血管紧张素Ⅱ对大鼠血管平滑肌细胞T型钙通道及其信号转导通路的影响

目的 研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对血管平滑肌细胞Cav3.1表达的影响及其作用机制.方法 酶消化法原代培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞,应用第5代传代细胞,实验随机分为7组:对照组(不加任何药物)、AngⅡ组[加入AngⅡ(0.1μmol/L)培养24 h]、AngⅡ+氯沙坦钾组[加入氯沙坦钾(1μmol/L)培养1h,再加入AngⅡ(0.1 μmol/L)共同培养24 h]、AngⅡ+PD98059组[加入PD98059(10 μmol/L)预刺激1h,再加入AngⅡ(0.1 μmol/L)共同培养24 h]、PD98059组[加入PD98059(10 μmol/L)培养1h]、AngⅡ+氯沙坦钾+PD98059组[先加入氯沙坦钾(1μmol/L),PD98059(10 μmol/L)培养1h,再加入AngⅡ(0.1 μmol/L)共同培养24 h]、氯沙坦钾组[加入氯沙坦钾(1μmol/L)培养4h].RT-PCR、Western blot方法测定各组T型钙通道的表达.结果 PCR结果显示:与对照组(1.000±0.315)比较,AngⅡ组Cav3.1表达量(17.930±0.954)明显增加(P＜0.01);PD98059组、氯沙坦钾组Cav3.1表达量为0.928±0.262、0.978±0.292,与对照组比较差异无统计学意义(P＞ 0.05);AngⅡ+氯沙坦钾组、AngⅡ+PD98059组、AngⅡ+氯沙坦钾+PD98059组的Cav3.1表达量分别为0.125±0.007、0.066±0.015、0.109±0.018,明显低于AngⅡ组(P＜0.01).Western blot结果显示:与对照组比较,AngⅡ+氯沙坦钾组、AngⅡ+PD98059组及AngⅡ+氯沙坦钾+PD98059组Cav3.1蛋白表达明显降低(P＜0.05);而PD98059组及氯沙坦钾组Cav3.1蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 AngⅡ通过Ras/PKCξ/MEK/ERK 1/2路径增加血管平滑肌细胞Cav3.1的表达.     

姜黄素和氯沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导的内皮间质细胞转化的作用及机制研究

目的 研究姜黄素和氯沙坦对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的内皮间质细胞转化(EndMT)的作用及机制.方法 培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)然后分为4组:对照组(不加刺激药物的正常培养组);AngⅡ组(加入刺激浓度为0.1 μmol/L或1μmol/L的AngⅡ);姜黄素+AngⅡ组(先加入12.5 μmol/L的姜黄素预孵1h,再加入1 μmol/L的AngⅡ);氯沙坦+AngⅡ组(先加入10 μmol/L的氯沙坦孵育2h,再加入1μmol/L的AngⅡ);刺激24 h后行划痕试验检测各组细胞迁移能力改变和CCK-8检测细胞活力;刺激5d后,显微镜观察各组细胞形态变化和Western blot检测各组血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达量.结果 HUVECs经AngⅡ刺激后形态改变,长梭形样细胞明显增多;姜黄素和氯沙坦可维持内皮细胞铺路石样形态.AngⅡ呈浓度依赖性地降低HUVECs存活率(P＜0.01);各组存活率均＞50％(均P＜0.05).相比对照组,AngⅡ促进HUVECs的迁移(P＜0.05);相比AngⅡ组,加入姜黄素和氯沙坦可抑制HUVECs的迁移(均P＜0.05).AngⅡ可诱导EndMT,AngⅡ刺激5d后VE-cadherin表达减弱(P=0.003),而α-SMA和TGF-B1的表达都明显增强(均P＜0.01),姜黄素和氯沙坦使VE-cadherin表达明显增加,而α-SMA和TGF-β1的表达均明显下调.结论 姜黄素和氯沙坦通过下调TGF-β1表达抑制AngⅡ诱导的EndMT.     

