辣椒根尖预处理及植株倍性鉴定

采用0.1%秋水仙素、0.002 mol/L 8-羟基喹啉和冰水3种试剂对辣椒辛香8号花药培养再生植株根尖进行预处理,研究不同预处理对根尖细胞中期分裂相的影响效果,并对辣椒花药培养再生植株进行倍性鉴定,以期获得辣椒染色体计数的最佳预处理。结果表明:3种预处理中,利用0.1%秋水仙素对辣椒根尖预处理3 h,细胞的中期分裂指数最高,达56.6‰,而且染色体分散度好,染色体分裂相多,比较适合染色体计数;经染色体计数鉴定得出5株花药培养再生植株中有4株双倍体和1株单倍体,可用于下一步育种实践中。     

'棉梨'染色体倍性鉴定

以‘库尔勒香梨’、‘黑酸梨’、‘沙梨01号’为对照,利用流式细胞仪和根尖压片法对‘棉梨’的染色体倍性进行鉴定,以期为梨种质资源的创新和利用提供参考。结果表明:根尖压片得出‘库尔勒香梨’、‘黑酸梨’、‘沙梨01号’以及‘棉梨’的染色体数目分别为34、51、68以及34,‘棉梨’的染色体数目与二倍体的‘库尔勒香梨’相同;利用流式细胞仪得出‘库尔勒香梨’、‘黑酸梨’、‘沙梨01号’以及‘棉梨’均出现了一个峰,且峰值比为1. 0∶1. 5∶2. 0∶1. 0,即各梨品种叶片细胞中DNA相对含量为2C∶3C∶4C∶2C。综上可得:‘棉梨’的染色体数目为2n=2X=34,为单纯的二倍体。     

三七根尖染色体倍性鉴定技术研究

为明确三七染色体的数目和倍性,采用多倍体三七籽条根尖进行染色体制片技术研究。结果表明,用8-羟基喹啉预处理根尖6 h(更换试液2 h/次),清洗,然后在水中延展10 min,用卡诺固定液Ⅰ固定3～24 h,换入70%酒精保存,水洗后加1 mol/L HCl于58～60℃水浴锅中水解10 min,倒去HCl,置于45%乙酸中浸泡2 min,用Schiff试剂染色40 min左右,2.5%纤维素酶+1.25%果胶酶混合酶液酶解37 min,洗涤酶液,固定,制片可得到较好的染色体制片效果,能清楚看到加倍的染色体。     

大白菜小孢子植株群体染色体倍性鉴定方法

大白菜小孢子植株群体染色体倍性鉴定方法有直接法和间接法2种。直接法通常是以根尖、茎尖、愈伤组织、胚乳等为材料制备染色体标本,在显微镜下观察染色体数目的方法;间接法是利用流式细胞仪、细胞形态学、花粉、植株形态学等观察手段来鉴定植株的倍性。分析了各种方法的优缺点,并指出流式细胞仪鉴定是目前较好的鉴定方法。     

作物单倍体二倍化及其染色体倍性鉴定研究进展

综述了农作物单倍体二倍化各种方法的特点及作物细胞染色体鉴定技术，分析比较了各种方法操作的简便性、可靠性以及适用范围，并对今后的发展趋势作了展望。     

菊花染色体倍性鉴定研究

[目的]综述菊花染色体倍性鉴定的常用方法及其在育种中的应用。[方法]重点介绍了染色体计数法和流式细胞术法,简要介绍了染色体倍性鉴定在菊花品种鉴定和育种中的应用情况。[结果]染色体计数法一般分为取材、预处理、固定、解离、染色、制片、镜检和制作永久玻片等步骤。流式细胞术鉴定法目前已成为倍性鉴定的主要方法,尤其适合大量样品的染色体倍性分析。介绍了流式细胞仪的结构与工作原理、使用方法与操作步骤。染色体倍性鉴定方法在菊花品种鉴定和育种中的应用主要在品种鉴定、杂交组合的选配、杂交后代材料的提前筛选和亲缘关系的鉴定4个方面。[结论]染色体计数法和流式细胞术法2种方法的结合有利于提高染色体倍性鉴定的效率和准确性。     

烟草花粉植株染色体倍性的早期快速鉴定

显了提高烟草单倍体育种效率,对用叶绿体计数法鉴定植株染色体倍性进行了研究。其结果是：以展开第５叶为材料,用植株气孔保卫细胞叶绿体数倍性分界法能早期、快速判定经秋水仙碱处理的烟草花粉植株是单倍体、二倍体或多倍体,其判定结果与开花结实情况有非常高的吻合率,且判定每株仅需１￣２ｍｉｎ。     

萝卜小孢子植株倍性鉴定研究

以萝卜游离小孢子再生植株为试验材料,采用形态学观察、根尖染色体鉴定、流式细胞测定等方法进行了倍性检测.结果表明,由游离小孢子培养获得的植株中同时含有单倍体、双单倍体和多倍体.来源不同的小孢子培养获得的植株倍性比例不同,不同倍性植株具有不同的形态特征.根尖染色体鉴定是植株倍性鉴定最为准确的方法.流式细胞测定可快速进行倍性测定,且准确率较高.     

