非小细胞肺癌中DPC4基因的表达与微血管形成的关系

目的：探讨DPC4（deleted in pancreatic carcinoma locus4，DPC4）基因在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其与微血管形成的关系。方法：利用免疫组织化学S-P法检测52例NSCLC组织、19例相应的癌旁正常肺组织中DPC4、VEGF的表达，用CD34标记血管内皮细胞并计算微血管密度MVD值。结果：DPC4在肺癌原发灶中的阳性表达率为63．5％（33／52），与癌旁正常肺组织中的阳性表达率89．5％（17／19）相比，DPC4阳性表达水平显著降低（P〈0．05）；DPC4与组织学类型、肿瘤细胞分化程度无关（P〉0．05），但与淋巴结转移显著相关（P〈0．05）。52例NSCLC中，DPC4的表达与VEGF、MVD值均呈负相关（r=-0．303，P=0．020）。结论：DPC4的低表达可能是肺癌发生过程的早期事件，可促进肺癌的淋巴结转移，并可通过直接或间接的作用促进肺癌血管生成。     

DPC4蛋白在胆道恶性肿瘤中的缺失表达

Objective To clarify the relationship between loss of expression of DPC4 proteins and pathogenesis of biliary tract carcinoma. Methods 71 primary biliary tract carcinomas (BTCa), including 38 common bile duct (CBD) carcinomas, 18 gallbladder carcinomas, and 15 hilar bile ducts (HBD) carcinomas were examined by immunohistochemical staining. In addition, the CBD carcinomas were divided into two groups, a tumor group with metastasis (M+ group, 27 cases) and a tumor group without metastasis (M− group, 11 cases). Results The frequency of loss expression of DPC4 protein was 32.8% in BTCa, 47.3% in CBD carcinoma, 11% in gallbladder carcinoma and 13% in HBD carcinoma. A comparison of the frequency of loss expression of DPC4 showed significantly statistical difference in the CBD carcinoma versus gallbladder carcinoma and HBD carcinoma (P<0.01). The frequency of loss expression of DPC4 was 48.1% in the M⁺ group and 45.4% in the M⁻ group. There was no significantly statistical difference between them (P>0.05). Conclusion There is a close relationship between the pathogenesis of BTCa and inactivation of DPC4 with different frequencies of DPC4 gene alteration in various locations of the biliary tract, but inactivation of DPC4 is not related with tumor metastasis in BTCa.     

大肠癌中DPC4蛋白表达及与临床病理特征的关系

[目的]探讨大肠癌组织中DPC4蛋白的表达及其与患者临床病理特征的关系.[方法]免疫组化Elivison二步法检测60例大肠癌手术切除标本中DPC4蛋白的表达,并探讨其与患者组织学类型、浸润深度、淋巴结转移和远处转移等临床病理特征的关系.并取40例癌旁正常大肠组织作对照.[结果] DPC4蛋白主要在大肠癌和癌旁正常大肠组织的胞浆表达,呈棕黄色细颗粒.60例大肠癌标本中DPC4的阳性表达为21例(35.0％),其中强阳性为4例(6.7％).40例癌旁正常大肠组织中DPC4蛋白表达均为阳性,其中强阳性34例(85.0％).大肠癌组织中DPC4蛋白阳性表达率明显低于癌旁正常大肠组织(x2=42.62,P＜0.01).大肠癌组织中DPC4蛋白表达水平随组织分化程度的增加而增加(P＜0.01),随原发病灶的浸润深度增加、淋巴结转移和远处转移的出现而下降(P＜0.01).[结论]且DPC4蛋白表达降低或缺失在大肠癌的发生发展过程起重要作用,有望成为大肠癌基因诊断和治疗的新靶点.     

