Akt和FoxO1在超负荷性心肌肥大时大鼠心肌的表达

目的通过检测Akt和FoxO1基因在大鼠超负荷性心肌肥大过程中的表达,探讨心肌肥大时的细胞周期调控机制。方法采用升主动脉缩窄的方法制作大鼠超负荷心肌肥大动物模型,通过三维彩色超声技术评价心肌肥大程度,采用RT-PCR技术检测心肌组织Akt和FoxO1的mRNA表达,用Westernblots方法检测Akt磷酸化水平。结果与假手术组相比,模型组的左室后壁厚度(LVPW)、室间隔厚度(IVS)增加(P<0.01),左室舒张末内径(LVDD)减小(P<0.01)。模型组心肌组织中FoxO1的mRNA表达下调(P<0.01),Akt的基因表达没有明显变化但蛋白的磷酸化水平显著增加(P<0.01)。结论大鼠超负荷性心肌肥大时Akt激活,同时FoxO1的表达下调。     

NF-κB参与Akt信号途径激活诱导的心肌肥大

目的：探讨NF-κB信号在Akt信号途径激活诱导的心肌肥大发生机制中所起的作用。 方法： 以缩窄SD大鼠升主动脉诱导的心肌肥大和心脏特异性表达的caAkt转基因小鼠为模型，采用EMSA检测心肌组织中NF-κB结合活性，应用Western blot方法分析心肌组织中phospho-Akt 和 phospho-IκBα的表达水平。 结果： ①缩窄大鼠升主动脉3周后，心脏重量/体重比值高于假手术组34.5%(P＜0.01) ，而且肥大心肌组织中p-Akt蛋白表达明显高于假手术组(P＜0.01)。②caAkt转基因小鼠心脏明显肥大，其心肌组织中NF-κB活性比野生型小鼠高567.86%(P＜0.01)，同时心肌组织中IκBα的磷酸化水平也明显高于野生型小鼠(P＜0.01)。 结论： NF-κB介入到Akt信号途径激活所致的心肌肥大发生发展过程中。     

蛋白激酶C及磷脂酰肌醇3激酶参与心力衰竭患者心肌重构

目的探讨蛋白激酶C(PKC)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路参与心力衰竭(CHF)患者心肌重塑的机制。方法选择因瓣膜性心脏病接受二尖瓣置换术的CHF患者39例,正常对照38例(其中8例来自意外伤亡的器官捐献者)。彩色多普勒超声心动仪检测心脏扩大和心功能参数,放射免疫法检测血浆及心肌组织中AngⅡ浓度,竞争蛋白结合法检测PKC,免疫沉淀法检测MAPK活性,免疫沉淀法测心肌组织PI3K/Akt磷酸化、C-FOS、α-骨骼肌动蛋白(α-skeletal-actin)的表达。结果CHF患者心肌组织呈典型重构心肌的病理改变。血浆及心肌组织AngⅡ浓度与心功能级别呈正相关。CHF患者心肌组织PKC和MAPK活性明显高于对照组(P<0.01),并随心功能恶化其表达逐渐增加;CHFⅡ级组患者心肌组织PI3K/Akt磷酸化明显强于正常对照组(P<0.01)和CHFⅢ、Ⅳ级组(P<0.01)。CHFⅢ、Ⅳ级组间没有差异。正常心肌组织中无C-FOS蛋白表达,CHFⅡ级组C-FOS蛋白表达明显高于Ⅲ、Ⅳ级组(P<0.01)。CHF患者心肌组织α-skeletal-actin表达明显高于对照组(P<0.01),并随心功能恶化其表达逐渐增加。结论PKC/MAPK及PI3K/Akt信号通路共同参与调节CHF患者心肌重构的病理过程。     

