幽门螺杆菌感染患者胃癌及癌旁组织中p53,p16和bc1—2基因的表达

研究幽门螺杆菌（Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ）感染胃癌得胃粘膜病变中抑癌基因ｐ５３、ｐ１６和关键性凋亡调节基因ｂｃ１－２蛋白的表达,进一步探讨Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ在胃癌发生、发展过程中作用的分子机制。方法：胃镜检查及外科手术中取４０例胃癌患者的癌组织和癌旁２ ｃｍ处组织各２块,石蜡包埋,切片ＨＥ染色作病理诊断及免疫组化检查ｐ５３、ｐ１６及ｂｃ１－２蛋白的表达。Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ阳性由快速尿素酶试验结合病理染色／＾１     

幽门螺杆菌感染与胃癌组织p16基因变异的关系

目的：探讨幽门螺杆菌（Hp)感染与胃癌组织p16基因变异的关系。方法43例胃癌患者的新鲜癌手术标本、相应的癌旁正常组织及血清标本为本组研究对象,分别采用PCR及银染PCR－SSC癌组织p16基因的纯合性缺失及突变情况;幽门螺杆菌感染状况通过PCR及血清学试验确定。结果（1）43例胃癌中,Hp阳性30例,阳性率为69．77％,其中CagA阳性24例,阳性率为80％。（2）30例Hp阳性胃癌中,有12例发生p16基因变异,发生率为40％;13例Hp阴性胃癌中,4例p16基因发生变异,发生率为30．77％,Hp阳性组与阴性组相比较p16基因变异率差异无显著性（P＞0．05）。（3）30例Hp阳性胃癌中,CagA阳性与阴性组p16基因变异率分别为41．67％（10．24）及33．33％（2／6）,两组变异率比较差异无显著（P＞0．05）。结论Hp及CagA阳性Hp感染与胃癌组织p16基因变异无显著相关性,Hp感染可能不是其改变或必须因素。     

幽门螺杆菌vacA基因型和cagA基因及其表达产物

幽门螺杆菌（Ｈｐ）的ｖａｃＡ基因和ｃａｇＡ基因分别表达ＶａｃＡ和ＣａｇＡ蛋白两种毒力因子。两种毒力因子之间有着相互的关联，在Ｈｐ引起的胃肠疾病中具有重要作用，Ｈｐ感染的临床发病与Ｈｐ的ｖａｃＡ基因型，具有ｃａｇＡ基因Ｈｐ以及ＶａｃＡ和ＣａｇＡ蛋白的表达有着密切的关系。     

幽门螺杆菌vacA毒性片段与cagA融合基因的构建与表达

目的　构建幽门螺杆菌空泡毒素 (VacA)毒性片段和细胞毒素相关蛋白 (CagA)的融合基因 (vlc) ,在原核细胞中表达 ,为Hp双价融合蛋白候选疫苗的研究提供材料。 方法　用GeneSOEing技术将vacA毒性亚单位片段 (v)与cagA保守片段 (c)用疏水性多肽接头 (Gly4Ser) 3 进行拼接 ,构建融合基因vlc,将vlc定向插入原核表达质粒pQE30 ,经DNA测序分析确认后 ,转化E .coliDH5a ,IPTG诱导表达 ,Westernblot分析其抗原性。结果　DNA序列分析表明融合基因的连接顺序、方向正确 ,有一个碱基发生了无义突变。工程菌诱导后可表达相对分子量为 5 8× 10 3 的融合蛋白 ,与预期分子量一致 ,约占菌体总蛋白的 8%。Westernblot显示融合蛋白具有良好的抗原性。结论　融合基因vlc构建成功 ,表达的融合蛋白具有良好的抗原性 ,有望进一步进行免疫保护性机制的研究和Hp疫苗的制备。     

幽门螺杆菌vacA基因型和cagA基因及其表达产物

幽门螺杆菌(Hp)的vacA基因和cagA基因分别表达VacA和CagA蛋白两种毒力因子。两种毒力因子之间有着相互的关联,在Hp引起的胃肠疾病中具有重要作用。Hp感染者的临床发病与Hp的vacA基因型、具有cagA基因Hp以及VacA和CagA蛋白的表达有着密切的关系。     

