革兰阴性杆菌中超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶的检测与分析

目的：了解革兰阴性杆菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶的产生情况，为临床用药提供参考依据。方法：用纸片扩散确证试验检测345株革兰阴性杆菌的ESBLs产生情况，同时用酶提取物三维试验检测其中194株菌的AmpC酶产生情况。结果：革兰阴性杆菌中，ESBLs阳性率为30．4％，主要产生菌为阴沟肠杆菌68．2％，大肠埃希菌45．9％，肺炎克雷伯菌31．0％；AmpC酶阳性率为11．9％，主要产生菌为阴沟肠杆菌29．5％，鲍曼不动杆菌18．2％。结论：在革兰阴性杆菌中ESBLs、AmpC酶产生情况已相当严重和普遍，应重视对这两类酶的检测。     

革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶检测的探讨

临床发现，越来越多的革兰阴性杆菌对三代头孢类抗生素耐药，其主要原因是细菌质粒介导产生的超广谱β－内酰胺酶（Extended Spectrum β－Ｌ；ESBLs）所致。研究发现。产ESBL细菌主要集中在肠杆菌科细菌，以肺炎在雷伯杆菌和大肠埃希氏菌为主，另外有阴沟肠杆菌、沙雷氏菌、产碱杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌等其它革兰阴性杆菌也有报道。由于产ESBL的菌株往往携带多重耐药基因，表现在不仅β－内酰类抗生素耐药。而且对氨基甙类、喹诺酮类抗生素也耐药，给临床治疗带来极大困难。目前产ESBL菌株有增多趋势并可引起医院感染的暴发流行。所以，ESBL的检测在临床上具有重要意义。目前，尽管检测ESBL的方法众多，但仍无令人满意的统一方法。本文对目前实验室较常采用的单纸片琼脂扩散试验（SD）法、双纸片协同试验（CD法）和Etest三种方法检测ESBL作一初步探讨。     

革兰阴性杆菌β-内酰胺酶表型和基因型研究

目的了解铜陵地区临床分离的革兰阴性杆菌产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC酶)和金属β-内酰胺酶(MBL)的分布情况,并检测产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型鉴定。方法采用三维试验检测革兰阴性杆菌产ESBLs和AmpC酶,纸片协同法检测MBL,用聚合酶链反应(PCR)对ESBLs表型阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行TEM型、SHV型、CTX-M型三种耐药基因检测并克隆测序。结果356株革兰阴性杆菌检出产酶株90株,检出率25.3%。单产ESBLs革兰阴性杆菌57株,检出率16.0%,以肺炎克雷伯(31.6%)、大肠埃希菌(31.0%)检出率高;单产AmpC酶4株,检出率1.1%,其中阴沟肠杆菌3株;同时产ESBLs和AmpC酶16株,检出率4.5%,以鲍曼不动杆菌(12.5%)检出率最高;产MBL细菌13株,均为非发酵菌,以嗜麦芽窄食单胞菌检出率最高,为71.4%。17株ESBLs表型阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌有16株检出ESBLs耐药基因,其中CTX-M型15株(88.2%),TME型13株(76.1%),SHV型2株(11.8%),有11株细菌同时带有两种ESBLs基因,1株带有3种ESBLs基因。结论革兰阴性杆菌产生ESBLs、AmpC酶和MBL多种β内酰胺酶,铜陵地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因型以CTX-M型为主。     

174株革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶检测分析

目的了解革兰氏阴性杆茵产超广谱β-内酰胺酶(ESBL).方法采用法国生物梅里埃VITEK32细菌分析系统对174株临床标本分离出的革兰氏阴性杆菌进行生化鉴定及药敏分析.结果检出产ESBL菌21株,为12.1%;其中大肠埃希氏菌13株;肺炎克雷伯菌5株;铜绿假单胞菌2株;阴沟肠杆菌1株;ESBL菌对β-内酰胺类、青霉素类、氨基糖甙类、喹诺酮类、磺胺类几乎全部耐药.但亚胺培南对ESBL菌有很强的抑菌作用.结论ESBL菌株产生来源于抗生素的滥用,从而导致交叉耐药菌及多重耐药茵的产生,所以合理选择抗生素,控制ESBL传播和流行具有深刻意义.     

