酶促牛黄与天然牛黄HPLC指纹图谱比较研究

目的:建立天然牛黄HPLC-DAD指纹图谱并与酶促牛黄指纹图谱进行比较。方法:采用高效液相色谱法,色谱条件:DiamonsilC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-氯仿-1%的醋酸水溶液,梯度洗脱;检测波长370 nm;流速1.0 mL/min;分析时间40 min。结果:在选定的色谱条件下建立了天然牛黄色谱指纹图谱共有模式,并对酶促牛黄与天然牛黄的指纹图谱进行比较,两者指纹基本一致,但各成分间的相对含量有差异。结论:所建立的天然牛黄色谱指纹图谱方法精密度高、重现性好,可用于各种牛黄药材替代品的鉴别研究。     

牛黄及代用品的红外指纹图谱鉴别研究

目的：通过开展牛黄、体外培育牛黄和人工牛黄的红外指纹图谱研究,建立牛黄、体外培育牛黄和人工牛黄的鉴别方法。方法：应用傅里叶变换红外光谱法（FTIR）进行测定,以450～4000 cm–1的透射率为指标,对牛黄、体外培育牛黄和人工牛黄的红外光谱进行分析,并采用ChamPattern软件对红外光谱数据进行聚类分析和主成分分析。结果：牛黄、体外培育牛黄和人工牛黄在红外光谱中的信号存在差异。人工牛黄在1700～1500、1200～900、700～500 cm–1波数处的峰强度与天然牛黄和体外培育牛黄存在明显差异;天然牛黄在1550、1450、1250 cm–1波数处的峰强度明显弱于体外培育牛黄。聚类分析和主成分分析结果表明,牛黄、体外培育牛黄和人工牛黄的红外光谱数据可分别聚为一类。结论：红外光谱可用于牛黄、体外培育牛黄和人工牛黄的鉴别研究。     

HPLC-MS/MS法测定体外培育牛黄与天然牛黄中26种胆汁酸成分

目的建立HPLC-MS/MS法同时测定体外培育牛黄Calculus Bovis Sativus(CBS)和天然牛黄Calculus Bovis(CB)中26种胆汁酸成分。方法 Symmetry C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,3.5μm),流动相为水(0.1%甲酸+10 mmol/L乙酸铵)-甲醇(0.1%甲酸+10 mmol/L乙酸铵),体积流量0.15 m L/min,梯度洗脱,进样量为10μL。质谱采用电喷雾离子源,负离子模式监测,喷射电压-4 500 V,离子源温度350℃,采用多反应监测模式(MRM)。结果牛黄中26种胆汁酸在线性范围内峰面积与摩尔浓度均呈良好的线性关系(r≥0.991 4),加样回收率为98.2%~102.3%,精密度RSD值小于0.95%,CBS和CB的胆汁酸类成分在种类和含量上存在一定差异。结论该法灵敏度高、专属性好、结果可靠,适用于牛黄中胆汁酸成分的测定。     

人工牛黄薄层指纹图谱多元图像分析及化学计量学研究

建立了人工牛黄薄层指纹图谱,对其图像进行数字化和化学计量学研究。首先采用以环己烷-乙酸乙酯-乙酸-甲醇(2∶7∶1∶2)为展开剂,10%硫酸乙醇溶液为显色剂,105℃加热至斑点清晰,并在366 nm下采集数码图像。然后将该图像转换成为灰度图像,得到指纹图谱的灰度曲线图多元数据,并采用主成分分析法对多元数据进行分析。结果表明薄层指纹图谱可表征不同生产企业生产的人工牛黄,并且分析得到图谱上表征来源的特征区域。该方法简便,快速,适合用于不同来源的人工牛黄质量差异的评价。     

