA干扰和质粒介导的过表达技术调节BC015134在胃癌MGC-803细胞中的表达水平,采用Transwell实验检测胃癌细胞侵袭和迁移能力。通过RNA pulldown实验及Western blot法验证BC015134与β-连环蛋白（β-Catenin）能否相互结合。利用qRT-PCR技术检测BC015134在临床样本中的表达水平,并做预后分析。结果 通过对芯片结果进行临床样本验证,发现BC015134在有远处转移的胃癌原发灶中高表达。在MGC-803细胞中过表达BC015134能够促进细胞的侵袭及迁移能力,而敲减BC015134能够抑制细胞的侵袭及迁移能力。BC015134能够与β-Catenin相互结合,过表达β-Catenin后神经型钙黏蛋白（N-cadherin）的表达上调,上皮型钙黏蛋白（...     

长链非编码RNA JPX对鼻咽癌增殖和侵袭的影响及机制研究

目的 探讨长链非编码RNA JPX(lncRNA JPX)在鼻咽癌细胞系中的表达及对鼻咽癌细胞增殖和侵袭的影响,并探讨其机制.方法 采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测人鼻咽上皮细胞系NP69及鼻咽癌细胞系(6-10B、5-8F、C666-1、CNE-1、CNE-2、HNE-1、HONE-1)中lncRNA JP...     

胃癌患者长链非编码 RNA 的差异表达

目的：研究胃癌患者癌组织长链非编码RNA（lncRNA）的差异表达。方法提取8例胃癌患者癌组织与癌旁对照样本中的总RNA,应用lncRNA表达谱芯片检测技术对两者之间差异表达的lncRNA进行分析。在差异表达倍数≥10的lncRNA中选择4个lncRNA（uc010lhn、uc．341、AK096257及BC048127）,利用荧光定量RT－PCR技术在细胞水平对微阵列检测结果进行验证。结果胃癌患者癌组织与癌旁对照样本间差异表达的lncRNA 共2621个,其中1215个表达上调,1406个表达下调,差异表达倍数≥10的lncRNA 22个。荧光定量RT－PCR验证结果显示,与正常胃上皮细胞系GES－1相比,4种lncRNA（uc010lhn、uc．341、AK096257及BC048127）在胃癌细胞系中的表达具有显著差异,与芯片检测结果一致。结论多种lncRNA在胃癌患者肿瘤组织中呈异常表达,其中uc010lhn及uc．341等在胃癌发生、发展过程中可能起一定的作用。     

过表达长链非编码RNA MT1JP抑制视网膜母细胞瘤SO-RB50细胞的增殖、侵袭和体内移植瘤的生长

目的 探讨过表达长链非编码RNA MT1JP抑制视网膜母细胞瘤SO-RB50细胞的增殖、侵袭和体内移植瘤的生长机制。方法 体外培养视网膜母细胞瘤SO RB50细胞,并分为空白对照组（control组）、转染对照组（Vector组）及过表达组（MT1JP组）;采用RT PCR检测各组MT1JP的表达;克隆形成检测各组SO-RB50细胞生长情况;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Transwell检测细胞侵袭情况;Western blot检测Ki67、VEGF蛋白表达情况。小鼠皮下注射SO-RB50细胞,建立移植瘤模型;RT PCR检测长链的表达;统计裸鼠生存时间,绘制生存曲线;检测小鼠肿瘤重量;免疫组化检测小鼠肿瘤组织中Ki67和VEGF的表达情况。结果 与空白对照组比较,转染对照组的MT1JP表达、单位面积细胞侵袭数目、Ki67、VEGF蛋白表达均无显著变化（P＞0.05）;与转染对照组比较,过表达组MT1JP的表达、细胞凋亡率显著升高（P＞0.05）,克隆实验细胞形成率、Ki67、VEGF蛋白表达、单位面积细胞侵袭数目显著降低（P＜0.05）;小鼠体内实验显示：与空白对照组比较,转染对照组小鼠肿瘤质量、生存期、Ki67、VEGF蛋白表达均无显著差异（P＞0.05）;相比转染对照组,过表达组小鼠MT1JP表达、小鼠生存率显著提高（P＜0.05）;肿瘤质量、Ki67、VEGF蛋白表达显著降低（均P＜0.05）。 结论 过表达长链非编码RNA MT1JP可以抑制视网膜母细胞瘤SO-RB50细胞的增殖、侵袭,促进SO RB50细胞的凋亡并抑制体内移植瘤的生长。     

