麝香通心滴丸对大鼠血管内皮早期损伤保护作用的实验研究

目的：探讨麝香通心滴丸对大鼠血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）所致的内皮损伤是否有保护作用。方法：SD大鼠125只,分成1、3、7、14和28d组,每组25只,又分为假手术组5只,内皮损伤组和麝香组各10只。对照组埋置0.9%氯化钠液缓释泵;内皮损伤组埋置AngⅡ缓释泵,剂量为200ng·min-1·kg-1,麝香组在埋置AngⅡ缓释泵前3d至实验结束用麝香通心滴丸超细粉灌胃（剂量5mg/kg/d）。动物分别在术后1、3、7、14和28d处死,用放免法测定血液内皮素（ET）、一氧化氮（NO）、免疫比浊法测定C反应蛋白（CRP）;ELISA测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量。扫描电镜观察主动脉内皮形态的变化、透射电镜观察肾动脉内皮的结构。结果：假手术组内皮完好;内皮损伤组见内皮细胞（EC）充血、水肿、脱落,内弹力板暴露;而麝香组在1d组、3d组、7d组损伤相对较轻。14d组和28d组见EC有不同程度的恢复。结论：麝香通心滴丸可以降低血液中ET,CRP和TNF-α含量,增加NO的含量,对EC有一定的保护作用。     

鼠骨髓间充质干细胞对缺氧/复氧心肌细胞的影响

目的:观察在体外培养条件下骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)对缺氧/复氧新生大鼠心肌细胞的保护作用.方法:无菌条件下分离、培养、传代Wistar大鼠MSC,细胞融合达90%时更换培养基培养24 h,收集细胞培养液作为MSC条件培养基;原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞,先用5% CO2、10% H2、85% N2混合气造成细胞缺氧24 h,再给予95% O2 和 5% CO2混合气复氧2 h,建立缺氧/复氧模型.MSC 处理组于复氧时加入MSC 条件培养基,正常细胞作为对照组,分别于复氧后用MTT法、乳酸脱氢酶(lactated dehydrogenase)法测定各组心肌细胞活性的改变;RT-PCR观察细胞凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达.结果: 与对照组比较,缺氧/复氧组细胞活力显著降低(P ＜ 0.01).与缺氧/复氧组比较,MSC处理组细胞活力明显增加(P ＜ 0.01).缺氧/复氧组抗凋亡基因Bcl-2的表达明显降低,促凋亡基因Bax的表达明显增加,而MSC条件培养基可以减少Bax基因的表达,提高Bcl-2/Bax值,与缺氧/复氧组比较差异具有显著性(P ＜ 0.01).结论:MSC对体外缺氧-复氧诱导的心肌细胞的凋亡有保护作用.     

麝香通心滴丸治疗女性绝经后冠心病的临床观察

目的 探讨麝香通心滴丸治疗女性绝经后冠心病的临床效果。方法 将147例气虚血瘀型绝经后女性冠心病患者随机分为对照组54例和治疗组93例。对照组采用常规西药疗法,治疗组口服麝香通心滴丸联合常规西药治疗。2个月后比较两组患者西雅图心绞痛量表评分、心绞痛疗效、心电图疗效和血清hs-CPR、MMP-9水平。结果 治疗后,治疗组西雅图心绞痛量表中PL、AS、AF、TS均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);DF与对照组比较,无显著性差异(P>0.05)。治疗组心绞痛疗效和心电图疗效的总有效率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组hsCPR、MMP-9水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组TG、TC、LDL-C、HDL-C水平比较,无显著性差异(P>0.05)。结论 女性绝经后冠心病患者服用麝香通心滴丸能够改善心肌缺血,减少心绞痛发作次数,提高生活质量,稳定斑块。     

麝香通心滴丸治疗冠心病心绞痛气虚血瘀证的临床疗效

探讨麝香通心滴丸治疗冠心病心绞痛气虚血瘀证的临床疗效及对血液流变学的影响。回顾性分析收治的266例冠心病心绞痛患者的资料,根据治疗方法的不同将患者分为观察组(n=110)和对照组(n=156),对照组给予冠心病心绞痛常规西药治疗,观察组在此基础上给予口服麝香通心滴丸治疗,两组均治疗2个月后对比观察心绞痛疗效、心电图疗效和治疗前后血液流变学变化。观察组心绞痛总有效率为97.27%,高于对照组的93.59%,但差异无统计学意义(P>0.05);观察组心电图总有效率为58.18%,高于对照组的52.56%,但差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗后红细胞积压、全血粘度均较治疗前显著降低,且显著低于对照组治疗后,差异有统计学意义(P<0.05)。常规西药治疗基础上加用麝香通心滴丸治疗冠心病心绞痛可以有效改善血液流变学,具有重要的临床意义。     