临床分离株中革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶菌的分布

目的 了解临床分离的革兰阴性杆菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的分布及耐药性. 方法 对临床分离的革兰阴性杆菌,采用CLSI标准检测产ESBLs菌株. 结果 120株革兰阴性杆菌分离出38株产ESBLs菌,阳性率32%,包括大肠埃希菌、克雷伯菌属、阴沟肠杆菌、弗劳地枸椽酸杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌.其中,第一位是大肠埃希菌 (53.8%, 21 /38),其次产酸克雷伯菌(35.3,6/17)、肺炎克雷伯菌(33.3%,7/20);药敏结果显示除对碳青酶烯类抗生素敏感外,ESBLs阳性株对多种抗生素的耐药率均较高,且明显高于ESBLs阴性株. 结论 本院产ESBLs菌分离率较高,主要以大肠埃希菌、产酸克雷伯菌、肺炎克雷伯菌为主.     

鲍曼不动杆菌超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶检测及耐药性分析

目的:了解鲍曼不动杆菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶的产生情况及耐药特点.方法:用酶提取物三维试验分别检测98株鲍曼不动杆菌ESBLs、AmpC酶产生情况,并用VITEK60型全自动微生物分析系统和K-B纸片扩散法检测其对多种抗生素的耐药性.结果:98株鲍曼不动杆菌中,共检测到ESBLs阳性株7株,阳性率为7.1%(7/98);AmpC酶阳性株17株,阳性率为17.3%(17/98).AmpC酶阳性株均呈多重耐药,其对多种抗生素的耐药性明显高于AmpC酶阴性株.结论:产AmpC酶是我院鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因,应加强对AmpC酶的检测及其感染者的治疗.     

长春地区部分医院革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶的基因类型及分布

目的:了解长春地区部分医院超广谱β-内酰胺酶 (ESBLs)基因在革兰阴性杆菌中的分布及类型,为合理使用抗生素提供依据。方法：对165株临床分离革兰阴性杆菌采用 PCR方法分别扩增SHV、TEM和CTX基因片段。PCR产物经测序后,登录GenBank查询并比较基因类型。结果：在165株革兰阴性杆菌中检出耐药基因及多重耐药基因68株, 其中 TEM型检出率最高（12.12%）,其余依次为CTX-M-1型（4.24%）,SHV型（3.64%）和CTX-M-9型（3.03%）;同时检出 SHV+TEM型、TEM+CTX-M-1型、TEM+CTX-M-9型、TEM+CTX-M-1+CTX-M-9型和 SHV+TEM+CTX -M-1+CTX-M-9型等多组多重耐药基因。随机选择扩增阳性的 PCR产物进行测序,得到 SHV-11亚型、TEM-1亚型、CTX-M-3亚型、CTX-M-15亚型、CTX-M-14和CTX-M-18亚型。结论:长春地区部分医院革兰阴性杆菌ESBLs的基因类型主要为TEM-1亚型、SHV-11亚型、CTX-M-14亚型和CTX-M-18亚型。     

革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测及药敏分析

目的　了解本院常见的革兰阴性杆菌中超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)细菌的发生率和药敏情况 ,为防止产ESBLs细菌的传播和抗生素的合理应用提供依据。方法　细菌鉴定用Vitek - 32细菌鉴定仪 ,药敏试验用K -B法 ,ESBLs初筛用双纸片法 ,ESBLs确证用NCCLS 1 999年推荐的确证方法。结果　产ESBLs耐药菌占全部分离菌的 2 8 9% ,其中各细菌ESBLs发生率大肠埃希菌为 2 8 6 % ,肺炎克雷伯菌为 34 1 % ,阴沟肠杆菌为 4 0 5 %。另外有 1例铜绿假单胞菌、2例弗劳地枸橼酸杆菌、2例嗜麦芽窄食单胞菌产ESBLs。对试验所做抗生素 ,ESBLs阳性株比阴性株具有更高的耐药率和更严重的交叉耐药现象。结论　本院产ESBLs细菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌多见 ,ESBLs的发生率和菌种分布有上升趋势 ,ESBLs菌感染的治疗仍以亚胺培南为首选     