幽门螺杆菌cagA基因的克隆表达及其产物的应用

目的体外表达ＣａｇＡ蛋白，发展快速而简便的检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的免疫学方法．方法用ＰＣＲ技术克隆ｃａｇＡ基因５端片段（８５４ｂｐ）于ｐＢＶ２２０中，在ＤＨ５α中温度诱导表达Ｍｒ３８０００的单体ＦＣａｇＡ，复性后分别作阴离子交换及凝胶柱层析，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定ＦＣａｇＡ的抗原性．以重组ＦＣａｇＡ为抗原，通过制备胶体金及免疫胶体金，建立了斑点金免疫渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）快速检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的方法．结果ＦＣａｇＡ具有抗原性．以该抗原所建立的斑点金免疫渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）快速检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的方法仅需２ｍｉｎ～３ｍｉｎ可完成，无需特殊设备，并可单人份操作．经过与ＥＩＡ法对比检测２６２例患者血清，本方法的特异性为９８５％，敏感度为９６８％．结论具有抗原活性的ＦＣａｇＡ蛋白的表达及ＤＩＧＦＡ检测抗ＣａｇＡ抗体方法的建立，对ＣａｇＡ＋Ｈｐ感染的流行病学研究具有重要意义     

胃癌高发区cagA+幽门螺杆菌的感染

目的研究胃癌高发区不同人群幽门螺杆菌（Ｈｐ）ｃａｇＡ＋亚型感染状况，探讨ＨｐｃａｇＡ＋亚型感染与胃癌高发流行的关系．方法用ＥＬＩＳＡ方法检测了全部受检者的抗Ｈｐ抗体及抗ｃａｇＡ抗体，并用１３Ｃ尿素酶呼吸实验（１３Ｃ－ＵＢＴ）方法检测了７０名儿童Ｈｐ感染状况．结果胃癌高发区成人Ｈｐ感染率为７４７％，儿童Ｈｐ感染率为６８６％；成人ｃａｇＡ＋亚型感染率为６５％，儿童为７１４％．７７名癌症患者的Ｈｐ和ｃａｇＡ＋亚型感染率均为５９７％，其中胃癌患者（ｎ＝３８）Ｈｐ和ｃａｇＡ＋亚型感染率分别为５０％和５５３％，均低于其他癌症患者（ｎ＝３９）的感染率（６９２％和６４１％）．结论胃癌高发区成人、儿童及癌症患者ＨｐｃａｇＡ＋亚型感染率相当高，表明Ｈｐ感染，尤其是ｃａｇＡ＋的Ｈｐ感染与当地胃癌高发有明显的关系．     

幽门螺杆菌vacA基因型和cagA基因及其表达产物与胃十二指肠疾病的关系

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染是慢性胃炎(chronic gastritis,CG)和消化性溃疡(peptic ulcer,PU)的病因之一。也是胃癌(gastric cancer,GC)的危险因素。Hp的空泡形成毒素基因(vacuolating toxin gene,vacA)型和细胞毒素相关基因(cytotoxin-associated gene,cagA)及其表达产物——空泡形成细     

幽门螺杆菌感染患者胃癌及癌旁组织中p53、p16和bcl-2基因的表达

目的:研究幽门螺杆菌(H.pylori)感染胃癌患者胃粘膜病变中抑癌基因p53、p16和关键性凋亡调节基因bcl-2蛋白的表达,进一步探讨H.pylori在胃癌发生、发展过程中作用的分子机制.方法:胃镜检查及外科手术中取40例胃癌患者的癌组织和癌旁2 cm处组织各2块,石蜡包埋,切片HE染色作病理诊断及免疫组化检测p53、p16及bcl-2蛋白的表达.H.pylori阳性由快速尿素酶试验结合病理染色/14C-尿素呼气试验确定.结果:40例胃癌患者中,H.pylori阳性23例,阴性17例.p53阳性表达率在H.pylori阳性及阴性胃癌组织中无显著差异(P＞0.05).H.pylori阳性组慢性胃炎或肠化组织中p16的阳性表达率及表达强度均显著低于H.pylori阴性组(表达率:P＜0.05;表达强度:P＜0.001和P＜0.01).而H.pylori阳性组肠化组织中bcl-2的阳性表达率及表达强度均显著高于H.pylori阴性组(P＜0.05).结论:在胃癌发生的早期即存在较明显的p16基因表达低下与bcl-2基因过度表达,并与H.pylori感染有一定关系.p53基因过度表达是胃癌发展过程中较晚期的事件,与H.pylori感染无明显相关性.     

