产共轭亚油酸乳酸菌的选育和鉴定

采用紫外分光光度法测定共轭亚油酸的含量,从13株实验室保存的乳酸菌中筛选出8株具有转化亚油酸生成共轭亚油酸能力的菌株.其中As1.2686产量最高,发酵液中共轭亚油酸含量达到13.63 mg/L;其次是菌株B11693,共轭亚油酸产量为11.55 mg/L.选择B11693做进一步的菌种鉴定,将传统的形态学、生理生化鉴定方法和细菌16SrDNA分子生物学鉴定方法相结合,鉴定菌株B11693为短乳杆菌.     

混菌完整细胞生物合成共轭亚油酸的营养条件

以MRS作为基础培养基,采用单因素及正交试验对植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌的完整细胞共同合成共轭亚油酸的营养条件进行了研究。通过试验得到混菌完整细胞生物合成共轭亚油酸的最佳营养条件:MRS培养基,葡萄糖20g/L,蛋白胨15g/L,牛肉膏5g/L,酵母膏5g/L,无水乙酸钠7.5g/L,吐温-80 1.5g/L,柠檬酸二铵3g/L,K2HPO43.93g/L,MgSO40.58g/L,MnSO40.3g/L。在此条件下,共轭亚油酸的合成量为81.38μg/mL,比使用基础培养基时的合成量增加了11.34μg/mL。     

共轭亚油酸的制备及其组成分析研究

以葵花油为原料,研究了反应温度、时间、溶剂及KOH用量等诸因素对亚油酸转变为共轭亚油酸共轭化率的影响,得到了制备共轭亚油酸的最佳制备技术条件.制备的共轭亚油酸产品,经气相色谱分析测定共轭化率为95.1%,其中9c,11t-18∶2和10t,12c-18∶2活性共轭亚油酸异构体成分达86.4%以上.     

共轭亚油酸强化型乳制品的稳定性研究

通过牛乳液中添加共轭亚油酸（CLA）,分析杀菌温度、均质压力、乳化剂类型、CLA添加量对牛乳稳定性的影响.实验结果表明：脱脂乳中添加0.17%的CLA稳定性较好,口感纯正;当灭菌温度超过100℃时,CLA含量明显降低;以单苷酯、三聚苷酯和蔗糖酯的混合乳化剂,按1∶1∶2混合的乳液稳定性好;35MPa以上的均质压力下,乳液中的脂肪球细小,分布均匀,口感细腻。     

共轭亚油酸的三氟化硼-甲醇的衍生化条件优化

对共轭亚油酸进行三氟化硼-甲醇衍生化时,采用不同条件处理共轭亚油酸,常常导致共轭亚油酸的不完全和异构化,从而影响到分析的准确度.本文报道对化学合成共轭亚油酸的三氟化硼-甲醇衍生化方法实验研究.阐明三氟化硼在甲醇中的浓度、反应温度和反应时间对衍生化效果的影响.确定最佳衍生化条件：三氟化硼与甲醇的质量比为10：100、反应的温度为45℃、反应时间为30 min.     

植物乳杆菌在不同基质中转化生成共轭亚油酸的研究

将具有转化亚油酸能力的植物乳杆菌ZS2058分别接入脱脂奶、豆奶和番茄汁中,分别考察了亚油酸的添加量、亚油酸的添加方式和预培养对植物乳杆菌生长和转化亚油酸的能力的影响.结果表明,在脱脂奶中植物乳杆菌转化能力最强,在脱脂奶中该菌能将1 mg/mL亚油酸转化成152.05μg/mL共轭亚油酸.     

抗氧化剂对共轭亚油酸甘油酯氧化稳定性的影响

采用了强化氧化实验条件,以过氧化值为指标,研究了维生素C、维生素E、柠檬酸三钠、甘草抗氧化剂对共轭亚油酸甘油酯氧化稳定性的影响．由过氧化值的一元线性回归方程得出它们对共轭亚油酸甘油酯均有抗氧化作用,甘草抗氧化剂抗氧化效果最好．单独添加质量分数为0．5％VC、0．1％VE、0．05％柠檬酸三钠、0．7％甘草抗氧化剂时,共轭亚油酸甘油酯的氧化稳定性最好．     

