不同浓度NaCl胁迫处理对番茄种子发芽的影响

研究了不同浓度NaCl胁迫处理对12个番茄品种种子发芽的影响。结果表明,低浓度NaCl胁迫,对番茄种子萌发有一定的促进作用;随着NaCl胁迫浓度的加大,发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数等降低,发芽时间推迟,种子发芽整齐度降低。同一胁迫条件下,不同番茄品种种子萌发有显著差异。     

NaCl胁迫对辣椒种子发芽特性的影响

以绿洲椒霸、日本天鹰椒、新优一号和高产懒椒王4个辣椒品种为材料,研究了NaCl胁迫对辣椒种子发芽特性的影响。结果表明:在低浓度NaCl(30mmol/L)胁迫下,绿洲椒霸、日本天鹰椒、新优一号和高产懒椒王4个辣椒品种的活力指数与对照相比均显著提高,侧根数分别比对照下降了4.7%、29.9%、51.3%、45.0%,绿洲椒霸和高产懒椒王的发芽势、发芽率、发芽指数和根长显著提高;高浓度NaCl胁迫(≥60mmol/L)对以上4个辣椒品种的发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数、根长和侧根数均有不同程度的抑制作用,并且随着NaCl浓度的增加,各指标抑制作用逐渐增强,其中日本天鹰椒和新优一号的降幅较小,而绿洲椒霸与高产懒椒王则有较大的降幅。     

盐胁迫对番茄种子萌发及胚根生长的影响

设置NaCl浓度为0、25、50、100 mmol/L,研究盐胁迫对番茄种子萌发及胚根生长的影响。结果表明,随着NaCl浓度的增加,种子发芽率、发芽势、胚根长度总体呈下降趋势,不同番茄品种耐盐性表现不同。当NaCl浓度为50 mmol/L时,浙粉202各项指标下降最为明显;在100 mmol/L处理条件下,除上海906外,其余品种几乎不发芽。综合各因素,上海906在盐胁迫下耐受性最好,浙粉202相对较差,浙樱粉1号和红圣女处于两者之间。     

不同樱桃番茄品种种子萌发期的耐盐性研究

研究了不同浓度的NaCl胁迫对10个樱桃番茄品种种子萌发的影响.结果表明,随着NaCl胁迫浓度的增大,相对发芽率、发芽指数、根鲜重、根长、下胚轴长、子叶鲜重等指标均明显下降,且品种间差异显著.在供试的10个樱桃番茄品种中,不同品种樱桃番茄种子萌发受NaCl胁迫抑制的程度不同.其中“京丹5号”和“黄莺2号”在发芽期的耐盐力优于其他参试品种,“小圆枣”发芽期的耐盐力则表现较差.     

盐分胁迫对加工番茄种子萌发与幼根发育的影响

采用不同浓度NaCl胁迫处理,对10个加工番茄品种进行种子发芽试验。结果表明,在低浓度NaCl胁迫下,对番茄种子萌发有一定的促进作用,而浓度过高则明显抑制种子萌发。当NaCl浓度为50 mmol/L时,石番15号、茄番0738、红杂33、IVF6172表现出较强的耐盐性。随着NaCl浓度的加大,发芽率、发芽势降低;当NaCl浓度为150 mmo/l时,发芽率明显降低,几乎不能发芽。综合各因素,石番15号、茄番0738、红杂33、IVF6172表现出较强的耐盐性,可作为耐盐碱品种进一步试验。     

中华鲟源维氏气单胞菌的分离鉴定及其药敏特性

以自然患细菌性败血症的子二代中华鲟(Acipenser sinensis)幼鱼为研究对象,无菌操作从濒死病鲟体内分离到1株致病菌(zhx20120301)。结合传统细菌学鉴定及分子生物学鉴定方法,对其形态、生理生化特性、16S r DNA序列及系统发育分析等方面进行研究,研究结果显示这株细菌为维氏气单胞菌(Aeromomas veronii)。回归感染试验证实分离菌株具有较强的致病性,能导致健康杂交鲟(西伯利亚鲟Acipenser baerii♂×施氏鲟Acipenser schrenckii♀)死亡,并呈现与自然条件下相似的临床症状,且再分离菌株各种生理生化特性与原分离菌株相同。药敏试验结果表明该菌株对头孢氨苄、头孢唑啉、庆大霉素、四环素、强力霉素、氟苯尼考、多粘霉素B、恩诺沙星、氟哌酸和左氧氟沙星敏感。     