Neuregulin-1β对压力超负荷心肌肥大大鼠治疗作用及机制的研究

 目的：研究神经调节蛋白 1β（NRG-1β）对压力超负荷所致大鼠心肌肥大的治疗作用并探讨其机制。方法：Wistar雄性大鼠采用腹主动脉缩窄的方法复制心肌肥大模型。术后8周,将模型动物随机分成模型（model）组、NRG-1β治疗组（尾静脉注射NRG-1β,10 μg·kg-1·d-1）和NRG-1β+赫赛汀(Herceptin, HERCE)治疗组（尾静脉注射NRG-1β的同时给予注射HERCE 10 μg·kg-1·d-1）。假手术（sham）组除不以银夹缩窄腹主动脉外,其余操作同腹主动脉缩窄组。7　d后分别采用心动超声、血流动力学评价心功能;Masson染色观察心肌组织的超微结构;放射免疫法检测心肌组织中血管紧张素II（Ang II）,酶联免疫吸附法测定心肌组织中肿瘤坏死因子 α（TNF-α）的变化;RT-PCR法检测心肌中bcl-2和bax mRMA表达的改变。结果：（1）心动超声显示,和模型组比较,NRG-1β组左室射血分数(LVEF)及短轴缩短率(LVFS)升高,左室收缩末内径(LVESD)及舒张末内径(LVEDD)减小（P<0.01）。（2）血流动力学检测显示,NRG-1β治疗组左室收缩末压(LVESP)和左室内压最大上升和下降速率(±dp/dtmax)均明显高于模型组（P<0.01）;左室舒张末压(LVEDP)低于模型组（P<0.01）。（3）与模型组比较,NRG-1β组心肌胶原容积分数（CVF）下降,心肌中Ang II和TNF-α明显减少,bcl-2 mRNA表达显著升高,而bax mRNA表达下降（P<0.01）。（4）NRG-1β+ HERCE治疗组与模型组相比各项指标无明显改变（P>0.05）。结论：NRG-1可以减少压力超负荷大鼠心肌Ang II和TNF-α的生成,从而减轻Ang II和TNF-α介导的心肌间质重构; NRG-1可通过上调bcl-2 mRNA表达、下调bax mRNA表达,抑制心肌细胞的凋亡,改善压力超负荷大鼠的心功能,进而在心肌肥大的过程中发挥作用。     

压力负荷性左室肥厚大鼠心肌钠钙交换体和肌浆网钙泵的表达

目的 观察压力负荷性左室肥厚大鼠心功能异常及心肌钠钙交换体(NCX)和肌浆网钙泵(SERCA2a)的表达变化.方法 缩窄大鼠腹主动脉制备压力负荷性心肌肥厚模型,测定在体血流动力学及左室重量指数(LVWI),用RT-PCR和Western blot法检测左室组织NCX及SERCA2a的表达.结果 与假手术组相比,模型大鼠左室收缩压(LVSP)及左室舒张末压(LVEDP)均显著升高(P<0.01,P<0.001);左室重量指数显著增加(P<0.001)及左室NCX mRNA表达上调(P相似文献   

Apocynin降低1型糖尿病小鼠心肌组织炎症因子的表达

目的： 探讨NADPH氧化酶抑制剂apocynin对1型糖尿病小鼠心肌组织IL-1β、IL-18、TNF-α和COX-2表达的影响及其机制研究。方法: C57小鼠腹腔注射STZ建立1型糖尿病动物模型,44只8周龄雄性小鼠分为对照组（sham,n=6）、apocynin对照组（Apo,n=6）、1型糖尿病组（STZ,n=16）及1型糖尿病apocynin治疗组(STZ+Apo,n=16)。实验于8周末结束,运用超声心动图检测小鼠心脏功能,以实时定量RT-PCR技术测定心肌组织IL-1β、IL-18、TNF-α和COX-2 mRNA表达,以Western blotting检测心肌组织磷酸化Akt表达。结果: 1型糖尿病小鼠心脏功能降低伴随心肌组织IL-1β、IL-18、TNF-α和COX-2 mRNA表达增加,STZ+Apo组小鼠心脏功能增高伴随心肌组织IL-1β、IL-18、TNF-α和COX-2 mRNA表达减少;1型糖尿病小鼠心肌组织磷酸化Akt显著减少,STZ+Apo组心肌组织磷酸化Akt明显增加。结论: Apocynin提高1型糖尿病小鼠心脏功能伴随显著减少心肌组织IL-1β、IL-18、TNF-α和COX-2 mRNA的表达,其机制可能与增加心肌组织磷酸化Akt表达密切相关。     

高血压心肌肥厚大鼠心脏组织中高迁移率族蛋白B-1的表达变化

目的 研究高迁移率族蛋白B-1(High mobility group box 1 protein,HMGB1)在心肌肥厚大鼠心肌中的表达变化及意义.方法 利用腹主动脉部分缩窄法在8～10周龄健康成年雄性Wistar大鼠体内构建压力超负荷心肌肥厚模型,并将大鼠随机分成两组:心肌肥厚组(OG)和假手术组(CG).手术后按要求饲养4周后处死,观察离体心脏大小并计算心室重/体重比(mg/g).取部分心肌标本,应用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测心肌组织中HMGB1表达水平.结果 与假手术组相比,心肌肥厚组心肌中HMGB1表达水平显著升高(P＜0.05).结论 压力超负荷可引起心脏组织中HMGB1表达增加及活化,且增加的HMGB1可能参与心肌肥厚的发生和发展过程.     

