杞蓟制剂对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织TNF-α蛋白表达的影响

目的：观察杞蓟制剂对大鼠非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis，NASH）肝组织肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor，TNF-α）蛋白表达的影响，探讨其作用机制。方法：采用高脂饮食复制大鼠NASH模型。实验分正常对照组、模型组、杞蓟制剂组、复方蛋氨酸胆碱片对照组。观察动物一般情况。计算肝指数、肝组织细胞脂肪变性、炎症活动程度，测定血清丙氨酸转氨醇（ALT）、天门冬氨酸转氨酶（AST）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TCH）等指标。结果：与模型组相比，杞蓟制剂预防给药明显改善NASH大鼠肝指数、肝组织脂肪变程度、炎症活动程度及血清ALT、AST、TG、TCH等指标（P〈0．01或P〈0．05），同时明显降低肝组织TNF-α蛋白表达（P〈0．05），优于复方蛋氨酸胆碱片对照组（P〈0．05）。结论：杞蓟制剂抑制TNF-α蛋白在肝组织表迭是其防治NASH的重要机制。     

杞蓟制剂对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织核转录因子-kB／IkB的影响

目的 观察非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝组织P65（NF-kB亚型）、核转录因子-kB抑制因子（IkB）-α（IkB亚型）蛋白和mRNA表达情况及杞蓟制剂对其影响。方法 采用高脂饮食复制大鼠NASH模型。实验分正常组对照、模型组、杞蓟制剂组、复方蛋氨酸胆碱片组。测定肝组织P65、IkB—α蛋白和mRNA的表达。结果与正常组相比，模型组大鼠肝组织P65、IkB—蛋白和mRNA表达明显增强（P〈0．01），且P65蛋白主要在胞核分布；与模型组相比，杞蓟制剂组大鼠肝组织P65、IkB—α蛋白和mRNA的表达明显降低（P〈0．05）。复方蛋氨酸胆碱片组大鼠肝组织P65、IkB-α蛋白和mRNA的表达虽有所降低，但与模型组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 NF—kB蛋白和mRNA表达增强及NF-kB蛋白活化增强参与了NASH的发病。杞蓟制剂能够抑制NF-kB（P65）蛋白和mRNA的表达，从而能防治NASH。     

枳黄方对急性酒精性肝病大鼠TNF-α和内毒素的影响

目的：通过观察枳黄方对大鼠急性酒精性肝损伤肝组织TNF—α的变化及其血浆内毒素水平的改变，验证此方对大鼠急性酒精性肝病的防治作用。方法：将75只Wistar大鼠随机分为枳黄方组、模型组及正常组，采用免疫组化法测量肝组织内TNF—α值，用生化法检测血浆内毒素水平。结果：枳黄方组大鼠血浆内毒素水平高于正常组（P〈0．05），但显著低于模型组（P〈0．01），肝组织TNF-α和血清ALT水平高于正常组（P〈0．01），但显著低于模型组（P〈0.01）。并且血浆内毒素水平与肝组织TNF—α活性变化呈正相关（r=0．993，P〈0．01）。结论：枳黄方合剂可显著降低急性酒精性肝病大鼠血液中内毒素水平及肝脏中TNF-α水平，对大鼠急性酒精性肝病有较好治疗作用。     

华夏小葱制剂对脂肪肝大鼠一氧化氦、一氧化氦合酶及血管内皮生长因子的影响

目的：探讨华夏小葱制剂对大鼠脂肪肝的防治作用及其机制。方法：SD大鼠分为空白对照组，模型对照组，华夏小葱制剂低、中、高剂量组，东宝肝泰片组共6个组。空白对照组大鼠用普通饮食及普通水喂养；其他组用高脂饮食及酒精水喂养，并且每周一次行后肢皮下注射四氯化碳色拉油溶液建立大鼠脂肪肝模型。华夏小葱制剂低、中、高剂量组及东宝肝泰片组大鼠分别给予相应剂量的华夏小葱制剂或东宝肝泰片混悬液。8周后处死各组大鼠。采用全自动生化分析仪测定血浆中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）含量，一氧化氮（NO），一氧化氮合酶（NOS），RT-PCR法测血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的含量。结果：大鼠血浆TC、TG值，肝组织NO、NOS值及VEGF值各组比较，模型对照组显著高于空白对照组（P〈0．01），华夏小葱制剂低、中、高剂量组及东宝肝泰片组均显著低于模型对照组（P〈0．05或P〈0．01）。结论：华夏小葱制剂具有降低TG、TC，改善活性氮的作用，其治疗脂肪肝的机制可能与减少细胞因子损伤有关。     