203株产超广谱β-内酰胺酶菌的检测及耐药性

目的 :了解革兰氏阴性杆菌产超广谱β 内酰胺酶 (ESBLs)的情况及耐药性 ,以利于对产ESBLs菌株的治疗。方法 :采用NCCLS推荐的确认法。结果 :72 7株革兰阴杆性菌中 ,共检出产ESBLs菌 2 0 3株 ,检出率为 2 7.9% ,其中大肠埃希菌 87株、克雷伯杆菌 72株、嗜麦芽窄食单胞菌 17株、费劳地枸橼酸菌 11株、阴沟肠杆菌 5株、鼠伤寒沙门菌 4株、产气肠杆菌 2株、铜绿假单胞菌 2株、亲水气单胞菌 2株、聚团肠杆菌 1株 ;亚胺培南除对 1株产ESBLs大肠埃希菌和 17株产ESBLs嗜麦芽窄食菌耐药外 ,对其他产ESBLs菌均表现出最强的抗菌作用 ;头孢哌酮 /舒巴坦对产ES BLs嗜麦芽窄食菌、大肠埃希菌及费劳地拘橼酸菌有较好的抗菌作用 ;丁胺卡那霉素对产ESBLs大肠埃希菌呈现较好的抗菌作用。结论 :我院革兰阴性菌产ESBLs情况严重 ,而且已经分离出对亚胺培南耐药的ESBLs大肠埃希菌 ,临床医生应尽量在确立了病原学诊断后参考细菌药敏报告用药 ,以减少耐药菌株的产生。     

136析革兰阴性杆菌ESBLs和AmpC酶的检测

随着抗生素的广泛使用,细菌的耐药性已成为人们关心的热点问题。已发现越来越多的革兰阴性杆菌对B-内酰胺类抗生素产生耐药性。细菌产超广谱B-内酰胺酶(ESBLs)和1-型β-内酰胺酶(AmpC酶)是革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药性的机制之一。其中AmpC酶对β-内酰胺酶抑制剂不敏感,使高产AmpC酶的菌株引起的感染更加难治。此外,出现AmpC酶由原来局限于染色体编码向质粒转移的趋势,大大提高了AmpC酶的横向传播能力[1]。为调查革兰阴性杆菌的产酶情况,我们对136株革兰阴性杆菌进行ESBLs和AmpC酶检测,并对检测结果进行分析。     

产超广谱β-内酰胺酶和质粒AmpC酶肺炎克雷伯菌耐药性检测

目的探讨泰安市产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和质粒AmpC酶肺炎克雷伯菌的耐药性。方法2005年1月至2006年7月我院临床分离的肺炎克雷伯菌251株,用Kirby-Bauer法进行药敏试验,根据NC-CLS2002年判断标准分析结果。结果251株肺炎克雷伯菌中检出产ESBLs和高产AmpC酶154株,检出率61.4%,其中单产ESBLs143株,单产AmpC酶8株,同时产AmpC酶和ESBLs3株,总检出率分别为57.0%,3.19%和1.20%。其中3株同时产AmpC酶和ESBLs的肺炎克雷伯菌对头孢菌素、酶抑制剂、氨曲南、头孢西丁都耐药,1株对亚胺培南耐药。单产ESBLs肺炎克雷伯菌对头孢曲松、头孢噻肟、左氧氟沙星耐药率在70%以上,对美罗培南、亚胺培南敏感性好。单产AmpC酶的肺炎克雷伯菌对头孢菌素,酶抑制剂的抗菌药物都耐药,对亚胺培南,头孢吡肟敏感。结论产ESBLs和高产AmpC酶是导致肺炎克雷伯菌耐药的两类主要酶,产酶株对多种抗菌药物耐药,对美罗培南、亚胺培南敏感性好.     

耐亚胺培南鲍氏不动杆菌超广谱β-内酰胺酶与AmpC酶研究

目的：研究临床分离的54株耐亚胺培南鲍氏不动杆菌耐药表型和基因型。方法：应用VITEK 2-compact全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,采用改良三维试验方法同时检测AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶,用PCR检测ampC和blaTEM基因,并进行基因测序。结果：54株耐亚胺培南鲍氏不动杆菌中,对抗菌药物耐药率除左氧氟沙星、美罗培南和头孢哌酮/舒巴坦外均〉77%,对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低（24.1%）。三维试验表明,36株（66.7%）单产AmpC酶,6株（11.1%）单产超广谱β-内酰胺酶,6株（11.1%）同时产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶。54株菌（100.0%）经PCR扩增和序列分析表明均同时携带ampC和blaTEM-1基因。结论：耐亚胺培南鲍氏不动杆菌多重耐药现象严重,同时携带ampC和blaTEM-1基因是本组鲍氏不动杆菌对β-内酰胺类药物耐药的主要原因。     