川芎嗪对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的 研究川芎嗪对培养的SD乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及其机制.方法 将原代培养的SD乳鼠心肌细胞按随机数字表法分为5组,分别为正常组、H/R损伤模型组和H/R+川芎嗪给药组(川芎嗪浓度分别为50、100、150 μg·mL-1),每组10孔.测定各组心肌细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及乳酸脱氢酶(LDH)活性.结果 与H/R损伤模型组相比,川芎嗪给药组可明显提高SOD活性,降低MDA含量、LDH活性,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 川芎嗪对体外培养心肌细胞模拟H/R损伤模型有明显的保护作用,其保护机制可能与川芎嗪抑制自由基生成或清除自由基有关.     

缺氧诱导因子-1对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的:观察缺氧诱导因子-1对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法:取SD新生大鼠(1～3 d)分离培养成心肌细胞;在培养的第3 d将心肌细胞随机分为3组(每组重复6次):正常对照组、H/R组、DMOG+H/R组;建立缺氧/复氧损伤模型,以脯氨酸羟化酶的抑制剂甲基异二酰基甘氨酸进行干预;采用酶免疫法检测各组心肌细胞培养上清液中的肌钙蛋白I含量,采用RT-PCR法检测各组缺氧诱导因子-1α及下游因子血红素氧合酶-1、血管内皮生长因子、葡萄糖转运蛋白1 mRNA水平。结果:培养4～6 h的乳鼠心肌细胞开始贴壁生长,12～24 h明显增殖,3～4 d后细胞融合成片;心肌细胞由圆形变为梭形、星形、多角形,并出现自发性节律性搏动;与正常对照组相比,H/R组、DMOG+H/R组的肌钙蛋白I含量明显增高(P<0.01),且缺氧诱导因子-1α、下游因子血红素氧合酶-1、血管内皮生长因子、葡萄糖转运蛋白1水平明显增高(P<0.01,P<0.05);与H/R组相比,DMOG+H/R组心肌细胞缺氧诱导因子-1α、下游因子血红素氧合酶-1、血管内皮生长因子、葡萄糖转运蛋白1水平明显增高而肌钙蛋白I含量明显降低(P<0.05)。结论:本...     

利拉鲁肽对缺氧/复氧诱导的乳鼠心肌细胞损伤的影响

[目的]观察新型降糖药物利拉鲁肽对缺氧/复氧(H/R)诱导的乳鼠心肌细胞损伤的影响.[方法]将体外培养Wistar大鼠乳鼠心肌细胞进行分组:单纯H/R组(A组)、利拉鲁肽组+H/R组(B组)、正常对照组(C组),将A,B两组细胞同时进行H/R损伤,复氧后分别检测3组的乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛含量(MDA)、超氧化酶歧化酶(SOD)活性及各组心肌细胞凋亡率.[结果]A组与C组比较,其细胞培养液中LDH、MDA含量、细胞凋亡率均增加,SOD活性降低,且差异有显著性(P＜0.01).与A组相比,B组LDH、MDA含量、细胞凋亡率则明显降低(P＜0.01),但仍高于C组,且差异有显著性(P＜0.01);SOD活性较A组增高,差异亦有显著性(P＜0.01).[结论]H/R可以造成心肌细胞的损伤,增加细胞的凋亡;利拉鲁肽作为胰高血糖素样肽-1类似物,其直接作用于心肌细胞,可减轻H/R造成的心肌细胞损伤,抑制心肌细胞的凋亡,具有潜在的心脏保护作用.     

蛋白质非酶糖化在丙酮醛促进心肌细胞缺氧／复氧损伤敏感性增加中的作用

目的：观察蛋白质非酶糖化是否会增加心肌缺氧/复氧损伤的敏感性。方法常规培养H9C2细胞,分别给予PBS（对照组）、丙酮醛（200μmol/L）、丙酮醛（200μmol/L）＋氨基胍（100μmol/L）孵育6 d后接受缺氧/复氧处理,以MTT法测定心肌细胞存活率,微量酶活性测试法检测乳酸脱氢酶（LDH）释放变化,比色法检测丙二醛（MDA）含量,并通过免疫组织化学检测心肌细胞终末糖化晚期产物（AGEs）表达。结果缺氧/复氧降低细胞存活率,增加心肌细胞MDA含量和LDH释放;而丙酮醛处理6 d的心肌细胞的AGEs含量明显增加,并对缺氧/复氧损伤的敏感性增加,与PBS孵育细胞经缺氧/复氧处理后相比, MDA含量和LDH释放显著上升,存活率明显下降（P＜0.01）;MGO引起的上述变化可以被糖化抑制剂氨基胍部分阻断（P＜0.05）。结论蛋白质非酶糖化是糖代谢中间产物丙酮醛增加心肌细胞对缺氧/复氧损伤敏感性的重要机制。     