体外培育牛黄的研制及临床

牛黄又称丑宝,是中医学乃至印度传统医学常用的珍贵药,《金光明经》称之谓瞿卢折娜,以其清热解毒、镇惊消肿、强心利胆等多方面的药理作用称著.古代入药者有4种,即牛神黄、角中黄、心黄与肝胆黄.因其用量大及药源匮乏,即便肝胆黄也不多得,天然牛黄自然发生率仅为0.921%,故有“千金易得,牛黄难求”之说.自1972年国家药品监督管理部门陆续批准了3个牛黄代用品,即人工牛黄、培植牛黄和体外培育牛黄.20世纪90年代华中科技大学同济医院蔡红娇教授经过20多年的研究,成功研制出“体外培育牛黄”.现对体外培育牛黄的研制、药效学特点及临床综述如下.     

体外培育牛黄的药学研究

目的：解决牛黄原料匮乏问题，为民族医药工业发展提供充足的优质牛黄原料药。方法：根据胆红素钙结石体内形成的原理和生物化学过程，应用现代生物工程技术，在体外牛胆囊胆汁内培育牛胆红素钙结石(体外培育牛黄)；采用电镜扫描、红外光谱法、紫外分光光度法等检测体外培育牛黄的性状、结构、成分和主要成分含量。结果：体外培育牛黄呈类球形，椋黄色；有同心层纹状结构，扫描电镜下见呈网状结构，网架富集胆红素钙颗粒；含胆红素、胆酸、胆固醇、磷脂、去氧胆酸、牛磺酸、糖蛋白、18种氨基酸及21种微量元素；在避光、密封、防潮条件下存放三年稳定。结论：体外培育牛黄的性状、结构、成分、含量与天然牛黄相似。     

体外培育牛黄的药理研究进展

体外培育牛黄有抗氧化、抗炎、保肝、提高免疫功能等药理作用，与天然牛黄成分基本一致，可作为天然牛黄的理想替代品．本文综述了近几年来体外培育牛黄的药理研究进展．     

体外培育牛黄抗炎作用的实验研究

体外培育牛黄２００～８００ｍｇ／ｋｇ，ｉｇ５～７天，可显著抑制小鼠巴豆油性耳廓水肿，大鼠角叉菜胶性足肿胀，大鼠巴豆油肉芽囊肿的渗出和组织增生，抑制白细胞游走反应，对抗ＰＧＥ２致毛细血管通透性增加，但不影响肾上腺中ＶｉｔＣ含量，本品抗炎作用强度与牛黄相似。     

我国体外培育牛黄开始投入生产

目前，国家一类新药“体外培育牛黄”已获国家食品药品监督管理局批准正式生产。     

培植牛黄药理作用的研究

用比较药理学研究方法,对培植牛黄与天然牛黄的主要药效和毒性在同等条件下进行了比较研究。结果表明,两者均具有镇静、抗惊厥、解热、抗炎、强心、降压作用,其作用强度与毒性也相近似。     

新仿牛黄的抗惊厥作用

牛黄为脊椎动物哺乳纲牛科牛BostaursdomesticusGmelin的胆结石。由于天然牛黄极为短缺,价格昂贵,因而许多学者都在进行人工牛黄的研究。五十年代,唐德煊首先进行了人工合成牛黄的研究并获得成功。后经朱颜进行的药理实验表明,人工牛黄对古柯碱和咖啡碱引起的小鼠惊厥有对抗作用,此点与天然牛黄的药理作用是一致的。1971年,卫生部组织了人工牛黄药理实验协作小组进行了实验,观察到人工牛黄对戊四氮引起的小鼠惊厥也有较好的对抗作用。同年年底,卫生部     

FTIR-PAS法对天然牛黄不同颜色层面的剖析研究

应用傅里叶变换红外光声光谱(FTIR-PAS)法研究了天然牛黄不同颜色层面的FTIR-PAS特性,所用样品不需要经过任何处理,不消耗,破坏样品,操作简便,样品用量少,快速,准确。     

