儿童非霍奇金淋巴瘤X-连锁凋亡抑制蛋白和Caspase-3的相关性研究

X-连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)是凋亡抑制蛋白家族中作用最强的一员,能明显抑制Fas和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)诱发的内源和外源细胞凋亡过程,已经在多种恶性肿瘤中均发现高表达。Caspase家族在细胞凋亡的过程中起重要作用,Caspase-3是主要的效应因子,在肿瘤细胞的凋     

细胞凋亡抑制蛋白-1在宫颈癌及宫颈癌化疗耐药方面的研究进展

细胞凋亡抑制蛋白-1(c-IAP1)属于凋亡抑制蛋白家族(IAPs),是一种重要的细胞内凋亡调节蛋白,通过抑制caspase酶活性以及参与调节核转录因子κB(NF-κB)信号通路抑制细胞凋亡并促进细胞存活,进而参与肿瘤形成及化疗耐药,亦可通过调节Rho家族(Ras homologue)中Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)等的活性,在肿瘤的转移中发挥重要作用。研究表明,c-IAP1在宫颈癌的发生发展、治疗及预后判断方面均发挥重要作用,现就其在宫颈癌及宫颈癌化疗耐药方面的研究进展作一简要概述。     

ERCC1 siRNA对鼻咽癌细胞HNE-1/DDP顺铂耐药的影响及机制

目的:研究切除修复交叉互补基因1(excision repair cross complement 1,ERCC1)siRNA对鼻咽癌细胞HNE-1/顺铂(cisplatin,DDP)耐药的影响及机制。方法:以qRT-PCR和Western印迹法测定人鼻咽癌细胞HNE-1/DDP和HNE-1细胞中ERCC1表达水平。人鼻咽癌细胞HNE-1/DDP转染ERCC1siRNA重组慢病毒载体和阴性对照载体,以qRT-PCR和Western印迹法测定干扰效果。用DDP处理转染ERCC1 siRNA的HNE-1/DDP细胞,MTT检测细胞增殖变化,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡变化,Western印迹法检测细胞中激活型caspase-3(C-caspase-3)、激活型caspase-9(C-caspase-9)蛋白水平,同时用Western印迹法检测细胞质和线粒体中细胞色素C(cy tochromeC)蛋白水平。结果:HNE-1/DDP细胞中ERCC1表达水平高于HNE-1细胞。ERCC1siRNA可明显下调HNE-1/DDP细胞中ERCC1的表达和转录。DDP和ERCC1siRNA可以降低HNE-1/DDP细胞增殖能力和克隆形成能力,提高细胞凋亡率,促进细胞中C-caspase-3,C-caspase-9蛋白表达,提高细胞质中cytochrome C蛋白水平,降低线粒体中cytochrome C蛋白水平。DDP处理转染ERCC1 siRNA的HNE-1/DDP细胞,细胞的增殖和克隆能力下降更多,细胞凋亡率升高更多,细胞中C-caspase-3,C-caspase-9蛋白水平更高,细胞质中cytochrome C蛋白水平也更高,线粒体中cytochromeC蛋白水平下降更多。结论:ERCC1siRNA能够逆转鼻咽癌细胞HNE-1/DDP对DDP耐药,作用机制可能与激活线粒体凋亡途径有关。     

凋亡蛋白抑制因子:一种具有多生物学活性的凋亡抑制蛋白

凋亡蛋白抑制因子(inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)是继Bcl-2家族蛋白之后发现的又一个抑制细胞凋亡的家族蛋白,最早发现于杆状病毒,它能抑制由病毒感染而诱导的细胞凋亡,具有结合和抑制半胱天冬酶(caspase)、调节细胞周期和调控死亡受体介导信号传导等多生物学活性。本文就近年来对IAPs结构和功能间的关系以及IAPs在肿瘤中表达意义的研究进展作一综述。     

