内源性硫化氢与阴茎勃起

内源性硫化氢(H2S)是继一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO)之后发现的第3种气体信号分子,通过胱硫醚-β-合成酶(CBS)和胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)途径合成或产生。它通过直接作用于KATP通道、减少细胞外Ca2+的内流及与睾酮、NO、CO协同作用等方式来舒张阴茎海绵体血管平滑肌,改善血管舒张功能;还可抑制血管平滑肌细胞增殖,促进其凋亡,改善血管重构。因此,深入研究H2S在阴茎勃起调节中的作用,可为治疗勃起功能障碍(ED)提供新的途径。     

糖尿病大鼠阴茎海绵体硫化氢含量及其合成酶表达的变化

目的 观察糖尿病大鼠及非糖尿病大鼠阴茎海绵体组织中硫化氢(H₂S)含量及胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)表达的差异。 方法 将Wistar大鼠随机平均分为两组,一组高脂饲料喂养8周后,注射链脲佐菌素(STZ)制备2型糖尿病大鼠模型(糖尿病组),另一组普通饲料喂养(对照组)。继续喂养12周后分离两组大鼠海绵体组织,检测海绵体组织内源性H₂S的生成;采用RT- PCR法检测两组海绵体组织中CSE mRNA的表达;采用Western blotting法检测两组CSE蛋白的表达。 结果 糖尿病组内源性H₂S浓度较对照组显著降低(P<0.01);糖尿病组海绵体组织中CSE mRNA和CSE蛋白的表达量均较对照组显著降低(P<0.01)。 结论 糖尿病大鼠阴茎海绵体H₂S含量显著降低,其机制可能与CSE mRNA及蛋白水平表达减少有关。     

内源性硫化氢在大鼠黑质氧化损伤中的变化及作用

目的 观察大鼠黑质氧化损伤后内源性硫化氢（hydrogen sulfide,H2S）的变化及其作用。方法 将SD雄性大鼠单侧黑质内微量注射6-羟基多巴胺（6-Hydroxydopamine,6-OHDA）作为黑质氧化损伤模型;H2S供体硫氢化钠（sodium hydrosulfide,Na HS）在6-OHDA损伤前连续腹腔注射3周作为预处理;实验分为对照组、6-OHDA损伤后7 d（D7组）、11 d（D11组）、17 d组（D17组）、Na HS预处理组（Na HS＋6-OHDA处理）,每组各8只;采用亚甲基蓝分光光度计法检测黑质胱硫醚-β-合酶（cystathionine-β-synthase,CBS）活性及H2S的含量;免疫组织化学法检测黑质酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）阳性细胞数;紫外分光光度法测定黑质谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活性和丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平。结果 与对照组比较,6-OHDA损伤后7、11、17 d黑质CBS酶活性分别下降为[（96.21±8.40）%,P〉0.05],[（86.48±9.85）%,P〈0.05]和[（75.16±7.45）%,P〈0.01];内源性H2S含量分别减少为[（90.12±10.03）%,P〈0.05],[（82.58±9.52）%,P〈0.01]和[（78.16±11.55）%,P〈0.01]。TH阳性细胞与对照组比较,在6-OHDA损伤后7 d即下降为[（84.32±6.06）%,P〈0.05],同时伴随黑质GSH-Px活性降低及MDA含量升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。但早期给予Na HS预处理补充H2S之后,与单纯6-OHDA损伤后7 d比较,TH阳性细胞则增加为[（96.15±5.03）%,P〈0.05],且黑质GSH-Px的活性升高,MDA的含量降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 6-OHDA氧化损伤导致大鼠黑质CBS酶活性及H2S含量下降,外源性H2S预处理可早期发挥抗黑质氧化损伤的神经元保护作用,这可能与其增加GSH-Px活性及减少MDA含量有关。     

活细胞硫化氢检测新方法

目的:建立测定活细胞释放微量硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)的简易方法。方法:在细胞培养板盖上方黏附滤膜,细胞释放的硫化氢与滤膜上的醋酸锌反应产生硫化锌,采用亚甲基蓝分光光度法测定并计算细胞释放的硫化氢的量。应用该方法分别检测了HepG2细胞和人脐静脉内皮细胞硫化氢的释放量。结果:HepG2细胞添加L-半胱氨酸以及辅酶磷酸吡哆醛后,继续培养12 h,H2S释放量为(859.39±19.12)nmol/(min.106cells);给予胱硫醚-γ-裂解酶抑制剂炔丙基甘氨酸(DL-propargylglycine,PAG)后,H2S产率下降到(341.34±105.90)nmol/(min.106cells);胱硫醚-β-合酶抑制剂间羟胺处理后,H2S产率下降到(375.05±174.50)nmol/(min.106cells);两种酶抑制剂联合使用后H2S释放量显著抑制,为(204.47±97.14)nmol/(min.106cells)。人脐静脉内皮细胞也可内源性产生H2S,HUVEC细胞H2S的释放量为(26.23±3.24)nmol/(min.106cells),约为HepG2细胞产量的1/30。台盼蓝检测细胞活性大于95%,细胞生长状态良好,表明该方法无细胞毒作用,细胞可根据实验需要继续培养。结论:滤膜吸附法简便易行、实用可靠,可应用于活细胞释放硫化氢的测定。     