COX-2、VEGF在NSCLC中的表达及与微血管生成的关系

目的探讨肺癌组织中COX-2、VEGF的表达及与血管生成和临床病理特征的关系。方法收集85例肺癌和20例肺良性病变标本,免疫组化S-P法检测COX-2、VEGF蛋白及MVD的表达并作相关分析。结果COX-2、VEGF、MVD在肺癌中的阳性表达率显著高于肺良性病变组织(P<0.05);COX-2表达与肺癌的组织学类型、分化程度和淋巴结转移相关(P<0.05);VEGF表达与肺癌分化程度和淋巴结转移相关(P<0.05);COX-2、VEGF、MVD呈两两正相关。结论COX-2、VEGF参与了肺癌的发生发展过程,COX-2可能通过上调VEGF促进肺癌的血管新生和发生发展。     

在非小细胞肺癌组织中DPC4和P21WAF1/CIP1蛋白的表达

目的 探讨DPC4、P21WAF1/CIP1在非小细胞肺癌组织中的表达及与肺癌生物学行为及预后的关系.方法 利用免疫组组织化学S-P法检测60例非小细胞肺癌组织及30例癌旁正常肺组织中DPC4及P21WAF1/CIP1蛋白的表达.结果 DPC4在肿瘤组织中阳性表达率为65%(39/60),与癌旁正常肺组织的阳性表达率90%(27/30)相比,DPC4阳性表达显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05);DPC4与淋巴结转移、临床分期相关(P＜0.05),而与病理类型、组织学分级无关(P＞0.05).P21WAF1/CIP1在肿瘤组织中阳性表达率为68.3%(41/60),与癌旁正常肺组织的阳性表达率6.7%(2/30)相比,差异有统计学意义(P＜0.05);P21WAF1/CIP1与组织学分类、临床分期、是否有淋巴结转移等无关(P＞0.05).结论 DPC4、P21WAF1/CIP1异常表达可能参与了NSCLC的发生发展,联合检测二者有助于判断肺癌的恶性程度及预后.     

DPC4基因在胰腺癌中的改变

目的 研究DPC4（deleted in pancreatic cancer locus4)基因在胰腺癌中的改变。方法 用多聚酶链反应－单链构象多态性分析（PCR－SSCP）银染技术及PCR产物直接测序法检测胰腺癌细胞系P1、P2、P3、P4、P7、11例新鲜冷冻胰腺癌组织中DPC4基因第1、2、3、4、8、11外显子的缺失和突变。结果 5株人胰腺癌细胞系中,3株（P1、P2、P3）存在DPC4基因突变,DPC4基因改变率为3／5。11例新鲜冷冻胰腺癌细胞中,3例有DPC4基因的纯合性缺失,2例有基因突变,DPC4基因改变率为5／11（45．5％）。结论DPC4作为一种抑癌基因,其改变在胰腺癌的形成中可能起重要作用。     

FLIP在非小细胞肺癌中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的 研究FLIP在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达并观察其与细胞凋亡的关系。方法 采用免疫组化技术检测FLIP在48例NSCLC和16例肺良性疾病组织中的表达，并应用TUNEL技术检测48例NSCLC的凋亡情况。结果 肺癌组织中FLIP的表达率为83．33％(40／48)，明显高于肺良性病变组织(25.00％)(P＜0．01)。FLIP的表达水平与TNM分期及淋巴结转移有密切关系，但与肿瘤组织学分型、分化程度无明显关系。FLIP在肺癌组织中的表达水平与癌细胞凋亡指数(AI)末见明显相关性(r＝-0.211，P＞0.05)。结论 FLIP的过量表达在NSCLC的发生发展中起重要作用，但与细胞凋亡无明显关系。     

