慢性心力衰竭患者心肌热休克蛋白47的表达及其与纤维化的相关性研究

目的热休克蛋白47(HSP47)是一种高度保守的分子蛋白,被认为是胶原的特异性分子伴侣,在胶原合成及纤维化中发挥着重要的作用。本文探讨心室重构在慢性心力衰竭患者中的分子机制。方法手术病人取血清及组织标本各60例,分为3组:心功能1级组、心功能2级组、心功能3级组,每组20例。采用实时荧光定量(RT-PCR)方法检测HSP47的m RNA表达量,并且运用酶联免疫吸附法测定上述60例患者血清HSP47、Ⅰ型前胶原羧基末端前肽(PⅠCP)浓度。结果 (1)与心功能1级组比较,HSP47 m RNA水平在心功能2级组、心功能3级组的心肌组织中表达明显增加(P0.05),且在心功能3级组较心功能2级组明显增加(P0.05)。(2)心肌组织中HSP47表达量与血清中HSP47、PⅠCP水平呈显著独立正相关(r=0.704,P0.05;r=0.811,P0.05)。结论HSP47 m RNA在慢性心力衰竭患者中表达增加,提示HSP47可能参与了心室重构。     

热休克蛋白47在心房颤动患者心肌中的表达

目的探讨热休克蛋白47(HSP47)在心房颤动(简称房颤)患者心房结构重构中所起的作用。方法 60例行心脏手术的患者分为窦性心律组、阵发性房颤组、持续性房颤组,各组20例,于手术中获取右心耳心房组织,采用实时荧光定量方法检测HSP47的mRNA表达;同时采用超声心动图测量心房内径,并研究其相关性。结果与窦性心律组比较,阵发性房颤组及持续性房颤组中HSP47mRNA水平明显增加(P<0.05),且持续性房颤组较阵发性房颤组增加更明显(P<0.05)。房颤患者HSP47mRNA水平与左房内径呈显著正相关(r=0.780,P<0.01)。结论房颤患者心房组织中HSP47基因表达显著增加,并与房颤的严重程度密切相关。     

心房颤动患者衰老基因的表达及其与心肌纤维化的相关性

目的探讨心房颤动(简称房颤)患者KLOTHO基因的表达及其与纤维化的相关性。方法 60例行心脏手术患者按心脏节律分为窦性心律组、阵发性房颤组及持续性房颤动,每组20例。采用用实时荧光定量聚合酶链式反应的方法研究KLOTHO基因mRNA在患者心房肌组织中的表达,及其与血清中心肌纤维化指标Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)的关系。并行心肌组织切片HE染色来观察心肌纤维化的程度。结果①与窦性心律组相比,房颤组左房明显扩大(P0.05),持续性房颤组的左房内径大于阵发性房颤组(P0.05)。②与窦性心律组相比,阵发性房颤、持续性房颤组心房组织的KLOTHO mRNA水平均明显减少(P0.05);持续性房颤组KLOTHO mRNA表达较阵发性房颤组亦明显减少(P0.01)。③窦性心律组心肌间质中仅见极少量胶原纤维;阵发性房颤组心肌间质中胶原沉积增多,心肌肌束周围可见明显胶原纤维包绕;持续性房颤组心肌间质中纤维组织显著增生,心肌肌束被大量的条索状胶原纤维所分隔。④与窦性心律组相比,房颤组血清PⅠCP、PⅢNP含量明显增高(P0.01),且持续性房颤组PⅠCP、PⅢNP含量较阵发性房颤组明显增加(P0.05);⑤房颤患者心肌KLOTHO mRNA水平与左房内径、血清中PⅠCP、PⅢNP呈独立的、显著的负相关关系(P0.01)。结论房颤患者KLOTHO基因的表达增加,心肌纤维化的程度减少,提示KLOTHO基因可能与心房纤维化有关。     

热休克蛋白与心房颤动

热休克蛋白(HSPs)作为分子伴侣保证蛋白质的正确折叠,并在各种应激中保护细胞免受损伤。近来发现HSPs还具有免疫原性,能被分泌至细胞膜表面或进入血液,并参与细胞间信号转导。HSPs与心房颤动(简称房颤)关系的研究主要涉及:不同种类HSPs在房颤中的表达及其作用,HSPs与心脏外科手术后房颤发生率的关系,HSPs自身免疫效应对房颤的影响,及HSPs与心房重构的关系等。这些研究促进了对房颤发生发展机制的深入理解,并有望形成防治房颤的新策略。     

