猪圆环病毒2型灭活疫苗的制备与免疫效力研究

猪圆环病毒2型（PCV2）经0.2%甲醛37℃作用一定时间后接种PK-15细胞,盲传3代,用PCR方法检测灭活效果。将灭活的PCV2加入适量的白油和氢氧化铝胶制成PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗,免疫小鼠,共免疫2次,时间间隔为3周,分别于一免后第21天和二免后第14天进行ELISA抗体检测。同时为了评价国产油佐剂和进口油佐剂的免疫效果,笔者进行了猪体免疫效力试验。通过ELISA抗体、攻毒后临床表现及体温变化、剖解时的病理变化、平均日增重及病毒血症等指标对疫苗免疫效果进行评价。结果如下：①PCV2能被0.2%甲醛完全灭活,灭活时间为16 h。②PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗免疫小鼠后均能产生较好的免疫应答,并且油佐剂灭活疫苗免疫效果好于铝胶佐剂灭活疫苗。③猪体免疫效力试验表明,两种油苗均能产生较高水平的ELISA抗体。攻毒后,攻毒对照猪的体温高于免疫猪,空白对照猪体温正常。免疫猪及空白对照猪平均体重均升高,而攻毒对照猪平均体重有所降低,且两个免疫组和空白对照组之间平均日增重差异显著（P〈0.05）。病毒血症检测及病毒DNA在组织中的分布检测表明两油苗均能够有效降低猪体的带毒。以上结果表明,PCV2灭活疫苗免疫小鼠和猪体后均能诱导机体产生免疫应答,并能够在一定程度上抵抗PCV2对猪体的感染。     

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫效果试验

本试验将10窝同期出生的共105头仔猪,随机分为试验组和对照组,试验组于14日龄、45日龄分别进行猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫,对照组不免疫。通过临床跟踪观测和定期采血进行猪圆环病毒2型ELISA抗体和PCR病毒核酸检测。结果表明,临床免疫猪群成活率及生长指标明显好于不免疫猪群;试验组及对照组病毒核酸阳性检出率和抗体阳性率差异不显著,且可同时检出圆环病毒核酸及抗体。     

猪2型圆环病毒自家组织灭活苗的研制及其免疫效果观察

本试验通过检测细胞组织培养PCV2灭活疫苗与自家细胞免疫后PCV2抗体水产,结果表明,自家组织灭活苗是预防PCV2行之有效的办法。     

猪圆环病毒灭活疫苗最新研究进展

文章主要对当前猪圆环病毒2型(PCV2)的流行现状、猪圆环疫苗的应用及发展趋势进行综述.当前PCV2仍是导致猪群发生圆环相关疾病的主要病原,PCV2d成为优势基因亚型,疫苗免疫可显著提高母猪的繁殖性能,降低保育猪和育肥猪的病死率,提高日增重,且当前商品疫苗对流行毒株仍可起到较好的免疫保护.     

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫试验

采用勃林格殷格翰动物保健公司生产的猪圆环病毒2型杆状病毒载体灭活疫苗,在光明农牧科技有限公司3个畜牧场分别进行免疫核心试验。结果显示,相比对照组,实验组猪成活率、日增重、整齐度等都有较大的改善,投入产出经济效益较好。     

五种常用猪2型圆环病毒疫苗的效果比较与分析

为了比较不同厂家疫苗对圆环病毒2d亚型（PCV2d）的防控效果,试验将相同批次的28 d龄断奶仔猪525头,分成5组,每组105头,分别接种A、B、C、D和E五个厂家的PCV2疫苗。免疫前从每个组中挑选15头断奶仔猪,采血监测PCV2抗体,根据抗体结果再将小猪均衡调配至各疫苗组并标记为后续跟踪监测对象,于60、88、97、107、117、127、137、149、158和181 d龄进行采血监测PCV2感染情况。试验前称取并记录各组猪只的重量,试验期间记录猪只的死淘情况和饲料消耗量,试验后再次称重并计算日增重和料重比。结果显示：感染后各时间点血液PCV2抗原的阳性率整体上,疫苗D组>疫苗A组>疫苗E组>疫苗B组>疫苗C组;死淘率和料重比,疫苗C组<各疫苗组;日增重,疫苗C组>各疫苗组;疫苗C组猪只的血液PCV2抗原阳性率低、病毒血症维持时间短、死淘率低（8.57%）、日增重高（0.738 kg/d）、料重比低（2.644）。说明疫苗C相较其他厂家的疫苗效果更好,更能有效防控PCV2d型毒株的感染。     

两种猪圆环病毒2型疫苗临床免疫效果的比较

选取国内商业PCV2疫苗A和B,在一个大型猪场进行小型田间试验.将36头母猪随机平均分成3组,每组母猪所产仔猪在14日龄分别接种疫苗A(A组)、 疫苗B(B组)、 生理盐水(C组,对照).采集免疫后不同时间的仔猪血清,检测PCV2抗体,比较各组的发病率、 死亡率与增重.结果显示,接种疫苗组与对照组的仔猪发病率与死亡率都低、 且无差异;但接种PCV2疫苗的两组都显著(P<0.05)提高了增重,并改善了血清中PCV2抗体变化趋势.另外,A组的临床数据稍优于B组.检测结果表明,仔猪免疫PCV2疫苗的临床效果明显优于未免疫组,PCV2疫苗A的临床免疫效果稍好于疫苗B,为试验猪场今后进行PCV2疫苗免疫提供了实验依据.     