氯沙坦对血管紧张素Ⅱ所致血管平滑肌细胞凋亡及凋亡调控基因的影响

目的探讨氯沙坦(LT)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡和凋亡调控基因的影响.方法采用流式细胞技术测定在AngⅡ不同浓度和不同作用时间下VSMC凋亡率及凋亡调控基因Fas、bcl-2表达的变化和氯沙坦对其的影响.结果①随着AngⅡ作用浓度的增加,VSMC凋亡率及Fas,bcl-2基因的表达量均增加(2.35±0.56 vs 19.71±3.03;Fas1.36±0.32 vs 14.67±1.39;bcl-22.35±0.51vs 16.65±1.42,P<0.01);②LT可促进VSMC的凋亡,促进Fas基因的表达,但可抑制bcl-2基因的表达(19.71±3.03 vs 27.65±2.11,Fas14.67±1.39 vs 20.14±1.41;bcl-216.65±1.42 vs 7.17±1.38,P<0.05);③随着AngⅡ作用时间的增加,VSMC凋亡率及Fas、bcl-2基因的表达均增加(1.43±0.21 vs 18.56±3.68,Fas1.21±0.32 vs 8.62±1.54,bcl-22.53±0.71 vs 15.41±1.63,P<0.01);④随着LT作用时间的增加,VSMC凋亡率及Fas基因的表达均增加,对bcl-2基因的表达则有抑制作用(18.56±3.68 vs 31.25±2.89,Fas8.62±1.54vs 17.46±1.47;bcl-215.41±1.63 vs 8.45±1.51,P<0.05).结论AngⅡ具有促进VSMC凋亡和凋亡调控基因表达作用;氯沙坦可调节AngⅡ对血管平滑肌细胞的作用.     

Effect of irbesartan on angiotensin Ⅱ-induced hypertrophy of human proximal tubular cells

Background Intrarenal activation of the renin angiotensin system (RAS) plays an important role in mediating renal fibrosis. Both angiotensin converting enzyme inhibitors (ACEIs) and angiotensin Ⅱ (AngⅡ) receptor antagonists have been shown to exert a protective role against diabetic and non-diabetic nephropathy. However, the exact mechanism of how blocking local RAS prevents renal fibrosis is unclear. The present study was to investigate the influence of a new AngⅡ receptor antagonist, irbesartan (Irb), on AngⅡ-induced hypertrophy in human proximal tubular cell line (HK-2). Methods The cell line, HK-2, was grown in Dulbeccos’s Modified Eagle’s Medium containing 10% heat-inactivated fetal calf serum. After rested in serum-free medium for 24 hours, the effects of Irb on AngⅡ (10(-7) mol/L)-induced ［3H］-leucine incorporation, total protein content (measured by the Coomassie brilliant blue G250 method), and change in cell size (determined by scanning electron microscopy) were observed. The influence of Irb on the cell cycle was analyzed by fluorescence activated cell sorter (FACS) flow cytometry. Results AngⅡ induced cell hypertrophy in a time and dose dependent manner. Stimulation of cells with AngⅡ for 48 hours resulted in a increase in ［3H］-leucine incorporation ［0 hour: (5584±1016) cpm/10(5)cells vs 48 hours: (10741±802) cpm/10(5)cells, P&lt;0.05］, which was significantly attenuated by treatment with Irb. AngⅡ significantly increased the total protein content in HK-2 cells ［control: (0.169±0.011) mg/10(5)cells vs AngⅡ group: (0.202±0.010) mg/10(5) cells, P&lt;0.05］, which was also markedly inhibited by cotreatment with Irb (P&lt;0.01). Scanning electron microscopy showed that AngⅡ induced an increase in average physical cell size, which was significantly inhibited by Irb ［control: (11.92±1.62) μm; AngⅡ group: (20.63±3.83) μm; AngⅡ+Irb group: (13.59±3.15) μm; P&lt;0.01 vs control, respectively］. Furthermore, flow cytometry revealed that AngⅡ arrested cells in the G0-G1 phase, which was significantly reversed by treatment with Irb ［G0-G1 cells in AngⅡ group: (76.09±1.82)%, in AngⅡ+Irb group: (67.00±2.52)%, P&lt;0.05］.Conclusion Irb can inhibit AngⅡ-induced hypertrophy in HK-2 cells.     