长链非编码RNA尿路上皮癌胚抗原1/微RNA-143-3p/成纤维细胞生长因子1轴对胃癌细胞BGC-823增殖、迁移及侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)/微RNA(miR)-143-3p/成纤维细胞生长因子1(FGF1)轴对胃癌细胞BGC-823增殖、迁移、侵袭的影响.方法 取对数生长期的胃癌细胞BGC-823接种至24孔板,然后分为对照组、空载组和沉默组.对照组细胞不进行处理,空载组和沉默组细胞...     

胃癌转移相关长链非编码RNA差异表达谱的研究

目的 筛选与胃癌转移相关的长链非编码RNA(lncRNA),寻找可预测及逆转胃癌转移相关的候选基因.方法 利用高通量lncRNA芯片技术分别检测3例未发生远处转移胃癌组织和3例发生远处转移胃癌组织中lncRNA及mRNA表达谱的差异,并对差异表达基因进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析.结果...     

长链非编码RNA GAS5对人乳腺癌细胞株增殖和侵袭能力的影响

目的:探讨长链非编码RNA GAS5对人乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移生物学活性的影响。方法:qRT-PCR方法检测3株乳腺癌细胞株SKBR-3、 MDA-MB-231及MCF-7中LncRNA GAS5的表达;LncRNA GAS5干扰片段和过表达载体分别转染LncRNA GAS5高表达以及低表达的乳腺癌细胞株,qRT-PCR方法检测转染后LncRNA GAS5的表达;磺酰罗丹明B染色法检测细胞的增殖能力;Transwell和划痕实验检测细胞的侵袭及迁移能力。结果:LncRNA GAS5在乳腺癌SKBR-3细胞中表达量最低,MCF-7细胞中表达量最高（P<0.01）;SKBR-3以及MCF-7细胞分别转染LncRNA GAS5过表达载体和干扰片段后,SKBR-3细胞LncRNA GAS5表达量增高,MCF-7表达量降低（P<0.01）;下调LncRNA GAS5的表达,细胞的增殖能力升高,侵袭及迁移能力增强（P<0.01）;过表达LncRNA GAS5之后,细胞的增殖能力、侵袭和迁移能力减弱（P<0.01）。结论:LncRNA GAS5是涉及到乳腺癌发展的一个新型的分子,有可能成为乳腺癌治疗的潜在靶点。     

长链非编码RNA EPIC1在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

目的：研究长链非编码RNA表观遗传诱发长链非编码RNA1(epigenetically induced long non-coding RNA 1, EPIC1)在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中的表达情况及临床价值。方法：收集2013年9月—2018年3月被确诊为HCC患者48例的肿瘤及癌旁组织,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测HCC组织、细胞中EPIC1的表达情况;分析EPIC1表达与患者临床参数的相关性。结果：EPIC1在肝癌组织中平均表达量为(13.28±36.66),显著低于癌旁组织(62.84±108.93)(P=0.006)。相较于正常的肝细胞系L-02,EPIC1在HCC细胞系中低表达(P<0.05)。HCC患者EPIC1表达量与患者的TNM分期相关(P=0.033)。结论：EPIC1在HCC中低表达,可能为潜在的治疗靶点。     

短发夹RNA沉默长链非编码RNA HULC对喉癌细胞生长和运动能力以及裸鼠成瘤的影响

目的:探究sh-HULC对喉癌细胞生长和运动能力以及裸鼠成瘤的影响.方法:构建shRNAHULC载体转染至Hep-2细胞,将Hep-2细胞随机分为3组:Control组、shRNA-NC组、sh-HULC组.EDU染色检测细胞增殖;Transwell检测细胞侵袭;蛋白免疫印迹检测Ki67、Survivin、VEGF、V...     

