左旋千金藤啶碱对缺氧纹状体和海马脑片Ca^＋／CaM PKⅡ和PKA活 …

目的 研究左旋千金藤啶碱对Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性的影响。方法 采用大鼠海马及纹状体病片体外缺血模型,用放射性＾３２Ｐ－ＡＰＫ掺入法测定Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性。结果 体外培养的纹状体和海马脑片在缺血３０ｍｉｎ后,Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性均明显下降,纹状体ＰＫＡ活性增加,于缺血前１０ｍｉｎ加入不同浓度ＳＰＤ后,二酶活性较单纯缺血均有明显改变。结论 ＳＰＤ对纹状体ＰＫＡ以及纹状体和     

多巴胺对大鼠海马和新纹状体脑片Ca^2＋／CaM PKⅡ活性的影响

目的 研究多巴胺（ＤＡ）对Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性的影响。方法 采用大鼠海马、新纹状体脑片体外培养模型，以＾３２Ｐ掺入法测定Ｃａ＾２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性。结果（１）单纯外源性ＤＡ引起Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性显著下降；海马、新纹状体脑片引起最大抑制作用的ＤＡ浓度分别是５００、１０μｍｏｌ／Ｌ。（２）酶活性随ＤＡ作用时间的延长逐渐下降；海马脑片１００μｍｏｌ／Ｌ ＤＡ作用２０ｍｉｎ酶活性方     

MK801拮抗脑缺血导致的Ca~(2 )/CaMPKⅡ活性抑制

目的研究脑缺血兴奋毒性与Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ的关系。方法采用离体孵育的大鼠海马脑片制备“缺血”模型。采用３２Ｐ标记，滤纸片吸附法测定Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性。结果①Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性随“缺血”时间延长而降低，“缺血”３０ｍｉｎ可降至正常的１６．４％；②单纯过量外源性谷氨酸作用３０ｍｉｎ可导致Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性降低；无胞外Ｃａ２＋时，谷氨酸导致的酶活性抑制程度不如有胞外Ｃａ２＋时显著；③ＭＫ８０１对“缺血”导致的Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性抑制有部分拮抗作用，２５μｍｏｌ／ＬＭＫ８０１可使“缺血”３０ｍｉｎ的Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性恢复至正常的４３．８％。结论脑缺血导致的Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性抑制可被ＭＫ８０１部分拮抗，说明其活性抑制与ＮＭＤＡ受体介导的兴奋性毒性作用有关。     

氯胺酮对大鼠海马脑片缺氧诱导Ca~（2＋）／CaM PK Ⅱ活性抑制的拮抗作用

目的研究Ｃａ２＋和氯胺酮对海马脑片Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性的影响。方法采用大鼠海马脑片体外缺氢模型进行实验，结果（１）有钙或无钙培养时，酶活性随缺氧时间的延长均下降，但前者比后者酶活性下降更显著，提示外Ｃａ２＋在神经元缺氧损伤中起重要作用；（２）氯胺酮对缺氧所诱导的酶活性抑制均有明显的拮抗作用，说明脑缺氧引起酶活性下降与ＮＭＤＡ受体介导有关。结论脑缺氧时该酶活性的抑制与下列通路有关：ＮＭＤＡ受体→Ｃａ２＋→Ｃａ２＋靶酶。     

谷氨酸对培养的皮质神经元Ca~(2 )/CaMPKⅡ活性的影响

目的研究谷氨酸（Ｇｌｕ）对皮质神经元的损伤及对Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性的影响。方法５００μｍｏｌ／ＬＧｌｕ作用１０ｍｉｎ，测Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ及乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性。结果Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性和正常对照相比下降４６．３％，１００μｍｏｌ／Ｌ氯胺酮几乎完全保护该酶活性；ＬＤＨ活性在１ｈ时无明显变化，２４ｈ时明显升高。结论（１）Ｇｌｕ对皮质神经元损伤致Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性下降早于ＬＤＨ变化；（２）Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性下降主要由ＮＭＤＡ受体介导，与非ＮＭＤＡ受体无关。     

谷氨酸介导皮质神经元Ca^2＋／CaM PKⅡ活性下降的机理研究

目的 研究谷氨酸对Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性的影响及其原因。方法 以培养的胎鼠皮质神经元为材料，采用＾３２Ｐ掺入滤纸片法测Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ凝胶电泳及放射为影研究Ｃａ＾２＋／ＣａＭ依赖怀内源蛋白后磷酸化水平变化。     

