内皮抑素与肿瘤的抗血管生成治疗(文献综述)

肿瘤的生长转移与肿瘤血管生成密切相关,抗血管生成是治疗肿瘤的新策略.内皮抑索是一种新发现的特异的内皮细胞增殖的抑制剂,具有很强的抑制血管生成的作用,被认为是最具有前途的血管生成抑制剂.本文对其结构、生物活性及应用前景作一概述.     

血管内皮生长因子可溶性受体flt—1n3对裸鼠人膀胱癌生长的影响

目的；研究血管内皮生长因子（VEGF）受体flt-1脑外区基因抗肿瘤新生血管生成的作用。方法：采用脂质体转染技术将含有flt-1胞外区前三个IgG样结构区域的真核表达质粒pcDNA3.1/KDPn7转入人膀胱癌EJ细胞，用G418筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞克隆，经固相结合实验筛先得到表达与VEGF特异结合的目的蛋白的细胞克隆，阳性细胞克隆进行PCR和RT－PCR鉴定。对裸鼠人膀胱癌组织切片进行免疫组化染色，定量分析微血管密度。结果：PCR和RT－PCR结果显示重组质粒转入EJ细胞及在转录水平表达；免疫组化的微血管密度实验组明显低于阴性对照组。结论：阻断VEGF／flt-1信号传导途径能够抑制肿瘤新生血管的形成，延缓肿瘤的生长速度。     

内皮抑素与肿瘤的抗血管生成治疗

肿瘤的生长转移与肿瘤血管生成密切相关 ,抗血管生成是治疗肿瘤的新策略。内皮抑素是一种新发现的特异的内皮细胞增殖的抑制剂 ,具有很强的抑制血管生成的作用 ,被认为是最具有前途的血管生成抑制剂。本文对其结构、生物活性及应用前景作一概述     

新型血管生成抑制人内皮细胞抑制素-血管内皮细胞生长抑制因子151治疗胃癌的实验研究

目的研究重组腺病毒表达的人内皮细胞抑制素-血管内皮细胞生长抑制因子151(hENDO-VEGI151)融合蛋白对胃癌的抑制作用.方法构建携带hENDO-VEGI151融合基因的重组腺病毒载体,脂质体介导法包装重组腺病毒Ad IL-3/hENDO-VEGI151.体外检测融合基因的表达及融合蛋白的生物学活性.应用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型及荷人胃癌裸鼠模型,进一步观察融合蛋白对活体血管生成的影响和融合基因治疗活体胃癌的疗效.结果用TCID50法测定携带融合基因的重组腺病毒滴度为4.2×1011TCID50/ml;用聚合酶链反应(PCR)、逆转录(RT)-PCR和免疫组织化学方法证实融合基因可被转导入SGC-7901细胞内并稳定高效地转录和表达;Western blot显示融合蛋白可被分泌到胞外发挥作用;融合蛋白可强烈抑制ECV-304细胞生长及鸡胚绒毛尿囊膜新生血管形成.Ad IL-3/hENDO-VEGI151治疗可强烈抑制裸鼠体内种植瘤生长,明显下调肿瘤微血管密度,促进胃癌细胞凋亡.结论 hENDO-VEGI151是一条新型强效的肿瘤血管生成抑制基因,其表达产物可能通过作用于肿瘤新生血管形成的不同环节强烈抑制新血管生成和肿瘤生长,值得进一步研究.     