热休克蛋白47在肝纤维化中的研究进展

肝纤维化是由胶原和非胶原在肝脏异常沉积引起,目前尚无特效治疗药物。热休克蛋白47(heat shock protein 47,HSP47)是一种存在于内质网中的胶原特异性分子伴侣,已被证实主要来源于纤维生成细胞,可协助三螺旋胶原前分子的正确折叠和稳定。在肝纤维化进程中,细胞外基质的主要来源是肝星状细胞,体内外研究均证实HSP47在肝内主要存在于肝星状细胞中,通过转化生长因子-β1(transforminggrowth factor-β1,TGF-β1)信号转导通路调控肝纤维化的发生,miRNA、HSP47-蛋白相互作用也参与了肝纤维化的发生发展,本文将对HSP47与肝纤维化的发病机制进行综述。     

热休克蛋白47与肺纤维化

热休克蛋白47（heat shock protein47．，HSP47）是一种胶原特异性分子伴侣，参与前胶原在内质网中的整个加工处理过程，在组织器官纤维化中起重要作用。在肺纤维化中HSP47和Ⅰ型前胶原显著表达，并且其表达量的不同可能与病因相关；TGF—B在肺纤维化中发挥着重要的作用，但其是通过诱导HSP47的表达发挥作用的；抑制HSP47的表达可以减轻肺纤维化的程度。因此HSP47有可能成为肺纤维化新的治疗靶点。     

热休克蛋白70与心肌缺血再灌注损伤大鼠心房颤动及心肌纤维化的关联

目的探讨热休克蛋白(HSP)70与心肌缺血再灌注损伤大鼠心房颤动(房颤)及心肌纤维化的关联。方法 48只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、缺血30 min组、再灌注60 min和再灌注120 min组,每组12只。采用大鼠左冠状动脉前降支结扎法建立心肌缺血再灌注模型。各组均采用24 h动态心电图监测房颤持续时间,直至实验结束。测定心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)活性。分别用免疫印迹和酶联免疫吸附试验检测心肌和血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达。采用免疫印迹法检测心肌组织中HSP70蛋白表达。结果与正常对照组相比,缺血30 min组房颤持续时间显著增加(P0.05);与缺血30 min组相比,再灌注各组房颤持续时间显著增加,至再灌注120 min达到高峰(P0.05)。与正常对照组相比,心肌组织中SOD活性于缺血30 min开始降低至再灌注120 min达到最低值。与正常对照组相比,心肌组织中MDA活性于缺血30 min开始升高至再灌注120 min达到最大值。与正常对照组相比,缺血30 min组心肌和血清中TNF-α表达量显著增加(P0.05);与缺血30 min组相比,再灌注各组心肌和血清中TNF-α表达量显著增加,至再灌注120 min达到高峰(P0.05)。与正常对照组相比,缺血30 min组心肌组织中HSP70蛋白表达显著增加,再灌注各组与缺血30 min组相比HSP70蛋白表达也明显增加(P0.05)。结论心肌缺血再灌注损伤会导致大鼠房颤,并通过加重炎症反应导致房颤和心肌纤维化。同时,心肌细胞内HSP70的表达水平变化与心肌缺血再灌注大鼠的房颤及心肌纤维化相关,是心肌缺血再灌注损伤发展和恶化的重要标志。     

热休克蛋白在风湿性心脏病并发心房颤动患者中的表达

目的比较多种热休克蛋白(HSP)在风湿性心脏病(RHD)并发心房颤动(简称房颤)患者和窦性心律(简称窦律)患者中的表达。方法 73例RHD患者,其中伴慢性房颤患者(A组)38例和不伴房颤患者(B组)35例。测定两组患者血沉、血清超敏C反应蛋白水平。经开胸手术获取右心耳组织标本,进行免疫组织化学染色,测量HSP27、HSP60、HSP70和HSP90的分布密度。结果与B组比较,A组HSP27分布密度均显著降低(255±117μm2/mm2vs 558±133μm2/mm2,P<0.05),而HSP60、HSP70和HSP90的分布密度在两组间无显著差异。在A组,HSP27分布密度与左房直径呈负相关(r=-0.58,P<0.05),与性别、年龄、体重指数、射血分数、血沉和超敏C反应蛋白水平等无关。结论 HSP27的表达水平与RHD并发的房颤相关。     

