铜绿微囊藻生物钟蛋白的表达纯化与抗体制备

为了获得融合表达的铜绿微囊藻(Microcystic aeruginosa)生物钟蛋白KaiA、KaiB、KaiC并制备其相应的多克隆抗体,将kaiA、kaiB、kaiC基因分别克隆到原核表达质粒pET-His中.重组质粒pET-His-KaiA,pET-His-KaiB和pET-His-KaiC经酶切和测序鉴定后,分别转化E.coli BL21(DE3)进行融合表达.经SDS-PAGE分析可知,融合表达的KaiA、KaiB和KaiC蛋白表达量可分别达到菌体总蛋白的25%、40%和20%.经亲和层析后融合蛋白KaiA和KaiB的纯度分别达95%和92%,而KaiC经胶回收纯化后纯度也可达93%.将纯化后的三种Kai蛋白作为抗原分别免疫小鼠制备多克隆抗体,经ELISA检测抗体滴度表明,制备的抗KaiA、抗KaiB和抗KaiC的多克隆抗体效价高,分别可达到1:50000、1:60000和1:100000.Western blotting结果表明:获得的多克隆抗体具有较高的效价,抗体能识别相应的Kai蛋白,具有较高的特异性,能用于铜绿微囊藻生物钟蛋白KaiA、KaiB和KaiC的表达节律检测.     

中国明对虾乙酰基专一性凝集素分离纯化方法的研究

为研究凝集素在中国明对虾天然免疫中的作用,利用3种不同物质--N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)、胎球蛋白(Fetuin)和小牛黏液素(BSM)为配基,分别与3种柱材料结合进行亲和层析,从中国明对虾血淋巴中纯化凝集素.这3种亲和层析均得到了一种相同的凝集素FCL-1,经SDS-PAGE证明FCL-1的分子量为168kDa.利用新鲜小鼠血细胞进行分离纯化同样获得了这种凝集素.FCL-1与乙酰基糖类和唾液酸类糖蛋白均具有较强的结合特性.     

丝氨酸配基PVDF亲和膜脱除人血浆中内毒素的研究

以L-丝氨酸(Ser)为配基,1,6-己二胺为间隔臂,制备了一种新型PVDF中空纤维亲和膜用于人血浆中内毒素的脱除.通过FTIR、XPS对PVDF中空纤维膜,亲水化改性膜以及亲和膜的结构进行了表征;探讨了离子强度、pH值对亲和膜吸附内毒素能力的影响以及内毒素分子在亲和膜上的吸附动力学.实验考察了自制的亲和膜组件用于人血浆中内毒素的脱除效果.结果表明,亲和膜对内毒素的吸附能力为0.058 EU/cm2;自制的亲和膜组件对内毒素含量为0.42 EU/mL的人血浆样品清除率为43.8%;亲和膜对人血浆样品的其它生化指标的影响不大.     

坛紫菜别藻蓝蛋白的纯化及多克隆抗体的制备

通过液氮研磨、超声波破碎、硫酸铵分级沉淀和DEAE-Sephadex-A-50柱层析等手段,建立了从坛紫菜叶状体体细胞中快速高效纯化别藻蓝蛋白的技术,并以该蛋白为抗原,通过动物免疫,制备了抗别藻蓝蛋白的多克隆抗体.电泳及Western印迹杂交分析的结果表明,纯化的别藻蓝蛋白已达到电泳纯,A650/A280达到3.5,计算蛋白回收率为70.5%.制备的多克隆抗体特异性强,效价高达1∶100 000.本研究的结果为进一步研究别藻蓝蛋白的功能和进行开发提供了基础材料和有用的工具.     

三聚氰胺人工抗原及多克隆抗体的制备

采用戊二醛法将三聚氰胺(Melamine,MEL)偶联到牛血清白蛋白(BSA)上合成免疫原三聚氰胺-牛血清白蛋白(MEL-BSA).三聚氰胺甲醛树脂法对三聚氰胺衍生化,再偶联到鸡卵清蛋白(OVA)合成包被原三聚氰胺-鸡卵清蛋白(MEL-OVA).对纯化后的合成抗原进行紫外扫描、红外扫描和SDS-PAGE电泳鉴定.免疫新西兰大白兔,检测抗体的生成.结果表明,免疫兔血清的效价达到了1∶20 000,从而为进一步建立三聚氰胺的免疫检测方法奠定了基础.     

用Alu－VectorettePCR方法从酵母人工染色体末端分离人基因组单拷贝片段

分离和克隆ＹＡＣ插入片段的末端顺序是构建ＹＡＣ重叠群的重要手段之一，我们采用Ａｌｕ载体（Ａｌｕ－ｖｅｃｔｏｒｅｔｔｅ）ＰＣＲ方法成功地从含人淀粉样蛋白前体（ＡＰＰ）基因的法国人类多态研究中心（ＣＥＰＨ，Ｃｅｎｔｒｅｄ＇ＥｔｕｄｅｄｕＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｅＨｕｍａｎ）ＹＡＣ克隆５９９Ｇ１１的未端分离到一个０．５８ｋｂ的单拷贝片段。测序后经核普酸顺序检索分析，证明这是一个新的ＳＴＳ顺序。用这个片段作探针，在英国肿瘤研究基金会（ＩＣＲＦ）的ＹＡＣ库中筛选到一个新的ＹＡＣ克隆，证明这是获得ｃｏｎｔｉｇ的有效而快捷的方法。     