血管内皮细胞生长因子受体在甲状腺髓样癌中的高表达

目的:评估血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1)和VEGFR-2在甲状腺髓样癌(medullary thyroidcarcinoma,MTC)组织的表达,探讨其与MTC病人临床数据间的关系。方法:用免疫组化技术评估24例MTC病人的石蜡包埋组织VEGFR-1和VEGFR-2的表达,回顾收集病人的临床数据。结果:24例病人平均年龄(44.9±14.1)岁,8例(33.3%)为遗传性,其中6例为多发性内分泌肿瘤(multiple endocrine neoplasia,MEN)-2A,2例为MEN-2B。VEG-FR-1免疫组化染色阳性率为91.7%(22/24),VEGFR-2为87.5%(21/24)。年龄与VEGFR-2染色强度为正相关(r=0.609,P=0.002)。VEGFR-2与肿瘤分期(肿瘤淋巴结转移)、肿瘤大小、病人血清CEA及降钙素在手术前后的相对降幅间没有关联。然而,VEGFR-1与肿瘤分期呈负相关(r=-0.660,P=0.0005),而与MTC病人血清CEA及降钙素在手术前后的相对降幅之间均呈正相关(CEA:r=0.869,降钙素:r=0.849,P0.05)。结论:VEGFR-1和VEGFR-2在MTC病人中高表达,且可能参与肿瘤的进展。     

内皮抑素与肿瘤的抗血管生成治疗

肿瘤的生长转移与肿瘤血管生成密切相关，抗血管生成是治疗肿瘤的新策略。内皮抑素是一种新发现的特异的内皮细胞增殖的抑制剂，具有很强的抑制血管生成的作用，被认为是最具有前途的血管生成抑制剂。本文对其结构、生物活性及应用前景作一概述。     

VEGF、肿瘤血管再生及抗肿瘤血管生成治疗

1肿瘤血管的再生 所谓血管的再生(angigenesis)是指在业已存在的血管床基础上，内皮细胞分化生成新的血管组织，籍以向远离现存血管系统的新生组织提供血液供应。它不同于胚胎期的血管生成(vasculogenesis)，后者由干细胞分化形成血管系统。血管再生现象在生命的胚胎发育期广泛存在，对新生命的生存发育     

可溶性血管内皮生长因子受体1在IgA肾病中的临床意义

目的 探讨可溶性血管内皮生长因子受体1 （soluble fms-like tyrosine kinase-1,sFlt-1）在IgA肾病中表达变化的临床意义与病理类型之间的关系.方法 选取2005年1月至2013年3月期间内蒙古自治区医院经肾活检确诊为IgA肾病的80例患者作为病例组,选30名健康献血者作为对照组,测定两组所有人员血浆中sFlt-1表达水平.将80例病例组患者按IgA肾病病理表现分为新月体形成组（36例）及硬化肾小球组（20例）,另有24例IgA肾病患者同时存在新月体形成及硬化肾小球,对比sFlt-1在新月体形成组和硬化肾小球组的相关性.结果 病例组血浆sFlt-1明显高于对照组（P＜0.01）;病例组中新月体形成组的患者血浆中sFlt-1含量明显升高,硬化肾小球组患者血浆中sFlt-1含量相对偏低,sFlt-1与新月体比例呈正相关,而与硬化肾小球比例不相关.结论 检测sFlt-1在IgA肾病中有重要的临床意义,sFlt-1与IgA肾病病理类型有相关性.     

血管内皮细胞生长因子在骨肉瘤中的研究进展

骨肉瘤是一种常见的恶性骨肿瘤，好发于血运丰富的长骨干骺端，其血行转移的发生率高且早，进展迅速，早期诊断及治疗较为困难。与正常血管一样，肿瘤血管的生成也受到多种血管生成因子等的调控，其中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)最为重要。人类的许多恶性肿瘤细胞，包括骨肉瘤都发现有高水平的VEGF。     