长链非编码RNA UCA1 在胃癌组织中的表达及其效应分析

目的 分析胃癌组织特征长链非编码RNA（lncRNA）表达谱,并探讨长链非编码RNA UCA1 在胃癌中的表达及效 应。方法 采用基因芯片检测6 例胃癌患者的肿瘤组织及癌旁正常组织LncRNA表达水平,分析胃癌组织特征lncRNA 表达谱,进一步通过定量PCR 检测40 例胃癌及其对应的癌旁正常组织中UCA1的表达并分析淋巴结转移、肿块大小、细胞分化程度及病理分期等临床病理特征的关系。在此基础上,利用siRNA 下调AGS 胃癌细胞内UCA1 表达水平,利用CCK-8 试剂盒检测UCA1干预对胃癌细胞增殖能力的影响。结果 LncRNA 基因芯片检测到胃癌组织1 021条差异＞2倍的lncRNA（P＜0.05）,定量PCR 验证明显差异表达的UCA1在胃癌组织中的表达显著高于正常组织（P＜0.01）。此外,临床病理相关分析显示,UCA1表达水平还与胃癌的细胞分化程度及病理分期相关。分化低的胃癌组织中UCA1表达水平明显高于中、高分化的胃癌组织（P＜0.05）;病理分期Ⅲ/Ⅳ期胃癌组织的UCA1 表达水平明显高于Ⅰ/Ⅱ期的标本（P＜0.05）。此外,下调UCA1 胃癌细胞表达可明显抑制细胞增殖。结论 异常表达的lncRNA 参与了胃癌的发生、发展,其中肿瘤组织上调表达的UCA1是胃癌重要的促癌基因。     

长链非编码RNA SPATA3-AS1在胃癌中的表达及意义

目的: 研究长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)SPATA3-AS1在胃癌患者癌组织和血浆中的表达及临床意义,并进一步探讨其对胃癌细胞株的影响及其潜在机制。方法：采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测80例胃癌及癌旁组织、29例胃癌患者和29例健康者血浆中SPATA3-AS1的表达水平;对胃癌患者SPATA3-AS1表达与其临床病理特征行统计学分析。敲减SPATA3-AS1,分别转染胃癌AGS、HGC-27细胞,采用细胞增殖、克隆形成、Transwell实验及流式细胞术分别检测细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡;采用qRT-PCR检测肿瘤相关基因mRNA的表达水平。结果：SPATA3-AS1在胃癌组织中呈高表达,其表达与淋巴结转移、肿瘤TNM分期、肿瘤浸润深度及肿瘤预后相关;胃癌患者血浆中SPATA3-AS1也呈高表达,其表达与淋巴结转移、肿瘤直径、肿瘤TNM分期呈正相关。血浆中SPATA3-AS1表达水平诊断胃癌ROC曲线下面积为0.788。敲减SPATA3-AS1后,胃癌AGS、HGC-27细胞增殖及移动活力减弱,细胞凋亡能力增强。同时N-钙黏蛋白、Twist1、Snail mRNA表达下调而E-钙黏蛋白mRNA表达上调。结论：SPATA3-AS1在胃癌患者癌组织及血浆中呈高表达并与其预后相关;敲减SPATA3-AS1后胃癌细胞增殖、迁移及侵袭等能力均受到抑制,细胞凋亡增强,可能与对上皮间质转化过程的调控有关。     

长链非编码RNA C16orf89在胃癌组织中的表达及对胃癌细胞增殖和侵袭的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)C16orf89在胃癌组织及细胞系中的表达,观察lncRNA C16orf89过表达对胃癌细胞增殖、侵袭的影响及其作用机制。方法:应用基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库在线分析lncRNA C16orf89在胃癌组织中的表达。应用Oncolnc数据库在线分析lncRNA C16orf89表达量与胃癌患者总生存期的关系。采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测lncRNA C16orf89在胃癌细胞系中的表达。分别将阴性对照质粒和lncRNA C16orf89过表达质粒转染至lncRNA C16orf89表达最低的胃癌细胞系,分别定义为NC组和lncRNA C16orf89组。采用噻唑蓝(MTS)和Transwell实验检测lncRNA C16orf89过表达对胃癌细胞增殖及侵袭的影响。采用在线生物信息学网站分析可能与lncRNA C16orf89结合的微小RNA(miRNA)。采用双荧光素酶报告载体实验检测lncRNA C16orf89与miR-95-3p的相互作用。采用qRT-PCR检测lncRNA C16orf89过表达对miR-...     