猪圆环病毒2型和3型混合感染引起的母猪繁殖障碍诊治

【目的】寻找引起某猪场母猪屡次配种不孕的原因。【方法】采集母猪饲料槽中正在食用的饲料检测黄曲霉素B₁含量;采集返情母猪的口鼻腔拭子、肛门拭子及血清,使用PCR、RT-PCR方法检测猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)、PCV3、猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)、猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪瘟病毒(Classic swine fever virus,CSFV);随机剖检13头返情母猪,采集脾脏、淋巴结、脊髓、子宫、卵巢组织检测繁殖障碍性病毒的感染情况;对检测到的PCV2和PCV3部分阳性样品进行ORF2基因序列分析;观察母猪卵巢病理变化情况,汇总分析结果,诊断该场母猪受胎率低、持续返情的原因。【结果】该猪场饲料中黄曲霉素B₁含量为4.5~9.0 μg/kg,均在GB 13078－2017规定的饲料中黄曲霉素B₁允许范围内(＜20 μg/kg)。PCR、RT-PCR结果显示,口鼻腔拭子、肛门拭子和血清的PCV2、PCV3、PRV、PPV、PRRSV、CSFV检测结果均为阴性;13头母猪的PCV2阳性率为69.23%(9/13),PCV3阳性率为38.46%(5/13),PCV2和PCV3混合感染率为30.76%(4/13)。实时荧光定量PCR检测结果显示,PCV2在脊髓中的病毒载量最高,脾脏次之,淋巴结中最少;PCV3在脾脏中病毒载量最高,脊髓次之,卵巢中病毒载量最少。ORF2基因序列分析发现,PCV2为2d亚型,PCV3为3a亚型。卵巢病理切片观察发现,卵泡细胞数量减少,卵泡腔形状不规则、塌陷扁平。【结论】经过诊断确定该场母猪持续返情、屡配不孕的原因是PCV2和PCV3混合感染,进而引起繁殖障碍。根据诊断结果和该场情况,采取全群接种PCV2疫苗,配合全场消毒,加强生物安全防控,成功解决该场母猪繁殖障碍问题,恢复正常生产。     

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫效果试验

正猪圆环病毒病(Porcine circovirus diseases,PCVDs)是由猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)引发的一种猪传染性疾病。一旦PCV2感染猪后具有免疫抑制特性,能够干扰其它疫苗的免疫效果~([1])。近几年我国猪场的PCV2感染     

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫效果试验

<正>猪圆环病毒病(Porcine Circovirus Diseases,PCVD)或称猪圆环病毒相关性疾病(PCVAD)是主要由猪圆环病毒2型(PCV2)引起的免疫抑制性疾病,临床表现为仔猪先天性震颤(CT)、断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎肾病综合征(PDNS)、猪呼吸道病综合征(PRDC)、母猪繁殖障碍(RF)等[1]。猪圆环病毒2型(PCV-2)主要在机体的单核细胞、巨噬细胞等抗原递呈细胞中生长和复制。引起这类抗原递呈细胞的抗原递呈能力下降,导致机体的免疫机能受到抑制。使得畜体免疫功能受到损害,造成其他细菌或者病毒的并发和继发感染[2]。最近几年我国养猪业面     

2型猪圆环病毒研究进展

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)是一种基因组较小,但有较高进化速率的DNA病毒,其是影响养猪业经济发展的重要病原体。到目前为止,PCV2具有5种基因型-PCV2a到PCV2e,但对PCV2流行株的基因序列的检测发现,PCV2的基因型仍在持续的发展。自2012年以来,PCV2d基因型的圆环病毒在北美取代了以前主导的PCV2b基因型感染,同时在中国和韩国也有了类似的趋势。圆环病毒的新兴基因型,其毒力存在增强的可能性,基于PCV2a基因型制备的疫苗,是否对PCV2d基因型圆环病毒的感染具有保护作用,已引起各国学者的重视。本文通过对PCV2的生物学特性、抗体变异情况以及其基因进化情况进行综合的分析总结,从而为PCV2疫苗的开发与研制奠定理论基础。     

