芸豆蛋白酶解工艺的研究

以芸豆蛋白为原料研究芸豆抗氧化活性肽的酶解工艺。首先以DPPH.清除率和水解度为评价指标筛选最适用酶,并采用单因素及正交实验设计优化酶解工艺。结果表明,Alcalase碱性蛋白酶对芸豆蛋白水解能力最强,酶解产物的抗氧化能力最高;最佳酶解工艺条件为底物浓度4.0%,温度55℃,加酶量2000u.g-1,pH9.0,时间6h,该条件下水解度和DPPH.清除率分别为16.16%和74.10%,比优化前分别提高4.95%和7.63%;芸豆活性肽显示出较强的抗氧化活性。      

双酶分段水解制备紫花芸豆肽工艺优化及抗氧化测定

研究紫花芸豆蛋白双酶分段水解的最佳工艺及产物的抗氧化特性。以水解度和抗氧化能力为测定指标,筛选酶种类及双酶组合方式,采用正交实验优化双酶分段水解工艺参数,提高紫花芸豆肽的水解度和抗氧化能力。最终确定胰蛋白酶+碱性蛋白酶分段水解为最佳水解工艺,参数为胰蛋白酶添加量7%、pH 10、温度50℃、时间4.5 h;碱性蛋白酶添加量7%、pH 9、温度60℃、时间3 h,水解度达到58.58%;对水解产物进行抗氧化性分析得到:当水解时间分别为6.5 h、7.0 h时,抑制脂质过氧化能力、超氧阴离子清除能力达到最大为46.53%、44.25%。结果均表明胰蛋白酶+碱性蛋白酶双酶分段水解工艺能显著提高紫花芸豆肽的水解度和抗氧化能力。     

英国红芸豆蛋白抗氧化肽酶解工艺的研究

以英国红芸豆为原料,研究芸豆蛋白质抗氧化活性肽的酶解工艺。首先以水解度和总抗氧化能力为评价指标进行酶的筛选,并采用单因素及正交实验设计优化酶解工艺。结果表明,碱性蛋白酶对芸豆蛋白水解能力最强,酶解产物的抗氧化能力最高;最佳酶解条件为底物浓度5.0%,温度55℃,加酶量4000 u/m L,p H10,时间2 h,该条件下总抗氧化能力高达186.97 U/mg pro,英国红芸豆活性肽显示出较强的抗氧化活性。      

芸豆蛋白酶解物不同脱盐工艺的比较研究

分别将离子交换树脂法和大孔吸附树脂法用于对芸豆蛋白酶解物（KBPHs）的脱盐工艺,并对其进行比较研究,分析脱盐前后KBPHs的理化成分和DPPH.清除活性。结果表明,大孔吸附树脂对KBPHs的脱盐效果优于离子交换树脂。静态吸附和解吸实验表明,H103树脂的吸附性能优于其他3种树脂。动态脱盐的最佳条件为：pH4.5、浓度45.5mg/mL的KBPHs液以1BV/h的流速上样、1BV/h的流速水洗、2mL/min的80%乙醇解吸。该条件下,H103大孔树脂对KBPHs的脱盐率为87.31%,回收率达82.37%。脱盐后KBPHs中灰分含量仅为1.81%,DPPH.清除活性的HSC50值为0.53mg/mL。     

超滤对芸豆蛋白酶解物抗氧化活性的影响

采用超滤法从芸豆蛋白酶解物中初步分离纯化抗氧化活性肽。研究超滤系统主要参数对膜通量的影响,确定最优的超滤条件和膜清洗方法,并对超滤前后酶解物的相对分子质量分布、氨基酸组成及抗氧化活性进行比较。结果表明：采用改性聚醚砜平板超滤膜在室温,酶解液质量分数2.5%,pH6.5 和压力0.25MPa 条件下的分离纯化效果较好;超滤能有效去除酶解液中相对分子质量较大的组分,相对分子质量2000～1000D 及1000D 以下的组分分别从11.38% 和12.64% 提高到32.83% 和 45.91%,其抗氧化活性也得到明显提高。     

双酶制备花生肽及其对NO·的清除能力

为对花生免疫活性肽的制备提供基础,采用蛋白酶水解花生蛋白制备花生肽,以花生蛋白水解度和NO·清除率为指标,优化酶种类组合及水解条件。结果表明：先采用Alcalase 2.4L碱性蛋白酶在花生蛋白质量浓度5 g/100 mL、超声功率400 W、超声时间5 min、pH 8.0、加酶量7 400 U/g、水解温度55℃条件下水解3 h,再加入2 480 U/g的中性蛋白酶,在pH 7.0、水解温度40℃条件下继续水解30 min,花生蛋白水解度可达到24.73%,花生肽NO·清除率的IC₅₀为1.88 mg/mL(显著低于商品大豆肽的3.51 mg/mL和商品酪蛋白肽的11.71 mg/mL);水解度在7.8%～39.1%范围内与NO·清除率有极显著线性关系,水解度超过22.6%时,与NO·清除率无显著线性关系。较高的水解度是花生肽拥有良好NO·清除能力的必要条件,但并非水解度越高越好。     