瘤内注射90Y-SAg治疗小鼠肝癌移植瘤的实验研究

目的探讨瘤内注射放射性核素钇-90(90Y)与超抗原(SAg)混悬液90Y-SAg治疗小鼠肝癌移植瘤的效果.方法30只荷瘤小鼠随机分为三组,每组10只,分别瘤内注射0.1 ml SAg和0.1 ml (100 μci)90Y(A组)、0.1 ml (100 μci)90Y(B组)、0.1 ml SAg(C组). 结果注射后2周B组、C组肿瘤生长率分别为0.18±0.12和0.21±0.17,两组差异不显著(P＞0.05);A组呈负生长,生长率为-0.28±0.23,与B组和C组比较均有显著性差异(P＜0.01);A、B、C三组肿瘤坏死率分别为0.36±0.18、0.11±0.09、0.10±0.06, B组和C组均为轻度坏死,两组间差异不显著(P＞0.05),A组为中度坏死,与B组和C组比较有显著性差异(P＜0.01). 结论瘤内注射90Y-SAg疗效优于单一的 90Y或SAg注射,是一种有效的治疗小鼠肝癌移植瘤方法.     

腹膜淋巴孔研究的新进展

腹膜淋巴孔是腹膜下毛细淋巴管在腹膜间皮细胞间的开口。通过淋巴孔、腹膜腔与淋巴管系直接相通,它具有主动吸收功能,是腹膜腔内物质转归的最主要部位。淋巴孔与肝硬化腹水的转归、连续不卧床腹膜透析的失超滤、肿瘤细胞的转移和扩散等密切相关。淋巴孔还具有调控和免疫功能。ＮＯ对淋巴孔调控作用是目前研究的热点,它通过激活鸟苷酸环化酶途径,增加细胞内ｃＧＭＰ,降低Ｃａ＾２＋水平,使淋巴孔产生强烈的舒张,淋巴孔开放数目增多、孔径增大,淋巴引流作用增强。而中药通过提高内源性ＮＯ水平,也能对腹膜淋巴孔进行调控,以促腹水转归。     

TAZ蛋白在血管紧张素Ⅱ诱导的高血压小鼠主动脉纤维化中的作用及其机制

目的 探讨PDZ结合域的转录共刺激因子(TAZ)蛋白在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的高血压小鼠主动脉纤维化中的作用及其机制。方法 将18只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、AngⅡ组和AngⅡ+维替泊芬(Ve)组，每组6只。AngⅡ组和AngⅡ+Ve组小鼠皮下植入注满AngⅡ的渗透压微量泵，持续14 d释放AngⅡ(1.1 mg·kg^-1·d^-1)诱导小鼠高血压模型；正常对照组小鼠不进行AngⅡ干预。AngⅡ+Ve组小鼠隔日腹腔注射1次Ve(60 mg·kg^-1)至实验结束；AngⅡ组和正常对照组小鼠隔日腹腔注射等量生理盐水。造模结束后，采用尾动脉测压法测定小鼠收缩压(SBP)、舒张压(DBP)和心率；使用水合氯醛麻醉小鼠，打开胸腔，分离主动脉，采用苏木精-伊红染色法检测小鼠主动脉厚度，Masson染色法检测小鼠主动脉纤维化情况，Western blot法检测TAZ、转化生长因子-β(TGF-β)、母亲信号蛋白同源物3(Smad3)、磷酸化母亲信号蛋白同源物3(p-Smad3)和Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)...     

水通道蛋白-1 在肝硬化腹水大鼠腹膜上的表达

目的探讨腹膜上水通道蛋白-1(AQP-1)的表达与肝硬化大鼠腹水形成之间的相互关系.方法 32只健康SD大鼠分为肝硬化组(20只)和正常对照组(12只),采用苯巴比妥钠诱导加皮下注射CCl4制造细胞毒性肝硬化大鼠伴腹水模型;免疫组织化学检测 AQP-1 在大鼠腹膜上的分布及蛋白质的表达.RT-PCR方法检测各组大鼠AQP-1在肝硬化腹水形成前后腹膜上 mRNA的表达,并以3-磷酸甘油醛脱氢酶相对定量.结果腹膜免疫组化显示,AQP-1 主要表达在腹膜毛细血管及小静脉的内皮细胞上,同时,间皮细胞上也有 AQP-1 的表达.在肝硬化早期(第6周末)两组AQP-1蛋白质[相对积分光密度正常对照组(23±10),肝硬化组(21±13)]和 mRNA[正常对照组(0.63±0.11) μg/μl,肝硬化组(0.67±0.15) μg/μl]的表达量差异均无统计学意义.在肝硬化晚期 (第12周末)AQP-1 蛋白质[相对积分光密度正常对照组(23±9),肝硬化组(15±8)]和 mRNA[正常对照组(0.58±0.15) μg/μl,肝硬化组(0.43±0.16) μg/μl]的表达均下调. 结论在肝硬化伴腹水模型大鼠腹膜的毛细血管及小静脉的内皮细胞上AQP-1表达减少, AQP-1 的减少可能参与了腹水的形成.     