小鼠脑外伤后内源性硫化氢体系的变化

目的 :探讨小鼠脑外伤(traumatic brain injury,TBI)后内源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)体系的变化。方法:利用改良的自由落体装置建立小鼠TBI模型,使用亚甲基蓝法检测血浆及脑组织中内源性H2S浓度。Western Blot技术观察内源性H2S合成酶胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-beta-synthase,CBS)在小鼠TBI后不同时间(1 h、6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、7 d)的表达变化。结果 :脑组织内源性H2S浓度在小鼠TBI血清、脑皮质及海马组织中变化趋势一致,呈先降低后升高。TBI后大脑皮质和海马组织CBS表达随着外伤时程的延长逐渐降低。结论:内源性H2S在TBI的病理生理过程中起着重要的作用。     

肾移植后阴茎勃起功能评价

目的：评价肾移植后男性患者的阴茎勃起功能。方法：应用勃起功能国际问卷表（IIEF－5），对120例肾移植男性患者勃起功能进行评价。结果：收回有效问卷96份（80％），慢性肾功能衰竭男性患者ED发生率为69．79％，肾移植后ED的发生率为42．71％，明显低于维持血液透析的患者（P＜0．01）；肾移植后78．13％的病人存在性心理障碍。结论：心理障碍、年龄因素和透析时间与勃起功能障碍密切相关。     

内源性硫化氢--一种新型气体信息分子

硫化氢(H2S)因被描述为特征性的“臭鸡蛋味”而闻名，并一亢被认为是毒性气体，有关其毒性的研究已有儿百年。自20世纪90年代以来的研究发现，内源性产牛的H2S存在于哺乳动物的多种组织、器官，通过多种调节方式和信号转导形式发挥多种生理、病理作用：松弛血管及消化道平滑肌进而影响该组织的生理功能和病理过程；     

硫化氢和同型半胱氨酸在动脉粥样硬化病变中的研究现状

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)性病变是目前世界上心血管疾病的发生率与死亡率高的首位原因,严重危害人们的生命健康安全。动脉粥样硬化主要累及大中动脉,是一种慢性复杂的累进型病理过称。高同型半胱氨酸血症(Hyperho-mocysteinemia,HHcy)是动脉粥样硬化形成的独立危险因子,它可以通过转硫基作用等转化成硫化氢,但是其致病机制尚未完全阐明。近年来,硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)因其在心血管健康和内稳态调节平衡方面的诸多积极性作用而受到重要关注。新近研究发现H2S在动脉粥样硬化病变过程中发挥重要作用。AS的发生发展与同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)和H2S存在一定的内在联系,本文拟对此方面的研究和认识作一综述。     

夜间阴茎勃起试验检测80例阴茎勃起功能障碍的临床分析及意义

目的提高对心理性ED和器质性ED的鉴别诊断水平,并分析其发病率与年龄的相关性。方法将夜间勃起监测仪的Holter固定于大腿根部,传感器袖带缠绕阴茎根部,连续测2～3个晚上。结果80例门诊ED患者中心理性ED53例,占66.25%,器质性ED27例,占33.75%。结论随着年龄的增长,心理性ED患病率明显降低,而器质性ED相对于同龄组心理性ED有上升趋势;从就诊年龄的构成比来看,青年人就诊率明显高于老年人;利用夜间阴茎勃起试验NPT监测仪检测,能够准确诊断出是心理性ED还是器质性ED,为进一步检查或治疗提供了重要依据。     

阴茎勃起功能障碍的流行病学及勃起生理学研究进展

阴茎勃起功能障碍 (ＥＤ)是临床男科学中最常见的疾病之一 ,其病因复杂 ,发病率亦报道不一。近年来随着男科学的深入发展 ,有关ＥＤ的流行病学、生理学、病理生理学的研究取得长足进展 ,使得对男子性功能障碍有了较好的理解。1　ＥＤ的流行病学1.1　ＥＤ的发生率与发病率　因对ＥＤ理解不同 ,ＥＤ的流行病学研究有不同结论。同时 ,信息采集的时间段和调查的人口数亦影响流行病学评估。早在 1948年Ｋｉｎｓｅｇ等首次对美国 15 781名 10～ 80岁男子性功能进行报道 ,认为小于 30岁男子ＥＤ发生率 <1% ,小于 45岁 <3% ,45～ 5 5岁为 6 .7% ,6 5…     