皱纹盘鲍腹足抗氧化肽的制备及其工艺优化

以皱纹盘鲍腹足为原料制备抗氧化肽。采用酶解技术,以皱纹盘鲍腹足为原材料,多肽得率、水解度、还原力、二苯代苦味脐基自由基(DPPH·)清除率为主要影响指标,筛选出最优蛋白酶;在单因素实验的基础上,应用响应面分析法,对pH值、酶解温度、酶解时间进行优化,确定制备工艺。结果表明,中性蛋白酶酶解皱纹盘鲍腹足制备抗氧化肽酶解液的最佳工艺条件为:pH 7. 10,酶解温度50. 25℃,酶解时间4. 65 h,此时皱纹盘鲍腹足抗氧化肽酶解液的DPPH·清除率可达到96. 12%,与预测理论值相比,其相对误差为0. 12%,且平均多肽含量可达到80. 56%。说明该工艺条件适于制备皱纹盘鲍腹足抗氧化肽,可达到促进皱纹盘鲍的产业化。     

微波酸处理对骨胶原蛋白酶解效果的影响研究

以骨胶原蛋白为原料,采用微波酸处理辅助酶解制备胶原蛋白肽,以水解度及抗氧化能力为指标确定最佳水解条件。通过比较实验确定最佳微波酸处理条件为:微波功率510W作用270s;通过对酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶及碱性蛋白酶水解结果比较,确定中性蛋白酶水解产物的水解度及ABTS、DPPH自由基清除率最高;通过单因素实验及正交实验优化中性酶最佳酶解条件为:酶与底物比10%,底物浓度4%,反应温度55℃,pH7.0。结果表明,与单独酶解相比,微波酸处理能够使骨胶原蛋白酶解时间缩短1/2,水解度上升3.2%,产物的ABTS、DPPH自由基清除率分别提高8.7%和3.1%。      

方格星虫蛋白酶解工艺优化

以水解度为指标,比较7种蛋白酶对方格星虫的水解效果。在单因素试验考察的基础上,采用Box-Behnken模型响应面设计,建立方格星虫蛋白酶解的二次回归模型,确定最佳的水解条件。结果表明,复合蛋白酶对方格星虫蛋白的水解效果最佳,最佳水解条件为:酶与底物比为7.8%,酶解时间为4 h,酶解温度为50℃。该条件下,方格星虫蛋白的水解度达到24.81%。     

豌豆分离蛋白酶解产物的乳化特性及抗氧化性研究

以豌豆分离蛋白为原料,研究了酶类型和酶解时间对其水解度、DPPH·清除活性和乳化特性的影响,并通过主成分分析法对酶作用效果进行了综合评价。结果表明：随着水解时间的延长,豌豆分离蛋白水解度整体呈增加趋势;与胰蛋白酶和木瓜蛋白酶相比,胃蛋白酶和风味蛋白酶的水解速度较快,水解度较高;碱性、中性和风味蛋白酶酶解过程后期所得产物的乳化稳定性较高;碱性、胃、中性以及风味蛋白酶酶解产物的DPPH·清除活性整体上均随水解度的增加而增加,且胃蛋白酶酶解产物的DPPH·清除活性较高。综合评价结果显示：风味、胃和碱性蛋白酶酶解产物的乳化特性及抗氧化性较好。研究结果为豌豆蛋白的开发利用提供了一定的理论依据。     

具有金属螯合活性的蚕豆蛋白酶解物的制备

目的探究蚕豆蛋白酶解物的金属螯合活性,研究其金属螯合活性与其抗氧化活性的关系。方法分别采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶对蚕豆蛋白进行酶解,并测定其水解物的抗氧化活性与金属螯合活性,选用碱性蛋白酶为酶解蚕豆蛋白制取金属螯合肽的最适酶,以酶解产物的水解度、抗氧化活性及金属螯合活性为测定指标获得合适的水解条件。结果 3种蛋白酶的蚕豆蛋白酶解产物都有金属螯合活性和抗氧化活性,碱性蛋白酶为酶解蚕豆蛋白的最适酶,最适酶解时间为4 h时,得到的酶解产物金属离子螯合率为88.22%,抑制羟自由基能力为220.70 U/mg,总还原力为0.03 U/mg。结论蚕豆蛋白酶解物具有一定的金属离子螯合活性与抗氧化活性,水解度对蚕豆蛋白酶解物的金属离子螯合活性及抗氧化活性有明显的影响,蚕豆蛋白酶解物的金属螯合活性与总还原力及抑制羟自由基能力呈现显著的正相关性,相关系数分别为0.925、0.968(P0.01)。     