PI3K/AKT通路与TRPC6通道在Ang Ⅱ诱导足细胞损伤中的相互作用

目的 探讨磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路与瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)在血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的肾小球足细胞损伤过程中的作用及其可能机制.方法 体外培养小鼠肾小球足细胞,分别利用Ang Ⅱ、氯沙坦、PI3K/AKT通路抑制剂(LY294002)、TRPC6通道阻滞剂(SKF96365)进行处理,将细胞分为空白对照组、Ang Ⅱ组、Ang Ⅱ+氯沙坦组、氯沙坦组、Ang Ⅱ+LY294002组、LY294002组、Ang Ⅱ+SKF96365组、SKF96365组,采用qRT-PCR检测各分组细胞TRPC6 mRNA的变化.采用Western blot检测各分组细胞AKT、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、TRPC6蛋白质表达的变化.采用Hoechst 33258染色法检测各组足细胞凋亡情况.结果 与空白对照组相比,Ang Ⅱ组AKT磷酸化水平降低,TRPC6的表达升高,足细胞凋亡增加(P＜0.05).与Ang Ⅱ组相比:Ang Ⅱ+SKF96365组AKT磷酸化水平升高,TRPC6的表达下降,足细胞凋亡减少(P＜0.05);Ang Ⅱ+LY294002组AKT磷酸化水平减少,足细胞凋亡增加(P＜0.05);Ang Ⅱ+氯沙坦组AKT磷酸化水平升高,TRPC6的表达下降,足细胞凋亡减少(P＜0.05).结论 Ang Ⅱ可能通过激活TRPC6通道进而抑制PI3K/AKT通路的激活而导致足细胞损伤.     

ORBSCAN-Ⅱ角膜地形图仪与A超测量角膜厚度的比较

目的　比较orbscan -Ⅱ角膜地形图仪与A超角膜测厚仪对角膜中央测定的差异 ,为临床应用提供依据。方法　随机抽取 165例 ( 3 0 0只眼 )近视眼患者 ,对其在屈光手术前用orbscan -Ⅱ角膜地形图仪和A超测量角膜中央厚度的结果进行比较分析。结果　orbscan -Ⅱ测量角膜中央厚度为 ( 5 48.5 8± 3 0 .89) μm ,A超测量结果为 ( 5 44 .3 3± 2 9.68) μm ,两者之间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。其中角膜中央厚度在 5 0 0～ 60 0 μm之间有 2 47眼 ,orbscan -Ⅱ测量结果为 ( 5 49.46±2 3 .0 5 ) μm ,A超测量结果为 ( 5 44 .94± 2 3 .41) μm ,两者无显著性差异 (P >0 .0 5 )。 >60 0 μm者有 2 3眼 >,orbscan -Ⅱ测量结果为 ( 617 77± 11.3 7) μm ,A超测量结果为 ( 60 7.46± 17.68) μm ,两者无显著性差异 (P >0 .0 5 )。 <5 0 0 μm者有 3 0眼 ,orb scan -Ⅱ测量结果为 ( 493 .91± 6.81) μm ,A超测量结果为 ( 496.9± 8.2 0 ) μm ,两者无显著性差异 (P >0 .0 5 )。 结论　orbscan-Ⅱ与A超对角膜中央厚度的测量有较高的一致性 ,但不能完全代替超声测厚     