幽门螺杆菌感染与原发性胃淋巴瘤

目的探讨幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染与原发性胃淋巴瘤、胃ＭＡＬＴ淋巴瘤的关系．方法经内镜、手术诊断的胃淋巴瘤患者２９例，其中男１９例，女１０例；年龄３０岁～７５岁，中位数年龄５２５岁．胃窦部１３例，胃体部９例，贲门部２例．凹陷溃疡型９例，蕈样隆起型８例，结节型１２例．胃粘膜标本切片，采用ＨＥ及ＷａｒｔｈｉｎＳｔａｒｙ染色后观察组织中有无Ｈｐ感染．结果原发性胃淋巴瘤患者２９例，胃粘膜组织中发现Ｈｐ感染２４例，阳性率８２８％．其中胃ＭＡＬＴ淋巴瘤８例，Ｈｐ感染７例，阳性率８７５％．明显高于同期胃良性病变Ｈｐ阳性率４６％（Ｐ＜００１）．２９例中１１例进行了术后随访，３例仍存在Ｈｐ感染，阳性率２７３％．结论Ｈｐ感染在原发性胃淋巴瘤的发病机制中起一定作用．     

幽门螺杆菌感染与胃癌部位组织类型的关系

目的探讨幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染与胃癌部位及组织类型的关系．方法胃镜及病理证实的胃癌７３例，男女之比为２０４∶１，平均年龄为５６０岁．其他肿瘤患者７３例（食管癌２２例；结直肠癌１９例；肺癌２１例；乳腺癌１１例），男女之比为１７０∶１，平均年龄为５５６岁，进行１∶１病例一对照研究，采用间接ＥＬＩＳＡ法检测血清抗ＨｐＩｇＧ抗体水平，将Ｈｐ抗体分为３个等级．结果胃癌组Ｈｐ感染率为５８９％，平均抗体水平为２２９±０８５（ｘ±ｓ），显著高于对照组的感染率４２５％（Ｐ＜００５）和平均抗体水平１８４±０６５（Ｐ＜００１）．Ｈｐ感染率在对照组的分布情况为食管癌４０９％，结直肠癌４７４％，肺癌３８１％，乳腺癌４５５％．胃癌组与对照组相比，机会比值呈线性趋势（Ｐ＝０００５４６０）．Ｈｐ阳性率在非贲门部胃腺癌为７４４％，明显高于贲门部腺癌４０７％（Ｐ＜００５）．结论Ｈｐ感染与胃癌有关，特别与非贲门部腺癌关系密切．胃癌的危险性随抗ＨｐＩｇＧ抗体滴度升高而升高．     

胃腺癌组织中Runx3、Smad4与p21的表达及临床意义

目的 研究胃腺癌及非癌组织中Runx3、Smad4和p21的表达及临床意义.方法 收集130例胃腺癌患者手术切除标本制作的石蜡块共378份,其中癌组织130份,癌旁组织和非癌组织248份,每份组织制成4块组织芯片,分别为174点、282点、156点和156点.采用免疫组化法检测其中Runx3、Smad4和p2l的表达.结果 Runx3在胃腺癌中的异常表达率高于非癌组织(P<0.05),Smad4及p2l的异常表达在胃黏膜癌变过程中呈上升趋势(P<0.05).Runx3的异常表达与胃腺癌组织学分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05),Smad4和p21的异常表达均与胃腺癌的分化程度相关(P<0.05).胃腺癌中Runx3表达与Smad4和p21表达呈正相关(r=0.387,P<0.05;r=0.840,P<0.05).Runx3、Smad4、p21正常表达患者的3年生存率均大于异常表达患者(P<0.05).多因素分析显示,Runx3和Smad4的表达可作为胃腺癌患者独立的预后因素(P<0.05).结论 Runx3、Smad4和p21在胃腺癌的发生、发展中可能起一定的作用.Runx3和Smad4可作为判断胃腺癌患者预后的指标之一.     

