银杏叶提取物对糖尿病大鼠睾丸损伤的作用

目的:研究银杏叶提取物(GBE)对糖尿病所致的睾丸损伤的作用及其机制。方法:用光镜及透射电镜观察链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病1个月大鼠睾丸的形态学改变,并测定睾丸组织丙二醛(MDA)、NO产物NO₂^-/NO₃^-的含量及超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)的活性。 结果:①糖尿病大鼠睾丸组织光镜下主要表现为睾丸曲细精管萎缩、变形及生精上皮脱落,透射电镜下主要见到支持细胞浆内内质网扩张、脂滴空泡形成,溶酶体明显减少,银杏叶组大鼠睾丸组织光镜、透射电镜下上述病变明显改善。②睾丸组织的MDA、NO₂^-/NO₃^-含量及tNOS和iNOS活性银杏叶组低于糖尿病组,SOD活性银杏叶组高于糖尿病组。 结论:GBE对糖尿病所致的睾丸损伤有明显的保护作用,其作用机制与提高SOD活力减少MDA产生,抑制iNOS活力减少NO产生有密切关系。     

银杏叶提取物对实验性2型糖尿病大鼠肝脏的保护作用

目的： 研究银杏叶提取物(EGB)对实验性2型糖尿病大鼠肝脏损伤的影响及机制。方法: 雄性SD大鼠39只，随机分为4组: 正常对照组、高脂组、糖尿病对照组和EGB治疗组。采用高脂饮食加链脲佐菌素（STZ） 诱导2型糖尿病大鼠模型， EGB治疗组给予EGB 8 mg·kg^-1·d^-1治疗8周。用光镜和透射电镜观察EGB对2型糖尿病大鼠肝组织的形态学改变，并检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GSH-PX)和总一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性及MDA、NO含量。结果: 糖尿病组光镜下主要表现为肝细胞脂肪变性明显，出现大量脂肪空泡，胞浆内糖原颗粒减少或消失。电镜下主要表现为肝细胞核固缩，胞浆内含大量脂滴，细胞器明显减少，贮脂细胞明显增生，胶原纤维增生。肝组织内GSH-PX、SOD、CAT活性明显低于正常对照组，MDA、 NO含量及总NOS、iNOS 活性显著高于正常对照组； EGB治疗组肝脏组织病理改变较轻，GSH—PX、SOD、CAT 活性明显高于糖尿病组，MDA、NO含量及总NOS、iNOS 活性显著低于糖尿病组。结论: EGB对2型糖尿病大鼠的肝脏具有保护作用、抗脂质过氧化作用和抑制NO的过多产生可能在其中起重要作用。     

糖尿病大鼠膈肌功能和形态学变化

目的:观察四氧嘧啶诱导的糖尿病4周大鼠膈肌收缩功能和形态结构的改变。方法:应用体外大鼠膈肌肌条,对其单收缩动力学、最大强直张力(P₀)、张力-频率曲线、疲劳指数(FI)的变化以及应用H.E、Heidenhain铁矾苏木素法和标准脱氢酶染色法对膈肌组织的形态学变化进行观察。结果:糖尿病大鼠膈肌最大颤搐张力(Pt)、收缩时间(CT)、半舒张时间(RT_1/2)及FI均明显低于对照组,而两组P₀无明显变化。予25、50、75、100、125Hz频率刺激膈肌时,糖尿病大鼠膈肌张力明显低于对照组。在膈肌疲劳后予氨茶碱浸浴膈肌,再予25、50、75、100和125Hz频率分别刺激膈肌,糖尿病大鼠膈肌张力均明显低于对照组。H.E及Heidenhain法染色可见糖尿病大鼠膈肌萎缩,肌横纹模糊。标准脱氢酶染色法显示糖尿病大鼠膈肌α-甘油磷酸脱氢酶呈弱阳性,光密度明显低于对照组(P＜0.01)。结论:糖尿病4周大鼠膈肌出现收缩功能减弱、易疲劳和结构破坏。     