RNA干扰ERCC1基因对肺癌细胞药物敏感性的影响

目的探讨RNA干扰切除修复交叉互补基因1(ERCC1)对肺癌细胞药物敏感性的影响。方法将肺癌A549/DDP细胞分为阴性组、空白组、ERCC1-shRNA1组及ERCC1-shRNA2组,通过不同方法检测分析ERCC1的mRNA和蛋白表达水平,及不同顺铂(DDP)浓度下肺癌细胞的凋亡程度。结果阴性组、空白组的ERCC1 mRNA及蛋白表达水平无显著差异(P>0.05);ERCC1-shRNA1组、ERCC1-shRNA2组的ERCC1 mRNA及蛋白表达水平与阴性组、空白组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);ERCC1-shRNA1组、ERCC1-shRNA2组的ERCC1 mRNA及蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ERCC1-shRNA 1组、阴性组、空白组的A549/DDP细胞抑制率均随着DDP浓度的升高而增加;DDP浓度为8、16、32μg/mL时,ERCC1-shRNA1组的A549/DDP细胞抑制率高于阴性组及空白组(P<0.05);阴性组、空白组的A549/DDP细胞抑制率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与0μg/mL相比,阴性组、空白组、ERCC1-shRNA 1组16、32μg/mL DDP的A549/DDP细胞凋亡率增加(P<0.05);DDP浓度为0、16、32μg/mL时,ERCC1-shRNA1组的A549/DDP凋亡率高于阴性组及空白组(P<0.05)。结论沉默ERCC1载体可减少肺癌A549/DDP细胞中ERCC1表达,可抑制肿瘤细胞增殖,增加化疗药物的敏感性。RNAi抑制交叉互补基因治疗肺癌患者的可行性高,能够为下一步临床工作提供理论基础。     

实时荧光定量RT-PCR检测食管癌Survivin mRNA的表达

SurvivinmRNA是近年来发现的一种新的凋亡抑制因子,属于凋亡抑制蛋白(inhibitorofapoptosisproteins,IAP)家族的新成员,具有抑制细胞凋亡和调节细胞增殖的双重作用[1]。Survivin选择性地表达于胚胎组织和人类大多数肿瘤组织,而在正常人终末分化组织中不表达[2,3]。对Survivin的     

生存素在恶性血液病中表达的临床意义

抑制凋亡蛋白家族(IAP)是继bcl-2家族后又一新抑凋亡蛋白家族。生存素为IAP家族中分子最小但研究较广的。生存素在静止期细胞中不表达,特异性表达于G2/M期,主要抑制caspase凋亡途径中终末凋亡执行的Caspase-3、-7,以抑制凋亡。生存素表达与bcl-2家族相关。恶性血液病尤其白血病100％表达。造血因子G-CSF、GM-CSF和SCF上调生存素表达。全反式维甲酸可下调生存素表达,线粒体促凋亡蛋白S-msc可对抗IAP。亚砷酸可促使Smac分泌。对生存素、Smac等深入研究,有助于治疗恶性血液病新策略的设计。     

Livin在胃肠肿瘤中的研究进展

肿瘤的发生发展与细胞增殖和细胞凋亡的失衡密切相关,凋亡抑制蛋白家族(inhibitors of apoptosis proteins,IAPs)是一组具有高度保守性和同源性的内源性抗凋亡基因家族的表达产物,Livin是2000年发现的IAPs家族的凋亡抑制因子之一,近年来Livin和肿瘤的相关性及治疗已成为研究的新热点。本文将     

iASPP抑制p53诱导的细胞凋亡

iASPP(inhibitor of ASPP family)是p53凋亡刺激蛋白家族ASPP(apoptosis stimulating protein of p53)中唯一的一个抑制因子,能够抑制p53诱导的细胞凋亡。iASPP基因在癌组织中表达上调,对肿瘤发生、发展起重要促进作用,具有早期诊断价值。进一步的研究显示iASPP基因沉默后,肿瘤细胞凋亡增强,使其有望发展成为肿瘤治疗的新靶点。     

凋亡蛋白抑制因子家族与白血病关系的研究进展

凋亡蛋白抑制因子(IAP)家族可以抑制凋亡的进行,与白血病发生发展及治疗有密切关系。该家族由多个成员组成,它们在各种白血病中的表达、调节及抗凋亡途径备有特点。IAP家族与白血病关系的深入研究,为白血病的临床诊断、判断预后和治疗提供了有力的依据。     