胺碘酮对人心房肌细胞钙电流和钙离子浓度影响的研究

目的　采用血管紧张素(Ang)Ⅱ刺激人的心房肌细胞,观察细胞膜钙通道电流及胞内游离钙浓度的变化,了解AngⅡ参与房性心律失常的电生理机制,同时观察胺碘酮的干预作用,为临床应用胺碘酮提供实验依据。方法　急性分离单个人心房肌细胞,采用全细胞膜片钳方法记录L 型钙电流(ICa L),同时应用共聚焦显微镜技术测定细胞内游离钙的浓度。实验分为对照组、AngⅡ组(0.1μmol/L AngⅡ)、胺碘酮组(30 nmol/L胺碘酮)及AngⅡ+胺碘酮组。结果　与对照组相比,0.1μmol/L AngⅡ能使人心房肌细胞膜ICa L峰值电流密度明显增加[(-12.77±1.61) pA/pF比(-5.78±0.81) pA/pF,P<0.05];30 nmol/L胺碘酮对人心房肌细胞膜ICa L无明显影响[(-5.58±0.62) pA/pF];但胺碘酮可拮抗AngⅡ的作用,AngⅡ+胺碘酮组的ICa L峰值电流密度[(-7.16±0.82) pA/pF]与AngⅡ组的差异有显著性(P<0.05)。共聚焦显微技术发现,对照组和胺碘酮组人心房肌细胞内荧光强度和荧光吸光度值较低;加入AngⅡ后即刻,细胞内荧光吸光度值开始增加,15 min后细胞内荧光强度和荧光吸光度值明显增高,与对照组比较,差异有显著性(P<0.05);而AngⅡ+胺碘酮组细胞内荧光吸光度值显著低于AngⅡ组(P<0.05)。结论　AngⅡ使人心房肌细胞膜ICa L峰值电流密度明显增加,同时可引起人心     

大鼠正中视前核注射血管紧张素Ⅱ对近曲小管Na^＋，K^＋ -ATPase活性的影响

目的 探讨大鼠正中视前核(MnPO)的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对肾脏近曲小管Na+,K+-ATPase活性的作用及其途径.方法 雄性SD大鼠,麻醉下MnPO注射AngⅡ,或预先注射Ang Ⅱ的Ⅰ型受体(AT1)拮抗剂氯沙坦(Losartan)后再注射AngⅡ.注射后45min取血,放射免疫分析法测定血清内源性洋地黄样物质(EDLS)水平;立体显微镜下手工微分离单根近曲小管,电镜鉴定,液闪计数器测定近曲小管Na+,K+-ATPase活性.结果 与MnPO注射aCSF的结果比较,在MnPO注射AngⅡ后45min,血清EDLS水平显著升高(59.87±4.48)pg/mL vs.(42.86±4.0)pg/mL,P<0.05;近曲小管Na+,K+-ATPase活性显著降低(1327±127)pmol Pi/mm/h vs.(1788±118)pmol Pi/mm/h,P<0.05;近曲小管Na+,K+-ATPase活性下降幅度与血清EDLS升高幅度呈负相关(r=-0.945,P<0.05);而Losartan预处理MnPO再注射AngⅡ后45min,血清EDLS水平和近曲小管Na+,K+-ATPase活性均无显著变化.结论 AngⅡ通过作用于MnPO的Ⅰ型受体(AT1),可抑制肾小管的Na+,K+-ATPase活性,AngⅡ的这一作用与其促进EDLS的释放有关.     

替米沙坦对肾脏的保护作用

目的　探讨血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )受体拮抗剂 (ARB)替米沙坦和血管紧张素转换酶抑制剂 (A CEI)苯那普利对负鼠近端小管上皮细胞 (OK细胞 )增殖和Na+ K+ ATP酶活性的影响。方法　培养的OK细胞采用低渗方法制备细胞膜悬液 ,以BCA 10 0蛋白质定量测定试剂盒测定膜蛋白 ;Na+ K+ ATP酶活性采用孔雀绿比色分析法测定释放的无机磷 (Pi)含量 ,培养液中分别加入AngⅡ、AngⅡ +替米沙坦、AngⅡ +苯那普利 ,观察其对OK细胞Na+ K+ ATP酶活性的影响。结果　①对照组Na+ K+ ATP酶活性为 (0 .0 896± 0 .0 0 6 6 )μmol·mg蛋白质·L-1·h-1,1× 10 -10 mol/LAngⅡ组为 (0 .0 972± 0 .0 0 81) μmol·mg蛋白质·L-1·h-1,活性明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;培养液中同时加入 1× 10 -10 mol/LAngⅡ和 1× 10 -9mol/L替米沙坦时为 (0 .0 6 2 3± 0 .0 0 5 3) μmol·mg蛋白质·L-1·h-1,较 1× 10 -10 mol/LAngⅡ组明显降低 (P <0 .0 5 ) ;培养液中同时加入1× 10 -10 mol/LAngⅡ和 1× 10 -9mol/L苯那普利为 (0 .10 2 7± 0 .0 0 17) μmol·mg蛋白质·L-1·h-1,与 1×10 -10 mol/LAngⅡ组的差异无显著性 (P >0 .0 5 )。②AngⅡ对OK细胞DNA合成有刺激作用 ,随着浓度的升高(1× 10 -10 ～ 1× 10 -6mol/L)作用     

