大连湾赤潮生物──赤潮异弯藻

于１９８５，１９８６和１９８７三年的夏季在辽宁大连湾采集赤潮生物──赤潮异弯藻，以相差显微镜和扫描电镜进行了形态观察和分类研究；同时述及其分类沿革及至今仍存在的争议，结合本种在大连湾的生态特点简要地综述了其在世界上的分布，生理宗，昼夜垂直移动，营养摄取以及细胞分裂周期和种群繁殖等。结果表明，在温带近海夏，秋季潮异弯藻的生长率最高，冬季休眠于海底；温度是限制其复苏的主要因子。本种昼夜都能摄取营养，生     

大连湾赤潮异弯藻赤潮的多元分析

赤潮的发生是海水化学与物理因子、海水动力、地理环境、气象条件、历史因素以及浮游生物生态适应性等综合作用的结果,因此,诱发赤潮的因素有很多,其规律也十分复杂·多年来人们从统计学的角度尝试赤潮的预测预报,并做了大量的工作[1~10].赤潮异弯藻(Heterosigma akashiwo)是大连湾海域常见的赤潮生物,郭玉洁[1]曾对大连湾赤潮异弯藻分类地位及生物学作过研究.     

应用免疫荧光技术对三种赤潮藻的研究

为探索和建立免疫学结合荧光技术对赤潮生物的定性、定量检测,制备了3种粒径不同的赤潮藻——赤潮异弯藻(Heterosigma akashiwo)、共生甲藻(Symbiodinium sp)、链状亚历山大藻(Alexandrium catenella)的多克隆抗体,并采用封闭吸附处理以提高抗体的特异性;采用间接酶联免疫法检测了抗体的效价;结果表明未经吸附处理的赤潮异弯藻、共生甲藻的效价分别为1:41 000,1:18 000以上,显示是高亲合力的抗体;链状亚历山大藻抗体的效价达到1:3 500,相比另两种藻的效价较低;吸附处理后的3种多克隆抗体的特异性明显提高,而效价有所下降。3种多克隆抗体与各自藻细胞均有很强的结合力,赤潮异弯藻和共生甲藻的荧光信号均匀分布于细胞表面,链状亚历山大藻细胞的荧光信号在细胞表面分布不均匀,主要集中在腹部横沟内。制备的多克隆抗体只与自身藻细胞结合,与另外2种藻细胞无交叉反应。链状亚历山大藻抗体只与自身藻细胞结合,与塔马亚历山大藻无交叉反应,可作为同属内不同种的鉴别。结合了免疫学和荧光技术,具有特异、灵敏、直观和简便的优点,并且费用低,对于开拓赤潮准确定性、定量检测方法和技术具有重要价值。     

东海原甲藻抗体的制备及酶联免疫检测方法的建立

通过制备针对东海原甲藻细胞破碎物的多克隆和单克隆抗体,建立了基于双抗体酶联免疫分析定量检测东海原甲藻(Prorocentrum donghaiense)的检测方法。利用该方法对单一藻种、混合藻种和现场样品中的东海原甲藻进行检测的结果与镜检结果相一致,最低检测限度为1×103 cells/m L。该方法的建立对中国近海赤潮暴发的实时监控具有重要意义。     

有害赤潮藻赤潮异弯藻Heterosigma akashiwo研究进展

浮游植物不仅在食物链中充当贡献者,也在生物地球化学循环过程中扮演着重要角色,然而一些种类在某些条件下暴发性增殖或聚集,形成有害藻华,对人类健康和生态系统构成威胁。赤潮异弯藻是形成有害藻华的典型物种,其藻华发生时会造成养殖鱼类大面积死亡,给水产养殖业造成巨大损失。近年来,随着全球气候变暖、水体富营养化程度日趋严重,有害藻华发生的规模和频次总体呈增加趋势,且相关研究表明气候变暖和二氧化碳水平升高均能刺激赤潮异弯藻的生长。本文主要从赤潮异弯藻物种鉴定、基础生物学研究、生态学研究等几个方面综述了该物种的研究进展,并对其未来研究方向进行了相关展望,以期为赤潮异弯藻的藻华形成机制研究、藻华防治等工作提供参考。     

赤潮异弯藻和海洋原甲藻LSU Rdna扩增及序列分析

利用引物D1R和D2C扩增并测定了赤潮异弯藻(Heterosigma akashiwo Hada)和海洋原甲藻(Prorocentrum micans Ehrenberg)的LSU rDNA D1与D2序列,并与GenBank中相关序列进行比较分析.结果表明:在种内水平,所测的H.akashiwo 6个株系之间共有5个变异位点,序列H.k与H.k-2,H.k-4均存在碱基替换;原甲藻属不同种内各株系之间的遗传距离为0.002～0.023之间,所测序列P.mi与P.micans其他株系之间均存在碱基替换.在种间水平上,原甲藻属不同种之间的遗传距离在0.045～0.139之间,大于种内遗传距离,每个种都具有特定的保守序列.根据序列间的遗传变异,可设计特异性的探针对不同株系和物种进行检测和计数.     