热休克蛋白与心肌保护

本文从细胞和分子水平上就热休克蛋白对心肌的保护作用作一介绍。     

心肌热休克蛋白70在慢性心力衰竭患者中的表达

目的:观察慢性心力衰竭患者心肌热休克蛋白(HSP70)的表达。方法: 60例手术患者分为3组,其中心功能1级组20例,心功能2级组20例,心功能3级组20例。采用实时荧光定量（RT-PCR）方法检测HSP70的mRNA表达量。结果:①与心功能1级患者比较,HSP70 mRNA 水平在心功能2级、心功能3级组的心肌组织中表达明显减少（均P<0.05）,且在心功能3级组较心功能2级组明显减少（P<0.05）。②HSP70 mRNA水平与慢性心力衰竭患者年龄、病程呈负相关。结论:慢性心力衰竭患者心肌HSP70的表达减少,可能与HSP70随着心功能恶化其保护作用减弱有关。     

热休克蛋白47与PⅠCP在慢性心力衰竭患者中的相关性

目的:慢性心力衰竭（CHF）是一种慢性的,逐渐进展的临床综合征。研究热休克蛋白47(HSP47)与血清Ⅰ型胶原羧基端肽(PⅠCP)在CHF不同心功能分级中的表达及其相关性。方法: 将60名患者分为心功能Ⅰ级、心功能Ⅱ级、心功能Ⅲ级,采用ELISA测定患者血清中的HSP47的含量与PⅠCP的含量,并研究两者与CHF的相关性。结果: 与心功能1级组比较,心功能Ⅱ级组PⅠCP含量显著增高（P<0.01）,且心功能Ⅲ级组较心功能Ⅱ级组PⅠCP含量显著增高（P<0.01）,且血清HSP47含量与PⅠCP含量呈正相关。结论: CHF患者存在心肌纤维化及左心室扩大,两者呈正相关关系,提示CHF患者存在心室结构重构,心肌纤维化在心室重构中起重要作用。CHF患者HSP47和PⅠCP显著升高,且呈显著正相关。     

热休克蛋白47在日本血吸虫病肝纤维化病程的动态变化

目的观察热休克蛋白47(heat shock protein 47,HSP47)在日本血吸虫病患者肝脏组织中的表达情况及其在日本血吸虫病肝纤维化小鼠动物模型中的动态变化。方法收集2008—2012年期间同济医院门诊和住院部日本血吸虫病肝纤维化患者肝穿标本72例。用免疫组织化学法检测HSP47表达;Masson染色观察胶原增生情况;实时荧光定量PCR检测HSP47、Ⅰ型胶原、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)及转移生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)m RNA水平的表达。构建实验性日本血吸虫病肝纤维化小鼠模型,分别于感染后第6、8、12周取小鼠肝组织,用免疫组织化学法检测HSP47表达,采用实时荧光定量PCR及Western blot检测HSP47的m RNA和蛋白水平表达及Ⅰ型胶原纤维增生情况。结果日本血吸虫病肝纤维化患者肝组织中的HSP47主要表达在肝脏间质细胞及虫卵结节周围,并随纤维化程度进展显著增多(P均0.01),与Ⅰ型胶原增生趋势平行。各纤维化分期患者肝组织胶原及纤维化相关因子CTGF及TGF-β1 m RNA表达均明显高于S0期无纤维化患者(P均0.01)。在肝纤维化模型小鼠中HSP47随纤维化进展其表达亦显著升高,感染后第6、8、12周,HSP47及Ⅰ型胶原的表达量均显著高于正常对照小鼠(P均0.01),同血吸虫病肝纤维化患者的表达趋势一致。结论 HSP47在日本血吸虫病肝纤维化患者和日本血吸虫病动物模型肝组织中表达均上调,且随Ⅰ型胶原、CTGF、TGF-β1增多呈相同趋势,其有望成为肝纤维化新的诊断标志和治疗靶点。     