银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠肾脏结构和功能的影响

目的：研究银杏叶提取物（GBE）对2型糖尿病（T2DM）大鼠肾脏结构和功能的影响。方法：SD大鼠随机分为正常对照组、高脂组、糖尿病组（高脂饮食+STZ造模）及糖尿病GBE治疗组（GBE 8 mg·kg-1·d-1），8周后处死大鼠,检测体重、肾重、尿量、24 h尿蛋白和N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平；电镜观察肾脏超微结构；RT-PCR法测定基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）、Ⅳ型胶原的基因表达水平。结果：糖尿病组大鼠肾皮质TIMP-1、Ⅳ型胶原mRNA表达高于正常对照组，MMP-9 mRNA表达低于正常对照组，肾重指数、尿量、24 h 尿蛋白、NAG均高于对照组。电镜下见肾小球基底膜增厚，厚薄不均匀，足细胞突起肿胀，变短，并可见足突融合，球囊壁层细胞内线粒体扩张，肾小球内胶原纤维增多。而糖尿病GBE治疗组肾小球基底膜及足细胞病变明显较轻，肾皮质MMP-9表达高于糖尿病组，Ⅳ型胶原mRNA表达低于糖尿病组，尿量、24 h尿蛋白、NAG均低于糖尿病组。TIMP-1 mRNA表达无明显差异。结论：GBE可改善2型糖尿病大鼠肾脏的结构和功能，其作用机制与降低TIMP-1、Ⅳ型胶原mRNA表达，升高MMP-9 mRNA表达，阻止ECM的堆积有关。     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠脂代谢及巨噬细胞功能的影响

目的： 研究银杏叶提取物（EGb）对2型糖尿病大鼠脂代谢及巨噬细胞功能的影响。 方法： SD大鼠分4组：正常对照组、高脂组、糖尿病组、EGb治疗组，治疗结束取血测血糖、血脂、血胰岛素并分别灌取4组大鼠腹腔及肺泡巨噬细胞，测定巨噬细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）及丙二醛（MDA）的水平，并用RT-PCR方法测定大鼠肺泡巨噬细胞内CD36、PPARγ的基因表达水平。 结果： 糖尿病大鼠血糖、血胰岛素、总胆固醇（TC）、总甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）升高，经EGb治疗后，血糖、血胰岛素、TC、TG、LDL-C明显降低；糖尿病大鼠腹腔及肺泡巨噬细胞内SOD活性下降、NO及MDA含量增高，经EGb治疗后，SOD活性升高、NO2-/NO3-及MDA含量下降；糖尿病大鼠肺泡巨噬细胞CD36基因表达升高，PPARγ基因表达升高，经EGb治疗后，CD36基因表达继续升高但无显著差异、PPARγ基因表达继续升高。 结论： EGb对糖尿病大鼠巨噬细胞脂质过氧化有较好的拮抗作用，并能降低一氧化氮含量，从而改善糖尿病时巨噬细胞功能；EGb可提高2型糖尿病大鼠肺泡巨噬细胞CD36、PPARγ基因的表达水平，这可能是其降血脂和改善胰岛素抵抗的机制之一。     

银杏叶提取物对大鼠肺纤维化初期肺结缔组织生长因子表达的影响

目的：　研究银杏叶提取物（GbE）对博莱霉素(BLM)性肺纤维化初期大鼠肺内结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法： 气管内滴注BLM, 用Western blotting法检测肺组织CTGF含量；用氯胺-T法测定肺组织羟脯氨酸含量；用比色法检测血浆丙二醛(MDA)含量。结果： 注BLM后14 d肺组织CTGF含量和出肺血MDA含量， BLM+NS组均分别高于NS组(P<0.05; P<0.01)。注BLM后30 d肺组织羟脯氨酸含量和出肺血MDA含量，BLM+NS组均分别高于NS组(Both P<0.01)。GbE处理可显著缓解上述变化。结论： GbE缓解BLM性肺纤维化初期肺内CTGF上调; GbE的抗氧化损伤作用可能是其缓解CTGF增多的机制之一。     