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目的　了解甲状腺滤泡状癌细胞中导入内皮抑素 (Endostatin ,ES)基因对体内外生长的影响 ,并探讨其作用机制。方法　用逆转录病毒载体将ES基因导入FTC133 细胞中 ,采用RT PCR和ELISA检测导入基因在肿瘤细胞的表达。观察肿瘤在裸鼠模型中的生长状况。用抗CD31抗体对肿瘤切片进行免疫组织化学染色检测微血管 ,计算微血管密度 (microvesseldensity ,MVD)。检测血清中ES和VEGF浓度。 结果　顺利将ES基因导入到FTC13 3 中得到稳定表达ES的肿瘤细胞系FTC133 rvEndo。后者在体外增值速度与母系相似。而在裸鼠模型中 ,其肿瘤生长速度明显慢于母系。种植 33天后 ,FTC133 组肿瘤大小为 ( 30 0 2± 44 1)mm3,FTC13 3 rvEndo组为 ( 5 5 7± 15 2 )mm3,两组间差异有显著性 (P =0 0 0 0 2 )。免疫组化染色表明FTC133 rvEndo肿瘤中血管内皮细胞数明显减少 ,MVD为 34 86± 10 6 8;而对照组为 6 4 71± 17 0 5 ,差异有显著性 (P =0 0 0 2 0 )。带瘤鼠血清人VEGF浓度FTC133 rvEndo组为 ( 8 99± 0 6 5 )ng/L ,明显低于对照组 ( 2 9 34± 5 5 5 )ng/L( P =0 0 0 98)。结论　利用逆转录病毒载体可将ES基因转入甲状腺滤泡状癌细胞系中 ,该基因的导入通过抑制血管生成使肿瘤体内生长速度减慢。其机制可能与抑制肿瘤细胞     

滤泡状甲状腺肿瘤微血管密度检测及其临床意义的探讨

目的检测甲状腺滤泡状肿瘤微血管密度 (microvesseldensity ,MVD) ,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化染色检测 4 0例甲状腺滤泡状腺癌 (follicularthyroidcarcinoma ,FTC)和 2 0例滤泡状腺瘤 (follicularadenoma,FA) ,计算MVD ,分析临床资料 ,进行t检验和 χ2 检验。结果FTC组MVD为 (2 2 8± 91)个 ,FA组MVD为 (15 6± 73)个。两组间差异有显著意义 (t=2 76 3,P <0 0 5 )。FTC组中 ,MVD与肿瘤长径和有无甲状腺外浸润有关 ,而与年龄、性别、颈淋巴结转移和预后无关。结论FTC的MVD高于FA。FTC瘤体的MVD与肿瘤长径和有无甲状腺外浸润有关。     

甲状腺癌的分子生物学研究进展

甲状腺癌是内分泌系统最常见的恶性肿瘤,多发于女性患者。不同病理类型的甲状腺癌,其生物学行为不同,且发病比较隐匿,故目前对甲状腺癌的早期诊断仍比较困难。近年来随着分子生物学的发展,对甲状腺癌的肿瘤标志物、癌基因及分子治疗研究较多。本文将对这三个方面的研究进展作一综述。     

超声鉴别诊断滤泡型甲状腺癌与甲状腺良性结节

目的探讨超声鉴别诊断滤泡型甲状腺癌和甲状腺良性结节的价值。方法收集19例滤泡型甲状腺癌(22个结节)、62例甲状腺良性病变(81个结节)包括腺瘤32例(35个结节),结节性甲状腺肿30例(46个结节),均经超声检查,并经手术和病理证实;比较甲状腺良、恶性结节的超声表现。结果滤泡型甲状腺癌与甲状腺良性结节形态、边界、回声水平、钙化、纵横比及弹性评分相似,结节周边晕征、结节内部囊变、结节晕环和结节内部血流分布特点差异有统计学意义(P均0.05)。在超声弹性成像中,滤泡型癌结节硬度自中央区向周边区增大,表现为结节周边区宽而不均匀的蓝色区带。结论尽管滤泡型甲状腺癌与良性结节的超声表现有一定重叠,但超声仍有助于鉴别诊断甲状腺良、恶性结节。     