晚期非小细胞肺癌患者外周血细胞核苷酸切除修复互补基因1表达水平与铂类化疗敏感性相关研究

目的 建立检测晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血核苷酸切除修复互补基因1(ERCC1 mRNA)表达水平的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,并探讨该基因表达水平与铂类化疗敏感性的关系.方法 符合入选条件的晚期NSCLC患者60例,化疗前利用实时荧光定量RT-PCR技术对其外周血标本进行ERCC1 mRNA相对定量分析.患者分别接受4～6个周期的含铂类第三代方案的化疗(具体方案为吉西他滨+顺铂或多西他赛+顺铂),并采用实体瘤疗效评价标准(RECIST标准)对患者化疗的有效率(response rate,RR)进行评估,疗效分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、稳定(SD)和进展(PD).结果 60例患者外周血均检测到ERCC1mRNA的表达.化疗总有效率(PR/PR+SD+PD)30.0％(18/60),总疾病控制率(PR+SD/PR+SD+PD)86.7％(52/60).有效(PR)患者的ERCC1mRNA表达水平(中位值＝1.790)与无效(SD+PD)患者的ERCC1 mRNA表达水平(中位值=2.779)差异有统计学意义(Z=2.376,P＜0.05).疗效为PR,SD,PD患者的ERCC1 mRNA表达水平呈逐渐升高的趋势(中位值分别为1.790,2.883,3.545),差异有统计学意义(H=6.319,P＜0.05).ERCC1 mRNA表达水平低于中位值患者(“低”表达)的有效率(53.3％)与高于中位值患者(“高”表达)的有效率(6.6％)差异有统计学意义(P＜0.05).ERCC1 mRNA表达水平与年龄、性别、ECOG PS评分、临床分期、组织细胞病理学分型等因素之间无显著相关性(P＞0.05).结论 ①外周血细胞ERCC1 mRNA表达水平与铂类化疗敏感性具有显著负相关.②所建实时荧光定量RT-PCR方法能成功检测晚期非小细胞肺癌患者外周血细胞ERCC1 mRNA表达水平,有较高的敏感性与特异性,可应用于临床检测工作,指导临床化疗.     

新辅助化疗对非小细胞肺癌组织ERCC1和BRCA1表达影响

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织核苷酸切除修复基因1（ERCC1）和乳癌易感基因1（BRCA1）的表达以及新辅助化疗对两者表达的影响。方法应用免疫组化PV二步法检测110例NSCLC组织（50例术前行新辅助化疗,60例行常规手术而术前未经化疗）ERCC1、BRCA1的表达。结果ERCC1主要在NSCLC组织细胞核表达,细胞浆有少量表达,总阳性表达率为59.09%。BRCA1在细胞核表达,总阳性表达率为74.55%。ERCC1、BRCA1表达强度与性别、年龄、组织学类型、肿瘤细胞分化程度、临床分期及有无淋巴结转移均无关（u=-1.557～-0.032,H=0.003～3.151,P〉0.05）。新辅助化疗组ERCC1、BRCA1总阳性表达率为68.00%、80.00%,单纯手术组为51.67%、70.00%,两组比较差异有显著性（u=-2.365、-3.011,P〈0.05）。ERCC1与BRCA1的表达强度呈显著正相关（r=0.264,P〈0.01）。结论新辅助化疗可以影响NSCLC组织中ERCC1、BRCA1的表达,从而影响肿瘤对顺铂化疗的敏感性,在肿瘤化疗中应予重视。     

晚期胃癌组织切除修复交叉互补基因 1 表达与奥沙利铂化疗近期疗效的相关性研究

目的探讨晚期胃癌组织中切除修复交叉互补基因1（excisionrepaircross—complementing1,ERCCl）表达与奥沙利铂化疗近期疗效的相关性。方法56例经病理确诊且具有可评估转移灶的晚期胃癌患者,均接受含奥沙利铂的联合化疗,观察分析化疗近期疗效与ERCCl表达之间的关系。结果56例患者中进展（PD）26例、稳定（SD）12例,部分缓解（PR）18例,完全缓解（CR）0例,疾病控制率53．57％,20例患者ERCCl呈阳性表达（35．7％）;ERCCl表达与化疗近期疗效具有关联性（X22=6．95,P=0．009）,且关联性较强（r=0．821）。结论晚期胃癌组织中ERCCl基因表达对于接受含奥沙利铂联合化疗疗效预测有指导作用。     