酶法水解红豆粉特性的研究

采用酶法提取红豆蛋白,筛选出5种蛋白酶,确定所选用的碱性蛋白酶作为水解酶;得出碱性蛋白酶提取红豆蛋白的最佳条件:pH为8.8,加酶量为3.5%,温度为56℃,时间为3.5h,料液比为1∶6.8,经过验证与对比实验可知在最优酶解工艺条件下蛋白得率可达到73.34%。      

酶解香菇柄蛋白制备抗氧化肽的工艺研究

以香菇柄蛋白为原料,对其进行酶解以制备具有抗氧化活性的多肽,为香菇柄的精深加工提供理论基础。首先进行蛋白酶的筛选,在最佳蛋白酶为碱性蛋白酶的基础上进行酶解单因素实验,再运用四因素三水平的响应面分析法研究底物浓度、加酶量、pH、温度对提取工艺的影响,以DPPH自由基清除能力为响应值,确定酶解的最优条件为:底物浓度2%,加酶量4700 U/g,pH为8.3,酶解温度为55℃,酶解时间为2.5 h,此条件下的DPPH自由基清除率达到63.2%,即香菇柄多肽具有一定的抗氧化活性,可以为开发香菇柄产品提供依据。      

超声辅助酶解制备红豆多肽及其抗氧化性的研究

采用超声辅助酶解法制备红豆多肽,并对其抗氧化性进行研究。在单因素实验基础上,采用响应面分析法对超声辅助酶解制备红豆多肽工艺进行优化,确定最优超声辅助酶解工艺为:碱性蛋白酶添加量3.5%,超声功率346 W,反应温度60℃,反应时间92 min,反应p H8.4。在最优工艺条件下,红豆多肽得率为85.84%。体系的抗氧化能力随着多肽浓度的增加而增强,当多肽达到一定浓度后,多肽浓度不再是抗氧化能力的主要影响因素。      

风味蛋白酶水解制备豌豆蛋白抗氧化酶解产物工艺条件优化

采用风味蛋白酶水解豌豆蛋白,对制备豌豆蛋白酶解产物清除DPPH.清除率进行研究;通过单因素实验和响应面回归分析,得到制备酶水解产物最佳酶解工艺条件:酶解温度48.8℃、酶解时间3.1 h、pH 5.5、加酶量4.0%、底物浓度6.0%,在此条件下,风味蛋白酶酶解产物对DPPH.清除率为60.10%。     

酶解蚕豆蛋白制备降胆固醇肽及其响应面优化

为了得到具有较高降胆固醇活性的蚕豆肽,对蚕豆蛋白的酶解条件进行了研究。通过比较6种蛋白酶对蚕豆蛋白的酶解程度以及降胆固醇能力,选择碱性蛋白酶进一步优化酶解条件。以水解度(DH)与降胆固醇能力为指标,利用单因素试验和响应面试验优化确定了酶解蚕豆蛋白制备降胆固醇肽的工艺参数。结果表明,最佳酶解参数为:酶解温度40℃,p H 9.0,酶解时间60 min,加酶量8 000 U/g,料液比1∶20。验证试验后得到的水解度为14.29%蚕豆多肽产品,其对胆酸钠、甘氨胆酸钠、牛磺胆酸钠抑制率分别为52.98%、31.87%、25.17%,与理论模型预测值52.49%、31.44%、24.76%基本相符。     

核桃蛋白酶法水解工艺条件研究

研究了核桃蛋白酶法水解的工艺条件,结果表明:蛋白酶种类对核桃蛋白水解作用影响较大,Alcalase 2.4L、Neutrase 0.8L对核桃蛋白水解作用较强;Alcalase 2.4L较适宜的酶解条件为酶与底物浓度比1000U/g,pH 8.0,温度60℃;Neutrase 0.8L较适合的水解条件为酶浓度为2000U/g,pH 6.0,温度45℃;Alcalase 2.4L、Neutrase 0.8L复合酶可以对核桃蛋白进行连续水解,并能提高核桃蛋白的水解度,产物肽链长度趋近于5。     

鱿鱼头蛋白酶解工艺的研究

为充分利用鱿鱼头资源,采用Flavourzyme 500MG蛋白酶酶解鱿鱼头蛋白,以水解度为指标对酶解过程进行研究,在单因素实验基础上以水解度和超氧阴离子清除率为指标进行酶解正交实验。结果表明制备水解度较高且抗氧化能力较强的鱿鱼头蛋白水解物的最佳条件为:温度43℃,时间7h,加酶量800U/g,料水比1∶3。在此条件下进行验证实验,测得水解度为43.93%,超氧阴离子清除率为52.31%。