夜间阴茎勃起试验检测80例阴茎勃起功能障碍的临床分析及意义

目的提高对心理性ED和器质性ED的鉴别诊断水平,并分析其发病率与年龄的相关性.方法将夜间勃起监测仪的Holter固定于大腿根部,传感器袖带缠绕阴茎根部,连续测2～3个晚上.结果80例门诊ED患者中心理性ED 53例,占66.25%,器质性ED 27例,占33.75%.结论随着年龄的增长,心理性ED患病率明显降低,而器质性ED相对于同龄组心理性ED有上升趋势;从就诊年龄的构成比来看,青年人就诊率明显高于老年人;利用夜间阴茎勃起试验NPT监测仪检测,能够准确诊断出是心理性ED还是器质性ED,为进一步检查或治疗提供了重要依据.     

硫化氢在膀胱癌细胞株的作用试验研究

目的:探讨硫化氢在膀胱癌细胞株中的作用与相关机制。方法:选用膀胱肿瘤T24细胞株30瓶,随机分三组,每组10瓶,一组经正常繁殖(作为对照组),一组在繁殖的同时采用同一浓度的硫氢化钠刺激(A组),第三组各瓶细胞分别采用0.0001~0.5 mmol/L浓度的硫氢化钠刺激(B组)。结果:B组随着硫氢化钠浓度的增加,膀胱肿瘤T24细胞的OD(吸光度,Opticaldensity)值也在增加,在不同浓度之间对比差异有统计学意义(P<0.05)。A组的CSE蛋白表达水平明显高于对照组,A组的CSEmRNA表达水平明显高于对照组,对比差异都有统计学意义(P<0.05)。结论:硫化氢在膀胱癌细胞株的应用能增强肿瘤细胞的增殖,其作用的发挥与增强CSE的表达有关。     

硫化氢在炎症反应中的作用研究进展

硫化氢(H2S)对有机体的毒性早在300多年前即被人们发现,至今,它仍被认为是一种有毒的环境污染气体,即使微小的剂量也能导致明显的病理生理作用[1]。H2S是一种小分子质量脂溶性的气体分子,可以自由渗透入细胞膜发挥生物效应,因此,其毒性作用范围广,可影响肺、脑、肾等多种器官     

阴茎夜间勃起电阻抗容量测定仪在阴茎勃起功能障碍诊断中的应用评估

夜间阴茎勃起(NPT)是鉴别心理性和器质性勃起功能障碍(ED)的重要方法之一。夜间勃起电阻抗容量测定仪(NEVA)是美国AMS公司最新的NPT检测装置。我科从2000年6月～2002年5月测试患者70例,现报告如下。1 资料和方法1.1 一般资料     

海洛因成瘾大鼠硫化氢/胱硫醚β-合酶体系的变化

目的观察海洛因成瘾对大鼠硫化氢(hydrogen sulfide,H2 S)/胱硫醚β-合酶(cystathionine-β-synthase,CBS)体系产生的影响。方法实验大鼠分成健康对照组、heroin组、heroin+硫氢化钠(NaHS)组,每组10只。heroin组、heroin+NaHS组按剂量递增原则皮下注射海洛因9 d,对照组按同样方式注射等量生理盐水,heroin+NaHS组在每次注射海洛因前30 min腹腔注射NaHS,第10天纳洛酮腹腔注射观察戒断症状。采用亚甲基蓝比色法测定大鼠血浆及海马组织H2S含量,Real-time PCR检测海马组织CBS mRNA表达量。结果 heroin组与健康对照组比较,血浆及海马H2 S含量均明显降低(P<0.05),CBS mRNA表达量显著增高(P<0.05);heroin+NaHS组与健康对照组比较,海马H2S含量明显降低(P<0.05);heroin+NaHS组与heroin组比较,血浆及海马H2S含量明显增高(P<0.05),CBS mRNA表达量明显降低(P<0.05)。结论海洛因依赖可导致大鼠体内H2S水平下降,内源性H2S与CBS之间存在负反馈调节作用,使内源性H2S维持在生理浓度水平。     