糖尿病大鼠膈肌酶组织化学研究

目的:观察糖尿病早期膈肌酶组织化学变化,以了解糖尿病膈肌的损害。方法:应用酶组织化学方法观察糖尿病4周大鼠膈肌组织脱氢酶、水解酶和氧化酶活性变化。结果:糖尿病4周大鼠膈肌组织琥珀酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、辅酶Ⅰ黄递酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、酸性磷酸酶和酸性-α-萘酸性酯酶活性强于对照组,乳酸脱氢酶和细胞色素氧化酶活性弱于对照组,辅酶Ⅱ黄递酶无明显改变,5'-核苷酸酶不着色。图像分析显示糖尿病大鼠膈肌组织琥珀酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶、谷氨酸脱氢酶、辅酶Ⅰ黄递酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、酸性磷酸酶和酸性-α-萘酸性酯酶着色深度(A)明显高于对照组,而乳酸脱氢酶和细胞色素氧化酶明显低于对照组,辅酶Ⅱ黄递酶无明显差异。结论:糖尿病4周大鼠膈肌组织有氧氧化能力增强、糖酵解能力减弱、脂肪及能量代谢紊乱。     

银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠睾酮水平、LHR和StAR mRNA表达的影响

目的： 探讨银杏叶提取物(EGB)在2型糖尿病大鼠睾酮合成中的作用及其对黄体生成素受体(LHR)、类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)基因表达的影响。方法: 雄性SD大鼠30只，随机均分成3组：正常对照组、2型糖尿病组、EGB 治疗组。后2组给以高脂饮食加小剂量(30 mg/kg)链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病大鼠模型，EGB治疗组予EGB50mg·kg^-1·d^-1灌胃12周，正常对照组及2型糖尿病组灌服等容积生理盐水。测定各组大鼠血葡萄糖、血胰岛素、血LDL-c含量；称各组大鼠睾丸重量，并用光镜和透射电镜观察大鼠睾丸组织的形态学改变； ELISA法检测血清黄体生成素(LH)、睾酮(T)水平；RT－PCR检测睾丸组织中LHR、StAR mRNA表达水平。结果: 与正常组相比，糖尿病组大鼠血清T、LH含量及睾丸组织的StAR mRNA含量明显降低，血糖、血胰岛素、LDL-c及LHR mRNA含量显著升高，睾丸重量明显减轻；光镜下主要表现为睾丸曲细精管内生精细胞数量减少及生精阻滞，透射电镜下主要见到间质细胞(Leydig cell)及支持细胞内线粒体、内质网等细胞器空泡样变及扩张。EGB治疗组睾丸组织病理改变较轻，血清T 、LH含量及睾丸组织StAR mRNA含量明显高于糖尿病组，血糖、血胰岛素、LDL-c及睾丸组织LHR mRNA含量低于糖尿病组。结论: EGB可提高2型糖尿病大鼠T的合成，其机制可能与改善糖脂代谢紊乱，调节LHR、StAR mRNA表达有关。     

糖尿病大鼠膈肌微量元素与氧化应激变化的研究

目的:了解糖尿病膈肌微量元素与氧化应激的关系。方法:采用原子吸收光谱法,测定糖尿病28 d大鼠膈肌组织中铜(Cu)、锰(Mn)锌(Zn)、铁(Fe)、镉(Cd)、铬(Cr)、钴(Co)、钼(Mo)和锂(Li)的含量,并同时测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:糖尿病膈肌Cu、Zn、Cr、Li含量明显低于对照组,Fe和Cd明显高于对照组,而Mn、Co、Mo与对照组无明显差别。糖尿病膈肌组织SOD活性明显低于对照组,MDA含量明显高于对照组。糖尿病膈肌组织Zn含量与其SOD活性呈正相关,与MDA含量呈负相关,Cd含量与SOD活性呈负相关。结论:糖尿病28d膈肌组织存在Cu、Zn、Fe、Cd、Cr、Li含量的变化及氧化应激增加,Zn和Cd在糖尿病膈肌组织氧化应激变化中具有重要意义。     

