温育温度对ELISA一步法检测HBsAg的影响

目前大多数实验室对HBsAg检测的质量控制仅停留在阴、阳对照及质控物的结果上，而忽略了其它很多问题，如温育温度、时间、加样、洗板等。其中温度是ELISA实验的重要影响因素之一，下面讨论在相同温育时间内不同温度对HBsAg结果的影响，以阐明全面质量控制的重要性。     

不同温育时间对层粘连蛋白放免分析结果的影响

在已达到要求的温育时间范围内, 选择最佳温育时间, 稳定剂量反应曲线, 使结果稳定、可靠.方法为: (1)随机取30份肝病患者血清, 在4℃分别温育18h、20h、23h,血清测定层粘连蛋白(laminin, LN)浓度, 并对三个不同的温育时间所得的值进行显著性检验;(2)对温育18h、20h、22h、24h分别为四批的标准曲线所得的质控指标进行分析;(3)对不同温育时间的回收率及浓度进行分析;(4)随机取20份肝病患者血清, 每三批各做20份, 于温育20h, 对其所得的值进行显著性检验, 以观察批间误差.结果表明: (1)三个不同温育时间的30份血清LN测定值的t检验有显著性差异.P值分别小于0.01和小于0.05;(2)不同温育时间的标准曲线B0/T(%)、NSB/T(%)、相关系数(r)的均值良好, 无明显差异;温育20h的ED50的均值为118.4ng/mL(范围113.9-123.8ng/mL), 在正常参考范围内(药盒正常参考值为115.7±17.3ng/mL).其它三个温育时间的ED50均超也正常参考范围;(3)温育低于及高于20h回收率均低于温育20h.温育20h的回收率最好, 为95.2%.(4)随机取20份肝病患者血清, 三批温育20h的批间结果均无显著性差异, P值均大于0.05.实验结果表明, 本实验室测定LN在4℃时, 最佳温育时间为20h.建议各实验室最好根据本室的实验条件寻找出最佳的温育时间.     

一种使用新的温育方式定量测定单克隆抗体的快速、有效的ELISA方法(文摘)

酶联免疫吸附试验(ELISA)广泛应用于单克隆抗体的制备,应用于克隆化时筛选大量标本中的单抗和定量测定单抗,同时也需要一种实用、快速、安全、敏感,适于大量标本检测的方法。本文介绍一种全部反应过程采用振荡温育方式定量测定单抗的方法。该法用羊抗人IgM(GAH-IgM)包被于聚苯乙烯平底微量滴板孔中作为捕捉抗体。     

ELISA测定中影响因素简析

ELISA方法被广泛用于各种抗原和抗体测定.但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在临床检验中如果处理不当,会出现一些错误结果(即假阳性或假阴性结果).引起ELISA测定错误结果的原因主要有:①标本因素;②操作因素;③试剂因素.本文主要就标本因素和操作因素对ELISA测定的影响做如下讨论.     

ELISA和PCR法筛查无偿献血者结果的分析

通过ELISA法对抗-HCV进行筛查,仍有输血后HCV的感染,这是目前多数输血相关传染病多为丙型肝炎的主要原因.为此,发达国家正在大力推行对病毒核酸的检测,美国、日本等国于1999年先后批准对献血者实施混合血浆的核酸检测.     

标本久置对ELISA法检测乙型肝炎表面抗原结果的影响分析

目的：探讨标本久置对ELISA法检测乙型肝炎表面抗原的影响。方法筛选强阳性、弱阳性及阴性标本若干份,用ELISA法对同一标本进行当天和隔日检测。结果强阳性及阴性标本放置前后,乙型肝炎表面抗原检测结果相同,无明显差异,而弱阳性标本放置后,出现假阴性。结论标本久置会使乙型肝炎表面抗原的免疫活性减弱,从而遗漏乙型肝炎表面抗原弱阳性者。     

不同检测方式对瞬目反射结果判断的影响

近年来,国内有作者利用瞬目反射（blinkre—flex,BR）在Bell麻痹病程中进行检测,认为其早期检测异常率可达100％,并且在其后的随访观察中,BR的恢复与否与预后亦密切相关,故BR与面神经F波、面神经电图已成为面神经麻痹的重要电生理检查方法。但不同的检测手段对结果的影响报道较少。本研究通过不同方式对Belt麻痹患者进行BR检测,以期能发现不同的结果描述。     

不同抗凝剂和缓冲液放置时间对纤维蛋白原测定结果的影响

目的观察不同抗凝剂和缓冲液放置时间对纤维蛋白原测定结果的影响。方法同一份标本用做血液流变的肝素抗凝和做凝血象的草酸钠抗凝 ;同一份标本用当天的、放置一天的、放置两天的缓冲液做纤维蛋白原 ,观察纤维蛋白原的测定结果。结果两种抗凝剂对纤维蛋白原的测定结果的影响没有显著性差异 ;缓冲液放置时间对纤维蛋白原测定结果的影响有显著性差异P<0.01。结论测定纤维蛋白原和血液流变可以用同一管血 ;每天要换新的缓冲液。     

ELISA和TPPA检测无偿献血者中梅毒的结果与分析

目的 分析昆山市无偿献血者中梅毒检测ELISA法和TPPA法的结果,提高血液安全.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)进行梅毒血清学筛查,和采用梅毒螺旋抗体明胶颗粒凝集试验检测法(TPPA)进行梅毒螺旋抗体的阳性确认.结果 昆山市无偿献血者梅毒检出率逐年升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);不同年龄段和不同职业的无偿献血者,梅毒检出率均存在明显差异,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 为了避免血源的浪费和提高血液安全,应对献血者的血浆样本进行严格筛选筛查,加强实验室质量控制.     