肺癌组织微血管密度的检测及临床意义

有研究表明肿癌的生长和转移有赖于瘤体血管的形成 ,这给肿瘤的治疗提供了新的思路。但目前还缺乏直接的检测手段来检测肿瘤内血管生成。现就检测肺癌瘤体血管形成的抗体 ,微血管密度 (ｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌｄｅｎｓｉｔｙ ,ＭＶＤ )测定的计数方法 ,免疫组化检测ＭＶＤ的临床意义作一综述。1　血管内皮免疫组化染色抗体的选择1.1　抗Ⅷ因子相关抗原 (ｆａｃｔｏｒⅧ ｒｅｌａｔｅｄａｎｔｉｇｏｎ ,ＦⅧ -ＲＡ )抗体免疫电镜下观察发现ＦⅧ -ＲＡ定位于内皮细胞 (ｅｎｄｏｔｈｅ ｌｉａｃｅｌｌ ,ＥＣ)的Ｗｅｉｂｅｌ -ｐａｌａｄａ小体…     

生存素在非小细胞肺癌中的表达及与细胞凋亡的关系

目的探讨生存素(survivin)蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与细胞凋亡的关系. 方法采用免疫组化的方法检测60例NSCLC和16例肺良性组织中survivin的表达,用TUNEL技术检测60例NSCLC的凋亡情况. 结果肺癌组织中survivin表达的阳性率为63.3%(38/60),而在正常组织中无一例表达;survivin蛋白的表达与肺癌TNM分期(P<0.05)、淋巴结转移(P<0.05)和细胞分化程度(P<0.01)有密切关系,但与肿瘤组织学类型、年龄、性别无明显关系(P>0.05).survivin在NSCLC中的表达水平与癌细胞的凋亡指数(AI)呈负相关(r＝-0.231,P<0.05). 结论 survivin蛋白的异常表达而引起的细胞凋亡抑制在NSCLC的发生中起一定作用,其过度表达提示NSCLC预后不良;survivin基因有望成为肺癌基因治疗的新靶点.     

survivin在非小细胞肺癌中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)中survivin表达水平及凋亡指数(AI)大小,探讨其临床病理意义、在肺癌发生和进展中的作用以及二者可能存在的相关性.方法:应用免疫组织化学法检测108例NSCLC,60例癌旁肺组织survivin表达情况,原位末端标记法(TUNEL)检测AI大小.结果:survivin在NSCLC中表达高于癌旁肺组织(P＜0.05),NSCLC 中AI小于癌旁肺组织(P＜0.05),survivin表达及AI均与肿瘤组织的分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关(P＜0.05),survivin表达与AI呈负相关(P＜0.05).结论:细胞凋亡水平异常可能在肺癌发生发展中起重要作用,survivin可能通过抑制细胞凋亡参与了肺癌的发生、发展.     

Analysis of the DPC4 Gene in Gastric Carcinoma

Allelic loss on chromosome 18q is involved in the progression of gastric carcinoma. Recently, DPC4 (deleted in pancreatic carcinoma, locus 4), a candidate tumor suppressor gene, has been localized at 18q21.1. This gene is inactivated in nearly one half of pancreatic carcinomas. We tested for DPC4 gene mutations and allelic status at 18q21 in 30 primary gastric carcinomas and 5 gastric carcinoma cell lines. Polymerase chain reaction single-strand conformation polymorphism and sequencing analyses revealed no DPC4 mutations in any of the primary tumors or cell lines. Homozygous deletion ofDPC4 was observed in only 1 (MKN-45) of the 5 (20%) cell lines. This suggests that the target gene for loss on 18q is not DPC4. The true tumor suppressor gene, encoded near DPC4 , has yet to be identified.     

胃癌细胞中DPC4基因失活与启动子区 的突变

 目的研究胃癌细胞系中DPC4基因表达和启动子区域的突变情况,并分析了两者之间的关系。方法采用RT-PCR法检测9种胃癌细胞系中DPC4基因的表达情况;克隆和测序DPC4启动子区域的突变情况;应用TFSEARCH ver.1.3软件分析DPC4启动子区域的转录因子结合位点。结果DPC4在SNU5、SNU16、SNU484、SNU638和KATOⅢ细胞中表达较高,而在SNU216、MKN28、MKN74 和 AGS细胞中表达较低或缺失。测序结果表明,MKN74细胞DPC4启动子区域出现了两处碱基置换突变,而在其它8种细胞系中没有发现突变。两处突变可能会影响转录因子MZF-1和IK-2与DPC4启动子的结合。结论DPC4基因在胃癌中频繁发生失活,而其启动子区域的突变可能是导致其失活的原因之一。     