新麦草种质染色体倍性鉴定及基因组估测

【目的】利用流式细胞仪检测新麦草种质的染色体倍性和基因组大小,为新麦草的种质鉴定及遗传育种研究提供基础数据。【方法】以31份新麦草种质为材料,利用流式细胞仪检测新麦草种质染色体倍性、核DNA含量,通过根尖染色体压片法验证检测结果。同时用已知基因组大小的黑麦草(Lolium perenne L.)和大麦(Hordeum vulgare L.)为对照,采用外标法估测新麦草的基因组大小。【结果】31份新麦草种质中,四倍体材料2份,分别为200803和595289号,占新麦草种质的6.45%;其余29份材料均为二倍体,占新麦草种质的93.55%。二倍体新麦草基因组大小为6.73 Gb,核DNA含量为(13.74±0.483) pg,四倍体新麦草基因组大小为13.62 Gb,核DNA含量为(27.842±0.681) pg。经根尖染色体制片法验证,二倍体新麦草种质体细胞染色体数为2n=2x=14,四倍体新麦草种质染色体数为2n=4x=28。根尖压片法和流式细胞仪法对新麦草种质染色体倍性鉴定结果完全一致。【结论】明确了新麦草种质的染色体倍性及基因组大小。     

南瓜胚囊再生植株倍性鉴定方法的比较

以南瓜胚囊再生植株为材料,采用形态学鉴定法、根尖染色体计数法和气孔保卫细胞叶绿体计数法3种方法对46株南瓜胚囊再生植株的倍性进行鉴定。结果表明:在46株再生植株中,有12株再生植株生长势弱、叶片较薄、叶脉不明显、分枝少、根系不发达,与其他倍性植株在形态上有明显差异;进一步进行染色体计数后,发现仅有7株再生植株的染色体数n=x=22,7株单倍体植株的保卫细胞叶绿体数的平均值为4.28个,正常二倍体组培苗的平均叶绿体数目为8.37个。说明形态学鉴定法只能作为倍性鉴定的一种辅助方法,而染色体计数法虽直接、准确,但效率低,气孔保卫细胞叶绿体计数法高效、简便。     

中国野生葡萄染色体倍性研究

利用去壁低渗染色体计数法及流式细胞术法,首次系统地对中国野生葡萄18个种64个株系的染色体倍性进行了鉴定。结果表明,供试的中国野生葡萄全部为二倍体(2n=38)。同时也证明流式细胞仪不仅可以进行染色体倍性的鉴定,且制样简单、测定快速、结果可靠。     

不同地域泥鳅和大鳞副泥鳅的染色体倍性比较与分析

采用流式细胞仪对安徽蚌埠,湖北荆州,上海崇明、南汇、松江、金山6地的泥鳅和大鳞副泥鳅的血液细胞和成熟精巢进行了染色体倍性检测,并对泥鳅和大鳞副泥鳅二倍体DNA相对含量进行比较。结果表明：①二倍体是泥鳅最主要的倍性形式,四倍体泥鳅出现的频率仅占总样本的1．12％,雄性和雌性泥鳅都发现了四倍体,这表明四倍体倍性与性别无关,与地域有关;②实验检测的四倍体均为泥鳅。未检测到大鳞副泥鳅存在四倍体,各地均未检测到泥鳅和大鳞副泥鳅的天然三倍体;③由于同一地域的泥鳅存在不同的倍性,故不能认为出自某一地域的泥鳅就仅有某种特定的倍性形式;④有部分样本流式细胞仪检测的DNA相对含量介于泥鳅和大鳞副泥鳅之间,这可能是由于在自然环境下,泥鳅和大鳞副泥鳅杂交,染色体发生交换所致。     

鲤鲫杂交回交子代的染色体数目及倍性

采用PHA和秋水仙素体内注射,制备鲤鲫杂交回交子代鱼(鲤鲫杂交♀×鲤鱼♂)的染色体,结果表明:鲤鲫杂交回交子代染色体组由150条染色体组成,按着丝粒位置染色体组型可分为4组,每个染色体小组均由3条同源染色体组成。鲤鲫杂交回交子代鱼的染色体数目为3n=150 条,染色体臂数NF=234,核型公式为:3n=60m 24sm 36st 30t。鲤鲫杂交回交子代的DNA相对含量是二倍体鲤鲫杂交肾细胞DNA相对含量的1.54倍,与细胞染色体试验结果一致,说明该鱼是以三倍体细胞为主的回交种。     