长链非编码RNA DNM3OS在胃癌中的研究

目的 本研究旨在探讨DNM3OS对胃癌细胞的作用及其对胃癌患者预后预测的作用。方法 选取2012年1月~2016年1月在笔者医院接受手术的胃癌患者,提取总RNA,检测DNM3OS的水平,随访患者预后。同时培养胃癌细胞AGS和MKN45细胞系,采用DNM3OS干扰RNA沉默DNM3OS,通过Tunel方法检测胃癌细胞的凋亡水平,通过MTT实验检测细胞活性;采用免疫印迹法检测信号通路。结果 与癌旁组织比较,DNM3OS在胃癌组织中的表达显著上调(P＜0.05),且DNM3OS高表达患者肿瘤浸润深度,淋巴结转移和TNM分级与DNM3OS低表达患者比较,差异有统计学意义(P＜0.05);DNM3OS高表达患者病死率明显高于DNM3OS低表达患者(P＜0.05)。在胃癌细胞AGS和MKN45细胞系中沉默DNM3OS后,DNM3OS沉默组细胞活性较对照组明显降低(P＜0.05),细胞凋亡较对照组明显增加(P＜0.05);免疫印迹法结果显示,DNM3OS沉默组细胞Akt的活化较对照组明显降低(P＜0.05)。结论 DNM3OS的表达与胃癌患者预后明显相关,其通过增加Akt的活化促进胃癌细胞的生存。     

长链非编码RNA BANCR对非小细胞肺癌增殖和侵袭的影响

目的:探讨长链非编码RNA BANCR在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织及细胞系中的表达水平,以及BANCR对NSCLC细胞增殖和侵袭的影响?方法:用定量PCR技术检测NSCLC组织及细胞系中BANCR的表达水平;通过转染pcDNA-BANCR上调BANCR的表达水平,并通过qPCR检测转染效率?用Transwell实验检测上调BANCR的水平对SPC-A1细胞和A549细胞增殖和侵袭能力的影响,Western blot检测这2种细胞中上调BANCR的水平对上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志物上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达水平的影响?结果:相比正常肺组织及细胞,在NSCLC组织和细胞中BANCR的表达出现显著下调?MTT实验显示,上调BANCR的表达能降低SPCA1细胞和A549细胞的增殖和侵袭能力?BANCR过表达能通过上调E-cadherin表达并下调Vimentin表达,影响EMT?结论:BANCR可通过影响EMT,抑制NSCLC细胞的增殖和侵袭?     

长链非编码RNA LSAMP-AS1在胃癌组织中表达及临床意义

目的探讨长链非编码RNA LSAMP-AS1在人胃癌组织中的表达及临床意义。方法收集2016年1月至2018年6月手术治疗60例患者胃癌组织标本。采用实时荧光定量聚合酶链反应法（RT-qPCR）检测4株胃癌细胞系和1株正常胃黏膜细胞细胞系LSAMP-AS1的表达水平。结果 LSAMP-AS1在胃癌组织中表达量明显低于癌旁组织。LSAMP-AS1表达量与淋巴结是否转移、TNM分期、BMI相关。多因素Logistic回归分析,胃癌转移与LSAMP-AS1表达水平相关。LSAMP-AS1组织表达水平对胃癌诊断的特异性为60.00%,敏感性为60.00%（AUC=0.607,P=0.043）。结论LSAMP-AS1可能作为抑癌基因参与胃癌的发生、发展,特别是参与胃癌的侵袭、转移过程,低表达LSAMP-AS1可作为不良预后指标,为胃癌诊断、预后判断提供重要参考依据。