氯胺酮对大鼠海马脑片缺氧诱导Ca^2＋／CaM PKⅡ活性抑制的拮抗 …

目的 研究Ｃａ＾２＋和氯胺酮对海马脑片Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫ Ⅱ活性的影响。方法 采用鼠海马脑片体外缺氧模型进行实验。结果 （１）有钙或无钙培养时，酶活性随缺氧时间的延长均下降，但前者比后者酶活性下降更显著。提示外Ｃａ＾２＋在神经元缺氧损伤中起重要作用；（２）氯胺酮对缺氧所诱导的酶活性抑制均有明显的拮抗作用，说明脑缺氧引起酶活性下降与ＮＭＤＡ受体介导有关。结论 脑缺氧时该酶活性的抑制与下列通路有     

利血平化沙土鼠脑缺血钙调素蛋白激酶Ⅱ活性的研究

目的 观察耗竭单胺类神经递质对缺血性纹状体、海马和皮质神经元ＣａＭ ＰＫⅡ活性的影响。方法 采用利血平化沙土鼠双侧颈总动脉结扎造成全脑缺血模型，用放射性＾３２Ｐ－ＡＴＰ掺入法测定ＣａＭ ＰＫⅡ活性。结果 利血平化对沙土鼠脑缺血３个脑区ＣａＭ ＰＫⅡ活性均有保护作用。在纹状体、海马和皮质，利血平化沙土鼠缺血１０ｍｉｎ酶活性比对照组酶活性分别升高５５％、５８％和１９％，缺血２０ｍｉｎ，酶活性分别升高５     

大鼠纹状体突触体酪氨酸羟化酶自身调节的研究

依赖Ｃａ２＋／ＣａＭ的ＰＫⅡ和依赖Ｃａ２＋／ＰＩ的ＰＫＣ对大鼠纹状体突触体的磷酸化均显著激活酪氨酸羟化酶（ＴＨ）的活性，增加Ｌｄｏｐａ的生成。选择性Ｄ２受体激动剂ＬＹ１７１５５５不影响ＰＫⅡ和ＰＫＣ对ＴＨ的磷酸化激活。ＣａＭ拮抗剂Ｗ７和去除反应液中的Ｃａ２＋均不影响Ｋ＋６０ｍｍｏｌ／Ｌ去极化对纹状体ＴＨ的激活，而ＰＫＣ抑制剂多粘菌素Ｂ却能完全阻滞Ｋ＋去极化对ＴＨ的激活效应。研究结果表明：（１）多巴胺（ＤＡ）自身受体介导的自身递质生物合成的负反馈调控与ＰＫⅡ和ＰＫＣ对ＴＨ的磷酸化激活不偶联；（２）Ｋ＋去极化对ＴＨ的激活是由ＰＫＣ介导的，不受ＤＡ自身受体的调控。     

吗啡依赖小鼠脑组织cAMP系统的变化及腺苷酸环化酶磷酸化 …

观察吗啡依赖小鼠脑组织腺苷酸环化酶（ＡＣ）／ｃＡＭＰ信号系统的变化、ＡＣ活性的磷酸化调节及蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）抑制剂对吗啡依赖形成的影响。方法采用放射免疫和酶学方法。结果（１）吗啡依赖小鼠纹状体、海马及大脑皮质ＡＣ活性、ｃＡＭＰ含量及可溶相蛋白激酶Ａ（ＰＫＡ）活性明显增加,小脑未见此变化;每日给吗啡前１５ｍｉｎ脑室注射ＰＫＡ抑制剂的小鼠纹状体、海马及大脑皮质ＡＣ活性明显低于吗啡依赖小鼠。（２）纳洛     

谷氨酸诱导大鼠海马脑片Ca^2＋／CaM PKⅡ活性的抑制作用

目的 研究外源性谷氨酸对海马脑片Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫ Ⅱ活性的影响及氯胺酮的保护作用，同时研究缺氧对神经元外谷氨酸堆积的影响。方法 采用体外培养的大鼠海马脑片研究这些作用。结果 （１）海马脑片在体外缺氧３０ｍｉｎ，谷氨酸在胞外的堆积增加２倍多；（２）单纯过量外源性谷氨酸能引起酶活性显著下降，仅为对照组的２４％，提示脑缺氧时酶活性的抑制与兴奋毒性有关；（３）氯胺酮对单纯外源性谷氨酸所诱导的酶活性     