赤潮异弯藻Heterosigma akashiwo的生长特性

采用多因子实验设计 ,经三维ANOVA统计分析 (TukeyTest) ,研究了温度、盐度和光照强度对鱼毒类赤潮藻———赤潮异弯藻Heterosigmaakashiwo生长的影响。结果表明 ,在实验范围温度 (1 2℃、1 9℃、2 5℃、3 2℃ ) ,盐度 (1 0、1 8、2 5、3 0、3 5 )和光照强度 0 0 2× 1 0 1 6、0 0 8× 1 0 1 6、0 3× 1 0 1 6、1 6× 1 0 1 6quanta/(cm2 ·s)内 ,各温度和光照强度、以及低盐度 (1 0 ,1 8)和高盐度 (3 5 )之间 ,藻生长率有极显著差异 (P <0 0 0 1 )。光照强度和温度、盐度和温度以及这三个因子之间存在极显著的相互作用 (P <0 0 0 1 ) ,而光照强度和盐度之间无显著的相互作用 (P =0 0 74>0 0 5 ) ,藻生长的最适温度、光照、盐度条件分别为 2 5℃、1 6× 1 0 1 6quanta/(cm2 ·s)、1 0— 3 5 ,这时生长率为 0 .85d- 1 。     

季铵盐类化合物灭杀赤潮异弯藻的实验研究

通过对几种不同结构的季铵盐类化合物对赤潮异弯藻的去除效率进行比较，发现具有一定结构的季铵盐类化合物对该种藻具有较强的灭杀去除效果；在相同用量（质量）下，含有一个长碳链的季铵盐化合物的灭杀效果明显高于含有双长链的季铵盐化合物。同时，通过测定十六烷基三甲基溴化铵作用下的赤潮异弯藻的叶绿素含量变化和光合作用强度，并借用透射电镜研究了受肋迫藻细胞的亚显微结构，从而分析了季铵盐类化合物灭杀赤潮生物的原理：季铵盐对赤潮异弯藻的“毒性“主要是由于其强表面活性，易于吸附在藻细胞的磷脂双分子膜结构的表面，从而引起膜结构的破坏和功能的丧失，进而导致细胞死亡。     

盐度和光照强度对赤潮异弯藻增长的效应

采用一次性培养的方法,研究了盐度和光照强度对赤潮异弯藻增长的效应。结果表明:赤潮异弯藻在3种光照和7个盐度梯度下均可生长。盐度对赤潮异弯藻的生长有极显著的影响(P0.01),光照强度对赤潮异弯藻的生长影响亦显著(P0.05),盐度和光照强度的交互作用无显著影响(P0.05)。不论在哪种光照下,低盐度10、15组赤潮异弯藻虽然能生长,但生长速率和最大细胞数量值均较低,随着盐度的提高,藻的生长速率和最大细胞数量值增大,但盐度增至30以后,即30~40试验组的生长速率和最大细胞数量值之间的差异不明显。而不论在哪个盐度条件下,赤潮异弯藻在3种光照强度下,均以6000lx时的藻细胞密度值最高,生长情况最好。     

几种大型海藻对赤潮异弯藻生长抑制效应的初步研究

利用共存培养系统研究了大型海藻缘管浒苔、刚毛藻、石花菜、鸭毛藻、扇形拟伊藻、蜈蚣藻、海黍子、脆江蓠对赤潮异弯藻(Heterosigma akashiwo)生长的抑制效应并和孔石莼的作用进行比较。实验指出：孔石莼和缘管浒苔对赤潮异弯藻的抑制效应最强,石花菜次之;扇形拟伊藻、蜈蚣藻、刚毛藻、脆江蓠、海黍子虽表现出抑制作用但较差;鸭毛藻的抑制效应最弱。     

不同起始浓度对塔玛亚历山大藻和赤潮异弯藻种群竞争的影响

初步分析了起始浓度对塔玛亚历山大藻 (AlexandriumtamarenseBalech)和赤潮异弯藻 (HeterosigmaakashiwoHa da)种群增长的影响。在单种培养的情况下 ,A .tamarense与H .akashiwo的生长曲线可用逻辑斯谛增长模型拟合。不同起始浓度 ( 0 .2× 10 4,0 .5× 10 4,0 .8× 10 4cell/mL)对A .tamarense环境容纳量 (K)有明显的影响 ,随起始浓度的增加K有减小的趋势。H .akashiwo种群瞬时增长率 (r)随起始浓度增加而增加。按不同接种比例进行混合培养 ,不同起始浓度对 2种藻竞争的结果具有明显影响。当接种比例为A .tamarense∶H .akashiwo(A∶H) =1∶4时 ,H .akashiwo在竞争中占优势 ,而当A∶H =1∶1及A∶H =4∶1时 ,A .tamarense在竞争中占优势。竞争结果不仅受营养盐限制 ,克生物质对竞争结果亦具有重要影响。     

东海赤潮异弯藻Heterosigma akashiwo的形态特征及其分子序列分析

将采集自东海南麂列岛海域水样进行分离、纯化,从中得到1株针胞藻,将其初步鉴定为赤潮异弯藻Heterosigma akashiwo(以下称东海藻株),并使用光学和荧光显微镜对其形态特征进行了详尽描述,及通过rDNA ITS序列测定、系统发育进化树构建和Jukes-Cantor距离矩阵分析,研究了其分子进化关系.结果表明:...     

