肺纤方对特发性肺间质纤维化患者血清基质金属蛋白酶1、2及其抑制剂的影响

目的:观察肺纤方治疗特发性肺间质纤维化的疗效和对患者肺基质重塑的影响。方法:将40例特发性肺间质纤维化患者随机分为治疗组20例、对照组20例,治疗组给予中药肺纤方治疗,对照组给予激素泼尼松治疗,疗程均为3个月。观察治疗后的临床疗效和患者血清基质金属蛋白酶1、2及其抑制剂的变化。结果:治疗组总有效率为84.2%,对照组总有效率为81.3%,肺纤方组治疗后能显著降低患者血清基质金属蛋白酶1、2及其抑制剂。结论:肺纤方能有效治疗特发性肺间质纤维化可能与其抑制患者肺基质重塑有关。     

肺纤方对博莱霉素致肺间质纤维化大鼠整体状态的影响

目的:观察肺纤方(Feixian Formula)对博来霉素致肺间质纤维化大鼠生存状态的影响.方法:85只雄性Wistar大鼠经气管插管灌注博莱霉素(1mg/kg体质量)复制大鼠肺间质纤维化模型,随机分入模型组29只,泼尼松组28只、肺纤方组28只;15只雄性Wistar大鼠经气管插管灌注等体积生理盐水作为假手术组.造模后24时开始常规每日一次灌胃给药,泼尼松组给予醋酸泼尼松5mg/kg体质量,肺纤方组给予肺纤方颗粒1.25g/kg体质量(相当于生药4.475g/kg体质量),模型组和假手术组给予等体积生理盐水.实验全程观察大鼠生活状态如活泼程度、毛发、饮水量、进食量的变化,有无出血、腹泻、死亡、有无其它异常情况;同时监测大鼠体质量变化.结果:实验全过程中,肺纤方组和假手术组没有死亡大鼠,模型组死亡4只大鼠,泼尼松组死亡2只,P=0.1304;大鼠体质量变化显示模型组体质量增长更快,从第21天开始,模型组大鼠体质量与假手术组比较没有统计学意义,P＞0.05;综合评价认为肺纤方组大鼠的整体状态好于模型组和泼尼松组.结论:肺纤方能够改善大鼠的整体状态.     

电针对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1表达的影响

目的:观察电针对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)及组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)表达的影响,探讨电针保护肺组织的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为正常组、模型组、药物组及电针组,每组10只。采用脂多糖器官滴入加烟熏法复制COPD大鼠模型。从造模第8天开始,药物组给予地塞米松注射液(2mg/kg)腹腔注射,1次/d,连续22d;电针组取"太渊""足三里""丰隆"和"太溪",留针20min,1次/d,连续22d。HE染色后在光学显微镜下观察肺组织结构,免疫组化法检测肺组织MMP-9和TIMP-1的表达水平。结果:HE染色结果显示,相对正常、药物和电针组大鼠,模型组大鼠肺组织中呈弥漫性水肿和炎性细胞浸润,其中杯状细胞明显增多,纤维细胞增生。与正常组比较,模型组大鼠肺组织MMP-9及TIMP-1的表达水平升高(P0.05);与模型组比较,电针、药物可降低肺组织中MMP-9及TIMP-1的表达(P0.05);模型组与正常、药物、电针组相比,MMP-9/TIMP-1下降(P0.05);电针组和药物组比较,两者各指标的差异无统计学意义(P0.05)。结论:电针有保护COPD大鼠肺功能的作用,其机制可能与降低肺组织MMP-9和TIMP-1的表达有关。     

红芪黄酮对肺纤维化模型大鼠基质金属蛋白酶-2及其抑制剂-1蛋白表达的影响

目的探讨红芪黄酮防治肺纤维化的作用机制。方法 SPF级Wistar大鼠216只,分为正常组、模型组、强的松组及红芪黄酮高、中、低剂量组。采用气管内滴注博莱霉素法建立肺纤维化模型,从造模后第2日起,各药物组分别给予相应剂量药物,按时间点连续灌胃治疗7、14、28 d,免疫组化法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1蛋白的表达。结果红芪黄酮高剂量组第7、14、28日及红芪黄酮中剂量组第14日MMP-2蛋白的表达较模型组明显减轻,差异有统计学意义(P0.05),红芪黄酮高剂量组表达水平与强的松组相似;红芪黄酮高、中剂量组第14日及红芪黄酮高剂量组第28日TIMP-1蛋白表达均较模型组明显减轻,差异有统计学意义(P0.05)。结论红芪黄酮在各个时点调整MMP-2和TIMP-1的蛋白表达,使MMPs/TIMPs趋于平衡,可能是其抑制肺纤维化进程的一种有效机制。     