泥鳅致病性维氏气单胞菌的分离与鉴定

从患病的泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)肝脏中分离得到优势菌NQ150728。对该菌进行了人工感染试验,并利用VITEK-2全自动微生物鉴定仪及16S rRNA、gyrB序列分析对纯培养细菌进行鉴定。此外,对分离的菌株进行药敏实验。结果显示,人工回感试验泥鳅患病症状同自然发病症状,证明其对泥鳅有致病性。VITEK-2全自动微生物鉴定仪鉴定菌株NQ150728为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)。16S rRNA、gyrB基因序列测定结果及系统发育树的构建也表明其为维氏气单胞菌。药敏试验结果表明,该菌对头孢曲松、利福平、恩诺沙星、四环素、氯霉素、头孢哌酮、氧氟沙星、洛美沙星、克拉霉素、氟罗沙星、头孢噻吩、多西环素、新霉素、头孢他啶、大观霉素、环丙沙星、呋喃妥因、头孢拉定、米诺环素、头孢氨苄、氨曲南、左氟沙星、甲氧嘧啶、甲氧胺嘧啶等24种药物高度敏感。     

不同大麦品种发芽期的耐盐性比较研究

以种子发芽势、发芽率、发芽指数、萌发活力指数以及幼苗相对生长率为指标,研究了NaCl胁迫对10个大麦品种(系)种子发芽的影响。结果表明,随着NaCl胁迫浓度的增大,各品种种子萌发受抑制作用明显增强;低盐胁迫在一定程度上能够促进种子发芽,但对幼苗的生长仍有抑制作用,高盐胁迫对种子发芽具有较大抑制作用,种子甚至不能发芽。在参试的10个大麦品种中花11耐盐性最好,秀06-3耐盐性最差。     

金鱼维氏气单胞菌的分离鉴定与药敏分析

从养殖场患病金鱼脾脏分离到1株优势菌株,形态特征和生理生化测试结果表明:该菌为革兰氏阴性杆菌,发酵葡萄糖产酸产气,氧化酶、接触酶阳性,生长无需NaCl。结合16SrRNA基因序列和系统发育树的分析结果,确定该菌为维氏气单胞菌(Aeromonasveronii)。药敏试验结果显示:在18种抗菌类药物中,分离菌对氯霉素、氟苯尼考、头孢氨苄、利福平和新生霉素5种药物敏感,而对强力霉素等11种药物敏感度低。     

草鱼源致病性维氏气单胞菌的分离鉴定及药物敏感性分析

从贵州兴义某水库网箱养殖的患病草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝脏中分离出菌落大小、形态一致的细菌,编号为GZ09007。经革兰氏染色、生理生化反应等表型鉴定为气单胞菌(Aeromonas)。通过扩增16S rRNA和gyrB基因序列并构建系统发育树,进一步鉴定该菌为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)。该菌株具有act、aer、lip、exu、fla、ser等毒力相关基因,不具有alt、ast、gca T和ahy B等毒力相关基因。人工感染试验表明该菌对草鱼、鲫、团头鲂和鳙均具有强致病性,半数致死量LD_(50)分别为7.45×10~5、1.27×10~5、1.76×10~5和5.36×10~4 CFU·(g·B·W)~(-1)。药物敏感性试验表明该菌对萘啶酸、恩诺沙星和左旋氧氟沙星等12种药物敏感,对新霉素、呋喃唑酮中度敏感,对氨苄西林耐受。研究结果表明维氏气单胞菌GZ09007是引起此次草鱼发病的致病菌。     