银杏叶提取物对血管性痴呆大鼠海马突触素表达的影响

目的：研究银杏叶提取物(EGb761)对血管性痴呆模型大鼠海马突触素表达的影响。方法:以双侧颈总动脉反复夹闭再通同时腹腔注射硝普钠建立血管性痴呆模型大鼠，采用Morris 水迷宫和免疫组化方法分别观察大鼠空间学习记忆能力及海马突触素(SYN)表达情况。结果:模型组大鼠在1月、2月和4月不同时点测得的Morris水迷宫逃避潜伏期(EL)均较假手术组明显延长(P<0.01)，药物组EL均显著短于模型组，但仍长于假手术组(P<0.05或P<0.01)；模型组海马SYN表达弱于假手术组，而药物组海马SYN表达高于模型组(P<0.01)。结论:EGb761增加海马结构SYN表达可能是其改善VD大鼠学习记忆障碍的重要机制。     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠肺泡巨噬细胞功能及基因表达的影响

目的探讨银杏叶提取物对糖尿病大鼬市泡巨噬细胞功能及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、CD36与过氧化物酶体增生物激活受体γ（PPAR-γ）基因的影响。方法测定各组大鼠血清葡萄糖、胰岛素含量,检测肺泡巨噬细胞超氧化物歧化酶、一氧化氮合酶活性,丙二醛、一氧化氮含量,用RT-PCR测定iNOS、CD36与PPAR-γ基因表达水平。结果①银杏叶提取物对糖尿病大鼠有降血糖作用（P〈0．05）,并使血清胰岛素水平呈一定程度的升高;②经银杏叶提取物治疗后糖尿病大鼠肺泡巨噬细胞超氧化物歧化酶活性、PPAR-γ mRNA表达升高（P〈0．05）,CD36 mRNA表达增加（无显著差异）,iNOS mRNA表达、一氧化氮合酶潘陛、丙二醛和一氧化氮含量均下降（P〈0．05）。结论推测银杏叶提取物对糖尿病大鼠的治疗作用可能与刺激胰岛β细胞分泌胰岛素,增强巨噬细胞抗脂质过氧化作用,以及促进PPAR-γ mRNA的表达有关。     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠视网膜病变的作用

目的:研究银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract,GBE)对大鼠糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的影响及初步机制。方法:实验共分为5组,以普通Wistar大鼠作为正常对照组(control组)、Goto-Kakizaki(GK)大鼠作为糖尿病视网膜病变模型组(DR组),给予GK大鼠不同剂量的银杏叶提取物,分为低剂量组(GBEL组),中剂量组(GBE-M组)和高剂量组(GBE-H组);检测各组大鼠的血糖与血-视网膜屏障损伤情况;TUNEL染色法和Western blot法分别检测视网膜组织的神经节细胞凋亡情况,核子因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(phosphorylation-extracellular regulated protein kinase,p-ERK)、细胞外调节蛋白激酶总蛋白(total extracellular regulated protein kinase,t-ERK)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和P53的蛋白水平变化。结果:银杏叶提取物能够降低糖尿病视网膜病变大鼠的血糖,减轻血-视网膜屏障的损伤,并降低视网膜神经节细胞凋亡数,上调细胞内的Nrf2、p-ERK与Bcl-2的蛋白水平,下调P53的蛋白表达,而对t-ERK蛋白的表达水平无显著影响。结论:在糖尿病视网膜病变中,银杏叶提取物能有效地保护视网膜神经节细胞,可能与Nrf2/ERK通路的激活以及Bcl-2与P53蛋白表达有关。     