BRCA-1、ERCCmRNA表达水平与在大肠癌铂类化疗预后的相关性研究

目的探讨以铂类为基础化疗方案的大肠癌患者中乳腺癌敏感蛋白I型（BRCA-1）、核苷酸切除修复交叉互补基因（ERCC-1）表达与患者临床病理特征的关系及其预后意义。方法采用实时荧光定量逆转录聚合酶联反应（RT—qPCR）检测54例大肠癌患者组织标本中BRCA-1、ERccmRNA表达,比较其表达水平与患者临床病理特征和生存时间之间的关系。结果（1）BRcA_1mRNA低表达20例（37．04％）,高表达34例（62．97％）。BRCA-lmRNA表达水平与淋巴结转移及临床分期有关（P=0．037,P=0．034）;（2）BRcA_1mRNA低表达患者中位生存时间MST（47．84月）高于高表达患者（35．36月,P=0．137）;（3）BRCA-lmRNA表达在16例晚期大肠癌患者中总生存时间高表达患者（32．6月）长于低表达患者（9．5月,P=0．026）;至肿瘤进展时间高表达患者（10．3月）长于低表达患者（4．3月,P=0．026）;（4）ERCCmRNA低表达14例（25．93％）,高表达40例（74．07％）。ERCCmRNA表达水平与临床病理特征无关（P〉O．05）;（5）ERCCmRNA低表达患者中位生存时间MST（49．50月）高于低表达患者（30．33月,P=0．014）;（6）ERCcmRNA表达在16例晚期大肠癌患者中总生存时间低表达患者（41．1月）长于高表达患者（20．7月P=0．018）;至肿瘤进展时间高表达患者（9．5月）长于低表达患者（8．9月,P=0．966）;（7）ERCC与BRCA-1表达有相关性,（r=0．497P〈O．05）;（8）COX多因素分析显示ERCCmRNA表达水平可以作为大肠癌患者铂类化疗预后的独立预测指标。结论ERCClmRNA表达水平的高低与大肠癌患者铂类化疗生存时间存在显著相关性：可以作为生存期的预测指标;ERCC与BRCA-1的表达具有相关性,但BRCA-1目前尚不能作为大肠癌患者铂类化疗生存期的预测指标,需进-步观察。     

ERCC1表达水平与晚期非小细胞肺癌患者化疗疗效的相关性

目的:研究Ⅲb、Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤组织内核苷酸切除修复交叉互补组1(excision repair cross complementation group1,ERCC1)基因mRNA表达水平与含铂类方案化疗疗效的相关性。方法:符合入选条件的患者56例,均为Ⅲb、Ⅳ期患者。所有的患者经皮肺穿刺或经纤支镜活检病理证实为NSCLC。化疗前利用RNA提取技术及RealtimeRT-PCR技术对其组织学标本进行ERCC1 mRNA相对定量分析。患者分别给予4～6个周期的含铂类方案化疗(吉西他滨/顺铂、紫杉醇/顺铂方案),对患者化疗后的总生存期(overall survival,OS)、肿瘤进展时间(time to progression,TTP)及化疗后反应率(response rate,RR)进行评估。结果:56例患者活检标本的ERCC1 mRNA相对于内控管家基因GAPDH mRNA表达的平均表达水平为6.1×103。以ERCC1 mRNA表达水平≥6.1×103的22例患者作为高表达组,以ERCC1 mRNA表达水平<6.1×103的34例患者作为低表达组。高表达组患者化疗后RR、OS及TTP...     

ERCC1 gene polymorphism as a predictor for clinical outcome in advanced colorectal cancer patients treated with platinum-based chemotherapy

Excision repair cross-complementation group 1 (ERCC1) is a highly conserved protein and an essential member of the nucleotide excision repair pathway. DNA repair is an important mechanism for resistance to platinum-based chemotherapy. Previous studies have shown that ERCC1 gene expression is associated with clinical outcome to platinum chemotherapy in a variety of cancers. Recently, 2 common polymorphisms in the ERCC1 gene have been described. The first is a single nucleotide polymorphism at codon 188 of the ERCC1 gene that causes a C-->T change but codes for the same amino acid, asparagine. This polymorphism may be associated with differential ERCC1 gene expression. The second is also a signal nucleotide polymorphism in the 3'-untranslated region and may affect MRNA stability. We hypothesized that these 2 polymorphisms may be associated with clinical outcome to platinum-based chemotherapy. We assessed the relationship between these ERCC1 gene polymorphism and clinical outcome to platinum-based chemotherapy in 106 patients with advanced refractory colorectal cancer. We found a significant associated between the ERCC1 codon 118 polymorphism and clinical outcome. Patients with the C/C genotype had a median survival of 15.3 months (95% CI, 6.0-12.1) and 11.1 months (95% CI, 5.8-16.2) for those with C/T and T/T genotypes, respectively. The ERCC1 codon 118 polymorphism may be a useful predictor of clinical outcome in advanced colorectal cancer patients treated with platinum-based chemotherapy.     

