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昆虫细胞的大规模培养 总被引:3,自引:0,他引:3
昆虫细胞的大规模培养李文青,肖成祖(北京军事医学科学院生物工程研究所,)昆虫细胞培养的鼻祖是德国人forhardBendict(1878—1958)[1],他在1915年发表了有关昆虫细胞培养的第一篇文章[2]。早期,昆虫细胞的培养是为了进行昆虫的生... 相似文献
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用微载体技术培养家蚕BmN细胞的实验研究 总被引:2,自引:0,他引:2
观察了家蚕BmN(从silkworm Bombyxmori获得的细胞系)细胞在微载体cytodex3上的贴壁分布,提出其分布符合Poisson规律.并由此估计了不同细胞接种浓度时裸球的百分比.与实际观测结果基本符合;研究了不同接种浓度与微载体浓度时细胞的生长情况,家蚕BmN细胞在Cytodex 3上生长的临界接种数为一珠粒6.4个细胞。当微载体浓度为3 g/L时,最低的接种浓度为1.O×105/ml。 相似文献
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目前,尿激酶原(Pro-UK)作为~种新型溶栓剂,越来越多的受到重视。北京大学承担国家“863”课题“利用昆虫一杆状病毒系统表达Pro一UK”获得成功[川。表达P]-UK酶活为8O0~1600IU/rnl,本研究将Sfg细胞用4L转瓶和SL生物反应器培养,并用重组Pro-UK的病毒感染,以进行尿激酶原的表达。1材料与方法工.且材料1.1.ISfg细胞和表达Pro-UK的重组病毒北京大学胡美浩教授提供。1.1.24L转瓶机美国BellcoGlass公司。1.1.3SL生物反应器美国NBS公司。1.1.4尿激酶检测试剂中国药品生物制品检定所。1.2方法1.2.1细胞在4… 相似文献
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昆虫细胞培养已经在小儿灰髓炎、乙肝表面抗原等研究中得到系统应用,此外,许多高值的治疗性蛋白药物,如tPA、白细胞介素-2、β-干扰素和促红细胞生成素等的研究过程中昆虫细胞及杆状病毒的培养已成为新的生物工程手段。在美国、荷兰等国已成功地得到了外源基因大量表达的药物。在我国也已成功构建了人-α干扰素的昆虫细胞/杆状病毒表达系统。同时昆虫杆状病毒本身可以制备成各种专一性较强的广谱、无公害、无毒性的的农用杀虫剂。但是昆虫细胞及其杆状病毒的大规模培养对 相似文献
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家蚕BmN细胞的微载体培养及HBeAg的高效表达 总被引:1,自引:0,他引:1
选择微载体Cytodex3对家蚕BmN(从SilkwormBombyxmori获得的细胞系)细胞进行高密度培养,并获得成功。观察了家蚕BmN细胞在微载体Cytodex3上的贴壁分布,研究了不同接种浓度与微载体浓度时细胞的生长情况,并筛选出最佳的技术参数。在1000mL滚瓶中用微载体Gytodex3培养家蚕细胞,在合适的培养条件下(细胞接种浓度3.6×105细胞/mL、微载体浓度5g/L),5d后,细胞的终密度达到2.8×106细胞/mL,细胞增长指数为7.9。在细胞指数生长期(传代后48~60h)用载有HBeAg基因的重组病毒(rBmHBe)接种(感染量为0.4PFU/细胞),5d后,培养上清中HBeAg滴度为1∶9.6×104,是用方瓶静止培养的家蚕细胞表达量的3倍。 相似文献
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家蚕BmN铁微载体培养及HBeAg的高效表达 总被引:1,自引:0,他引:1
选择微载体Cytodex3对家蚕BmN(从Siliworm Bombyx mori获得的细胞系)细胞进行高密度培养,并获得成功。观察了家蚕BmN细胞在微载体Cytodex3上的贴壁分布,研究了不同接种浓度与微载体浓度时细胞的生长情况,并筛选出最佳的技术参数。在1000mL滚瓶中用微载体Gytodex3培养家蚕细胞,在合适的培养条件下(细胞接种浓度3.6×10^5细胞/mL、微载体浓度5g/L),5 相似文献
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微载体规模化培养细胞的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