Hp感染与胃癌和癌前病变中p53、ras、c-myc基因表达的关系

目的研究幽门螺杆菌（Hp）感染与胃癌（GC）和癌前病变中p53、ras、c-myc基因表达的关系,以探讨其致病机制。方法用美兰和W-S特殊染色方法确定Hp感染,免疫组化SP法检测p53、ras、c-myc基因的表达。结果慢性萎缩性胃炎（CAG）、肠化生（IM）、异型增生（DYS）、GC的Hp感染率均高于慢性浅表性胃炎（CSG）（P均〈0.05）;p53、ras、c-myc基因在GC、DYS中的表达均高于CAG（P均〈0.05）,p53、ras基因在IM中的表达均高于CAG（P〈0.05）;IM中Hp阳性者的p53阳性表达率高于Hp阴性者（P〈0.05）,DYS、GC中Hp阳性者p53、ras、c-myc的表达率高于Hp阴性者（P均〈0.05）。结论Hp感染可能通过调节p53、ras、c-myc基因的表达而促进GC的发生。     

幽门螺杆菌感染与C-myc基因和P53基因表达与胃癌的相关性研究

目的探讨幽门螺杆菌（Hp）感染情况与C-myc基因及P53基因的表达与胃癌的相关性。方法用w—s染色法观察不同胃病黏膜组织中Hp感染情况，采用免疫组化检测技术检测不同胃病组织的C-myc基因和P53基因表达产物。结果胃癌及癌前病变组Hp感染率明显高于慢性浅表性胃炎组（P〈0．01），C-myc基因和P53基因的表达也显著高于慢性浅表性胃炎组（P〈0．01）。Hp感染阳性组的C-myc基因和P53基因表达明显高于Hp感染阴性组（P〈0．01）。结论Hp感染可能通过激活C-myc基因，同时使P53基因失活从而诱发胃黏膜的癌变。     

胃癌,消化性溃疡患者幽门螺杆菌和iceA基因的研究

目的研究幽门螺杆菌（Ｈｐ）的ｉｃｅＡ基因与胃癌、消化性溃疡病的关系。从１２１例患不同胃十二指肠疾病的患者胃活检组织中分离培养Ｈｐ,ＰＣＲ扩增检测Ｈｐ的ｃａｇＡ和ｉｃｅＡ基因。结果胃癌、消化性溃疡及功能性消化不良患者Ｈｐ的ｃａｇＡ基因的阳性率分别为：９１２％、８７１％和８９７％（Ｐ＞０．０５）;而ｉｃｅＡ１基因的阳性率分别为：６８０％、７１０％和６９２％（Ｐ＞０．０５）。结论我们的研究表明Ｈｐ的ｃａｇＡ和ｉｃｅＡ１基因与胃癌及消化性溃疡的发生不相关。     

An epidemiologic study of Helicobacter pylori infection in three areas with high,moderate or low incidences of gastric carcinoma

AIM: To study the relationship between the Helicobacter pylori (Hp) infection rate and the incidence and mortality of gastric cancer. METHODS: The Hp infection rates of the natural population in three areas were detected by measuring the specific IgG antibody to Hp using the indirect ELISA method. RESULTS: The Hp positive rates were 59.4%, 55.9% and 34.5% in the areas with high, moderate and low incidences of gastric carcinoma, respectively. The differences in incidence among the areas were significant (χ² = 25.029, P < 0.05). The Hp infection rate was the highest in the high incidence area of gastric cancer in people younger than 40 years. The Hp infection rate was 50% in children younger than 5 years in the high incidence area. The Hp infection rates were not different among the three areas in the people older than 40 years. The average levels of anti-Hp IgG in the high, moderate and low incidence areas were 2.3 ± 0.49, 2.04 ± 0.47 and 1.84 ± 0.46, respectively. Multivariate regression analysis showed that the Hp infection was related to bad hygienic habits, low income, frequent use of antibiotics, and mental depression. Univariate analysis showed that Hp infection might also be associated with raising animals in the home. CONCLUSION: Gastric cancer is closely related to the incidence of Hp infection.     