自家血治疗实验性兔角膜溃疡后对角膜中基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶组织抑制剂-2的表达影响

目的：观察自家血治疗实验性兔角膜溃疡的疗效,并探讨自家血对溃疡角膜中基质金属蛋白酶（Matrix Metalloproteinase,MMP）2及基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2,TIMP-2)表达的影响和作用。方法：将36只实验兔随机分为A、B、C、D四组,每组9只。B、C、D组通过角膜环钻在兔角膜中央处钻取一个直径5 mm、深度0.1 mm的角膜溃疡灶,建立动物模型。自术后第1天开始,B、C、D组采用盐酸左氧氟沙星滴眼液点眼每日4次,作为抗感染基础治疗;B组采用自家血点眼每日2次;C组采用速高捷眼用凝胶点眼每日3次;D组采用生理盐水点眼每日3次。术后第3、7、14天行角膜炎症和溃疡评分,并于术后第14天从各组随机抽取三只角膜应用免疫印迹法检测角膜中MMP2、TIMP-2的表达。结果：角膜评分显示,术后第3天B、C、D三组间的角膜炎症评分和溃疡评分差异均无统计学意义（均为P> 0.05）;B组和C组的角膜炎症和溃疡评分在术后第7天起各时间点均小于D组（均为P <0.05）;术后第7天B组的角膜炎症...     

肺纤方抗大鼠肺纤维化的实验研究

目的：研究肺纤方与泼尼松对照抗大鼠肺纤维化肺组织病理的影响。方法：采用气管内注入博莱霉素的方法制造大鼠肺纤维化模型,观察造模后14、28、45d模型组、假手术组、肺纤方组、泼尼松组肺组织病理,光镜苏木精-伊红染色观察肺泡炎,光镜三色染色观察肺胶原。结果：肺纤方抗大鼠纤维化在45d尤为突出。结论：肺纤方有显著抗大鼠肺间质纤维化作用。     

基质金属蛋白酶组织抑制剂与动脉粥样硬化

基质金属蛋白酶组织抑制剂（TIMPs）在动脉粥样硬化（AS）形成过程中起着十分重要的作用，TIMPs通过抑制基质金属蛋白酶（MMPS）从而可延缓或阻止AS发生和发展。     

消渴康对糠尿病肾病大鼠肾脏基质金属蛋白酶9与蛋白酶组织抑制剂1表达的影响

目的：观察消渴康对糖尿病肾病大鼠肾脏基质金属蛋白酶9（ matrix metalloproteinase-9,MMP-9）与金属蛋白酶组织抑制剂1（tissue inhibitor of metalloproteinases-1,TIMP-1）表达的影响。方法 SD大鼠单侧肾切除后2周,一次性腹腔注射链脲佐菌素（ streptozotocin,STZ）,72小时后血糖浓度≥16.7 mmol/L,尿糖定性〉＋＋＋,确定糖尿病肾病造模成功,随机分为模型、氯沙坦和消渴康大、中、小剂量治疗组,分别灌胃12周后,免疫组化法检测各组糖尿病肾病大鼠肾脏 MMP-9与TIMP-1表达情况。结果消渴康小剂量治疗组极显著增加糖尿病肾病大鼠肾组织MMP-9表达（ P〈0．01）,消渴康中、小剂量治疗组极显著降低糖尿病肾病大鼠肾组织TIMP-1表达（P〈0．01）。结论消渴康对糖尿病肾病大鼠肾脏异常细胞外基质（ extracellu-lar matrix,ECM）堆积具有一定促降解作用。     