麝香通心滴丸联合胸痛贴治疗冠心病稳定型心绞痛气虚血瘀型患者的疗效观察

目的 探讨针对冠心病稳定型心绞痛气虚血瘀型患者实施麝香通心滴丸联合胸痛贴的临床疗效。方法 选取2021年1月至2022年1月我院收治的60例冠心病稳定型心绞痛气虚血瘀型患者,按随机数字表法分为对照组和治疗组各30例,对照组采用西医规范化治疗方案,观察组在此基础上加用麝香通心滴丸联合胸痛贴进行干预,两组均持续干预14 d,对比两组心绞痛发作情况、心电图S-T段改变及中医证候积分的变化。结果 观察组治疗后心绞痛发作频次、发作持续时间较对照组明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后心电图总有效率及中医证候积分总有效率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 麝香通心滴丸联合胸痛贴可明显提高冠心病稳定型心绞痛气虚血瘀型患者的临床疗效,改善心绞痛症状提高生活质量,无明显不良反应。     

促红细胞生成素对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的探讨促红细胞生成素（EP0）对心肌细胞缺氧／复氧（HR）损伤的保护作用及其机制。方法对乳鼠心肌细胞进行原代分离培养,并缺氧2h,复氧1h,建立HR损伤模型。心肌细胞随机分为四组：正常细胞培养组（空白组）,HR组,HR＋EPO 10U／ml组（EPO组）,HR＋EPO10U／ml＋U0126 10μmol／L组（U0126组）。全自动生化分析仪检测各组细胞培养液LDH活性;MTT法检测心肌细胞活性;TUNEL法：流式细胞仪Annexin—V—FITC法检测凋亡心肌细胞;Westem—blot法测定各组心肌细胞ERK1/2和磷酸化ERK1/2蛋白含量。结果EPO显著降低心肌细胞HR损伤后LDH的漏出,增强细胞的活性,减少细胞的凋亡比例,提高ERK。蛋白磷酸化水平;而经过U0126（MAPK的阻滞剂）的处理,心肌细胞LDH外溢量增加,细胞活性显著下降,凋亡细胞的比例明显增加,且ERK1/2蛋白磷酸化水平显著降低。结论EPO对心肌细胞HR损伤有一定的保护作用,其机制与ERK1/2信号通路的激活及抑制心肌细胞凋亡有关。     

复方独一味滴丸治疗血瘀证30例临床观察

目的:验证复方独一味滴丸治疗血瘀证的疗效.方法:随机将30例血瘀证患者分为两组,治疗组予复方独一味滴丸治疗4周;对照组予复方独一味胶囊治疗4周,分别观察两组患者症状与体征(如舌象、脉象、疼痛、皮下瘀斑)的变化.结果:复方独一味滴丸具有显著改善血瘀证症状及体征的作用,两组刺痛及痛有定处、脉络瘀血、皮下瘀斑、出血、痛经、肌肤甲错等症状积分治疗后均有明显降低(P<0.05或P<0.01),治疗组有效率(86.67%)略高于对照组(80.00%).结论:复方独一味滴丸具有明显的活血化瘀作用.     

Protective role of retinoid X receptor in H9c2 cardiomyocytes from hypoxia/reoxygenation injury in rats

BACKGROUND:

Retinoid X receptor (RXR) plays a central role in the regulation of intracellular receptor signaling pathways. The activation of RXR has protective effect on H₂O₂-induced apoptosis of H9c2 ventricular cells in rats. But the protective effect and mechanism of activating RXR in cardiomyocytes against hypoxia/reoxygenation (H/R)-induced oxidative iniury are still unclear.