2O3株产超广谱β-内酰胺酶菌的检测及耐药性

目的:了解革兰氏阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及耐药性,以利于对产ESBLs菌株的治疗.方法:采用NCCLS推荐的确认法.结果:727株革兰阴杆性菌中,共检出产ESBLs菌203株,检出率为27.9%,其中大肠埃希菌87株、克雷伯杆菌72株、嗜麦芽窄食单胞菌17株、费劳地枸橼酸菌11株、阴沟肠杆菌5株、鼠伤寒沙门菌4株、产气肠杆菌2株、铜绿假单胞菌2株、亲水气单胞菌2株、聚团肠杆菌1株;亚胺培南除对1株产ESBLs大肠埃希菌和17株产ESBLs嗜麦芽窄食菌耐药外,对其他产ESBLs菌均表现出最强的抗菌作用;头孢哌酮/舒巴坦对产ESBLs嗜麦芽窄食菌、大肠埃希菌及费劳地拘橼酸菌有较好的抗菌作用;丁胺卡那霉素对产ESBLs大肠埃希菌呈现较好的抗菌作用.结论:我院革兰阴性菌产ESBLs情况严重,而且已经分离出对亚胺培南耐药的ESBLs大肠埃希菌,临床医生应尽量在确立了病原学诊断后参考细菌药敏报告用药,以减少耐药菌株的产生.     

产超广谱β-内酰胺酶菌的检测及耐药分析

目的 :了解本院产超广谱β-内酰胺酶 ESBL s菌株的检出率、分布及耐药特点 ,以指导临床科学合理地使用抗生素。方法 :对 4 12株革兰氏阴性杆菌采用 K- B纸片法筛选试验和双纸片法表型确证试验检测 ESBL s。结果 :4 12株革兰氏阴性杆菌中检出产 ESBL s菌 14 5株 ,检出率为 35 .2 % ,以大肠埃希菌和克雷伯氏菌为主 ;主要分布在内科 (5 2 .4% )及外科 (36 .6 % ) ,二者占了产 ESBL s菌感染总数的 89.0 % ,而感染标本以痰 (45 .5 % )、尿 (2 5 .5 % )和伤口分泌物(18.6 % )为主 ;产 ESBL s和不产 ESBL s菌对 11种抗生素的耐药率比较 ,各组均有显著差异 (P<0 .0 0 5 ) ,产 ESBL s菌株的耐药率明显高于不产 ESBL s菌株。结论 :产 ESBL s菌株的感染及耐药率严重 ,微生物实验室和临床医生必须高度重视 ESBL s的检测工作 ;亚胺培南和哌拉西林 +他唑巴坦是治疗产 ESBL s菌感染的首选药物。     

产超广谱β-内酰胺酶菌的检测及耐药分析

目的:了解本院产超广谱β-内酰胺酶ESBLs菌株的检出率、分布及耐药特点,以指导临床科学合理地使用抗生素.方法:对412株革兰氏阴性杆菌采用K-B纸片法筛选试验和双纸片法表型确证试验检测ESBLs.结果:412株革兰氏阴性杆菌中检出产ESBLs菌145株,检出率为35.2 %,以大肠埃希菌和克雷伯氏菌为主;主要分布在内科(52.4 %)及外科(36.6 %),二者占了产ESBLs菌感染总数的89.0 %,而感染标本以痰(45.5 %)、尿(25.5 %)和伤口分泌物(18.6 %)为主;产ESBLs和不产ESBLs菌对11种抗生素的耐药率比较,各组均有显著差异(P<0.005),产ESBLs菌株的耐药率明显高于不产ESBLs菌株.结论:产ESBLs菌株的感染及耐药率严重,微生物实验室和临床医生必须高度重视ESBLs的检测工作;亚胺培南和哌拉西林+他唑巴坦是治疗产ESBLs菌感染的首选药物.     