虫草菌丝对非酒精性脂肪肝病大鼠肝细胞凋亡的作用及其相关机制

目的（1）证实肝细胞凋亡的异常增多存在于非酒精性脂肪性肝病中。（2）观察虫草菌丝对肝细胞凋亡异常增多的影响，并探讨可能的分子机制。方法通过高脂饮食建立大鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的模型，同时设立正常饮食对照组，病理对照组（NASH组），虫草菌丝干预组（CS组）。肝组织切片HE染色观察肝脏病理改变；检测肝组织超氧化物歧化酶（SOD）活性；TUNEL检测肝组织肝细胞凋亡情况；免疫组织化学染色观察肝组织Bax、Bcl-2、Caspase-3、NF-κB P65蛋白表达情况。结果（1）与正常对照组相比，病理对照组大鼠肝组织广泛弥漫肝细胞脂肪变性，炎性细胞浸润、坏死、局部有纤维组织增生；肝脏SOD活性显著降低（P〈0．01）；TUNEL法检测肝细胞凋亡显著增多（P〈0．01）；免疫组化染色显示Bax、Caspase-3蛋白表达增加（P〈0．01），而Bcl-2无显著变化（P〉0．05）；（2）与病理对照组相比，虫草菌丝组大鼠肝组织有广泛肝细胞脂肪变性，炎性细胞浸润，可见灶性及点状坏死，未见纤维组织增生；肝组织SOD活性高于病理对照组（P〈0．05）；TUNEL法检测凋亡的肝细胞显著减少（P〈0．01）；免疫组化染色显示Bax、Caspase-3蛋白表达也明显降低（分别为P〈0．05、P〈0．01），而Bcl-2、NF-κB P65蛋白表达增加（P〈0．01）。结论（1）NASH时肝细胞凋亡异常增多。（2）虫草菌丝可以通过增加超氧化物歧化酶（SOD）活性来减少活性氧含量，降低Bax表达，增加Bcl-2表达和活化NF-κB P65减轻NAFLD中肝细胞凋亡从而在一定程度上具有保护肝脏功能的作用，对延缓或阻止脂肪肝病变的进展起到一定的作用。     

非酒精性脂肪性肝炎患者肝组织NF-кβ的表达及其意义

目的探讨核因子κβ（NF-κβ）在非酒精性脂肪性肝炎（NASH）患者肝组织中的表达状况及在发病机制中的意义。方法应用免疫组化方法检测41例不同病变程度NASH患者肝组织NF-κβ表达，分析其与NASH患者肝组织病理改变以及血清TNF-α、胰岛素抵抗（IR）之间的关系，并与39例酒精性脂肪肝、50例NASH合并慢性乙型肝炎（CHB）患者进行比较。结果与正常人肝组织中NF-κβ（1．13±0．05）表达比较，NASH（5．09±1．30）、酒精性脂肪肝（4．07±1．54）和NASH合并CHB（6．40±1．41）患者表达均明显增强（P〈0．05）；在NASH肝组织中，NF-κβ表达于肝脂肪变区及炎症活动区的肝窦壁细胞及炎细胞中，其阳性表达随肝脏炎症损伤程度和纤维化程度的加重而增加（P〈0．05），与血清TNF-α水平和IR成正相关（P〈0．05），而与脂肪变程度无明显相关性（P〉0．05）。结论不同类型的脂肪性肝病均存在胰岛素抵抗和肝组织NF-κβ的活化，NF-κβ的活化是非酒精性脂肪肝胰岛素抵抗持续进展的一个重要机制。     

肝泰对高脂饮食诱导的大鼠脂肪肝保护作用的研究

目的探讨肝泰对实验性脂肪肝的保护作用及其可能机制。方法SD雄性大鼠53只，随机分为4组，即模型组（n=15）、肝泰组（n=15）、易善复对照组（n=15）、正常对照组（n=8）。利用高脂饮食建立大鼠脂肪肝模型，肝泰组给予肝泰（755mg/kg）干预，易善复对照组给予易善复（550mg／kg）干预，10周后处死所有大鼠。采用光镜及电镜观察肝脏组织学改变，检测大鼠血清总胆同醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）、肝组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）及免疫组化法检测肿瘤坏死因子（TNF-α）在肝组织中表达。结果病理所见：模型组出现重度水变性和脂肪变性及点、灶状坏死；肝泰组未见重度水变性和脂肪变性，可见极少数点状坏死。肝泰组肝组织TNF-α与模型组肝组织TNF-α比较，肝泰组TNF-α蛋白含量显著减少（P〈0．05）。肝泰组血浆TC和肝匀浆GSH与模型组比较，肝泰组血浆TC较模型组显著减低，肝泰组GSH比模型组显著升高，均有显著性差异（P〈0．05）。结论肝泰对实验大鼠脂肪肝有保护作用。     