犬心房颤动模型缝隙连接蛋白40、45与心肌纤维化的相关性

目的 心房颤动(房颤)的发生及维持机制与心房结构重构和电重构有关.缝隙连接蛋白(connexin,Cx)是心肌闰盘的重要组成结构.一旦Cx出现重构,可影响心肌细胞电传导的极性,出现传导阻滞或折返,引发心律失常.实验通过快速心房起搏建立房颤模型,观察其对心房Cx40和Cx45及心房心肌纤维化的影响,并对两者相关性进行研究.方法 16只健康杂种犬随机分为模型组和对照组,2组犬均在X线下置入心房"J"型电极于右心耳,模型组予以400次/min快速起搏,而对照组维持窦性心律.连续起搏10周,分别在2、4、6、8周检测肢导联心电图.对于10周后未出现房颤的犬予以房颤诱发.实验结束后,取左心房组织制备心肌组织切片.Masson染色观察心房心肌胶原改变,电镜观察心房心肌超微结构及闰盘改变,放射免疫法测定血清中Ⅲ型前胶原氨基端肽和Ⅳ型胶原,免疫组化法检测Cx40及Cx45的表达.结果 模型组在快速起搏10周后均未出现自发性房颤,但其中有2只犬分别出现心房扑动和房性早搏,模型组和对照组予以Burst刺激后,模型组房颤诱发率可达66.7%,而对照组均正常.与对照组相比,模型组心房心肌胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF)增加(P＜0.05),尤以心内膜和心房肌细胞间质纤维化明显.电镜下,模型组心房肌细胞超微结构可见肌纤维紊乱、断裂,胶原纤维增生,闰盘结构扭曲、扩张,部分闰盘缝隙消失.模型组血清中Ⅲ型前胶原氨基端肽和Ⅳ型胶原水平较对照组显著增高(P＜0.05);模型组心房心肌Cx40表达较对照组增加(P＜0.05),而Cx45蛋白改变二组差异无统计学意义(P＞0.05).将心房心肌组织CVF与Cx40行相关性分析,结果显示CVF与Cx40呈正相关(r=0.671).结论 犬心房快速起搏能诱导左心房组织心肌纤维化和Cx40表达增加,但对Cx45无影响,同时发现Cx40的改变程度受心房心肌纤维化程度的影响.

Abstract：

Objective Electrical and structural remodeling are of importance for the occurrence and maintenance of atrial fibrillation. We observed association between atrial connexin protein expression and fibrosis in a canine model of prolonged rapid atrial pacing. Methods "J"-type electrodes were placed in the right atrial appendage under the guidance of X-ray in 16 dogs, Animals in model group ( n = 8) received fast pacing (400 beats/min ) for 10 weeks while animals in control group (n =8) maintained at sinus rhythm.Limb-lead ECGs were recorded at 2,4,6,8 weeks respectively. Burst stimulation was applied to induce atrial fibrillation in all animals after 10 weeks, animals were sacrificed thereafter and the left atrial tissues were taken for myocardial collagen measurement ( Masson staining) and myocardial ultrastructure examination and detection of protein expression of connexin ( Cx ) 40 and 45 ( immune staining). Procollagen type Ⅲ N-terminal peptide and type Ⅳ collagen in serum were also detected by radioimmunoassay. Results Two dogs died in model group due to atrial rupture induced cardiac tamponade or lung emboli. Spontaneously atrial fibrillation was not observed in all animals, but two dogs developed atrial flutter and atrial premature beats. Atrial fibrillation was induced by burst stimulation in 4 out of 6 dogs in model group and in none of the dogs in control group. Atrial myocardial collagen volume fraction was significantly increased in model group compared with the control group (P ＜ 0. 05). Ultrastructure examination in atrial tissue evidenced disorder,fracture,collagen fiber proliferation, mitochondrial swelling, blurred cristae, and intercalated disc distortion,expansion, part of gap junction disappears in model group. The serum levels of procollagen type Ⅲ N-terminal peptide and type Ⅳ collagen in model group were significantly higher than in the control group ( P ＜ 0. 05 ). The protein expression of Cx40 in atrial myocardium in model group was significantly higher than in control group (P ＜ 0. 05 ), while Cx45 protein expression was similar between two groups (P ＞0. 05). The left atrial CVF was positively correlated with Cx40 ( r = 0. 671, P ＜ 0. 01 ). Conclusion Increased myocardial fibrosis is positively correlated with upregulation of myocardial Cx40 protein expression in left atrium in rapid atrial paced canine.     