肠道硫化氢合成酶CSE与糖尿病大鼠结肠动力的相关研究

目的：探讨肠道硫化氢（H2 S）合成酶胱硫醚‐γ‐裂解酶（CSE）与糖尿病（DM ）大鼠近端结肠动力的关系。方法一次性腹腔注射1％链脲佐菌素（STZ）65 mg／kg ,建立1型糖尿病模型,观察大鼠的一般情况;注药第10天制作结肠平滑肌纵行肌条,使用生物机能实验系统记录每组纵行肌肌条自发性收缩活性;分别采用免疫组化及双重免疫荧光的方法观察结肠全层标本及肌间神经丛（M P）中CSE分布;采用Western blot方法观察肠道组织（去黏膜及黏膜下层）CSE的表达。结果 DM组近端结肠肌条收缩活性均低于对照组（P＜0．05）;CSE在黏膜下层、黏膜下神经丛、MP、纵行肌和环形肌都有分布;CSE在大鼠肌间神经元细胞核中分布,但CSE阳性神经元所占MP比例差异无统计学意义（P＞0．05）;DM组大鼠结肠（去除黏膜及黏膜下层后）CSE的表达上调（P＜0．05）。结论 CSE表达上调可能是DM大鼠近端结肠运动减退的原因之一。     

高原肺动脉高压大鼠硫化氢／胱硫醚-γ-裂解酶体系的变化

目的探讨气体信号分子H2S及其生成酶胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）在大鼠高原性肺动脉高压形成中的作用及其动态变化规律。方法60只雄性Wister大鼠,随机抽取10只大鼠作为低海拔对照组,其余50只为高原组。高原组大鼠在到达海拔4617m的第1、3、7、15、30d不同时间采集血浆及肺组织标本,采用右心导管法测定肺动脉压、敏感硫电极法测定血浆H,S浓度、酶促反应法测定肺组织CSE转化率、Western blot方法检测CSE在蛋白中的表达。结果大鼠第1d到达高原时,各项观察指标无明显变化;到达高原第3d时肺动脉压（18．12±3．34mmHg）无明显变化,而血浆H2S和CSE转化率明显增高;大鼠在高原7d时可形成肺动脉高压[（30．31±4．05）mmHg];随着高原低压低氧和大鼠肺动脉高压的持续,血浆H2S浓度、肺组织CSE转化率及蛋白表达逐渐下降,15d组和30d组与其他各组比较差异均有统计学意义。结论在高原暴露早期,内源性H2S／CSE体系上调而肺动脉压不增高,而在后期H2S／CSE体系下调且肺动脉压增高,提示内源性H2S体系可能与高原性肺动脉高压形成有关,并起着保护作用。     

慢性缺氧对大鼠阴茎勃起功能的影响

目的探讨慢性缺氧与大鼠阴茎勃起功能障碍(ED)之间的相互关系及其可能的致病机理。方法48只白色雄性成年SD大鼠随机分为对照组和实验组,每组按照实验时间(2周、6周、10周)再分为三个亚组,每个亚组8只。其中实验组置于密闭低氧舱中制备低氧模型,对照组在正常环境中饲养,其他条件同实验组。于2周末、6周末、10周末分别取各组大鼠,观察其勃起功能,并采用免疫组化SP法检测大鼠阴茎组织中神经元性一氧化氮合酶(nNOS)染色阳性神经纤维的数量、内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)的表达。结果①实验组自身比较,大鼠缺氧前后勃起次数有显著性差异,缺氧后大鼠阴茎勃起次数比缺氧前明显减少(P<0.001)。②实验组与对照组比较,2周末、6周末、10周末阴茎组织中nNOS染色阳性神经纤维数量、eNOS蛋白的表达均有显著性差异(P<0.01)。实验组大鼠阴茎勃起次数6周明显低于2周,10周稍高于6周;阴茎组织中nNOS染色阳性神经纤维数量三个实验亚组间有显著性差异(P<0.01);eNOS的表达6周最低,10周有所回升。结论低氧影响大鼠阴茎勃起功能和nNOS、eNOS的表达。nNOS染色阳性神经纤维数量的减少、eNOS表达的下降,可能是低氧环境中大鼠ED发生的原因之一。     

反复热性惊厥前后硫化氢/胱硫醚-β-合成酶体系表达的改变

目的:研究反复热性惊厥(febrile seizures,FS)对发育期大鼠脑内硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)/胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase,CBS)体系表达的影响.方法:采用热水浴诱导大鼠反复热性惊厥.隔日诱导惊厥1次,共诱导10次.发育期大鼠随机分为对照组(N组, n=8)及10次热性处理组(n=22).10次热性处理组依其是否出现惊厥又分为10次高热组(H组, n=9)及10次热性惊厥组(FS组,n=8).10次热性处理组中虽出现惊厥但不足10次者用于其他实验.用亚甲基蓝法测定大鼠血浆H2S含量;用原位杂交和免疫组化法分别观察CBS基因和蛋白表达情况.结果:FS组大鼠血浆H2S含量明显高于对照组和高热组,FS组大鼠海马CBS基因和蛋白表达明显高于对照组和高热组.结论:反复热性惊厥可使大鼠血浆H2S含量升高,并可使大鼠海马CBS基因和蛋白表达增强.