氯沙坦减轻幼龄肾损伤大鼠蛋白尿的作用

目的　观察血管紧张素Ⅱ受体 1拮抗剂氯沙坦减轻幼龄肾损伤大鼠蛋白尿的作用。方法　对SD幼龄大鼠 (1个月龄 ,体重 10 0 g左右 )行单侧肾切除加阿霉素注射建立动物模型 ,术后治疗组即给予氯沙坦 5mg/kg·d-1灌胃 ,共12周 ,观察大鼠蛋白尿的变化。结果　于治疗的第 9、12周 ,尿蛋白 (mg/d)氯沙坦组与同期模型组相比分别为 :2 4 2±2 12vs 17 4 8± 9 77、4 6 3± 4 15vs 15 18± 4 71(P值均<0 0 1)。结论　在单侧肾切除后 1周注射阿霉素的幼龄肾损伤大鼠动物模型中 ,氯沙坦显示了较好的降尿蛋白作用     

中药复方治疗肝纤维化及腹水的电镜实验研究

[目的 ]探讨中药复方促腹水转归的可能机制。 [方法 ]将不同剂量的某中药复方作用于 CCL4 诱导的小鼠肝纤维化模型 ,电镜下观察小鼠肝纤维化组织和腹膜淋巴孔的变化 ,检测尿量和尿离子浓度。 [结果 ]大、小剂量中药复方组小鼠肝组织病变轻微 ,腹膜淋巴孔开放数目增多 ,面积增大 ,分布密度增加 ,且尿中 Na+ 、K+ 、Cl- 浓度上升。 [结论 ]大、小剂量中药复方对小鼠肝纤维化组织有明显修复作用 ,并通过调控腹膜淋巴孔促进腹腔内液体和无机盐离子排出 ,对治疗肝纤维化及腹水有一定意义。     

血管紧张素Ⅱ对结肠癌CT26细胞株增殖及侵袭的影响

目的: 研究血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)及其1型受体(angiotensin Ⅱ type 1 receptor,AT1R)阻滞剂氯沙坦对结肠癌CT26细胞株增殖和侵袭能力的影响。方法: 采用免疫荧光法检测AT1R在CT26细胞中的表达;采用CCK8法分别检测不同浓度AngⅡ和氯沙坦作用后细胞的增殖率,选取最适作用浓度的AngⅡ和氯沙坦;将CT26细胞分为对照组(常规培养)、Ang Ⅱ组(1×10-7moL/L)、氯沙坦+Ang Ⅱ组(1×10-6moL/L氯沙坦预处理2 h+1×10-7moL/L Ang Ⅱ);采用侵袭实验检测细胞的侵袭能力;ELISA法检测CT26细胞中TNF α的分泌量;蛋白质印迹法检测AT1R和TNF α蛋白的表达。结果： 免疫荧光结果显示AT1R表达于CT26细胞;与对照组相比,Ang Ⅱ组CT26细胞的增殖、侵袭能力增强,AT1R及TNF α蛋白的表达增加(P均<0.05)。与Ang Ⅱ组对比,氯沙坦+Ang Ⅱ组肿瘤细胞增殖、侵袭能力均减弱,AT1R及TNF α蛋白的表达降低(P均<0.05)。 结论： Ang Ⅱ可促进结肠癌CT26细胞增殖和侵袭,氯沙坦可拮抗Ang Ⅱ的作用。     