使用茜素络合物标记鳙耳石

探究茜素络合物(Alizarin complex, ALC)对鳙(Aristichthys nobilis)的标记效果,评估其作为鳙增殖放流检测手段的价值,为鱼类的大规模标记提供理论依据和技术支撑。选用不同质量浓度的ALC(50、100和200 mg/L)分别对不同饲养密度(20、40和50尾/L)的鳙进行24 h和48 h的浸泡标记,确定最适标记条件后进行增殖放流。结果表明,ALC对鳙的最适标记条件是:质量浓度100 mg/L,浸泡时间48 h,饲养密度50尾/L;微耳石是检测ALC对鳙荧光标记最适宜的耳石类型,且在蓝色荧光下观察效果最佳。标记的鳙在为期1 a的灞河放流过程中生长情况良好,标记环清晰可见,说明ALC标记法标记效果稳定,可用于对鳙增殖放流的检测。     

草鱼源致病性维氏气单胞菌的鉴定及其黏附特性分析

采用表型鉴定与细菌16S rRNA基因序列分析对从患病草鱼体内分离的病原菌株16-1进行分类鉴定,综合该菌株的表型特征与16S rRNA基因序列,确定其为维氏气单胞菌。随后,对该菌株的细胞黏附特性及其携带的黏附素基因进行检测与分析。结果显示,分离菌株能以聚集性方式黏附于鲤鱼上皮瘤细胞（EPC）周围,平均黏附菌数随共孵育时间延长而增加,90 min达到峰值,说明该分离株具有良好的细胞黏附性。黏附因子检测表明,该菌株同时携带ompAI、ompAII和ahl13种黏附素基因,这些黏附素基因在分离菌株与不同来源参考株之间的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别介于95.8%～99.5%和95.0%～100%（ompAI）,96.3%～99.1%和97.9%～100.0%（ompAII）,78.6%～99.6%和75.5%～99.4% （aha1）,说明所携带的ompAI和ompAII黏附素基因在不同来源的维氏气单胞菌之间具有较高的保守性。     

马源蜡样芽孢杆菌的分离鉴定及毒力基因检测

为鉴定从内蒙古通辽市某马术俱乐部发病及死亡赛马体内分离出的一株病原菌,本研究对分离菌株进行革兰氏染色镜检、动物致病性试验、全自动微生物分析系统检测、16S rRNA基因扩增、系统进化树分析及部分毒力基因PCR检测。结果显示:分离株生化特性符合蜡样芽孢杆菌的特性;其对克林霉素、庆大霉素等药物敏感,对头孢西丁、环丙沙星等药物中度敏感,对氨曲南、头孢唑林等药物耐药;16S rRNA基因序列与GenBank中已登录的蜡样芽孢杆菌序列同源性为100%;系统进化树分析表明,分离株与蜡样芽孢杆菌等亲缘关系最近;毒力基因PCR检测结果显示,8种潜在的毒力基因entFM、cytK、hblA、hblC、hblD、nheA、nheB、nheC均呈阳性。试验结果表明,该分离菌株为具有严重致病性的蜡样芽孢杆菌。     

碳酸氢钠对嗜水气单胞菌致病性及其主要毒力相关基因表达的影响

为探讨碳酸氢钠对嗜水气单胞菌毒力基因表达的影响,利用荧光定量PCR技术,以未添加碳酸氢钠的嗜水气单胞菌为对照组,添加0.024、0.048、0.072、0.096和0.120 mol/L碳酸氢钠的嗜水气单胞菌为实验组,对嗜水气单胞菌的3个主要毒力基因——溶血素基因(AHH-1)、气溶素基因(Aer A)和弹性蛋白酶基因(ahyB)进行相对表达分析。结果表明,5个实验组嗜水气单胞菌的AHH-1、AerA和ahyB表达量均显著低于对照组。且随着碳酸氢钠浓度的增加,基因表达呈逐渐下调趋势。人工感染结果表明,添加碳酸氢钠培养的嗜水气单胞菌对斑马鱼的半致死量明显比对照组高,而且随着碳酸氢钠浓度的增加,嗜水气单胞菌对斑马鱼的半致死量呈现逐渐加大的趋势,表明毒力逐渐减小。     