扎考比利改善压力超负荷致大鼠心室重构的作用

目的:研究扎考比利(zacopride,ZAC)对腹主动脉缩窄所致大鼠压力超负荷性心室重构的改善作用。方法:通过腹主动脉缩窄构建大鼠压力超负荷心室重构模型,预防性给予ZAC、氯喹(chloroquine,Chlor)及ZAC+Chlor。连续给药8周,超声心动图评价心功能;计算心重/体重比(HW/BW)和左心室/体重比(LVW/BW);左心室心肌组织HE染色;透射电镜观察心肌细胞超微结构;Western blot检测大鼠心肌组织内向整流钾通道(IK1)蛋白表达;RT-PCR法检测心肌组织Kir2.1的mRNA表达。结果:与模型(vehicle)组相比,ZAC组大鼠心功能明显改善,LVEDS和LVEDD明显降低(P 0.05),LVEF和LVFS显著升高(P 0.01),HW/BW和LVW/BW显著降低(P 0.05),心肌肥大程度降低,心肌细胞横断面积明显减小(P 0.01),心肌超微结构明显改善。Chlor明显阻断了ZAC对腹主动脉缩窄所致压力超负荷大鼠心室重构的保护作用。与vehicle组相比,ZAC组大鼠心肌组织IK1蛋白表达和Kir2.1的mRNA显著升高(P 0.01)。结论:心肌IK1激动剂ZAC显著减轻大鼠左心室压力超负荷诱发的心室重构。     

阿尔茨海默病模型大鼠海马结构Akt磷酸化与caspase3表达的相关性研究

目的 探讨Aβ所致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠Akt的磷酸化水平与caspase 3在海马结构神经元的表达及其分布.方法 选用24只3月龄雄性Wistar大鼠随机分为对照组和模型组(侧脑室注射10μgAβ25-35).免疫组化方法观察caspase-3在海马结构神经元(海马CA1、CA3和齿状回)的表达;Western blot方法检测海马结构神经元Akt的磷酸化水平.结果 模型组海马结构3个亚区神经元的caspase-3的平均光密度值均较对照组明显增高(P＜0.01);模型组P-Akt的表达量较对照组明显下调(P＜0.05).结论 Aβ25-35可能是通过下调Akt的磷酸化水平促进caspase-3的表达,进而导致海马结构神经元的凋亡.     

大鼠压力负荷性肥大心肌中TNF-α mRNA表达变化

目的：探讨大鼠压力负荷性肥大心肌中TNF-α mRNA表达的变化及卡托普利（captopril）对其的影响。方法：采用腹主动脉缩窄法复制压力超负荷心肌肥大模型，于术后42 d采血、摘取心脏，测定心肌肥大指数并采用酶联免疫法测定血清及左心室肌TNF-α含量；应用心肌原位杂交法结合图像分析系统检测心肌组织中TNF-α mRNA表达的变化，并观测TNF-α mRNA在心肌组织中的定位。结果：术后42 d心肌明显肥大，以左心室为主；主动脉缩窄（aorta-constriction, AC）组心室肌TNF-α含量比假手术（sham-operation, SO）组高98%（P<0.01）；卡托普利干预使心室肌TNF-α含量比AC组低64.14%（P<0.01），但未达到对照水平；心肌组织原位杂交显示TNF-α mRNA表达主要在心肌间质部位，假手术组心肌TNF-α mRNA表达水平极低，明显低于AC术后（P<0.01），captopril干预虽明显抑制AC术后心肌组织中TNF-α mRNA表达，但并未使其达到SO组水平。结论：心肌组织内源性TNF-α的表达增加在压力负荷性心肌肥大中具有重要的调控作用，其过表达可能与RAS激活促心肌间质TNF-α mRNA表达上调有关。