苦碟子注射液对大鼠肝纤维化模型肝脏MMP-1、TIMP-1的影响

目的观察肝纤维化形成过程中肝组织MMP-1、TIMP-1表达,以探讨MMP-1、TIMP-1与基质转换的关系,以及苦碟子注射液和大黄虫丸对它们的影响。方法将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组与苦碟子注射液高剂量组、苦碟子注射液低剂量组和大黄虫丸组,采用40%CC l4橄榄油溶液造模(0.15 mL/100 g),2次/周,并从实验第3周开始给大鼠用20%乙醇灌胃(1 mL/100 g),隔天1次造模。造模结束给予苦碟子注射液高低剂量和大黄虫丸治疗,12周末在股动脉处取血,取肝脏标本。采用HE方法检测模型对照组和各给药组病理变化情况、血清PCⅢ水平变化。免疫组织化学法检测肝组织MMP-1、TIMP-1。结果模型对照组及各给药组与正常对照组比较均呈程度不同的病理损害,MMP-1、TIMP-1表达均显著增高(P均0.05),且TIMP-1表达明显高于MMP-1表达。各给药组与模型对照组比较,MMP-1表达均无显著性差异(P均0.05),TIMP-1表达却均明显减少(P均0.05)。结论肝脏炎症活动及纤维化会出现程度不同的病理损害,可能与MMP-1及TIMP-1表达明显失衡有关。苦碟子注射液及大黄虫丸治疗对其有一定的抑制作用。     

补肾化瘀方对肝纤维化大鼠肝组织MMP-1/TIMP-1活性的影响

目的:研究补肾化瘀方对肝纤维化大鼠肝组织MMP-1/TIMP-1活性的影响,探讨其防治肝纤维化的作用机制。方法:建立Wistar大鼠CCL4损伤性肝纤维化模型,通过免疫组化及图像分析等方法,观察补肾化瘀方对肝组织Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原及MMP-1/TIMP-1表达的影响。结果:经补肾化瘀方治疗后,用药组肝细胞变性程度和纤维化程度明显减轻;Ⅰ型、Ⅲ型胶原表达明显降低(P<0.05);MMP-1含量明显增加,TIMP-1含量降低,MMP-1/TIMP-1比值显著增加,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:补肾化瘀方可能通过增加MMP-1的产生、减少TIMP-1的分泌而使其对MMP-1的抑制作用减弱,促进了Ⅰ型及Ⅲ型胶原的降解,起到抗纤维化的作用。     

五田保肝液对酒精性肝纤维化大鼠肝组织MMP-2及其抑制剂表达的影响

[目的]研究五田保肝液对酒精性肝纤维化大鼠肝组织中Ⅳ型胶原以及基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其抑制因子TIMP-2表达的影响,探讨五田保肝液对大鼠酒精性肝纤维化的治疗效果和可能机制。[方法]随机将100只Wistar大鼠分成6组:正常组、五田保肝液低、中、高剂量组、模型组、阳性药对照组,其中正常组10只,其他各组均18只。采用白酒加少量玉米油、吡唑的混合物灌胃,制备大鼠酒精性肝纤维化模型,造模12周后处死大鼠,以免疫组化法检测大鼠肝组织Ⅳ型胶原蛋白的表达,实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠肝组织MMP-2、TIMP-2mRNA的表达。[结果]各组Ⅳ型胶原蛋白的表达均比正常组显著升高,但五田保肝液各剂量组和阳性药组Ⅳ型胶原蛋白的表达比模型组降低;模型组大鼠肝组织MMP-2、TIMP-2的mRNA表达比正常组显著升高,但TIMP-2的mRNA表达升高幅度更大;五田保肝液和阳性药组MMP-2mRNA的表达较模型组升高,但TIMP-2mRNA的表达较模型组降低,且五田保肝液以中、高剂量效果更明显。[结论]五田保肝液可能通过上调MMP-2的表达、下调TIMP-2的表达,从而抑制大鼠酒精性肝纤维化的发生发展。     

补肺汤对肺纤维化大鼠肺组织MMP-9、TIMP-1蛋白表达影响

目的:观察补肺汤对肺纤维化大鼠肺组织中基质金属蛋白-9(MMP-9)和组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)蛋白表达及肺组织病理变化的影响。方法:雄性SD大鼠,随机分成4组:空白组、模型组、强的松组、补肺汤组。除空白组外,其余3组均采用博莱霉素(BLM)制作肺纤维化大鼠模型,每日灌胃给药,造模后7、14、28天取材。通过免疫组织化学染色方法,检测肺组织MMP-9、TIMP-1蛋白表达,采用光学显微镜观察肺组织病理变化。结果:与模型组比较,补肺汤组、强的松组各时间点肺泡炎和肺纤维化程度均较轻;与模型组比较,各时间点强的松组、补肺汤组肺组织MMP-9蛋白表达明显减低;与模型组比较,各时间点的强的松组、补肺汤组肺组织TIMP-1蛋白表达明显降低。结论:补肺汤能够抑制早期肺泡炎的发生,降低肺组织MMP-9与TIMP-1蛋白表达,纠正MMP-9/TIMP-1失衡,改善细胞外基质的异常代谢,从而抑制或延缓博莱霉素致大鼠肺纤维化的发生和发展。     