香青兰对缺血心肌保护作用的实验研究

采用异丙基肾上腺素（ＩＳＰ）诱发小白鼠急性心肌缺血损伤模型，以心肌肌浆网Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶、ＳＯＤ、Ｓｅ－ＧＳＨＰｘ、ＭＤＡ、ＣＰＫ及心肌超微结构为指标，观察香青兰对急性心肌缺血损伤的保护作用。结果显示，香青兰组较缺血组心肌肌浆网Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶、ＳＯＤ、Ｓｅ－ＧＳＨＰｘ酶活力明显增高，血清及心肌组织ＭＤＡ含量下降，血清ＣＰＫ酶活力降低，心肌超微结构改变减轻。初步表明香青兰可通过提高心肌组织中自由基清除酶活力，保护肌浆网Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活力减轻钙超载，而发挥对缺血心肌的保护作用。     

无Ca~(2 )晶体停搏液对未成熟心肌保护作用的影响

目的探讨无Ｃａ２＋晶体停搏液对未成熟心肌保护作用的影响。方法采用离体心脏灌注模型，以含不同Ｃａ２＋浓度的Ｓｔ．ＴｈｏｍａｓⅡ停搏液间歇灌注心脏停搏，经２０℃、９０ｍｉｎ缺血后再灌注３０ｍｉｎ。再灌注末，测定心肌组织Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性、ＡＴＰ和ＭＤＡ含量及ＳＯＤ活性。结果无Ｃａ２＋组Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性显著低于其它两组（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０５），ＳＯＤ活性为４６６２．５０±１２４．８０ＮＵ·ｇ－１亦低于对照组。此外，无Ｃａ２＋组ＭＤＡ含量为１１８．０１±２９．１７ｎｍｏｌ·ｇ－１，呈显著增高。结论低温缺血期间，无Ｃａ２＋Ｓｔ．ＴｈｏｍａｓⅡ停搏液间歇灌注清除了未成熟心肌细胞外间隙的Ｃａ２＋，增加了细胞内外的Ｃａ２＋浓度梯度，破坏了心肌细胞膜离子通道完整。再灌注后，心肌细胞质膜的脂质过氧化的增加，表明了氧自由基在心肌细胞损伤中的致因作用。显然，无Ｃａ２＋晶体停搏液不利于缺血成熟心肌的保护。     

低温再灌注对海马Ca^2＋／CaM PKⅡ活性及迟发性神经元死亡的影响

目的 研究低温再灌注对海马Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性恢复及迟发性神经元死亡（ＤＮＤ）的影响。     

染铅鼠脑海马神经原长时程增强过程中Ca~(2 )浓度及PKC活性的研究

为探讨中枢神经系统铅中毒的生化机制，以慢性染铅鼠为动物模型，用高频刺激诱发海马区产生长时程增强后，以Ｆｕｒａ－２为Ｃａ２＋指示剂，测定海马神经元Ｃａ２＋浓度。以放射性［ｒ－３２Ｐ］－ＡＴＰ掺入外源性底物方法测定神经元胞浆及胞膜ＰＫＣ活性。结果：染铅组长时程增强过程中Ｃａ２＋浓度明显升高（２３６．４８±６１．８３ｎｍｏｌ／Ｌ），与对照组比较有统计学意义（Ｐ＜０．００１）。ＰＫＣ活性亦升高（胞浆：１．８７±０．３５ｎｍｏｌ／ｍｇ．ｍｉｎ－１；胞膜１．５２±０．４０ｎｍｏｌ／ｍｇ．ｍｉｎ－１），与对照组比较有统计学意义（Ｐ＜０．０１；Ｐ＜０．００１）。说明海马长时程增强过程中，铅作为钙的类似物可使Ｃａ２＋浓度升高激活ＰＫＣ，进而干扰长时程增强过程。证明Ｃａ２＋－ＰＫＣ系统对铅有高度敏感性，可能是铅致神经毒性作用的关键中介物。     