肾透明细胞癌患者血清中内皮抑素含量检测及其临床意义

目的 检测肾透明细胞癌患者术前血清中内皮抑素含量,分析其与肿瘤分级、分期的关系.方法 2004年3月至2008年10月接受手术治疗的肾透明细胞癌患者138例,其中男性102例,女性36例,平均年龄63.2岁;T1期73例,T2期39例,T3期20例,T4期6例.40例性别、年龄相应的健康人作为对照组,应用双抗体夹心ELISA法检测其术前血清中内皮抑素水平.结果 患者术前血清中内皮抑素含量均值为93.1 μg/L,与健康对照组(78.9 μg/L)差异无统计学意义(P>0.05).T1期患者术前血清内皮抑素水平为80.4 μg/L,低于T2期(107.5 μg/L,P<0.01)、T3期(102.7 μg/L,P<0.05)及T4期(120.7 μg/L,P<0.01),而后三组之间差异无统计学意义(P>0.05).T1期患者与对照组无明显差异(P>0.05).转移组患者术前血清内皮抑素含量为118.4 μg/L,高于未转移组的89.5 μg/L(P<0.05);单纯淋巴结转移组及远处转移组患者之间差异无统计学意义.G3-4级患者血清内皮抑素水平为111.8 μg/L,高于G1级(80.4 μg/L)和G2级(86.2 μg/L)(P<0.01).结论 肾透明细胞癌患者术前血清内皮抑素含量与肿瘤的高分级、高分期相关,可能有助于患者预后及肿瘤分化程度判断.     

转染人Endostatin基因对胰腺癌SW1990细胞增殖、凋亡及血管内皮生长因子表达的影响

目的观察转染人Endostatin（hEndostatin）基因对胰腺癌细胞株SW1990增殖、凋亡及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法携带hEndostatin基因的复制缺陷型重组腺病毒载体体外转染SW1990细胞，MTT法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡，实时荧光定量PCR和ELISA分析检测hEndostatin和VEGF的表达。建立裸鼠胰腺癌模型，随机分为3组（n=8），瘤体内分别注射磷酸盐缓冲液（PBS组）、报告基因LacZ重组腺病毒（Ad—LacZ组）、hEndostatin重组腺病毒（Ad—bEnd组）100山，隔日1次，共4次。4周后免疫组织化学染色检测肿瘤组织中hEn．dostatin、VEGF、增殖性细胞核抗原（PCNA）的表达，TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡。结果体外转染hEndostatin基因不影响SW1990细胞的增殖和凋亡（P〉0．05），但下调VEGF的表达（P〈0．01），下调作用第5天最大，在mRNA和蛋白水平的抑制率分别为84．67％和81．41％。体内转染4周后，Ad．bend组VEGF、PCNA阳性表达率分别为（36．3±7．1）％、（38．2±3．9）％，显著低于Ad．LacZ组的（81．2±6．6）％、（93．2±4．9）％和PBS组的（78．4±6．2）％、（90．1±5．7）％（P〈0．01）；肿瘤细胞凋亡率为（31．2±5．4）％，显著高于Ad—LacZ组的（9．4±4．9）％和PBS组的（8．5±3．7）％（P〈0．01）。结论hEndostatin基因转染抑制SW1990细胞的体内增殖并促进凋亡；下调SW1990细胞内源性VEGF的表达可能是抗肿瘤的作用机制之一。     

甲状腺癌相关基因1 mRNA和蛋白在甲状腺乳头状癌组织的表达及其相关性

目的 探讨甲状腺癌相关基因1(TC-1) mRNA和蛋白表达及其相关性.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)、Western blot和免疫组织化学[链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法]检测50例甲状腺乳头状癌(PTC)及其癌旁组织(NCE)中TC-1基因mRNA及其蛋白的表达水平,并与临床病理特征进行相关性分析.结果 FQ-PCR结果显示,在PTC中TC-1 mRNA的表达明显高于相应的癌旁组织,且与PTC的TNM分期、病理分级及淋巴结转移明显相关(P＜0.05).免疫组织化学结果显示TC-1阳性表达主要位于细胞质中,并与相应的癌旁组织的表达比较差异有统计学意义(P＜0.05).并且与PTC的TNM分期、病理分级及淋巴结转移明显相关(P＜0.05).Western blot结果显示,TC-1蛋白在PTC的相对表达量为(2 546±195)明显高于相应的癌旁组织(992±75,P＜0.05).TC-1蛋白表达与患者的TNM分期、病理分级及淋巴结转移明显相关(P＜0.05).TC-1基因mRNA的表达与蛋白的表达明显相关性(P＜0.05).结论 TC-1基因的表达在PTC的发生、发展中起重要作用.     