温度和处理时段对西瓜四倍体诱导的影响及其倍性鉴定

以3个不同熟性两瓜为诱导材料,幼苗两叶一心时摘心后,用秋水仙素滴苗,以不同温度及不同时间段进行处理研究对四倍体的诱导.结果发现,西瓜幼苗的成活率和诱导率因不同品种、处理温度和处理时间而异.幼苗摘心后处理的温度越低,成活率越高,随之诱导率也越高,在29℃时幼苗的成活率和诱导率高于32℃和35℃.不同时间处理对不同基因型的成活率和诱导率虽不同,但均是在每天的17:00-18:00处理时最高.四倍体西瓜的叶片和花器官比二倍体的大,颜色较深.叶片的保卫细胞的长度和叶绿体数目随倍性的增加而增加.采用改良品红压片法能够清楚地鉴定花粉母细胞染色体数目,是可靠的鉴定方法.     

酵母菌的倍性及其鉴定方法

[目的]鉴别单、二倍体酵母菌株。[方法]分析了2种倍性酵母菌的特征及其联系,对酵母菌体进行美兰染色、产孢后子囊孢子的番红染色以及低温特殊处理试验,对单、二倍体酵母进行区分与鉴定。[结果]酵母菌株经美兰染色后能清晰观察到两者的活性及其菌体大小的差异;产孢后的二倍体菌株,子囊孢子被染成红色,菌体为蓝色,而单倍体菌株只有蓝色的菌体;低温特别处理后,在长有单、二倍体混合菌株的平板上,二倍体的菌落明显大于单倍体。[结论]单、二倍体酵母菌在形态上、遗传上和生理上存在很大差异,可以借助一些辅助试验很好地把它们区分开来。     

不同染色体倍性小麦分蘖期氮同位素组成的研究

[目的]研究不同染色体倍性小麦分蘖期氮同位素组成（δ15N）的变化。[方法]以不同染色体倍性小麦及不同抗旱性小麦为试验材料,采用EA-Delta pluse质谱仪测定并研究了小麦叶片、根系和整株氮含量、δ15N的变化。[结果]随着染色体倍性的增加（2n→6n）,小麦整株δ15N呈增加趋势,整株δ15N更能代表小麦生长过程中氮的分馏情况;现代小麦整株δ15N与其收获性状有关,即高产小麦的δ15N较低。[结论]该研究可为选择高氮利用效率小麦提供理论依据。     

利用流式细胞术鉴定杏及其部分近缘植物的倍性

果树多倍体生长旺盛、果实大且无籽或少籽、产量高、适应性和抗性强,多倍体砧木能够诱导嫁接植株矮化、提高植株对干旱等非生物胁迫的耐受能力。基于多倍体的诸多优点,发掘、培育与利用多倍体种质资源是果树育种的重要内容。利用流式细胞术鉴定植物倍性技术简单、效率高、结果准确。为了鉴定150 份杏、7份李和9份李杏砧木种质资源的倍性,发掘多倍体资源,采集其幼嫩叶片,利用Partec试剂盒制备细胞核悬液及染色,通过流式细胞仪检测DNA相对含量。以二倍体杏品种''巴斗''为外标,其他种质资源DNA相对含量值与其比较,确定各自倍性水平,若与二倍体''巴斗''DNA相对含量比值近似1,为二倍体;比值近似2,为四倍体;比值近似3,为六倍体。结果表明：150份杏均为二倍体;7份李资源中,2份欧洲李和1份黑刺李为六倍体,4份杏李为二倍体;9份李杏砧木资源中二倍体5份,四倍体1份,六倍体3份。     

橡胶草染色体制片技术研究

以橡胶草根尖和嫩叶为材料,对其染色体制片技术的取样时间、预处理试剂、解离方法及解离时间进行比较研究。结果表明:橡胶草根尖和嫩叶取样最佳时间均为上午8:00~10:00;2 mmol/L 8-羟基喹啉溶液室温预处理4 h效果最好;根尖和嫩叶用1 mol/L盐酸于60℃下分别酸解10和12 min效果良好。     

荧光原位杂交技术的研究进展及其在染色体识别应用中的展望

荧光原位杂交技术是一门新兴的分子细胞遗传学技术,主要介绍了该技术的产生过程、基本原理、探针类型和标记方法以及发展历史,并对该技术在染色体识别中的应用作出展望。