温度对赤潮异弯藻生长速率及细胞体积和生化组成影响的研究

在实验室条件下,研究了温度对赤潮异弯藻生长速率、细胞体积和生化组成的影响。结果表明,赤潮异弯藻在10~30℃之间均能正常生长,25℃时生长速率最高,25℃为其最适生长温度;赤潮异弯藻的细胞体积随着温度的升高大致呈逐渐减小的趋势,10℃时细胞体积最大(823.89μm3),25℃时细胞体积最小(387.98μm3)。进一步分析表明,赤潮异弯藻生长速率与细胞体积(对数值)呈显著的负相关关系(P0.05)。在10~25℃之间,赤潮异弯藻单个细胞的碳、氮含量随着温度的升高呈逐渐减少的趋势,其单位体积细胞的碳、氮含量却呈单峰变化(15℃时结果为峰值)现象;叶绿素a含量在单个细胞和单位体积细胞两个层次上随温度的变化趋势一致,即其在整个温度区间内随着温度的升高均呈逐渐增加的趋势。赤潮异弯藻细胞C∶Chl a和N∶Chl a随着温度的升高呈先减小后增加的趋势,均在10℃时最大,在25℃时最小。     

The effect of UV-B radiation enhancement on the interspecific competition between Skeletonema costatum and Heterosigma akashiwo

1 Introduction R ed tide is a global m arine ecological calam ity.In recentyears, there has been an increase in frequen-cy, affected area and extentof injury of red tide out-breaks in the coastalw aters ofour country.A ccordingto China M arine D isaster B ulletin issued by the StateO ceanic A dm inistration of C hina, harm ful red tideshad occurred up to 119 tim es in 2003, w hich w as 40tim es m ore than thatin 2002. O w ing to the w orsenedcultural environm ent and increased nutrient en…     

三种赤潮藻多克隆抗体制备及特异性分析

Polyclonal antibodies against three red tide algae with different size, Heterosigma akashiwo, Gymnodinium sp and Alexandrium catenella were raised in this study. Block affinity treatment was done to enhance the specificity of the antibodies. The titer of three polyclonal antibodies was determined by indirect enzyme-linked immunosorbent assay, and the specificity against polyclonal antibody was determined by indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assy(icELISA). The result showed that Heterosigma akashiwo and Gymnodinium sp antibodies without block treatment got titer higher than 1:32000 and 1:10000, respectively, an indicating of high affinity antibodies. The titer of Alexandrium catenella antibody reached 1:2500, relatively lower than the previous two. The specificity of three polyclonal antibodies after affinity treatment was raised remarkably. However, the titer declined. All the polyclonal antibodies showed a high affinity with their own cells. Polyclonal antibodies were not remarkable cross reacted with other algae in the icELISA, The antibody of Alexandrium catenella reacted to its own cells, no cross activity was found with Alexandrium tamarense, which will be applicable in distinguishing species within the genus. The immunology technique was specific, sensitive and simple with low expend. This was provide a valuable tool for further experiment and had signafication to qualitative and quantitative monitoring of red tide algae.     

多环芳烃对3种赤潮微藻类胡萝卜素含量的影响及其对UV-B辐射的响应

评价UV-B辐射增强对海洋生态系统的影响,通过实验生态学的方法,研究3种多环芳烃——菲、芘和蒽对3种赤潮微藻——赤潮异弯藻、塔玛亚历山大藻和中肋骨条藻类胡萝卜素含量的影响。结果表明:低浓度的菲、芘和蒽处理使3种赤潮微藻的类胡萝卜素含量有所提高,而高浓度处理则降低藻细胞内的类胡萝卜素含量。菲、芘和蒽处理对赤潮异弯藻类胡萝卜素含量的96 h半抑制剂量分别为0.098,0.124和0.139 mg.L-1,对中肋骨条藻的96 h半抑制剂量分别为0.120,0.147和0.155 mg.L-1,对塔玛亚历山大藻的96 h半抑制剂量分别为0.128,0.153和0.162 mg.L-1。在菲、芘和蒽处理的同时,附加辐射剂量为0.3 J.m-2的UV-B辐射处理,3种赤潮微藻的类胡萝卜素含量显著降低。     

Expression, purification and polyclonal antibody generation of p23, an Hsp90 cochaperone, in the amphioxus Branchiostoma belcheri

1Introduction p23, the 23-kDa protein originally identified asa component of the complex of heat shock protein 90(Hsp90) with the progesterone receptor (Johnson etal., 1994), is a ubiquitous and highly conservedprotein from yeast to humans (Garcia -Ranea …