三七总皂苷对肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-13及其抑制因子-1表达的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶(MMP)-13、基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP)-1表达的影响,探讨PNS抗肝纤维化作用的可能机制.方法:将大鼠随机分成正常组、模型组、PNS低、中、高剂量(50,100,200 mg·kg-1)组和秋水仙碱(Col,0.1mg·kg-1)组.除正常组外其余各组采用CCl4皮下注射的方法诱导肝纤维化大鼠模型,每周2次,连续18周.于造模第9周起,给药组分别灌胃相应的受试药物,正常组和模型组灌胃等容量的生理盐水,疗程10周.实验结束后,计算肝脏、脾脏指数;比色法测定血清中ALT,AST含量;同时取固定部位肝脏组织,HE染色观察肝组织病理学改变,免疫组化技术测定肝组织中MMP-13,TIMP-1蛋白的表达,RT-PCR技术测定MMP-13,TIMP-1mRNA的表达.结果:与模型组相比,三七总皂苷(100,200 mg·kg-1)不仅可减轻大鼠肝纤维化程度,降低肝脏、脾脏指数及血清ALT,AST的含量,还可显著升高肝纤维化大鼠肝脏MMP-13的表达,降低TIMP-1的表达.结论:三七总皂苷对大鼠肝纤维化具有一定的保护作用,其机制可能与上调MMP-13,抑制TIMP-1的表达,促进胶原降解有关.     

温阳活血方对单侧输尿管梗阻模型大鼠肾组织基质金属蛋白酶抑制剂-1和基质金属蛋白酶-3表达的影响

目的:观察温阳活血方对实验大鼠肾间质纤维化的保护作用并探讨其作用机制。方法:实验采用单侧输尿管梗阻大鼠模型,随机分为温阳活血组、福辛普利组、模型组,并设假手术组。观察梗阻侧肾脏组织形态学改变,运用ELISA法测大鼠尿视黄醇结合蛋白(retinol binding protein,RBP)水平,免疫组化半定量法分析基质金属蛋白酶-3(marix metalloproteinases,MMP-3)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metallo-proteinases,TIMP-1)的表达水平。结果:造模各组与假手术组相比均呈不同程度的病理损害。造模各组RBP水平均有所增高,温阳活血组、福辛普利组RBP水平明显低于模型组(P<0.05),两组间无明显差异(P>0.05)。模型组的MMP-3、TIMP-1表达水平均增高,而TIMP-1增高程度高于MMP-3。温阳活血组、福辛普利组MMP-3的表达水平高于模型组(P<0.05);但TIMP-1的表达水平低于模型组(P<0.05);MMP-3、TIMP-1在两个治疗组间的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:温阳活血方可能通过抑制TIMP-1的表达,恢复MMP-3表达,以此来调节MMP-3/TIMP-1的比例,减轻RBP的排泄,从而保护肾小管功能,减轻间质纤维化的进展。     

甲基莲心碱对肝星状细胞Collagen-I, TIMP-1及MMP-2的影响

目的: 观察甲基莲心碱对肝星状细胞Collagen-I,TIMP-1及MMP-2 mRNA表达及蛋白分泌的影响。 方法: 体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6,随机分为5组:对照组、血小板衍生因子(PDGF)组、甲基莲心碱低、中、高剂量组(2,6,10 μmol·L^-1)。分别加入各组药物培养48 h后,收集细胞提取总RNA,采用RT-PCR检测Collagen-I,TIMP-1及MMP-2 mRNA表达,并收集细胞上清液采用ELISA检测3个因子的蛋白含量。 结果: 与对照组相比,PDGF可明显增加肝星状细胞Collagen-I,TMIP-1及MMP2 mRNA表达及蛋白分泌。与PDGF组相比,甲基莲心碱中、高剂量组Collagen-I及TMIP-1 mRNA表达及蛋白分泌明显减少,且随着浓度的增加,减少更明显,而甲基莲心碱低剂量组Collagen-I及TMIP-1 表达及分泌无明显变化。与PDGF组相比,甲基莲心碱3个剂量组的MMP-2 mRNA表达及蛋白分泌均无明显变化。 结论: 甲基莲心碱可抑制PDGF诱导的HSC的Collagen-I和TIMP-1的mRNA表达及蛋白分泌,且随浓度的增加,抑制作用加强,但对MMP-2的表达及分泌无明显影响。     