抗氧化剂对共轭亚油酸甘油酯氧化稳定性的影响

采用了强化氧化实验条件,以过氧化值为指标,研究了维生素C、维生素E、柠檬酸三钠、甘草抗氧化剂对共轭亚油酸甘油酯氧化稳定性的影响.由过氧化值的一元线性回归方程得出它们对共轭亚油酸甘油酯均有抗氧化作用,甘草抗氧化剂抗氧化效果最好.单独添加质量分数为0.5%VC、0.1%VE、0.05%柠檬酸三钠、0.7%甘草抗氧化剂时,共轭亚油酸甘油酯的氧化稳定性最好.     

微生物共轭亚油酸异构酶的生物学研究

在各种共轭亚油酸异构体中,c9,t11-18∶2和t10,c12-18∶2这两种天然不饱和脂肪酸异构体被认为具有生物活性,如抗癌、抗动脉粥样硬化、减肥、促进生长、缓和免疫反应副作用等,因而在医药、食品、保健品、化妆品等领域有着广阔的应用前景.一些微生物能产生共轭亚油酸异构酶(Conjugated linoleic acid isomerase,EC 5.2.1.5),该酶又能专一性地催化亚油酸转化为活性共轭亚油酸异构体的反应,因此近几年来倍受关注,利用生物合成法生产共轭亚油酸已成为该领域未来的发展趋势.然而目前,共轭亚油酸异构酶的物种分布及进化关系、在细胞中的生物学功能、结构域、催化反应机理等尚未得到完整的阐释,利用基因工程技术大量高效地表达有活性的重组酶也尚未得到很好的解决.本文在前人对共轭亚油酸异构酶进行的多方面研究的基础上,对近年来共轭亚油酸异构酶的分布、生物学作用、酶的催化反应机理、酶基因的克隆表达等生物学方面的研究进展进行了综述,并利用生物信息学方法对已知的共轭亚油酸异构酶序列进行了初步分析.     

紫外可见分光光度法在共轭亚油酸定量分析中的应用

采用UV－9100型紫外可见分光光度地，测定了由植物油脂制得的共轭亚油酸、共轭亚油酸甲酯、共轭亚油酸三甘酯在不同浓度时在200nm－300nm的吸光度，绘制出样品在不同浓度时的吸光度曲线，找出适宜的浓度范围，用MicrocalSoftware Origin Version4.0做回归分析，由线性回归给出样品浓度和吸收光度的线性关系，为对实验结果进行检验和校正，采用惠普8452A二极管阵列分光光度计测定了同一批样品在不同浓度范围内的吸光度，利用PEAutosystem XL-TurboMass测得样品中共轭亚油酸准确度，结合回归系数给出了用紫外可见分光光度计快速测定样品中共轭亚油酸含量的经验公式。     

植物乳杆菌在不同基质中转化生成共轭亚油酸的研究

将具有转化亚油酸能力的植物乳杆菌ZS2058分别接入脱脂奶、豆奶和番茄汁中，分别考察了亚油酸的添加量、亚油酸的添加方式和预培养对植物乳杆菌生长和转化亚油酸的能力的影响．结果表明，在脱脂奶中植物乳杆菌转化能力最强，在脱脂奶中该菌能将1mg／mL亚油酸转化成152．05μg／mL共轭亚油酸．     

发酵条件对植物乳杆菌产共轭亚油酸的影响

以植物乳杆菌(L.plantarum A6-1)菌株为研究对象,系统研究了发酵条件对共轭亚油酸形成的影响,结果表明:反应温度、培养时间、底物浓度、初始pH、接种量对共轭亚油酸的转化有明显的影响.在接种量2%,37℃培养32 h,初始pH值7.0,底物亚油酸(LA)的浓度为1mg/mL,A6-1转化生成共轭亚油酸的产量可达91.4μg/mL.     