Expression of DPC4/Smad4 gene in stone-containing intrahepatic bile duct

BACKGROUND AND OBJECTIVES: Hepatolithiasis is etiologically related to cholangiocarcinoma. We underwent this study with an attempt to examine the expression of DPC4/Smad4 gene in stone-containing intrahepatic bile ducts (IHD) and intrahepatic cholangiocarcinoma (ICC). PATIENTS AND METHODS: The immunohistochemical method and RT-PCR analysis were used to study the expression of DPC4/Smad4 gene in normal IHD, stone-containing IHD, and ICC. All the specimens were from hepatic resection. RESULTS: The immunohistochemical study showed that all specimens from 24 normal IHD had marked expression of DPC4/Smad4 gene, while there was 4.4% (2/46) and 33.3% (3/9) loss of DPC4/Smad4 expression in stone-containing IHD and ICC, respectively. Among the specimens of stone-containing IHD, all the hyperplastic epithelial cells showed normal expression of DPC4/Smad4 gene while dysplastic epithelial cells showed 20% (2/10) loss expression of DPC4/Smad4. The RT-PCR analysis showed that the normal IHD had the highest content of DPC4/Smad4 mRNA, which was threefold and sixfold higher than that of stone-containing IHD and ICC, respectively. CONCLUSION: Loss expression of DPC4/Smad4 gene was found both in stone-containing IHD and ICC. Dysplastic epithelium of stone-containing IHD had higher potential for malignant transformation.     

血小板衍生内皮细胞生长因子在胃癌中的表达及其与血管生成

目的 :探讨血小板衍生内皮细胞生长因子 (PD ECGF)在胃癌中表达的临床病理意义及其与肿瘤血管生成的关系。方法 :采用免疫组化S P法检测 5 8例胃癌 ,2 6例癌旁非瘤组织PD ECGF的表达 ,应用抗CD34 单抗标记血管内皮细胞测定肿瘤间质微血管密度 (MVD)。结果 :胃癌组织PD ECGF阳性表达率 (82 76 % )明显高于癌旁非瘤组织 (15 38% ,P <0 0 0 1)。PD ECGF阳性表达组的平均MVD值(30 6 2± 12 0 2 )明显高于PD ECGF阴性表达组 (2 0 15± 7 88,P <0 0 5 )。并且 ,随着PD ECGF表达程度的加强 ,MVD值增加。此外 ,PD ECGF表达与胃癌浸润深度、TNM分期密切相关。浸润达浆膜层的胃癌组织 ,PD ECGF阳性表达率 (94 4 4% )明显高于未累及浆膜层者 (6 3 6 4% ,P <0 0 1)。TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期的胃癌组织 ,PD ECGF阳性表达率 (93 75 % )明显高于TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期的胃癌组织(6 9 2 3% ,P <0 0 5 )。结论 :PD ECGF是胃癌的促血管生成因子之一 ,在促进肿瘤的浸润和发展起一定作用。     

雌激素和孕激素受体在非小细胞肺癌中的表达

目的:检测非小细胞肺癌组织中雌激素受体、孕激素受体的表达与临床病理、肿瘤分化程度、患者年龄及性别的关系.方法:用免疫组织化学SP法检测66例非小细胞肺癌组织标本中ER、PR的表达.结果:ER和PR的总阳性率分别为59.3%和64.1%,鳞癌和腺癌的ER阳性率分别为56.2%和62.5%,PR阳性率分别为56.2%和71.8%.雌孕激素受体阳性率与肿瘤分化程度具有相关性,而与肿瘤组织学分型、患者性别、年龄等无关.结论:肺癌组织中存在性激素受体,可能对肺癌的治疗有一定指导价值.     