METHODS:

The model of H/R injury was established through hypoxia for 2 hours and reoxygenation for 4 hours in H9c2 cardiomyocytes of rats. 9-cis-retinoic acid (9-cis RA) was obtained as an RXR agonist, and HX531 as an RXR antagonist. Cultured cardiomyocytes were randomly divided into four groups: sham group, H/R group, H/R+9-cis RA -pretreated group (100 nmol/L 9-cis RA), and H/R+9-cis RA+HX531-pretreated group (2.5 μmol/L HX531). The cell viability was measured by MTT, apoptosis rate of cardiomyocytes by flow cytometry analysis, and mitochondrial membrane potential (ΔΨm) by JC-1 fluorescent probe, and protein expressions of Bcl-2, Bax and cleaved caspase-9 with Western blotting. All measurement data were expressed as mean±standard deviation, and analyzed using one-way ANOVA and the Dunnett test. Differences were considered significant when P was <0.05.

RESULTS:

Pretreatment with RXR agonist enhanced cell viability, reduced apoptosis ratio, and stabled ΔΨm. Dot blotting experiments showed that under H/R stress conditions, Bcl-2 protein level decreased, while Bax and cleaved caspase-9 were increased. 9-cis RA administration before H/R stress prevented these effects, but the protective effects of activating RXR on cardiomyocytes against H/R induced oxidative injury were abolished when pretreated with RXR pan-antagonist HX531.

CONCLUSION:

The activation of RXR has protective effects against H/R injury in H9c2 cardiomyocytes of rats through attenuating signaling pathway of mitochondria apoptosis.KEY WORDS: Retinoid X receptor, Cardiomyocytes, Apoptosis, Mitochondria, Hypoxia reoxygenation     

芪参益气滴丸对射血分数保留心力衰竭的疗效观察

目的 观察芪参益气滴丸对射血分数保留心力衰竭的临床疗效。方法 将就诊于保定市第一中心医院的180例射血分数保留心力衰竭患者随机分为常规组（n=90,西药常规治疗）和治疗组（n=90,西药常规治疗加用芪参益气滴丸）,记录两组患者治疗前、治疗6个月后的血浆氨基末端脑钠肽前体（NT proBNP）水平、6分钟步行距离（6 MWT）、舒张早期二尖瓣血流速度峰值与舒张晚期二尖瓣血流速度峰值的比值（E/A值）、明尼苏达心力衰竭生活质量量表评分（MLHFQ评分）的情况。结果 最终169例患者纳入评估,其中常规组81例,治疗组88例,随访结束后,治疗组的NT proBNP水平、MLHFQ评分均低于常规组,E/A值、6 MWT均高于常规组（P<0.05）。未见与试验药物明显相关的严重不良反应。结论 芪参益气滴丸可以明显改善射血分数保留心力衰竭患者心脏的舒张功能、提高运动耐量及生活质量。     

抑制COX-2表达对心肌缺血再灌注损伤过程中心肌细胞保护作用的研究

目的研究心肌缺血再灌注损伤过程中,环氧化酶-2(COX-2)表达水平与心肌细胞损伤之间的分子机制。方法通过缺氧/复氧(H/R)实验,模拟心肌缺血再灌注过程,在H9C2心肌细胞系中检测COX-2及其相关蛋白的表达水平,并通过COX-2特异性抑制剂NS398抑制其活性,观察细胞变化情况,并研究其作用机制。结果NFκB的激活诱导COX-2表达上调,COX-2促进H/R介导的促炎症因子转录,以及ROS活性增强。结论心肌细胞受到H/R刺激时,NFκB的激活诱导COX-2表达上调,抑制COX-2活性能够降低H/R诱导的促炎症因子转录以及ROS活性增强,从而发挥对心肌细胞的保护作用。     

天七方对过氧化氢诱导心肌细胞损伤模型核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件通路的影响

目的探讨天七方(TQ)对过氧化氢(H2O2)所致心肌细胞损伤的核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件(Nrf2/ARE)通路的影响,阐明TQ抗心肌损伤的分子机制。方法建立H2O2诱导的心肌损伤模型,通过MTT法观察在不同浓度TQ的干预下,对心肌细胞增殖作用的影响,Western blot法检测Nrf2/ARE通路相关蛋白表达情况。结果与空白组相比,TQ对心肌细胞无明显损伤,并且TQ可减少H2O2所导致心肌细胞损伤(P0.01)。此外,TQ可上调蛋白Nrf2和HO-1的表达。结论 TQ通过激活Nrf2/ARE通路,增加蛋白HO-1的表达,抑制H2O2所致的心肌细胞的氧化损伤。     