社区感染中革兰阴性杆菌的超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的检测社区革兰阴性杆菌ESBLs的产生及其对11种抗生素的耐药性.方法采用双纸片扩散法对临床分离的革兰阴性杆菌进行ESBLs检测,体外药敏实验采用K-B法,实验数据处理使用x2检验.结果社区感染革兰阴性杆菌以大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌为主.社区感染革兰阴性杆菌ESBLs总阳性率为17.6%,其中阴沟杆菌、肺炎克雷伯菌和大肠杆菌的ESBLs阳性率分别为23.5%、18.5%和18.1%.社区感染阴性杆菌的ESBLs总阳性率(17.6%)显著低于医院感染(29.7%)(x 2检验,P＜0.05).除泰能、阿米卡星、派拉西林/他唑巴坦、舒普深四种抗生素外,社区感染产ESBLs阴性杆菌对其余七种抗生素(庆大霉素、头孢他啶、环丙沙星、头孢噻肟、头孢吡肟、氨曲南、头孢哌酮)的耐药性与不产ESBLs阴性杆菌相比有显著性差异(x2检验,P＜0.05).社区感染和医院感染中分离的革兰阴性杆菌对泰能的耐药率分别为0和0.5%,两者相比无显著性差异(x2检验,P＜0.05).社区感染革兰阴性杆菌对除泰能外的其他抗生素的耐药率与医院感染菌株相比均有显著性差异(x2检验,P＜0.05).结论社区感染革兰阴性杆菌耐药性颇为严峻,社区感染患者乱用和盲目使用抗生素是导致其耐药性的重要原因,ESBLs的产生也不容忽视.应加强抗菌药物的管理,减少患者滥用抗生素及加强对社区感染细菌的检测,以减少耐药菌株的产生.     

136株革兰阴性杆菌ESBLs和AmpC酶的检测

随着抗生素的广泛使用,细菌的耐药性已成为人们关心的热点问题.已发现越来越多的革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药性.细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和1-型β-内酰胺酶(AmpC酶)是革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药性的机制之一.     

下呼吸道感染产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的耐药监测

由于第三代头孢菌素对需氧革兰阴性菌的抗菌作用强、抗菌谱广，且毒性低，被广泛用于治疗革兰阴性杆菌感染。近年来国内外的病原学研究表明，革兰阴性杆菌对此类抗菌药物的耐药率逐年上升。主要是由于第三代头孢菌素能诱导细菌产生基因位点突变，使细菌产生质粒介导的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)，它能水解青霉素、头孢菌素及单环类抗生素。我国三级医院中已广泛开展ESBLs的基础研究，加强二级医院使用抗生素的监测及管理也是必要的。ESBLs主要由革兰阴性杆菌中的肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和阴沟肠杆菌产生，本研究即对我院下呼吸道感染上述3种细菌的分离株进行分析，现报道如下。     

12株产β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的耐药基因检测

目的 研究革兰阴性杆茵产β-内酰胺酶的基因型.方法 收集北京大学人民医院12株革兰阴性杆菌,用VITEK-2系统进行鉴定和药敏检测,对多种β内酰胺酶基因进行聚合酶链反应(PCR)扩增.耐药基因与pGEM-3zf载体连接转化至大肠埃希茼DH5d,筛选、鉴定阳性克隆后进行序列分析.结果 12株菌检测出CTX-M型、TEM型、SHV型、OXA型、PER型和IMP型耐药基因,其中1株鲍曼不动杆茵同时携带OXA型和PER型耐药基因.2株大肠埃希茵的耐药基因分别在CTX-M-14的基础上发生了1个位点的突变.结论 细菌携带一种或多种耐药基因导致多重耐药,基因突变可导致新的基因型产生.鲍曼不动杆菌产金属碳青霉烯酶或丝氨酸碳青霉烯酶对亚胺培南耐药.     

革兰阴性杆菌耐药与产AmpC酶的检测及其与耐药的关系分析

目的了解274株革兰阴性杆菌的耐药现状及产AmpC酶与耐药的关系分析。方法采用microscan walkaway-4．0鉴定274株革兰阴性杆菌的药敏情况,并用酶粗提物头孢西丁三维实验检测AmpC酶。结果32株细菌产AmpC酶(占11．7％),其中阴沟肠杆菌13株(占30．2％)、产气肠杆菌2株(占22．2％)、不动杆菌6株(占21．4％)。274株菌对IPM、AK、CIP、FEP、CN、SXT、CAZ、ATM、CRO、PIP的药物敏感率从高到低依次为：89．4％、78.8％、69．3％、55．5％、45．9％、39．1％、36．9％、31．4％、30．3％、18．2％。结论革兰阴性杆菌的耐药状况严重,检测AmpC酶有助于临床抗菌药物的选用。