AngⅡ/Ang-(1-7)/Mas系统通路与脑心综合征关系的实验研究

目的研究AngⅡ/Ang-(1-7)/Mas系统通路在脑心综合征发生及发展中的作用,探讨脑心综合征的发病机制。方法健康成年雄性Wistar大鼠64只,随机分为空白对照组、模型对照组、氯沙坦组、氯沙坦+A779组,每组内再分别分为4 h组、24 h组(n=8)。用线栓法栓塞大脑中动脉制作脑梗死模型,监测各组大鼠心电图。脑氯化三苯基四氮(TTC)染色确定模型是否成功。化学发光法检测组织和血浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的含量,用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测组织和血浆中血管紧张素1-7(Ang-(1-7))的含量。用苏木素伊红染色(HE)观察各组大鼠心肌损伤程度。结果模型对照组心肌损伤严重,氯沙坦组心肌损伤有所减轻。氯沙坦+A779组心肌损伤较氯沙坦组较重。心肌损伤程度随着时间的延长相应加重。模型对照组血浆中AngⅡ的含量相比空白对照组增加(P<0.01),氯沙坦组AngⅡ的含量相比模型对照组显著增加(P<0.01),氯沙坦+A779组AngⅡ的含量与氯沙坦组相比显著降低(P<0.01)。模型对照组血浆中Ang-(1-7)的含量相比空白对照组显著降低(P<0.01),氯沙坦组Ang-(1-7)的含量相比模型对照组升高(P<0.01),氯沙坦+A779组Ang-(1-7)的含量相比氯沙坦组降低(P<0.01)。血浆AngⅡ、Ang-(1-7)的含量分别随着时间的延长相应增加(P<0.01)。心肌局部AngⅡ、Ang-(1-7)的含量变化趋势分别与血浆中AngⅡ、Ang-(1-7)含量的变化趋势一致。结论 Ang-(1-7)通过Ang-(1-7)特异性受体(D-Ala-7-Ang-(1-7),Mas)参与脑心综合征的发生及发展,并对脑梗所致的心肌损伤起到保护作用。     

血管紧张素Ⅱ及其受体在慢性环孢素A肾毒性大鼠肾组织中的表达

\[摘要\]目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ) 及其受体在慢性环孢素A(CsA)肾毒性中的表达。方法Sprague-Dawley大鼠皮下注射CsA(15 mg·kg-1·d-1) 4周, 建立慢性CsA肾毒性模型;正常对照组皮下注射橄榄油。检测各组大鼠的体重、收缩期血压、血CsA浓度、血清肌酐、肌酐清除率;三色染色观察肾小管间质纤维化;免疫组织化学染色和蛋白质免疫印迹法分别检测AngⅡ及其受体AT1和AT2的表达。结果慢性 CsA 肾毒性组表现为体重减少、血肌酐上升、肌酐清除率下降、肾小管间质带状纤维化 (P<0.01)。与对照组相比,毒性组大鼠AngⅡ的免疫活性明显增加(47±7 vs 13±4, P<0.01),主要分布于入球动脉的肾小球旁器,与肾小管间质纤维化程度紧密相关(r=0.769, P<0.001)。免疫印迹显示毒性组AngⅡ受体 AT1 的表达明显减少\[(114±14)% vs (42±6)%, P<0.01\],而 AT2 的表达增加\[(129±23)% vs (469±43)%, P<0.01\]。结论在慢性CsA肾毒性中,肾内肾素血管紧张素被激活,表现为AngⅡ免疫活性增加,这种AngⅡ免疫活性与肾小管间质纤维化紧密相关。     

AngⅡ受体拮抗剂对糖尿病肾病蛋白尿的治疗效果及分析

目的　调查血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )受体拮抗剂对糖尿病肾病蛋白尿是否有明确的疗效和对肾功能的保护作用。方法　选 4 7例糖尿病肾病患者进入该前瞻性研究 ,其血糖血压均控制在理想水平。随机分为治疗组 2 4例 ,对照组 2 3例 ,两组降压、降糖等治疗措施相仿 ,而治疗组加用AngⅡ受体拮抗剂厄贝沙坦 0 3g ,每日 1次。 结果　治疗 8周后 ,治疗组尿蛋白为 (1 95± 0 6 5 )g/2 4h ,与治疗前的 (3 14± 1 2 2 ) g/2 4h相比明显下降 (P <0 0 1) ,与对照组的 (3 0 1± 1 2 5 ) g/2 4h比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1) ,对照组血肌酐为 (2 2 4 5± 2 5 6 ) μmol/L ,与治疗前的 (175 3± 2 2 8) μmol/L相比明显上升 (P <0 0 1) ,与治疗组的 (115 6± 34 2 ) μmol/L比较 ,存在显著性差异 (P <0 0 1)。结论　AngⅡ受体拮抗剂具有降低糖尿病肾病的尿蛋白量 ,以及保护肾功能的作用。