BCRP基因在非小细胞肺癌组织和非癌肺组织中的表达及意义

目的：F是一步研究从人类乳腺癌细胞株（MCF-7/AdrVp)中克隆出对蒽环类抗癌药耐药的BCRP基因在非癌肺组织及非小细胞肺癌组织中的表达。方法：从术后即刻获得的正常肺组织和有省略的非小细胞肺癌组织新鲜标本中及时提取细胞总RNA,通过RT-PCR及PCR法获得并扩增BCRP基因的cDNA产物,再经凝胶电泳分离BCRP基因cDNA带,然后再通过转膜技术把这些BCRP基因cDNA产物转移到杂交膜上,用Southern blot杂交技术检测BCRP基因的表达程度。结果：细胞总RNA分别从8个只有肺癌组织标本和12对同时获取的肺癌组织及非癌肺组织标本中成功提取,然后用变性凝胶电泳鉴定提取RNA的质量,其中4例标本因术中缺血时间太长,或有坏死炎症或术前放化疗等原因,所提RNA有降解而放弃进一步的检测,通过RT-PCR及PCR方法从16例可用标本中获得并扩增BCRP基因的cDNA产物,再通过转膜及Southern blot杂交技术,最终发现BCRP基因在正常肺组织中均有不同程度的表达（10/10）,而在非小细胞肺癌组织标本中只有一半病人的标本有不同程度的表达（8/16）。结论：BCRP基因可能是一个在非癌肺组织中常规表达的基因,而在部分病人的肺癌组织中可能此基因有缺失或被抑制。因此,在部分非小细胞肺癌患者中如用蒽环类抗癌药（如阿霉素,柔红霉素等）化疗时,可能会诱导BCRP基因的过度表达而产生对此类药物的耐药现象。     

VEGF-C和FLT-4在非小细胞肺癌组织中的表达及其意义

目的研究VEGF-C、FLT-4在非小细胞肺癌组织中的表达及其与淋巴结转移的关系。方法采用半定量RT-PCR和免疫组化方法,检测60例非小细胞肺癌肿瘤组织中VEGF-C、FLT-4的表达。结果60例非小细胞肺癌组织中,36例(60%)VEGF-C阳性表达,30例(50%)FLT-4阳性表达。有淋巴结转移者VEGF-C和FLT-4的阳性表达率分别为80.5%和69.4%,明显高于淋巴结阴性组(29.2%和33.3%),有非常显著性差异(P值均<0.01)。经半定量RT-PCR分析,VEGF-C和FLT-4在有淋巴结转移者中的表达量明显高于无淋巴结转移者,有显著性差异(分别为P<0.01,P<0.05)。结论VEGF-C及其受体FLT-4的表达与非小细胞肺癌的淋巴结转移有关。     

Mechanisms of Gambogic Acid-Induced Apoptosis in Non-Small Cell Lung Cancer Cells in Relation to Transferrin Receptors

Abstract

Gambogic acid (GA) is one of the important active ingredients of gamboge. Our study examined the expression of transferrin receptors (TFR) on the cell surface of human lung SPC-A1 and SK-MES-1 cells and measured their GA-induced apoptosis rate. The results showed that SPC-A1 cells with a higher TFR expression were more sensitive at the same GA concentrations. To examine its distribution in cultured cells and study the mechanisms of apoptosis, we labeled GA with a ¹²⁵I tracer and examined the expression of apoptosis-related proteins. We found that GA uptake into SPC-A1 cells was higher than into SK-MES-1 cells; apoptosis-related proteins Caspase 2, Caspase 9, Caspase 10, Bax and p53 were involved in GA-induced apoptosis. We conclude that GA has an apoptosis-promoting effect on non small cell lung cancer cells. In clinical practice, the histopathological quantitation of TFR expression levels in tumor tissues may become a predictor of the sensitivity of patients' tumors to GA treatment.