牛磺酸对缺血大鼠心肌细胞膜ATP酶活性的影响

研究缺血大鼠心肌细胞膜ＡＴＰ酶活性改变及牛磺酸的影响。给Ｗｉｓｔａｒ大鼠皮下注射异丙肾上腺素（ＩＳＰ５ｍｇ／ｋｇ）制造心肌缺血损伤模型，另一组在注射ＩＳＰ前３０ｍｉｎ腹腔注射牛黄酸２００ｍｇ／ｋｇ及对照组注射等量生理盐水。观测心肌细胞膜Ｋ＋·Ｎａ＋－ＡＴＰ酶，Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性，丙二醛（ＭＤＡ）含量及心肌钙含量。结果显示，缺血组Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｋ＋，Ｎａ＋－ＡＴＰ酶活性分别降低４８．２３％和４５．８５％（Ｐ＜０．０１），ＭＤＡ含量升高８０％（Ｐ＜０．０１），牛磺酸保护组未见显著性变化。并发现Ｋ＋、Ｎａ＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性与ＭＤＡ含量之间有显著负相关（Ｐ＜０．０５）。结果提示，牛磺酸可通过抑制心肌ＭＤＡ生成，实现它对心肌细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｋ＋·Ｎａ＋－ＡＴＰ酶活性的保护作用。     

蟾蜍背根神经节胞体动作电位离子成份的分析

在蟾蜍离体背根神经节标本上，用标准微电极方法，通过改变胞外离子成份及浓度，结合应用离子通道阻滞剂，分析胞体动作电位各离子成份。结果表明：５μｍｏｌ／Ｌ河豚毒灌流６ｍｉｎ后，动作电位幅值及去极相斜率均明显减小；无Ｃａ（２＋）（０ｍｍｏｌ／Ｌ）和高Ｃａ（２＋）（１０、２０ｍｍｏｌ／Ｌ）液灌流１５ｍｉｎ后，动作电位时程（ＡＰＤ）分别较对照值减小和增大；无Ｋ＋（Ｏｍｍｏｌ／Ｌ）和高Ｋ＋（６ｍｍｏｌ／Ｌ）液灌流１５ｍｉｎ后，ＡＰＤ的改变与上述相同；２ｍｍｏｌ／ＬＭｎ（２＋）和１０ｍｍｏｌ／Ｌ四乙胺亦可分别使ＡＰＤ较对照值减小和增大。实验表明胞外Ｃａ（２＋）的改变与ＡＰＤ值的大小呈线性关系。     

局限缺血－再灌注心肌细胞内钙超负荷发生机制的探讨

本文通过犬急性心肌缺血－再灌注模型探讨缺血－再灌注心肌Ｃａ２＋超负荷的发生机制。当心肌持续缺血１５０ｍｉｎ，心肌细胞内Ｃａ２＋、Ｎａ＋增加、Ｋ＋降低；心肌细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性降低，心肌组织丙二醛（ＭＤＡ）含量增加．而心肌缺血９０ｍｉｎ后，再灌注６０ｍｉｎ，与之比较细胞内Ｃａ２＋明显增加，伴Ｎａ＋升高、Ｋ＋降低，心肌细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性降低，ＭＤＡ含量增加，说明缺血－再灌注过程中Ｎａ＋升高、Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换增加，Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性降低是细胞内Ｃａ２＋超负荷发生的重要原因。     

急性心肌梗塞时心肌线粒体钙变化的实验研究

用Ｖｉａｌ方法分离心肌线粒体，按Ｎａｋａｎｉｓｈｉ方法测定线粒体钙，并按张源鑫方法测定Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ（钙－镁－三磷酸腺苷酶），研究心肌缺血后心肌线粒体钙变化，线粒体膜Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性并相应观察心肌的超徽结构变化。结果表明缺血后心肌线粒体钙明显增高，缺血３０ｍｉｎ和正常组比较Ｐ＜０．０５，６０ｍｉｎ和１８０ｍｉｎ增高更明显。此变化和心肌线粒体超微结构改变相吻合，缺血３０ｍｉｎ时线粒体肿胀，此时尚为可逆性变化。６０、１８０ｍｉｎ后线粒体出现坏死。线粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ在缺血后呈进行性下降（Ｐ＜０．０１。说明线粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性降低是导致线粒体钙超载的原因之一。     

API0134对缺血——再灌注心肌氧自由基和钙超负荷的作用

在犬生心肌缺血－－再灌注模型上，结扎冠状动脉左前降支（ＬＡＤ）９０ｍｉｎ后，行再灌注１２０ｍｉｎ，发现缺血区心肌组织超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性降低，丙二醛ＭＤＡ含量增加；Ｎａ、Ｃａ＾２＋含量明显增加，Ｋ含量及Ｋ／Ｎａ幽会显著降低。再灌注前４５ｍｉｎ静脉给予ＡＰＩ０１３４，则见相应在的缺血区ＳＯＤ、ＧＳＨ－Ｐｘ活怀，Ｋ含量及Ｋ／Ｎａ比值高于对照，而ＭＤＡ和Ｎａ、