依据ERCC1及RRM1对晚期非小细胞肺癌实施个体化治疗的随机对照临床研究

目的对晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者根据切除修复交叉互补基因1（ERCC1）及核糖核苷酸还原酶M1（RRM1）的检测结果选择敏感药物,观察疗效差异,以期对个体化治疗起到指导作用。方法对经病理确诊的晚期NSCLC的肿瘤细胞进行ERCC1及RRM1基因的联合检测。入组患者按照1∶2随机分为2组,对照组使用吉西他滨联合顺铂化疗;基因型组根据ERCC1及RRM1的表达情况分为4组进行个体化治疗。观察近期疗效及远期疗效。结果本研究共纳入174例患者,总体有效率为44.2%,对照组有效率为37.5%,基因型组有效率为47.5%,结果无统计学差异。基因型组中ERCC1阴性组有效率（56.7%）高于ERCC1阳性组（37.9%）,结果有统计学差异。各组间中位无疾病进展生存期、中位生存期及1年生存率无统计学差异。结论 ERCC1低表达患者中使用个体化治疗可获得更高的有效率,而ERCC1高表达患者可能意味着对铂类耐药。     

NSCLC含铂新辅助化疗后ERCC1和BRCA1表达及其与疗效关系

目的探讨含铂新辅助化疗对非小细胞肺癌（NSCLC）组织中核苷酸切除修复基因1（ERCC1）和乳癌易感基因1（BRCA1）表达的影响及其与化疗疗效的关系。方法应用免疫组化PV二步法检测50例NSCLC病人含铂新辅助化疗前后ERCC1、BRCA1的表达。结果 ERCC1主要在细胞核表达,细胞浆有少量表达;BRCA1在细胞核表达。含铂新辅助化疗前ERCC1、BRCA1阳性表达率为48.00%、64.00%,化疗后为68.00%、80.00%,化疗前后二者表达强度比较差异有显著性（u=-2.657、-3.083,P〈0.01）。ERCC1、BRCA1表达阳性者化疗有效率为41.67%、40.63%,表达阴性者为73.08%、88.89%,两组比较差异有显著性（χ2=5.055、11.016,P〈0.05、0.01）。结论含铂新辅助化疗可影响NSCLC组织中ERCC1、BRCA1的表达,从而影响肿瘤对顺铂的敏感性。     

ERCC1对晚期非小细胞肺癌一线含铂化疗疗效的预测价值

  目的  探讨肺癌组织ERCC1(excision repair cross-complementation group1)表达水平对晚期非小细胞肺癌含铂化疗疗效及生存期的预测价值。  方法  采用免疫组织化学方法对39例非小细胞肺癌患者的石蜡包埋肿瘤标本进行ERCC1检测, 分析其与化疗反应率及生存期间的关系。  结果  56.4%(22/39)的肿瘤组织呈ERCC1高表达。ERCC1表达与患者性别、年龄、病理类型、肿瘤分化程度、吸烟史及吸烟指数均无相关性; ERCC1低表达患者对含铂一线化疗的反应率优于ERCC1高表达者, P < 0.05。但ERCC1表达水平对患者总生存(overall survival, OS)和疾病进展(time to progression, TTP)时间没有明显影响。  结论  ERCC1在肺癌组织的表达水平可能成为预测晚期非小细胞肺癌患者一线含铂化疗方案疗效的因素之一。     

ERCC1和AKT2在胃癌组织中的表达及其临床意义

【目的】探讨切除修复交叉互补基因1（ERCC1）、蛋白激酶B（protein kinase B,PKB/AKT）两种蛋白在胃癌组织中表达情况及其意义。【方法】采用 SP免疫组织化学法检测76例胃癌组织中 ERCC1、AKT2蛋白的表达情况,并与42例正常胃黏膜组织进行比较。【结果】胃癌组织中 ERCC1、AKT2蛋白表达定位于细胞核和浆, ERCC1表达明显低于正常胃黏膜组织,而 AKT2阳性表达明显高于正常胃黏膜组织（P ＜0．05）。ERCC1和AKT2蛋白的表达与淋巴结转移及病理分期有关（P＜0．05）,两者之间表达呈无明显相关性。术后化疗患者中ERCC1和 AKT2阴性者预后好于均阳性者。【结论】ERCC1和 AKT2在与胃癌预后及耐药密切相关,对其变化进行检测可帮助了解胃癌患者的肿瘤恶性程度,指导制定个体化治疗方案并判断预后。