长江江豚饵料鱼源温和气单胞菌的鉴定及毒力分析

湖北长江天鹅洲白鱀豚国家级自然保护区内长江江豚（Neophocaena asiaeorientalis asiaeorientalis）的多种饵料鱼暴发细菌性疾病,主要表现为烂鳍、白尾等临床症状,严重威胁长江江豚的食物和水生环境安全。自患病的?条（Hemiculter leucisculus）等饵料鱼的肝、脾和肾中分离出多株菌株,其中分离株SS161012经16S rDNA、gyrB基因序列测定,形态观察及生理生化分析等方法鉴定为温和气单胞菌（Aeromonas sobria）。该菌编码溶血素（Hly）、外膜蛋白（Omp）、粘附素（Aha）、丝氨酸蛋白酶（Ahp）等毒力基因。致病性试验显示,分离株SS161012可通过注射感染和划痕浸泡感染致试验鱼死亡,且创伤浸泡感染死亡率明显高于注射感染。药物敏感性测试显示该菌株对环丙沙星、左氧氟沙星等BD Phoenix^TM分析鉴定系统基本药物和氟苯尼考、恩诺沙星等水产常用药物敏感。     

克氏原螯虾布氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及药敏分析

从患病的克氏原鳌虾(Procambarus clarkii)中分离纯化得到一株优势菌株AX1707。通过革兰氏染色、氧化酶试验、生化鉴定、16S rRNA基因测序和进化树构建等操作进行分析,结果显示,AX1707为布氏柠檬酸杆菌(Citrobter braakii),人工感染试验结果显示该菌具有较强致病性,药敏试验结果显示其对恩诺沙星、氧氟沙星、氟苯尼考、复方新诺明、庆大霉素和多西环素敏感,对四环素和新霉素中度敏感,对红霉素和氨苄西林耐药。     

一株克氏原螯虾病原——霍乱弧菌的分离鉴定

从尾扇边缘溃烂的克氏原螯虾中分离到一株优势菌LK-18,并对该菌株进行种属鉴定和致病性分析。通过菌落形态观察、16S rRNA测序、血清型分析及基因特性鉴定对细菌的类别进行初步判断,并采用浸泡感染、肌肉注射和腹腔注射等方式进行人工感染实验对细菌的致病性进行评估。经16S rRNA测序分析和4个管家基因（atpA、pyrH、recA、gyrB）串联分析,该菌株最终被鉴定并命名为Vibrio cholerae LK-18。V. cholerae LK-18经PCR鉴定不属于O1和O139血清型,但含hly毒力基因和几丁质分解相关的几丁质酶（chitinase,Chi）基因。人工感染实验虽未能重现烂尾症状,但从克氏原螯虾烂尾组织中分离的V. cholerae LK-18具有致病性,能够引起克氏原螯虾的死亡。研究结果表明霍乱弧菌LK-18是一种致病菌,不仅扩大了非O1/O139群霍乱弧菌的感染宿主范围,同时预警霍乱弧菌有导致克氏原螯虾养殖业暴发疾病的可能,因此要提前做好该疾病的预防工作,从而避免霍乱弧菌感染带来的损失。     

猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其皮肤坏死素(DNT)粗提液的小鼠皮肤毒性试验

为更好地进行波氏菌病的防治,利用分离培养、生化实验、PCR鉴定和同源性分析对采自四川某规模化猪场有明显萎缩性鼻炎症状的猪鼻腔拭子进行支气管败血波氏杆菌的分离鉴定,参考经典的皮肤坏死素(DNT)粗提技术,将分离株DNT粗提原液及10和100倍稀释物分别注射于4~5、15~20和40~45d3组不同日龄的SPF鼠,进行毒力检测。结果分离到一株支气管败血波氏杆菌,其DNT毒力较强,0.2mL粗提原液可造成4~5d乳鼠皮下组织发生严重急性出血性炎症而死亡;15~20d乳鼠皮下出血,毛囊损伤,表皮层细胞结构模糊、紊乱,耐过乳鼠损伤处皮肤毛发生长受损;40~45d小鼠脱毛等轻微症状。本试验分离菌株皮肤毒性较强,DNT对不同日龄鼠的皮肤致病力有差异,可引起表皮层、真皮层和皮下组织同时损伤。