共轭亚油酸的三氟化硼-甲醇的衍生化条件优化

对共轭亚油酸进行三氟化硼-甲醇衍生化时,采用不同条件处理共轭亚油酸,常常导致共轭亚油酸的不完全和异构化,从而影响到分析的准确度。本文报道对化学合成共轭亚油酸的三氟化硼-甲醇衍生化方法实验研究。阐明三氟化硼在甲醇中的浓度、反应温度和反应时间对衍生化效果的影响。确定最佳衍生化条件:三氟化硼与甲醇的质量比为10∶100、反应的温度为45℃、反应时间为30 min。     

植物甾醇-共轭亚油酸酯对结肠癌细胞增殖的抑制作用

观察植物甾醇-共轭亚油酸酯对结肠癌HT-29细胞增殖的作用,探讨其可能的作用机制。采用体外培养结肠癌HT-29细胞的方法,施加不同浓度植物甾醇-共轭亚油酸酯(100、150、200、250、300μmol/L),观察对细胞增殖的影响。应用四唑盐比色法(MTT法)观察细胞增殖抑制情况,倒置荧光显微镜观察细胞形态学特征。结果显示,植物甾醇-共轭亚油酸酯各组较对照组增殖降低,且存在剂量-效应关系(100～300μmol/L)和时间-效应关系(24、48、72h),说明植物甾醇-共轭亚油酸酯抑制结肠癌HT-29细胞增殖。     

异构化菜油中共轭亚油酸的紫外分光光度法的定量

采用wFZ UV-2102C型紫外分光光度计,定量分析碱性异构化菜油中共轭亚油酸的含量.在紫外区200～260 nm各种不同的波长下对菜油、共轭亚油酸标准品、Tonalin共轭亚油酸和异构化菜油的吸光度进行了比较分析,结果显示紫外分光光度分析可适用于样品中共轭亚油酸同分异构体总量的定量,共轭亚油酸的特征吸收峰在230～235 nm,并且在测定环境温度25℃、波长234 nm处,控制待测样液中共轭亚油酸浓度不大于40 μg/mL的条件下共轭亚油酸的总量与吸光度呈线性相关关系.     

变构菌素类似物的分离鉴定及其生物合成机制

利用正相色谱、反相色谱法对灰产色链霉菌的发酵副产物进行了分离,采用波谱学方法进行了化合物的结构鉴定;利用生物转化方法对其生物合成途径进行了研究;采用MTT法检测了化合物对HCT-15细胞的抗肿瘤活性.结果表明:从灰产色链霉菌发酵产物中得到了变构菌素的结构类似物A1,A1为全新结构的天然产物.对比变构菌素,A1对HCT15的细胞毒性较差(IC50为70μm),且A1来自于变构菌素的异常生物合成.     

嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌混菌发酵合成共轭亚油酸的动力学

利用Logistic方程建立发酵过程中菌体生长和共轭亚油酸合成的动力学模型;应用Origin 8.0对实验数据进行处理,得到了嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌混菌发酵合成共轭亚油酸动力学的模型及参数,相关系数R2分别为0.985 09和0.986 75,说明动力学模型与实验数据拟合较好,基本反映了嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌混菌合成共轭亚油酸的发酵过程。     

尿素包合法富集棉籽油异构化产品中共轭亚油酸的研究

采用尿素包合法对由棉籽油异构化所制备产品中的共轭亚油酸进行富集,研究得到了最佳的富集条件为m(混合脂肪酸)∶m(尿素)∶V(乙醇)=1∶1.4∶5.6,包合温度为0℃,包合时间为10h.在此条件下,共轭亚油酸的含量可由56%提高到82%左右.     

紫外光谱法测定葵花油异构化产物中共轭亚油酸的含量

以葵化油为原料,经过皂化、酸化、共轭化过程制备共轭亚油酸。采用紫外光谱法,在232.62nm波长下进行测定,标准曲线的线性回归方程为Y=0.0104X＋0.054,相关系数为R^2=0.9995,方法的相对标准偏差为0.52％,回收率为94.05％—100.21％。     

黑色素生物合成抑制剂产生菌株的筛选

采集了中国１１个省的土样和草样共２３１份,分离出了１７００株链霉菌,筛选是：３９－２４号菌株在比基尼链霉菌筛选 抑制的直径为２０ｍｍ,属于直径较大者;其黑色素生物合成帽剂初提物对ＣＶ－１细胞的急性细胞毒性为１０ｍｇ／ｍｌ,属于毒性较小者,根据以上试验结果,作者确定３９－２４号菌株为黑色素生物合成抑制剂研究的试验菌株。