不同浓度氧化性低密度脂蛋白对成年大鼠心肌细胞的损伤作用

目的：研究不同浓度氧化性低密度脂蛋白（ox-LDL）对成年大鼠心肌细胞的损伤作用。方法本实验采用铜氧化LDL法制备ox-LDL,分为1μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、7.5μg/ml、10μg/ml 5个浓度组和PBS对照组。LDL亦分为相应浓度组。测定培养的心肌细胞的存活率。结果与对照组相比,2.5μg/ml ox-LDL组心肌细胞培养24 h、5μg/ml ox-LDL组培养8 h、10μg/ml ox-LDL组培养4 h,心肌细胞存活率均明显降低（P＜0.05）。LDL组与对照组相比心肌细胞存活率无明显差异,随着ox-LDL作用时间的延长,心肌细胞的存活率逐渐下降。结论 ox-LDL的浓度和作用的时间与心肌细胞损伤的程度有着密切的关系。     

阿魏酸钠预处理保护成年大鼠心肌细胞缺氧复氧的损伤

背景:阿魏酸钠预处理能对心肌细胞产生保护作用并已在大鼠体外心脏和乳鼠心肌细胞水平得以证实,尚缺乏在成年大鼠心肌细胞水平上的研究。目的:探讨阿魏酸钠预处理对成年大鼠缺氧复氧心肌细胞的保护作用及其K+ATP通道机制。方法:用Langendorff系统灌流心脏,以胶原酶消化法分离纯化成年大鼠心肌细胞并给予模拟缺氧复氧液以及干预因素阿魏酸钠、K+ATP通道阻断剂格列本脲处理,随机分为6组:正常对照组、缺氧复氧组、缺氧预适应+缺氧复氧组、阿魏酸钠+缺氧复氧组、格列本脲+缺氧预适应+缺氧复氧组、格列本脲+阿魏酸钠+缺氧复氧组。结果与结论:①心肌细胞存活率:缺氧复氧组与对照组比较,细胞存活率明显降低(P<0.01);缺氧预适应+缺氧复氧组、阿魏酸钠+缺氧复氧组与缺氧复氧组比较,细胞存活率明显增高(P<0.01);格列本脲+缺氧预适应+缺氧复氧组、格列本脲+阿魏酸钠+缺氧复氧组与缺氧复氧组相比,差异无显著性意义,但明显高于缺氧预适应+缺氧复氧组(P<0.01)。②乳酸脱氢酶活性:各组间乳酸脱氢酶活性比较结果与心肌细胞存活率比较结果吻合。③透射电镜观察:缺氧复氧组心肌细胞线粒体明显肿胀,嵴消失或变形,细胞膜结构破坏,有核边聚现象;缺氧预适应+缺氧复氧组、阿魏酸钠+缺氧复氧组心肌细胞超微结构改变轻微,线粒体排列规则、大小均匀,嵴及内外膜清晰完整,核膜完整,较缺氧复氧组损伤明显减轻;格列本脲+缺氧预适应+缺氧复氧组、格列本脲+阿魏酸钠+缺氧复氧组心肌细胞超微结构改变与缺氧复氧组相似。结果可见阿魏酸钠预处理对成年大鼠心肌细胞具有药理性心肌缺血预适应保护作用且该作用可能与K+ATP通道有关。     

麝香保心丸对严重冠状动脉狭窄患者侧支循环的影响

目的探讨麝香保心丸对严重冠状动脉狭窄患者侧支循环的影响以及与血清二甲基精氨酸(ADMA)浓度的关系。方法根据冠脉造影的结果选择150例严重冠心病的患者,采用Rentrop方法对冠状动脉侧支循环进行分级,CCC0级为侧支循环未形成组(n=85),1~3级为侧支循环形成组(n=65)。150例患者随机分为A、B两组,两组患者在服用药物前测定ADMA的浓度。A组患者服用麝香保心丸6个月,B组患者服用安慰剂6个月,6个月后两组患者复查冠脉造影,并对冠脉侧支循环进行分级评价,同时测定ADMA的浓度。结果 A组服用麝香保心丸6个月后,CCC0级组19例、CCC1级组40例、CCC2级组16例,其中CCC0级组病例数减少,CCC1级组及CCC2级组病例数增加,各组服药后侧支循环分级都差异有统计学意义(χ2=13.96,P=0.003);B组服药前后CCC分级差异无统计学意义。A组服药前后ADMA水平差异有统计学意义(P=0.01~0.03),B组服药前后ADMA水平差异无统计学意义(P0.05),CCC1级与CCC0级组ADMA浓度的比较,CCC1级浓度明显低于CCC0组(P=0.002)。结论麝香保心丸可能具有促进严重冠状动脉狭窄患者侧支循环的形成,保护缺血心肌,减小梗死范围的作用。