多人单机协同动作的作业绩效模型研究

借鉴已有的单人操作动作作业绩效模型,结合层次分析法,构建武器装备多人单机协同作业操作动作作业绩效模型,并以某型高炮的准备阶段的协同作业来检验模型。     

苏丹红Ⅰ号多克隆抗体的制备与特异性鉴定

采用琥珀酸酐法,分别以BSA、OVA为载体蛋白合成了免疫抗原和包被抗原并通过SDS-PAGE凝胶电泳和紫外扫描法鉴定了合成的抗原为载体蛋白和苏丹红I号的复合物.将合成的免疫抗原用弗氏佐剂乳化后免疫新西兰大白兔,制备出多克隆抗体,经辛酸纯化,间接ELISA法测得有高效价血清抗体;进一步采用琼脂双扩散试验和免疫金试纸法鉴定出血清中含有苏丹红Ⅰ号特异性抗体.     

聚醚砜血浆蛋白分离中空纤维膜的研制

采用干-湿相转化法纺丝工艺纺制聚醚砜中空纤维膜,研究了聚乙二醇(PEG)含量、入水距离对聚醚砜中空纤维膜性能的影响.结果表明,随PEG含量的增加,PES中空纤维膜的纯水通量、溶茵酶的清除率增大,牛血清的截留率、爆破压力略有下降;随着入水距离的增大,PES中空纤维膜水通量、溶菌酶的清除率逐渐下降,牛血清的截留率变化并不明显.     

重组抗HER2人源化单克隆抗体纯化工艺研究

目的：开发重组抗HER2人源化单克隆抗体纯化工艺。方法：选择了亲和层析介质、阳离子层析介质、疏水层析介质作为备选介质进行纯化工艺开发。结果：确定纯化策略为依次Sure、SP-FF、Phenyl-HP层析。     

提高温度传感器测试准确性的方法

通过对常规工作用Pt100温度传感器检定规程和使用方法的分析,给出了一种提高Pt100温度传感器测试准确性的方法,经过对温度传感器的多点标定试验,利用Matlalb软件求出Pt100温度传感器的电阻与温度转换公式下的新的系数值,从而对其使用温度点作出准确修正,最后的试验数据和分析表明,该方法对提高传感器的准确性是切实可行的.     

X100管线钢焊接接头组织对其断裂性能的影响

通过调整焊接线能量研究了X100管线钢CO2气体保护药芯焊焊接接头的组织及其对维氏显微硬度和断裂韧性(CTOD)的影响规律.结果表明:和15kJ/cm焊接线能量相比,30kJ/cm线能量下焊接接头的显微硬度较低,粗晶区的断裂韧性也较低,其主要原因是30kJ/cmm焊接线能量下组织中的贝氏体含量减小使得材料强度降低.     

美国舰船用HY-80／100和HSLA-80／100钢板规范的演变

本文主要从化学成分、力学性能两个方面分析了美国舰船用HY-80／100、HSLA-80／lOO钢板规范演变特点,指出新规范的规定更加科学合理,化学成分的调整及优化能确保钢板性能更加稳定可靠。     

100%低地板列车车内声源识别试验研究

100 %低地板列车是一种新型绿色环保的城市区域交通运输车辆。针对其特殊的车体结构,提出了更高的车内噪声控制要求。通过线路噪声试验,和100 %低地板列车车内声源特性的系统测试,定性分析了车内显著声源的传递路径,在此基础上提出车内减振降噪建议措施。试验结果表明,100 %低地板列车车内各个测点的声源能量主要集中在中心频率400 Hz～1 250 Hz的1/3倍频带,声源位置主要位于地板、顶板以及风挡区域。车内最显著频带声源的传递路径以空气传声为主。控制车辆外部空气声源,提高车体结构的密封、隔声性能是降低车内噪声的可行方法。研究结果可为100 %低地板列车车内减振降噪提供参考。     

First-principles study of near surface point defects stability in Si (100) and SiGe(100)

Calculations based on Density Functional Theory are carried out to study interstitial generation close to the Si(100) surface with further consideration of effects related to the presence of substitutional Ge atoms on the surface. Defect structures, vacancy and Si interstitial, and associated energies are calculated. We observe that germanium atoms tend to increase the stability of created defects, promote the generation of interstitials through drastic structural changes and blocks the climb of Si interstitials towards the surface.     

AGC公司100DID对羰基硫的分析应用

对于羰基硫的分析,使用AGC公司100DID色谱仪来分析COS中H_2、O_2/Ar、N_2、CH_4、CO、CO_2等杂质。     

[100]面氯化银T颗粒乳剂研究新进展

介绍了 [10 0 ]面氯化银T颗粒乳剂研究新进展。阐述了少量碘对 [10 0 ]面氯化银T颗粒乳剂形成的作用 ;射频光电导的下降和离子电导的增加 ,进一步说明了碘的加入位置对提高 [10 0 ]面T颗粒乳剂感光度的影响。     

100 m烟囱定向爆破应变观测分析

为了解钢筋砼高耸烟囱倾倒过程中各相关部位应变及应力变化的情况，也为类似爆破烟囱倾倒拆除的参数设计提供可参考的第一手基础数据，确保倾倒方向的准确性，对3座拟爆的100m高钢筋砼结构烟囱的支撑体相关部位布置了测点。爆破时进行应变观测，取得了一系列时间－应变数值。据此进行应力分析，总结了该情况下钢筋砼烟囱爆破倾倒过程中支撑体相关部位应力变化规律。