热休克蛋白60与心房颤动的关系

目的探索心房颤动(简称房颤)与氧化应激的关系。方法以住院行心脏换瓣手术的病人作为研究对象,按患者心律分为房颤组(n=22)和对照组(n=20),对照组为窦性心律。所有研究对象的心房肌组织样本,均作病理形态学观察,并用免疫组织化学法检测其热休克蛋白60(HSP60)表达;用乳胶增强免疫比浊法测定其血清C-反应蛋白(CRP)水平。结果房颤病人的心肌细胞肥大与间质纤维化程度都比对照组明显。HSP60表达阳性率房颤组高于对照组(68.2%vs 25.0%),灰度值房颤组低于对照组(157.69±16.00 vs 178.69±28.63)。血清CRP含量房颤组高于对照组(20.72±17.92 mg/L vs 6.80±6.26 mg/L,P均<0.05)。结论氧化应激与房颤关系密切。     

慢性心力衰竭患者心肌HSP47表达及其与某些因素的相关性

目的 探讨慢性心力衰竭患者心肌热休克蛋白47（HSP47）的表达及其与某些因素的相关性。方法 60例手术患者,采用实时荧光定量（RT-PCR）方法 检测心肌HSP47的mRNA表达量。结果HSP47mRNA在慢性心力衰竭患者中均有表达,且随心功能的下降HSP47表达升高。①慢性心力衰竭患者心肌HSP47与左室舒张末期内径呈独立、显著的正相关（r=0.785,P<0.05）,与左室射血分数呈负相关（r=-0.804,P<0.05）;②HSP47与年龄、血脂等无相关关系。结论 慢性心力衰竭患者心肌HSP47表达随心功能下降而升高,与左室舒张末期内径呈正相关,而与左室射血分数呈负相关。     

热休克蛋白与心肌保护研究进展

热休克蛋白与心肌保护研究进展上海市东方医院心胸外科陈国涵综述上海第二医科大学附属仁济医院朱洪生审校现代医学认为除了早期恢复冠脉血流外，其它方法几乎不能挽救由于心肌缺血造成的心肌损害［１］。八十年代始应用冠脉内溶栓、冠脉成形术或冠脉搭桥术，使缺血区心肌...     

热休克蛋白22与心肌保护

热休克蛋白22是小分子热休克蛋白亚家族中的成员之一，广泛分布于哺乳动物的各种组织中，如心脏和骨骼肌等，分子量为21．6kD。近来研究发现，热休克蛋白22可通过促进细胞存活，抑制细胞凋亡，参与糖代谢及分子伴侣样作用，对缺血缺氧等应激损伤的心肌细胞具有显著保护作用。     

大鼠急性脊髓损伤热休克蛋白47的表达变化

目的 研究老年大鼠急性脊髓损伤(SCI)中热休克蛋白47(HSP47)的表达情况.方法 用54只Wistar大鼠制作钳夹型SCI模型,在SCI后3 d及每周评价BBB评分,并在1、3、5 w用免疫组化方法 分析脊髓中HSP47的表达情况.结果 正常Wistar大鼠脊髓组织低表达HSP47,在SCI后表达明显提高,且在第5周仍有上升趋势(P＜0.01).脊髓损伤后灰质、白质分界不清,细胞凋亡明显,HSP47主要在血管及靠近软脊膜处白质中表达.结论 老年Wistar大鼠SCI 后HSP47表达增加,HSP47可能参与到SCI的病理改变过程中.     

热休克蛋白与心房颤动时的心房重构

心房颤动(简称房颤)引起细胞应激导致心房重构包括离子通道下调、结构改变(如细胞凋亡)和收缩功能障碍等。热休克蛋白由一系列蛋白家族组成的细胞保护蛋白,可以通过结合未折叠蛋白抑制毒性蛋白的聚集和影响信号传导途径,对应激损伤细胞起保护作用。研究发现热休克蛋白与心房电重构、结构重构以及炎症和免疫有关。热休克蛋白诱导剂可能对房颤发生有抑制作用,此外,热休克蛋白可能与房颤时的神经重构有关。