天然牛黄对小鼠免疫功能的影响

实验结果表明天然牛黄能增强小鼠吞噬细胞的碳粒廓清能力,增强小鼠抗体生成能力,提高LPS引起的淋巴细胞转化。     

含体外培育牛黄的安宫牛黄丸治疗流行性乙型脑炎的临床研究

目的观察含体外培育牛黄的安宫牛黄丸治疗暑温风痰闭窍证(流行性乙型脑炎)的临床疗效及安全性.方法采用随机双盲和单盲对照法,与含天然牛黄的安宫牛黄丸对照研究,共治疗乙脑患者 260例,其中含体外培育牛黄的安宫牛黄丸治疗组 182例,对照组 78例.结果治疗组与对照组的愈显率分别为 94.50 %,88.46 %,总有效率分别为 99.45 %,97.44 %.两种牛黄的安宫牛黄丸均有较好的疗效,两组比较差异无显著性意义(P > 0.05). ECG及实验室各项检查表明,两种牛黄的安宫牛黄丸对病人均无明显毒副作用.结论含体外培育牛黄的安宫牛黄丸治疗流行性乙型脑炎疗效显著.     

牛黄与其一种伪品的鉴别研究

目的：对牛黄与其一种伪品进行鉴别研究。方法：将中药传统性状鉴定与体式显微和光学显微技术相结合,鉴定并报道了一种新发现的牛黄伪品。并应用高效液相色谱法及液质联用方法对染色物质进行了确证。结果：牛黄与该伪品在层纹的断面特征及颗粒状团块的显微特征等方面存在差异。该伪品主要是用淀粉和色素混合制作而成,伪品中掺有金胺O、皂黄、金橙Ⅱ、柠檬黄、胭脂红等5种染色物质。结论：从宏观到微观层级递进的观察方法可有效鉴别牛黄药材的真伪。HPLC-DAD和HPLC-MS等现代仪器分析方法可用于牛黄药材染色物质的确认。     

香港市场商品牛黄的鉴定研究

应用性状鉴定、显微鉴定、显微化学和薄层层析试验方法对6批香港市场的商品牛黄进行了分析鉴定研究,样品分别来源于澳大利亚、巴西和印度。鉴定结果表明,有一半的商品牛黄属伪劣、低次品。     

A Rapid and Effective HPLC Method for Identification of Bovis Calculus in Chinese Patent Medicines

Objective Due to the limited resource and the large demand,many kinds of Bovis Calculus(BC)including artificial Bovis Calculus(ABC),in vivo cultured Bovis Calculus(in vivo CBC),and in vitro cultured Bovis Calculus(in vitro CBC)were used in Chinese patent medicines(CPMs).Previous studies have shown that the chemical constituents of ABC and their properties were different from other BC.The two types of CBC with much higher price than ABC were approximately equivalent with natural Bovis Calculus in quality and clinical effect.The aim of the study is to establish a rapid and effective method for the identification of BC in CPMs.Methods An HPLC method with the higher specificity for analyzing bilirubin was established to distinguish ABC from other three kinds of BC by comparing the change of bilirubin content with the addition of EDTA-2Na as the extraction solvent and stabilizer.Results The bilirubin content in CPMs containing ABC was basically unchanged,while that in CPMs containing other kinds of BC showed significant difference.The proposed method was employed to analyze a variety of CPMs containing Bovis Calculus(CPMBCs)and proven to be universal.Conclusion An effective analytical method is established for the quality control of CPMBCs and further ensures the safety and efficacy of these drugs in clinical practice.     

薄层扫描法测定人工牛黄及其制剂中胆酸的含量

目的 :测定人工牛黄及其制剂中胆酸的含量。方法 :薄层扫描反射锯齿法 ,λS=380nm ,λR=6 5 0nm ,狭缝 :0 .4nm×0 .4nm ,Sx =3。结果 :本法的精密度、重现性、稳定性和回收率均良好。结论 :本法适用于人工牛黄及含有人工牛黄的中成药制剂中胆酸的含量测定