腺苷蛋氨酸对酒精性肝损伤大鼠甲硫氨酸代谢和脂质过氧化的影响

观察腺苷蛋氨酸（S-adenosylmethionine，SAM）对酒精性肝损伤大鼠的防治作用及机制。48只SD大鼠随机分为4组（每组12只）：正常对照组、模型组、腺苷蛋氨酸低及高剂量组。除对照组外，其余三组给予酒精、鱼油灌胃配合高脂饮食构建酒精性肝损伤大鼠模型，造模4周后腹腔注射SAM，第8周处死全部大鼠。测定血浆总同型半胱氨酸（total plasma homocysteine，tHcy）、血清丙氨酸转移酶（ALT）、甘油三酯（TC）、总胆固醇（TG）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子（TGF-β）水平、肝匀浆丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘肽（GSH）含量，及肝组织病理学检测。与对照组比较，模型组大鼠tHcy、ALT、TC、TG、TNF-α、TGF—β、MDA含量均明显升高（P〈0．01）；GSH水平降低（P〈0．01）。与模型组比较，SAM治疗组ALT、TC、TG、MDA（P〈0．01）和TNF-α、TGF—β明显降低（P〈0．05），GSH含量升高（P〈0．01），但血浆tHcy水平无显著变化（P〉0．05）。SAM低、高剂量组各项指标间比较无明显差别（P〉0．05）。SAM可明显改善大鼠酒精性肝损伤，其机制可能与其降低肝组织脂质过氧化、并与抗免疫炎性因子和抗增殖有关。     

非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织Bcl-2和Bax的表达及其意义

目的探讨凋亡调控蛋白Bel-2和Bax表达在大鼠非酒精性脂肪性肝炎发病中的作用。方法将20只Wistar大鼠随机分为普通饲料喂养组（正常组）和高脂饲料喂养组（模型组）,连续喂养12周后,测定血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）,观察肝组织病理学变化和炎症活动度计分,采用westem blot法检测肝组织Bcl-2和Bax的表达。结果模型组大鼠肝小叶内肝细胞呈弥漫性脂肪变,伴大量炎性细胞浸润及散在性点状坏死;模型组动物肝组织Bax蛋白表达较正常组显著性升高（1．02±0．33对0．51±0．03,P〈0．01）,而Bel-2蛋白较正常组则明显下降（0．15±0．31对0．52±0．01,P〈0．01）,Bel-2／Bax比值降低（0．14±0．01对1．03±0．06,P〈0．01）。结论凋亡调控蛋白Bel-2和Bax的表达变化可能参与了NASH的发生和发展过程。     

枳黄方对急性酒精性肝损伤大鼠内毒素信号转导通路中白细胞分化抗原14的影响

[目的]探讨酒精性肝损伤时，枳黄方对内毒素信号通路中白细胞分化抗原14（CD14）表达的影响。[方法]将75只Wistar大鼠随机分为空白对照（正常）组、酒精攻击（模型）组、枳黄方（治疗）组，10d后，处死大鼠，取大鼠血清和肝脏测定丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST），苏木精-伊红染色观察肝脏病理变化，基质染色法测定血清内毒素，免疫组化法测定肝脏肿瘤坏死因子α（TNF-α），RT—PCR法测定肝组织CD14mRNA的变化。[结果]治疗组肝脏病理表现较模型组好，其血清内毒素、ALT、AST和肝组织TNF-α、CD14mRNA表达水平均高于正常组（P〈0．05，〈0．01，〈0．01，〈0．01，〈0．05），且均显著低于模型组（均P〈0．01）。[结论]枳黄方能显著降低内毒素信号转导通路上CD14基因水平的表达，减少肝组织TNF-α的表达，这可能是其对大鼠酒精性肝损伤有较明显保护作用的机制之一。     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.