猪圆环病毒3型与猪圆环病毒2型二重PCR检测方法的建立

为建立同时检测PCV3和PCV2的二重PCR方法,分别以PCV3和PCV2基因组的保守区域设计2对特异性引物,片段大小分别为649,295 bp。将反应条件进行优化,构建PCV3和PCV2的二重PCR检测方法。检测结果表明该方法能特异性扩增PCV3和PCV2,且无法扩增其他猪常见病毒;PCV3和PCV2的最低检出限分别为508,412 copies/μL。临床样品检测结果显示,PCV3和PCV2阳性率分别为2.1%(3/145),62.1%(90/145),PCR产物经测序证实为PCV3。本研究建立的二重PCR方法具有速度快、特异性强和灵敏度等优点,可以用于PCV3和PCV2的检测和流行病学调查。     

猪圆环病毒2型(PCV2)遗传变异与疫苗免疫、发病机理及诊断的关系

猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)的发生依赖猪圆环病毒2型(PCV2)的感染,表现为一群复杂的多因子综合征。目前在野外流行的PCV2被分为PCV2a和PCV2b两个亚群。北美和其它国家PCVAD的暴发通常与主要基因型从PCV2a转变为PCV2b有关。因此,有人提出基因型存在致病性和抗原性差异。总体来说,毒力是特定PCV2分离株的特性,与基因型无关。此外,报道证实只有少数抗原差异。就免疫病理学而言,位于衣壳蛋白C端一个保守的诱骗表位为不能鉴定基因型之间的致病力差异提供了解释。最后本文讨论了PCV2的遗传变异对疫苗和诊断方法的影响。     

用猪圆环病毒Ⅱ型灭活疫苗免疫控制猪圆环病毒病的最新田间研究结果

1前言 猪圆环病毒Ⅱ型疾病(PCVD)已经成为可造成全球绝大多数国家的养猪业严重经济损失的主要疾病[1].自1995年此病在欧洲的首次报道以来,出现PCV2临床症状的猪场就不断的增加.     

猪圆环病毒2型(PCV2)遗传变异与疫苗免疫、发病机理及诊断的关系(续)

<正>上期回顾:上一期主要介绍了PCV2分离株的进化和分类,包括圆环病毒的起源、PCV2的出现和PCV2的分类和系统发生的关系。2分子差异与PCV2的致病性PCV1、PCV2a和PCV2b的基因组大小分别为1 759、1 768和1 767个核苷酸(Tischer等,1986;Meehan等,1998)。PCV1和PCV2在核苷酸水平上序列有70%的相同,PCV2a和PCV2b基因型有95%的相似性。PCV2各基因型主要差异在ORF2,该处核苷酸和氨基酸序列的相似度有90%。有报道指出肽段的不同造成了致病力的差异,导致低致病性的PCV2a被PCV2b取代。序列比较发现ORF2内有一对基序可以区别PCV2a和PCV2b分离株(cheung等,2007)。PCV2b病毒基因组1 486~1 472位序列为TCA/AAC/CCC/CG,PCV2a在1 487~     

猪圆环病毒2型感染对猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗体液免疫的影响

本试验采用ELISA方法对单独接种猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株灭活苗组(HP组,n=3)和PCV2感染且出现病毒血症后接种PRRSV变异株灭活苗组(PCV2/HP组,n=3)不同时相血清中的PRRSV抗体进行检测;并对HP和PCV2/HP组血清中PCV2特异的抗体和核酸分别进行ELISA和荧光定量PCR检测。结果表明,在首免后70 d HP组血清平均抗体效价极显著高于PCV2/HP组(P<0.01);首免后56、63和77 d HP组平均抗体效价明显高于PCV2/HP组。其中在首免后56和63 d HP组抗体阳性率均达67%(2/3),PCV2/HP组在相应时相抗体阳性率为0;在首免后70和77 d HP组抗体阳性率均达100%(3/3),PCV2/HP组在相应时相抗体阳性率仅为0和33%(1/3)。结果提示PCV2感染可在一定程度上抑制PRRSV变异株(JXA1)特异性的抗体反应。     

猪圆环病毒2型（PCV2）：遗传变异与疫苗免疫、发病机理及诊断的关系（续）

上期回顾：上一期主要介绍了PCV2分离株的分子差异与PCV2的致病性，包括猪圆环病毒间致病差异、ORF1和ORF2对致病性的影响、CP内的抗体表位、PCV2基因型间的抗原性差异。     

猪圆环病毒2型原位杂交检测方法的建立

参照GenBank发表的PCV2ORFl基因序列设计了1对引物,利用PCR地高辛探针合成的方法制备了长度为494bp的特异性探针,经检验具有良好的特异性和敏感性,可检测最低质粒DNA质量浓度为0．9728ug／L。用该探针建立了原位杂交组织切片检测方法,并用来检测PCV2感染猪的扁桃体和淋巴结组织,结果表明阳性信号主要存在于巨噬细胞胞浆中,信号强、背景良好,阴性对照无显色,说明该方法可作为PCV2实验室诊断和机理研究的一种有效检测方法。