通过实验探索使用微载体进行动物细胞规模化培养,以期达到建立规模化生产病毒疫苗的目的。实验研究了Vero细胞的生长曲线,以及对细胞生长过程中影响细胞生长的葡萄糖、氨含量两个主要因素的变化规律以及微载体浓度与细胞密度的关系。通过实验发现微载体规模化培养细胞易于操作,比传统转瓶培养的细胞密度高,封闭式的培养方式不但减少了污染几率,而且可以充分保证疫苗的质量。最终找出适宜疫苗培养的微载体使用浓度为2.5g/L,适宜的细胞接种浓度为:1~5×105cell/m l。 相似文献
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利用杆状病毒载体和昆虫细胞生产重组蛋白的研究日益增多,本文就杆状病毒的宿主细胞种类、培养条件、大规模培养方法和虫体表达以及昆虫细胞对表达产物的翻译后修饰加工的研究现况进行了概述。 相似文献
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我国昆虫分子生物学研究的回顾和展望 总被引:17,自引:0,他引:17
1953年,Watson和Crick发现了DNA双螺旋结构,奠定了现代分子生物学的基础,从而给生命科学研究带来了一场革命。以研究基因结构和功能为主的分子生物学和以DNA重组技术为核心的生物技术研究,在本世纪取得了飞跃发展,预示了分子生物学和生物技术将成为21世纪的发展方向,是具有远大发展前景的新兴学科和产业。昆虫生理生化研究对生物学基础研究和分子生物学的发展作出过重要贡献,例如基因一酶的学说、类固醇激素作用机理和细胞摄取生物大分子的细胞内吞作用都是首先在昆虫中发现。另外,果蝇的研究也为分子遗传学和分子生物学的发展… 相似文献
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葡萄糖的添加对昆虫细胞Sf21悬浮生长的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
添加葡萄糖对昆虫细胞Sf21(Spodoptera frugiperda)悬浮生长的影响,发现补加糖量在lg/L时·能明显提高细胞生长的速度和最高密度,细胞最高密度由2.5×104/ml增加到4.9×106/ml; 朴加糖量在2g/L时,则有显著的抑制作用,即使增加接种密度.细胞生长的最高密度也只有2.1×106/ml。当采取流加葡萄糖方法来培养细胞时,则其生长的最大密度可提高到5.2×106/ml。 相似文献
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微载体培养动物细胞技术的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
微载体是一种新兴的大规模细胞培养技术,是当前贴壁依赖型细胞大规模培养的主要方法。它具有均相培养兼具平板培养和悬浮培养的优势,培养条件(温度、pH值、二氧化碳浓度等)容易控制,并且培养过程系统化、自动化,不易被污染。本文简要介绍了近几年来常用的几种制备微载体的天然聚合材料,比较了固体微载体和液体微载体各自特点,列举了微载体培养技术的几种生物反应器系统。 相似文献
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简易的杂交瘤细胞载体培养 总被引:1,自引:0,他引:1
通常杂交瘤细胞是悬浮培养在扁瓶或搅拌瓶中,其培养的细胞浓度和抗体的产量都不高。大量生产单克隆抗体则要依靠各种细胞培养器、中空纤维、微胶囊、固定化细胞和连续灌注等系统,但这些系统设计复杂,技术要求高,价格昂贵,效果不一。最近Wang G等人采用园片状聚脂载体(Fibra- 相似文献
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VerO细胞在气升式反应器中的微载体培养 总被引:1,自引:0,他引:1
哺乳动物细胞的大规模培养是生产许多医学上重要生物制品的一种主要方法之-⑴。很多有工业价值的动物细胞都是贴壁细胞,必须附着在一定的表面上才能生长,微载体培养是一种有效的体系⑵。用于微载体培养的反应器多为搅拌式反应器,近年来,流化床式反应器越来越引起生化工程学家的重视。有希望用于大规模动物细胞培养的主要是液升和气升式。液升式反应器的优点是培养液可以间接氧饱和,气泡和细胞不直接接触。在气升式流态反应器中,气泡与细胞直接接触,其优点是操作方便,设备筒单。本文报道通过气升流态化反应器实现高密度贴壁细胞培养工艺条件的研究。 相似文献