改良保肾方Ⅱ号对糖尿病肾病大鼠肾脏病理和肾组织MMP-2/TIMP-2表达的影响

目的 观察改良保肾方Ⅱ号对糖尿病肾病大鼠肾脏病理及肾组织MMP-2/TMP-2表达的影响,探讨本方治疗糖尿病肾病的机制.方法 以链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病肾病大鼠模型.观察用药12周后不同剂量改良保肾方Ⅱ号对大鼠肾脏病理的改变.采用明胶酶谱法测定MMP-2活性,以Western Blot检测TIMP-2表达.结果 药物干预12周后,各药物干预组(盐酸贝那普利组、小剂量中药组、大剂量中药组)大鼠的BUN、SCr、UAER水平较未经药物治疗的空白模型组显著降低,差异有统计学意义(P<0.01),大剂量中药组BUN、SCr、UAER较盐酸贝那普利组降低,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01),小剂量、大剂量中药组对Glu降低作用与空白模型组、盐酸贝那普利组比较,差异均有统计学意义(P<0.05、P<0.01).大剂量改良保肾方Ⅱ号组在对大鼠肾脏病理及MMP-2/TIM-2表达方面,与盐酸贝那普利组比较差异均无统计学意义.Weatern Blot检测TIMP-2结果表示空白模型组、盐酸贝那普利组、小剂量中药组、大剂量中药组与空白对照组比较MMP-2表达均下降且有统计学意义(P<0.01).而TIMP-2上升或无差异.结论 改良保肾方Ⅱ号可以改善大鼠糖尿病肾病肾脏病理改变,并通过调节MMP-2/TIMP-2平衡,延缓糖尿病肾病的进展.     

黄芪建中汤对胃黏膜损伤模型大鼠MMP-2及TIMP-1表达的影响

目的:观察黄芪建中汤对胃黏膜损伤模型大鼠基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响。方法:将健康SD大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、黄芪建中汤组、生胃酮组,每组10只。采用改良Okabe法复制动物模型。胃黏膜MMP-2、TIMP-1表达水平检测采用免疫组织化学法。结果:模型组MMP-2表达较假手术组显著升高(P<0.01),各治疗组MMP-2表达水平显著低于模型组(P<0.01);模型组TIMP-1表达较假手术组显著降低(P<0.05,P<0.01),各治疗组TIMP-1表达水平显著高于模型组(P<0.01);黄芪建中汤组较生胃酮组MMP-2表达水平显著降低(P<0.01),TIMP-1表达水平显著升高(P<0.01)。结论:黄芪建中汤通过调控MMP-2、TIMP-1的表达水平,修复胃黏膜损伤。     

虎杖对肺纤维化大鼠肺成纤维细胞MMP-2，TIMP-1mRNA表达的影响

目的:观察虎杖对大鼠肺纤维化形成的影响,并探讨其作用机制.方法:将雄性SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、阳性对照组、虎杖预防组、虎杖3 d治疗组、7 d治疗组和14 d治疗组.除正常对照组外其余各组均气管内注射博莱霉素诱导肺纤维化.阳性对照组造模当天予0.5%地塞米松4 mL·kg~(-1)·d~(-1)灌胃;正常对照组和模型组于造模后当天开始灌胃生理盐水4 mL·kg~(-1)·d~(-1);虎杖预防组、虎杖3,7,14 d治疗组分别在造模前2 d、造模后第3,7,14天开始胃饲受试药物4 mL·kg~(-1)·d~(-1)(含生药量1 g·mL~(-1)),进行动态观察.HE,Masson染色行肺组织病理学检查,胰酶消化法行肺成纤维细胞培养,并用RT-PCR法检测MMP-2,FIMP-lmRNA的表达.结果:与模型组比较,阳性对照组、虎杖预防组及各治疗组,肺泡炎、肺纤维化程度及胶原沉积均明显减轻.肺成纤维细胞MMP-2mRNA表达除第42天与模型组相似,无统计学意义,其余之前的时间点均较模型组减弱(P<0.05或P<0.01);TIMP-1mRNA表达也均较模型组减弱(P<0.05或P<0.01),其持续抑制时间更长,直至第42天.结论:虎杖通过抑制不同时期肺成纤维细胞MMP-2,TIMP-1mRNA的异常高表达以减轻肺泡炎及肺纤维化的程度,可能是其延缓肺纤维化的作用机制之一.