人内皮抑素基因转染对Hep3B肝癌细胞裸鼠移植瘤的抑制作用

目的研究腺相关病毒转染人内皮抑素基因对肝癌细胞体内致瘤作用的影响。方法用含人内皮抑素基因的重组腺相关病毒(rAAV2/ES)体外转染人肝癌细胞Hep3B,以空病毒(AAV2)转染作阴性对照,RT-PCR方法检测ES在mRNA水平的表达。将转染细胞接种裸鼠,通过ELISA方法检测裸鼠血液中人内皮抑素的的浓度。观察内皮抑素对移植瘤的生长抑制作用。结果RT-PCR结果显示腺相关病毒可介导内皮抑素基因高效转染Hep3B细胞;rAAV2/ES转染细胞接种裸鼠后内皮抑素的表达随时间逐渐升高,在第4周达到最高浓度(115·79±8·70)ng/ml;rAAV2/ES转染组8只裸鼠中6只成瘤,成瘤时间为(26·80±6·42)d,明显长于对照组(17·17±4·17)d(P<0·05);对裸鼠移植瘤检测显示瘤体重量和瘤内微血管密度(MVD)分别为(0·36±0·22)g、(3·50±1·05)个/视野,明显低于对照组(1·54±0·48)g、(12·67±1·97)个/视野(P<0·01)。结论腺相关病毒介导人内皮抑素基因转染可有效抑制Hep3B细胞在裸鼠体内的生长。     

逆转录病毒介导单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因对胰腺癌细胞的杀伤作用

目的：观察单纯疱疹病毒－胸苷激酶（HSV－tk)／丙氧鸟苷（GCV）基因治疗系统在体内外对人胰腺癌细胞的杀伤效应。方法：构建含HSV－tk基因的重组逆转录病毒载体pDOR-tk-neo,经病毒包装细胞PA317产生重组逆转录病毒,后者将HSV－tk基因转入人胰腺癌细胞系PC－2细胞内,筛选出稳定表达HSV－tk的细胞克隆PC－2／tk。测定PC－2/tk细胞在体外对GCV的敏感性及其旁观杀伤效应PC－2／tk细胞在裸鼠皮下成瘤,观察GCV的治疗作用。结果：GCV对PC－2/tk细胞有明显的杀伤作用,且其作用呈现剂量和时间依赖性特点以及旁观杀伤效应,对母本细胞则无明显毒性。裸鼠腹腔注射GCV后对移植瘤有明显治疗作用。结论：表达HSV－tk的人胰腺癌细胞在体内外均可被GCV有效杀伤。     

逆转录病毒介导HyTK基因治疗膀胱癌的实验研究

目的 了解逆洋病毒介导的潮霉素磷酸转移酶和ＨＳＶ－ＴＫ的融合基因（ＨｙＴＫ）的基因转移移联合更昔洛韦（ＧＣＶ）对膀胱癌细胞的杀伤作用。方法 构建重组质粒ＰＬ（ＨｙＴＫ）ＳＮ,应用非脂质体基因转导系统ＦｕＧＥＮＥ＾ＴＭ６及“乒乓效应”（ｐｉｎｇ－ｐｏｎｇ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ）,获 滴度重组病毒并转染膀胱朱ＥＪ／ＨｙＴＫ的杀伤作用。结果 本文实验逆转录病毒的效率为３５％左右,Ｓｏｕｔｈｅｍ Ｂｌｏｔ、