银杏叶提取物对1型糖尿病大鼠认知功能及海马神经细胞凋亡的影响

目的： 探讨银杏叶提取物(EGB)对1型糖尿病脑病大鼠海马神经细胞的保护机制。方法: 36只SD雄性大鼠随机分为正常对照组（C组）、糖尿病模型组(DM组)、银杏叶提取物治疗组（EGB组）。用链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立糖尿病动物模型,EGB组腹腔注射银杏叶提取物注射液,其余2组给予同等体积的生理盐水。于12周末通过Morris水迷宫法评价各组大鼠学习记忆能力并测定血清中的血糖和胰岛素浓度;用Image-Pro Plus 6.0图像分析技术检测大鼠海马组织神经细胞密度;Western blotting和免疫组织化学法检测其Bax、Bcl-2和caspase-3蛋白的表达。结果: DM组大鼠血糖浓度(P<0.01)、海马神经细胞中Bax(P<0.01)、caspase-3(P<0.01)蛋白的表达、Bax/ Bcl-2比例 (P<0.01)及Morris水迷宫潜伏期(P<0.01)均高于C组,而胰岛素水平(P<0.01)、海马CA1和CA2区域的神经细胞密度(P<0.05) 及Morris水迷宫搜索策略能力(P<0.01)均低于C组。EGB干预治疗后大鼠胰岛素水平(P<0.05)、海马CA1和CA2区域的神经细胞密度(P<0.05) 及Morris水迷宫搜索策略能力(P<0.01)均高于DM组,而血糖浓度(P<0.01)、海马组织中Bax(P<0.05)、caspase-3(P<0.05)蛋白的表达、Bax/ Bcl-2比例 (P<0.01) 及Morris水迷宫潜伏期(P<0.05)均低于DM组。各实验组大鼠Bcl-2蛋白的表达没有明显变化。结论: 银杏叶提取物提高糖尿病大鼠的空间学习记忆能力,可能通过减少Bax、caspase-3蛋白表达、降低Bax/ Bcl-2比例,从而减少神经细胞的凋亡,提高神经细胞密度而发挥作用。提示通过有效调节神经元凋亡相关基因是EGB治疗糖尿病脑病的的重要作用机制之一。     

姜黄素类似物L6H4对2型糖尿病大鼠膈肌的保护作用

目的:探讨姜黄素类似物L6H4对2型糖尿病大鼠膈肌的保护作用及机制。方法:40只SPF级雄性SD大鼠,随机均分成5组:正常对照(NC)组、高脂(HF)组、高脂治疗(FT)组、糖尿病(DM)组和糖尿病治疗(DT)组。后4组采用高脂饲料喂养,4周后DM组及DT组腹腔注射链脲佐菌素诱导2型糖尿病模型,造模成功后FT组和DT组用L6H4灌胃治疗8周。生化法检测空腹血糖及血脂水平;放射免疫法检测空腹血清胰岛素(FINS)水平并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);ELISA法检测血清脂联素(APN)水平;光镜和电镜观察大鼠膈肌形态改变;酶组织化学染色观察膈肌内脂质沉积及琥珀酸脱氢酶(SDH)和还原型辅酶Ⅰ四氮唑还原酶(NADH-TR)活性;硫代巴比妥酸法和羟胺法分别检测膈肌丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;免疫组化和Western blot检测膈肌脂联素受体1(AdipoR1)蛋白的表达。结果:HF组和DM组大鼠的血糖、血脂、FINS和HOMA-IR较NC组均有升高(P0.01),L6H4治疗后均下降(P0.01);HF组与DM组大鼠血清APN水平较NC组下降,L6H4治疗后升高(P0.01)。HF组及DM组大鼠膈肌纤维萎缩,肌纤维内脂肪颗粒堆积,线粒体轻微肿胀;DM组大鼠膈肌纤维化,L6H4治疗后,大鼠膈肌的形态学损害减轻。HF组和DM组大鼠膈肌MDA含量及SDH和NADH-TR活性较NC组升高,L6H4治疗后下降(P0.05);HF组和DM组大鼠膈肌SOD活性和AdipoR1蛋白表达较NC组下降,L6H4治疗后升高(P0.05)。结论:姜黄素类似物L6H4对2型糖尿病大鼠的膈肌具有保护作用;膈肌AdipoR1蛋白表达增强、血清APN浓度增加及抗脂质过氧化可能参与其中。