HBsAg ELISA试剂盒筛检结果的评估

目的 评估部分国产与进口HBsAg ELISA试剂盒筛查血源的价值.方法 选用部分国产和进口HBsAg ELISA试剂,对中国生物制品检定所120份HBsAg临床科研组合血清样本及随机抽取400份东莞市无偿献血者血清标本为验证样本进行同步平行检测,以中国生物制品检定所组合血清及献血者HBsAg阳性并经中和试验证实者为金标准.结果采用四格表法计算两者对等指标并进行评价.结果 国产HBsAg ELISA试剂和进口HBsAg ELISA试剂的灵敏度分别为85.71%（72/84）和100%（84/84）;特异性分别为100%（436/436）和96.55%（421/436）;尤登指数分别为0.86、0.97;两种试剂重复合格率均为100%.结论 试剂的灵敏度以进口HBsAg ELISA试剂较好,但特异性比国产试剂差,两种试剂的重复性均好,两种试剂联合筛检献血者血样标本可提高临床输血的安全性.     

血清和精浆中C反应蛋白的ELISA测定

用抗人Ｃ反应蛋白（ＣＲＰ）血清和ＣＲＰ标准品建立了检测人血清和精浆中ＣＲＰ的ＥＬＩＳＡ，检测了正常人和不育男性精浆中ＣＲＰ含量，以及１０种疾病患者血清ＣＲＰ含量。结果表明，研制的试剂和建立的方法可满足临床常规检测要求。     

应用PCR和ELISA法检测血清HBV的结果分析

在1985年美国Cetus公司遗传部Mullis等发现聚合酶链反应(PCR)技术并用其可检测到fg水平后,从基因测得了HBV DNA与HBV血清学标志物的相互关系.本文对本地区1368例(名)各类患者及正常人血清HBV DNA、HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb进行了检测,现将其结果报道如下. 材料与方法 1 HBVDNAPCR检测采用美国MJ公司生产的PTC-100型DNA扩增仪,PCR引物由上海复生生物工程研究所提供,严格按说明书操作.     

聚合酶链反应杂交ELISA对肝炎患者血清HCV RNA的测定和分析

目的 应用丙型肝炎病毒（HCV）聚合酶链反应杂交酶联法（HCV－PCR－H ELISA）152份各型肝炎血清进行HCV RNA测定和分析。方法 利用标记生物素的寡核苷酸引物对患者血清进行PCR扩增,扩增产物与结合在微孔反应板的HCV特异探针快速杂交,通过抗生物素－酶联反应判定结果。结果 152份肝炎患者中,HCV RNA的检出率为57．9％（88／152）,其中抗－HCV阳性组的检出率为81．8％（72／88）。抗－HCV与HCV RNA的总符合率为78．9％（120／152）。对5例丙型肝炎患者应用α干扰素治疗者追访显示,HCVRNA的消长与抗病毒药物疗效一致。结论 HCV－PCR－H ELISA方法简便、稳定、敏感、特异,为半定量指标,可应用于HCV感染的临床诊断和抗病毒药物疗效判定。     

全自动生化分析仪项目设置顺序对测定结果的影响

全自动生化分析仪在使用过程中发现,一些实验项目如果试剂顺序摆放不当,会对实验结果造成严重系统误差.本研究的目的 是提高测定结果的准确性,为临床提供可靠的诊断依据.     

不同处置时间对免疫荧光法快速CRP测定结果的影响

本文分别观察CRP检测缓冲液加入血清后放置8个不同时间点和检测板放置8个不同时间点对结果的影响,并分析如下。1材料和方法1.1标本收集本院门急诊患者的新鲜全血加入美国BD5ml凝胶试管,立即离心取上层血清备用。     

不同ELISA法对筛选单克隆抗体的影响

单克隆抗体(McAb)的筛选方法要求敏感性高、特异性强、快速简便。ELISA目前已成广为接受的一种筛选方法,其中以固相抗原筛选相应的McAb最常用。但一些文献指出当抗原吸附于固相载体表面时,那些位于和固相载体结合处的某些抗原决定簇由于未能暴露,因而就不可能筛选出识别这些抗原决定簇的McAb。我们在抗CEA McAb的筛选中,为了避免上述可能发生的漏选,采用固相多克隆CEA抗体,结合CEA抗原后,再用于筛选McAb的方     

McAb夹心ELISA测定人IL-2及其影响因素的探讨

用抗人白细胞间素-2(IL-2)单克隆抗体(McAb)及多克隆抗体建立了敏感的测定IL-2的夹心ELISA。测定范围为1.5u～1000u/ml,与生物学方法有较好的可比性。十二烷基磺酸钠、盐酸胍、尿素及二巯基乙醇等重组IL-2纯化制备中常用的变性剂对本法有不同程度的干扰,而血清则无。用戌二醛预处理包被板可明显减弱这些试剂的干扰作用,并可将测定的敏感性提高2倍。本法也可用以快速确定亲和层析纯化IL-2的条件及抗IL-2McAb的构相表位相关性。