胃癌组织中幽门螺杆菌cagA和vacA的表达及与其感染的相关性

目的:研究HpyloricagA和HpylorivacA在胃癌、胃黏膜不典型增生和胃炎组织中的表达及与Hpylori感染的相关性.方法:采用Warthin-Starry嗜银染色法检测胃癌组织39例,胃黏膜不典型增生组织24例和慢性胃炎组织33例中Hpylori感染情况;PCR法检测上述标本中HpyloricagA和HpylorivacA的表达.结果:胃癌组织中Hpylori,HpyloricagA 株和HpylorivacA 株感染率显著高于慢性胃炎组织(χ2=7.00,P<0.05;χ2=15.20,P<0.05;χ2=12.43,P<0.05);胃黏膜不典型增生组织中Hpylori,HpyloricagA 株和HpylorivacA 株感染率显著高于慢性胃炎组织(χ2=6.25,P<0.05;χ2=11.04,P<0.05;χ2=11.61,P<0.05);低分化胃癌组织中Hpylori,HpyloricagA 和HpylorivacA 株感染率显著高于高中分化胃癌组织(χ2=8.19,P<0.05;χ2=13.14,P<0.05;χ2=6.62,P<0.05).慢性胃炎、不典型增生和胃癌组织中Hpylori与HpyloricagA和HpylorivacA表达均呈正相关(慢性胃炎:r=0.56,P<0.01;r=0.64,P<0.01;不典型增生组织:r=0.64,P<0.01;r=0.92,P<0.01;胃癌:r=0.90,P<0.01;r=0.95,P<0.01).结论:Hpylori感染是慢性胃炎向胃黏膜不典型增生及胃癌发展的重要启动因子,Hpylori感染可能通过诱导cagA表达促使胃黏膜上皮细胞增殖加快,诱导vacA表达促使胃黏膜上皮细胞损伤;他们的协同作用可能在胃癌发生、发展过程中发挥了重要作用.     

胃粘膜肥大细胞及其脱颗粒与Hp致病关系的探讨

目的：探讨胃粘膜肥大细胞（MC）及其脱颗粒与幽门螺杆菌（Hp）致病性的关系。方法：采用改良甲苯胺蓝染色法检测120例患者胃粘膜中MC计数及脱颗粒细胞所占比例。结果：1．Hp阳性患者胃粘膜MC计数及脱颗粒比显著高于Hp阴性患者（P＜0．01）;2．不同Hp感染胃病患者之间胃粘膜MC计数及脱颗粒比也有差异,消化性溃疡（PU）和慢性浅表性胃炎（CSG）患者胃粘膜MC计数及脱颗粒比显著高于慢性萎缩性胃炎（CAG）患者（P＜0．01）。结论：胃粘膜肥大细胞及其脱颗粒参与了Hp致病而导致胃粘膜受损。     

c-met基因表达与胃癌增殖在幽门螺杆菌感染中的关系

目的：研究c-met基因蛋白及增增殖细胞核抗原（PCNA）在幽门螺杆菌（HP）感染的胃粘膜病变演进的表达及关系。方法：对145例经病理证实的不同胃粘膜病变，采用免疫组化法检测c-met和PCNA基因表达，Warthin-starry法检测HP感染。结果：在浅表性胃炎（CSG）、萎缩肠化生胃炎（CAG＋IM）、异型增生（ATP）、早期胃癌和进展期胃癌中，CAG＋IM、ATP胃癌c-met和PCNA两种基因均显著高于CSG（P＜0．05）。胃粘膜增殖程度与c-met和PCNA阳性表达强度显著相关（P＜0．01）。c-met和PCNA阳性表达与胃癌组织类型，浆膜浸润和淋巴结转移密切相关。c-met－LI和PCNA－LI在胃癌中等相关表达及其显著的相关性（P＜0．001）。c-met阳性表达与肠型胃癌HP感染有关，CAG＋IM、ATP和GC组c-met阳性表达中HP感染者明显高于阴性者。结论：c-met和PCNA基因表达与胃粘膜增殖和恶化有关。c-met基因在HP感染时其表达升高，是其恶性的主要参考指标，HP感染和c-met表达与胃粘膜增殖和进展有关。